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检测犬瘟热病毒的单克隆抗体胶体金试纸条的制备 被引量:12
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作者 房超 张泉 +3 位作者 易海华 吴萍兰 徐波 吴亚力 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第2期26-30,共5页
将从水貂中分离的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)HB株经培养和纯化后免疫小鼠,制备分泌抗CDV-HB的杂交瘤细胞株,分别命名为2E1和7F3,ELISA测定腹水效价均大于107。亚类鉴定结果表明单抗2E1的分子亚类为IgM,7F3的分子亚类为IgG1... 将从水貂中分离的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)HB株经培养和纯化后免疫小鼠,制备分泌抗CDV-HB的杂交瘤细胞株,分别命名为2E1和7F3,ELISA测定腹水效价均大于107。亚类鉴定结果表明单抗2E1的分子亚类为IgM,7F3的分子亚类为IgG1,间接免疫荧光试验表明,这两株单抗均可以与CDV-HB特异性结合。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒并标记2E1单克隆抗体,获得检测貂犬瘟热病毒抗原的胶体金免疫层析试纸,且鉴定证明制备的检测CDV的胶体金试纸条具有良好的的特异性。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 单抗 胶体金试纸条
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食用油中黄曲霉毒素B1快速检测试纸的评价 被引量:9
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作者 张威 张文中 +2 位作者 郭平 胡重怡 吕小丽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第12期326-331,共6页
采用空白基质加标制备盲样,并验证盲样的均匀性和稳定性,对3个厂家的黄曲霉毒素B1快速检测产品进行评价测试,系统性研究产品评价过程中黄曲霉毒素B1添加量、样品数量等条件对性能指标的影响。结果表明,3个厂家快速检测产品的灵敏度分别... 采用空白基质加标制备盲样,并验证盲样的均匀性和稳定性,对3个厂家的黄曲霉毒素B1快速检测产品进行评价测试,系统性研究产品评价过程中黄曲霉毒素B1添加量、样品数量等条件对性能指标的影响。结果表明,3个厂家快速检测产品的灵敏度分别为83%、100%、100%,特异性分别为76.2%、79.3%、67.3%,假阴性率分别为17%、0%、0%,假阳性率分别为23.8%、20.7%、32.7%,相对准确度分别为78.9%、87.6%、80.6%。本研究对添加量设置、结果判定等方面进行了深入讨论,阐明了多种因素对快速检测产品评价的影响,有望推进快速检测评价工作的发展。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 食品安全快速检测 胶体金免疫层析试纸条 评价
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冷鲜猪肉中单增李斯特菌快速检测试纸条的初步研制 被引量:6
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作者 赵鑫 张帅 +2 位作者 祁文婧 齐颖颖 张红星 《北京农学院学报》 2019年第1期92-96,共5页
【目的】建立一种可快速检测单增李斯特菌的胶体金试纸条的制备方法。【方法】用自制的单核增生性李斯特菌作为抗原对BALB/c小鼠进行免疫,之后通过杂交瘤技术进行细胞融合制备出特异性良好的单克隆抗体,并通过双抗夹心ELISA体系筛选出2... 【目的】建立一种可快速检测单增李斯特菌的胶体金试纸条的制备方法。【方法】用自制的单核增生性李斯特菌作为抗原对BALB/c小鼠进行免疫,之后通过杂交瘤技术进行细胞融合制备出特异性良好的单克隆抗体,并通过双抗夹心ELISA体系筛选出2株稳定且配对最佳的抗体,利用胶体金免疫层析技术组装试纸条并分析其特性。【结果】筛选出的2株单抗命名为3B7、5C9,测得其灵敏度均为10~4 CFU/mL,抗体的最适pH值是8.0,最佳抗体标记是24μg,试纸条的灵敏度为10~6 CFU/mL且特异性良好。【结论】初步制备出可快速、准确检测冷鲜猪肉中单增李斯特菌的试纸条。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 单克隆抗体 胶体金免疫层析试纸条
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铜绿假单胞菌快速检测胶体金免疫层析试纸的制备 被引量:1
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作者 张世凯 朱辉煌 +2 位作者 李家吉 王毅 胡征 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期941-946,954,共7页
