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乳酸菌在肠道定植的影响因素及研究方法 被引量：12
1
作者 秦文飞 宋馨 +2 位作者 夏永军 艾连中 王光强 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第23期275-283,共9页
乳酸菌是一类无芽孢的革兰氏阳性菌,能利用碳水化合物发酵产酸,其作为益生菌家族中重要的一员,具有调节肠道菌群平衡、参与免疫应答和抑制肠道病原菌的生长繁殖等多种益生功能。这些益生功能持续发挥作用的先决条件是乳酸菌能定植于肠道... 乳酸菌是一类无芽孢的革兰氏阳性菌,能利用碳水化合物发酵产酸,其作为益生菌家族中重要的一员,具有调节肠道菌群平衡、参与免疫应答和抑制肠道病原菌的生长繁殖等多种益生功能。这些益生功能持续发挥作用的先决条件是乳酸菌能定植于肠道中,但到目前为止,乳酸菌在肠道定植的机制还并不清楚。本综述介绍了乳酸菌在肠道定植中的干扰因素(黏附能力、运动性、乳酸的分泌、与肠道菌群的作用、宿主基因与体征因素、胃酸与胆盐的耐受性以及饮食),概述了乳酸菌肠道定植的研究方法(平板计数法、荧光标记、聚合酶链式反应以及新型纳米材料),旨在加深对乳酸菌在肠道定植的认识,为进一步揭示乳酸菌定植肠道的机理提供参考。 展开更多
关键词 乳酸菌 肠道定植 定植因素 黏附模型 量化方法 体内示踪
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大豆低聚肽对嗜酸乳杆菌的增殖效果研究
2
作者 高建胜 《养殖与饲料》 2024年第1期47-50,共4页
[目的]探究大豆低聚肽对嗜酸乳杆菌生长的影响,为乳酸菌体内定植提供思路。[方法]试验组加入不同质量浓度的大豆低聚肽于MRS肉汤培养基中,培养嗜酸乳杆菌48 h测定OD_(600 nm);测定不同培养时间下嗜酸乳杆菌培养液的OD_(600 nm),绘制生... [目的]探究大豆低聚肽对嗜酸乳杆菌生长的影响,为乳酸菌体内定植提供思路。[方法]试验组加入不同质量浓度的大豆低聚肽于MRS肉汤培养基中,培养嗜酸乳杆菌48 h测定OD_(600 nm);测定不同培养时间下嗜酸乳杆菌培养液的OD_(600 nm),绘制生长曲线;以300、600、1200 mg/kg剂量的大豆低聚肽-嗜酸乳杆菌菌悬液连续灌胃抗生素诱导的肠道菌群紊乱小鼠7 d,测定大豆低聚肽作用下小鼠体质量变化。[结果]40、30、20 mg/mL大豆低聚肽能明显增加嗜酸乳杆菌菌液浊度,促进嗜酸乳杆菌增殖;能使嗜酸乳杆菌培养12 h后进入对数生长期,提前进入快速增长状态并提高增长速度;低剂量组(300 mg/kg)、中剂量组(600 mg/kg)、高剂量组(1200 mg/kg)均能促进小鼠体质量增长,且600 mg/kg中剂量组体质量增加2.89 g,与阴性对照组差异显著。[结论]大豆低聚肽在体外能明显促进嗜酸乳杆菌增殖,添加的大豆低聚肽质量浓度为40 mg/mL时增殖效果最为显著。能促进小鼠体质量增长,但其促进乳酸菌的体内定植机制需要进一步评价。 展开更多
关键词 大豆低聚肽 嗜酸乳杆菌 体外增殖 体内定植 肠道营养
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双荧光探针分子两步标记益生菌在肠道原位活性分析研究 被引量：1
3
作者 陈荧 李琳 +3 位作者 陈国平 李佩 谢智勇 廖琼峰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1402-1410,共9页
有效补充益生菌可有益肠道健康,但是益生菌在肠道原位活性的分析却鲜有报道。本研究通过将异硫氰酸荧光素(FITC)和5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯[5(6)-TAMRA-SE]分别与D-赖氨酸进行偶联,获得了两种颜色的荧光D-氨基酸(fluorescent ... 有效补充益生菌可有益肠道健康,但是益生菌在肠道原位活性的分析却鲜有报道。本研究通过将异硫氰酸荧光素(FITC)和5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯[5(6)-TAMRA-SE]分别与D-赖氨酸进行偶联,获得了两种颜色的荧光D-氨基酸(fluorescent D-amino acids, FDAAs)探针:绿色探针(fluorescein-D-lysine, FDL)和红色探针(TAMRA-D-lysine, TDL),并尝试对嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus, LA)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei, LC)和韦荣球菌(Veillonella atypica, VA) 3种益生菌进行了体外标记。