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AM真菌孢子保藏条件的研究——以异形根孢囊霉为例
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作者 黎雪 胡文涛 +1 位作者 况宇瑄 唐明 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2023年第5期162-169,共8页
为探究丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,AM)真菌纯孢子短期、中期保藏的最佳条件,将异形根孢囊霉(Rhizophagus irregularis,Ri)纯孢子保藏于30%甘油、30%甘油+植物组培抗菌剂(plant preservation mixture,PPM)、纯水、纯水+PPM 4种不同... 为探究丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,AM)真菌纯孢子短期、中期保藏的最佳条件,将异形根孢囊霉(Rhizophagus irregularis,Ri)纯孢子保藏于30%甘油、30%甘油+植物组培抗菌剂(plant preservation mixture,PPM)、纯水、纯水+PPM 4种不同介质当中,于4℃和-20℃条件下保藏2个月和5个月后,将孢子液接种宿主植物根系,测定不同保藏条件对Ri孢子侵染宿主能力的影响。结果表明,1)保藏5个月、4℃纯水介质中大量休眠孢子打破休眠,显著提高Ri孢子液活性,与初始相比提高5.08%~11.07%,其他条件下Ri孢子活性随着保藏时间的增加而降低。2)保藏2个月后,其活性在甘油和纯水2种介质以及4℃和-20℃2种温度中无显著差异。Ri孢子保藏5个月后,其在纯水中保藏活性高于甘油,在4℃下保藏活性高于-20℃。3)PPM的添加在2个月内能够提高Ri孢子在纯水和甘油中的活性;在2~5个月能够提高Ri孢子在甘油中保藏的活性,而降低在纯水中保藏的活性。因此,短期保藏Ri孢子时,建议选择纯水+PPM于4℃保藏;中期保藏Ri孢子时,建议选择纯水于4℃保藏。研究结果为AM真菌纯孢子短期中期保藏提供一定借鉴。 展开更多
关键词 丛枝菌根真菌 保藏时间 保藏介质 保藏温度 侵染能力
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利用GFP标记研究秸秆还田对假单胞菌PW9土壤定殖能力的影响 被引量：3
2
作者 吴红艳 于淼 +1 位作者 冯健 冯敏 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第6期1257-1261,共5页
【目的】本文利用GFP标记系统研究秸秆还田对假单胞菌PW9土壤定殖能力的影响。【方法】将可产生绿色荧光蛋白(GFP)的质粒pBBR1MCS2-Tac-EGFP电转化至假单胞菌PW9中,通过抗生素鉴定及质粒检测,获得了能够产生稳定的强烈绿色荧光且具有较... 【目的】本文利用GFP标记系统研究秸秆还田对假单胞菌PW9土壤定殖能力的影响。【方法】将可产生绿色荧光蛋白(GFP)的质粒pBBR1MCS2-Tac-EGFP电转化至假单胞菌PW9中,通过抗生素鉴定及质粒检测,获得了能够产生稳定的强烈绿色荧光且具有较高解磷能力的标记菌株PW9-gfp,并以此为试验菌株进行土壤定殖能力研究。【结果】标记菌株PW9-GFP施入土壤0~60 d时间内,两种处理方式的土壤样品中有效菌落数量均由109 CFU/g降至10 CFU/g;在植株同一生长时间时,标记菌株PW9-gfp单独施入的土壤样品中有效菌落数量均略低于与秸秆同时施入的土壤样品。【结论】秸秆还田对菌株PW9的土壤定殖能力具有一定的促进作用,其作用机理有待进一步研究,这一研究结果为解磷菌合理施用及微生物菌肥与秸秆还田协同作用深入研究奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 假单胞菌 GFP标记 定殖能力 秸秆还田
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两株CRISPR工程大肠埃希菌在小鼠体内的定植实验研究
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作者 任晨吟 高思琦 +3 位作者 李浩 唐标 杨华 刘月环 《实验动物与比较医学》 CAS 2022年第6期541-550,共10页
目的 利用小鼠对2株大肠埃希菌工程菌Nissle1917和BW25113在肠道的定植能力与定植效率进行评价,以筛选出肠道定植效率高的菌株,为后续利用成簇的规律性间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspersed short palindromic repeat... 目的 利用小鼠对2株大肠埃希菌工程菌Nissle1917和BW25113在肠道的定植能力与定植效率进行评价,以筛选出肠道定植效率高的菌株,为后续利用成簇的规律性间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspersed short palindromic repeats,CRISPR)及其相关蛋白(CRISPR associated protein,Cas)系统的工程菌消减体内耐药菌的研究奠定基础。方法 每株工程菌的实验共取70只18~20 g的ICR小鼠,雌雄各半,操作时小鼠区分性别并随机分为7个处理组,每组10只(6只实验,4只对照)。实验组灌胃2×10^(10)个工程菌共200μL,对照组灌胃等体积的PBS。灌胃后1、3、6、12、24、48、72 h分别取小鼠的肠系膜淋巴结、胃、回盲部、结肠组织及内容物,分别采用平板划线、荧光镜检和PCR法检测工程菌,比较Nissle1917和BW25113这2菌株在小鼠体内的定植能力与效率。结果 灌胃后前6个时段(1、3、6、12、24、48 h)中,3种方法检测到2株菌在胃、回盲部、结肠组织有定植,淋巴结未检到目标菌株;而72 h有且仅有Nissle1917菌定植于回盲部和结肠组织,Nissle1917和BW25113两株菌的定植效率分别为100%和0。结论 Nissle1917菌定植效率高于BW25113菌,且能较长时间定植于回盲部和结肠组织,提示其可作为防控耐药基因传播用CRISPR系统的备选载体菌。 展开更多
关键词 CRISPR工程大肠埃希菌 肠道定植能力 定植效率 ICR小鼠
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