目的 研制快速、准确检测铜绿假单胞菌(P.aeruginosa,Pa)的胶体金免疫层析试纸。方法 采用生物信息学对铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF进行分析后,化学合成抗原决定簇丰富、种内同源性高的基因序列,连接至pET-28a(+)载体,构建表达载体pET-28a... 目的 研制快速、准确检测铜绿假单胞菌(P.aeruginosa,Pa)的胶体金免疫层析试纸。方法 采用生物信息学对铜绿假单胞菌外膜蛋白OprF进行分析后,化学合成抗原决定簇丰富、种内同源性高的基因序列,连接至pET-28a(+)载体,构建表达载体pET-28a-OprF,转入E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经Ni SepharoseTM6 Fast Flow纯化。将纯化的重组OprF蛋白免疫2只雌性BALB/c小鼠,共免疫3~4次,首次免疫为背部皮下多点注射,后续免疫为腹腔注射。通过动物细胞融合技术筛选单克隆抗体,利用单克隆抗体、双抗夹心免疫层析技术制备铜绿假单胞菌快速检测胶体金免疫层析试纸,并评价其特异性、灵敏度及稳定性。结果 获得2株可配对的单克隆抗体Pa-1#和Pa-2#,抗体效价均达到1∶409 600,均可特异性识别OprF。制备的胶体金免疫层析试纸检测灵敏度为1.0×106CFU/mL,与9种常见的呼吸道病原菌无交叉反应,且稳定性较好。结论 制备的胶体金免疫层析试纸可在15 min内快速检测铜绿假单胞菌,特异性强,且具有良好的稳定性。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 外膜蛋白OprF 单克隆抗体 胶体金免疫层析试纸
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一种异丙威胶体金免疫快速检测试纸条的研制 被引量:5
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作者 冯月君 张瑜 +5 位作者 万宇平 贾芳芳 李静 王喜平 王兆芹 何方洋 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第1期194-197,共4页
农产品的农药残留检测方法较多,异丙威作为速效性农药,应用较为广泛,但是检测异丙威的快速检测方法极少。该研究通过制备异丙威半抗原,研制出一种能够检测蔬菜、水果中异丙威的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,该试纸条对蔬菜、水果等... 农产品的农药残留检测方法较多,异丙威作为速效性农药,应用较为广泛,但是检测异丙威的快速检测方法极少。该研究通过制备异丙威半抗原,研制出一种能够检测蔬菜、水果中异丙威的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,该试纸条对蔬菜、水果等农产品中异丙威的最低检出限为10μg/kg,检测时间仅为15 min,假阳性率和假阴性率均为0。与甲草胺、亚胺菌、乙霉威和异丁草胺等药物无交叉反应,技术指标均符合《农残办技术材料要求及审查程序》要求。该试纸条检测快速、便捷,能够应用到基层实验室的大批量样本检测,具有实际意义。 展开更多
关键词 异丙威 胶体金免疫层析 试纸条 快速检测
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基于单克隆抗体的胶体金试纸条检测水产品中甲霜灵的残留 被引量:4
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作者 孙晶 邱军强 +3 位作者 陈天楠 王雅丽 郑瑞州 胡鲲 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期74-82,共9页
为了建立检测水产品中抗水霉药物甲霜灵残留的快速初筛方法,采用基于单克隆抗体技术的胶体金标记检测水产品中甲霜灵残留。甲霜灵单克隆抗体为IgG1,Kappa型;重链50 ku,轻链20 ku,分子质量约为150 ku;亲和力常数为2.46×10^(9) L/mol... 为了建立检测水产品中抗水霉药物甲霜灵残留的快速初筛方法,采用基于单克隆抗体技术的胶体金标记检测水产品中甲霜灵残留。甲霜灵单克隆抗体为IgG1,Kappa型;重链50 ku,轻链20 ku,分子质量约为150 ku;亲和力常数为2.46×10^(9) L/mol;IC_(50)为59.57 ng/mL。利用甲霜灵单克隆抗体作为金垫,甲霜灵-牛血清白蛋白偶联物及羊抗鼠IgG作为检测线与质控线,制备了甲霜灵胶体金免疫层析试纸条。测定结果显示:胶体金试纸条在甲霜灵质量浓度为5 mg/mL时可检出,与恩诺沙星、磺胺甲恶唑、氟苯尼考、呋喃唑酮、吡喹酮、强力霉素、孔雀石绿和亚甲基蓝等8种药物均无交叉反应。利用试纸条对草鱼(Ctenopharyngodon idella)、花蛤(Ruditapes philippinarum)、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)等水产品样品进行测试,在草鱼、凡纳滨对虾样品最低检测限可达2 mg/kg,花蛤样品最低检测限可达1 mg/kg。利用高效液相色谱法验证试纸条检测甲霜灵残留,主要数据验证结果一致。基于单克隆抗体的胶体金免疫条快速、灵敏、特异性强,适合作为水产品组织中甲霜灵残留检测的初筛方法。 展开更多