随后将FDAAs应用到小鼠肠道菌群标记,建立方法考察了3种常用益生菌口服定植存活情况。所有动物实验方案经由广州中医药大学动物伦理委员会审查通过。结果表明,合成的两种FDAAs可以无毒且完全对3种益生菌进行体外标记;通过FDAAs两步标记口服益生菌可知,LA存活率较高为92.30%±1.67%, LC和VA的存活率相近,分别为84.13%±4.06%、82.27%±2.43%。本研究可通过快速比较不同益生菌在体内定植存活率的变化,为益生菌在肠道原位定植活性提供理论支撑,同时对临床益生菌合理用药具有指导作用。 展开更多
关键词 荧光D-氨基酸 益生菌 肠道菌群 荧光成像 体内定植
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铅结合蛋白PbrR的大肠埃希菌外膜展示株构建及体内定植初步研究 被引量：1
4
作者 惠长野 郭妍 +6 位作者 高朝贤 杨学琴 刘征宇 李丽梅 陈钰婷 张文 黄先青 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期935-941,共7页
目的 构建铅特异性结合蛋白PbrR的大肠埃希菌外膜展示株，并考察其在小鼠体内的定植及外膜展示的重组蛋白在消化道内环境耐受能力。方法 全基因合成嵌合蛋白Lpp-OmpA编码序列，将其插入表达载体pET-21a，构建外膜蛋白展示载体pLOA。全... 目的 构建铅特异性结合蛋白PbrR的大肠埃希菌外膜展示株，并考察其在小鼠体内的定植及外膜展示的重组蛋白在消化道内环境耐受能力。方法 全基因合成嵌合蛋白Lpp-OmpA编码序列，将其插入表达载体pET-21a，构建外膜蛋白展示载体pLOA。全基因合成PbrR编码序列，将其插入pLOA，构建PbrR外膜展示质粒pLOA-pbrr。转化表达宿主大肠埃希菌BL21（DE3）pLysS，IPTG诱导表达，15% SDS-PAGE及Western blot分析表达情况。考察PbrR外膜展示株在人工肠液中的铅吸附能力及在人工胃液中的存活能力。KM小鼠经口连续7 d给予诱导后的展示株，终止染菌后，继续饲喂至30 d，稀释涂平板法检测第7、15、30天小鼠粪便中重组菌含量，免疫印迹法检测第7和第15天小鼠粪便中的重组蛋白残留。结果 基于Lpp-OmpA展示载体，成功构建了PbrR的外膜展示质粒。融合蛋白Lpp-OmpA-PbrR-His tag得到了高水平表达，展示株在人工肠液中表现出了显著升高的铅离子吸附能力。展示株表现出了一定的胃酸耐受性，经口染菌后可定植于小鼠肠道，外膜展示的重组融合蛋白对消化道内环境表现出较好的抵抗能力。结论 大肠埃希菌PbrR外膜展示株在体外模拟肠道环境中表现出了较强的铅富集能力，体内可定植小鼠消化道，外膜展示蛋白也有较好的消化液耐受能力。本文为进一步基于动物模型的生物吸附选择性驱铅的研究提供基础资料。 展开更多
关键词 铅结合蛋白 PbrR 细菌表面展示 体内定植
原文传递
PbrR大肠埃希菌外膜展示株体内外生长特性
5
作者 吴晓燕 郭妍 +3 位作者 惠长野 陈剑辉 高朝贤 曾新军 《中国热带医学》 CAS 2017年第7期650-654,共5页
目的考察Pbr R大肠埃希菌外膜展示株在不同条件下的体内外生长特性,为其体内定植驱铅能力的研究奠定基础。方法 15%SDS-PAGE分析不同浓度诱导剂L-阿拉伯糖诱导展示菌p BAD-loa-pbrr/DH10B的重组蛋白表达情况;铅平板敏感实验对比重组菌... 目的考察Pbr R大肠埃希菌外膜展示株在不同条件下的体内外生长特性,为其体内定植驱铅能力的研究奠定基础。方法 15%SDS-PAGE分析不同浓度诱导剂L-阿拉伯糖诱导展示菌p BAD-loa-pbrr/DH10B的重组蛋白表达情况;铅平板敏感实验对比重组菌诱导及非诱导条件下在含铅平板上的菌落形成能力;体外培养实验考察诱导剂的加入对重组菌生长能力及耐铅能力的影响;通过混合共培养实验对比诱导条件下重组菌与空宿主菌的竞争生长能力;考察重组菌6 h内的胃酸耐受性;考察诱导剂及染菌方式对重组菌小鼠体内定植的影响。结果低至0.002%的L-阿拉伯糖即可诱导重组蛋白的高效表达;Pbr R展示菌对铅表现出了一定的耐受力;诱导剂引入后重组菌生长能力降低;重组菌对胃酸有较好的抗性,经口染菌方式重组菌可定植于小鼠肠道,但摄入L-阿拉伯糖水后,粪便中重组菌快速丢失,通过连续染菌方式可维持其定植水平。结论重组菌体内外培养实验结果表明,基于商品化的诱导型表达载体构建的展示菌难以表达重组蛋白的同时实现小鼠体内的稳定定植。 展开更多
关键词 铅结合蛋白 细菌外膜展示 体外生长特性 体内定植
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