关键词 甲霜灵 单克隆抗体 胶体金免疫层析试纸条 水产品
原文传递
对虾白斑综合征病毒胶体金免疫层析试纸条的优化及应用 被引量:3
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作者 刘鹿山 绳秀珍 战文斌 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期43-48,共6页
在已研制的对虾白斑综合征病毒(WSSV)胶体金免疫层析试纸条的基础上,对影响试纸条检测灵敏度的金标抗体、检测线抗体等关键因素进行优化,制备并纯化了5种IgG型的抗WSSV单克隆抗体2E6、2A3、3B7、4G9、5D2;金标抗体以Au-2E6和Au-2A3按1∶... 在已研制的对虾白斑综合征病毒(WSSV)胶体金免疫层析试纸条的基础上,对影响试纸条检测灵敏度的金标抗体、检测线抗体等关键因素进行优化,制备并纯化了5种IgG型的抗WSSV单克隆抗体2E6、2A3、3B7、4G9、5D2;金标抗体以Au-2E6和Au-2A3按1∶1(V/V)混合,检测线抗体以2A3、3B7、4G9、5D2按2∶4∶2∶1(V/V)混合,优化后的试纸条灵敏度提高到117.2ng/mL。使用该试纸条对人工感染WSSV克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的鳃、肠、心脏、性腺、肌肉、肝胰腺、血淋巴等组织样品进行跟踪检测。发现感染后12h时,肠最早检测为WSSV阳性;24h时,鳃、血淋巴、肠、心脏、性腺、肝胰腺的检测结果为阳性,肌肉为阴性;36h时,各组织均检测为阳性,其中肠、性腺、血淋巴、鳃的阳性信号明显比其他组织强。研究表明,优化后的WSSV胶体金免疫层析试纸条可用于虾类感染WSSV早期的病毒检测,在对虾养殖中推广应用该试纸条,对控制白斑病暴发、减少经济损失有重要意义。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 胶体金免疫层析试纸条 单克隆抗体 灵敏度
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新型B族链球菌胶体金免疫层析试纸条的临床应用评价 被引量:2
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作者 吴瑜霞 吴斌 +2 位作者 潘秀华 汤永平 徐邦牢 《现代检验医学杂志》 CAS 2015年第4期53-55,共3页
目的:探讨新型 B 族链球菌(GBS)胶体金免疫层析试纸条的临床检测效果。方法选取202份女性的阴道或宫颈棉拭子标本,采用新型检测试剂与对照试剂作对比,进行临床应用评价。结果新型试剂最低检出浓度为105 CFU/ml,5~8 min 内即可... 目的:探讨新型 B 族链球菌(GBS)胶体金免疫层析试纸条的临床检测效果。方法选取202份女性的阴道或宫颈棉拭子标本,采用新型检测试剂与对照试剂作对比,进行临床应用评价。结果新型试剂最低检出浓度为105 CFU/ml,5~8 min 内即可观察结果;与对照试剂相比,考核试剂灵敏度更好,显色时间更短;检测的202份临床标本中,与对照试剂相比,197例样本检测结果一致,其余5例样本检测结果不符,阳性符合率达97.5%,阴性符合率达97.54%,总符合率为97.52%,Kappa 值0.948,一致性分析表明新型试剂与对照试剂具有很好的一致性。结论该新型试剂能有效的辅助诊断 B 族链球菌感染,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 B 族链球菌 胶体金免疫层析 试纸 临床应用
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一种多氯联苯胶体金免疫快速检测试纸条的研制 被引量:1
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作者 万宇平 郑百芹 +4 位作者 贾芳芳 李爱军 崔海峰 贾招闪 何方洋 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第10期191-195,共5页
该研究制备了多氯联苯(PCB118)半抗原,基于该半抗原研制出一种能够检测饲料中多氯联苯的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,该试剂条检测限为10μg/kg,检测时间约为15 min,假阳性率和假阴性率均为0。与多氯联苯PCB52、PCB101、PCB28、PCB... 该研究制备了多氯联苯(PCB118)半抗原,基于该半抗原研制出一种能够检测饲料中多氯联苯的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,该试剂条检测限为10μg/kg,检测时间约为15 min,假阳性率和假阴性率均为0。与多氯联苯PCB52、PCB101、PCB28、PCB138、PCB153、PCB180等药物无交叉反应,特异性较好,12个月内稳定性指标均符合要求,技术指标均符合《农残办技术材料要求及审查程序》对快速检测产品的要求,该试纸条适用于基层实验室的大批量样本检测,具有实际意义。 展开更多
关键词 多氯联苯 胶体金免疫层析 试纸条 快速检测
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