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大黄素抑制肺成纤维细胞增殖及转分化和胶原蛋白合成 被引量：9
1
作者 刘理静 尹辉明 +3 位作者 贺兼斌 谢茂峰 王在岩 肖华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期921-925,共5页
目的探讨大黄素对肺成纤维细胞增殖、向肌纤维母细胞转化、胶原合成的影响及相关机制。方法用二甲基亚砜(DMSO)和(0、10、20、40、80、160)μmol/L大黄素处理MRC-5人胚肺成纤维细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖。根据细胞增殖实... 目的探讨大黄素对肺成纤维细胞增殖、向肌纤维母细胞转化、胶原合成的影响及相关机制。方法用二甲基亚砜(DMSO)和(0、10、20、40、80、160)μmol/L大黄素处理MRC-5人胚肺成纤维细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖。根据细胞增殖实验结果,以DMSO及(40、80)μmol/L大黄素分别培养MRC-5细胞48 h后,采用荧光实时定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、含1型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶1(ADAMTS-1)、1型胶原蛋白(Col1)、Col3 mRNA表达水平;Western blot法检测上述分子的蛋白水平。结果 MRC-5细胞增殖抑制率随着大黄素浓度的增加和处理时间的延长而逐渐增高。在处理48 h后,与对照组相比,(40、80)μmol/L大黄素处理组α-SMA、TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平均降低,而ADAMTS-1 mRNA与蛋白水平升高;与40μmol/L大黄素处理组比较,80μmol/L大黄素处理组α-SMA、TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达进一步下调,ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达进一步上调。结论大黄素可抑制肺成纤维细胞增殖及其向肌纤维母细胞转化,并通过抑制TGF-β1/ADAMTS-1信号通路减少Col1、Col3合成。 展开更多
关键词 大黄素 肺成纤维细胞 α平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 去整合素样金属蛋白酶1(ADAMTS-1) 1型胶原蛋白(col1) 3型胶原蛋白(col3)
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中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸通过下调CTGF抑制胶原蛋白合成抗大鼠肺纤维化 被引量：1
2
作者 刘理静 贺立洋 +3 位作者 魏文婕 周美玲 贺彬 贺兼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1011-1017,共7页
目的观察结缔组织生长因子(CTGF)及胶原蛋白合成在果王素(中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸)抗大鼠肺纤维化(PF)中的作用。方法雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、(60、120、240)mg/kg果王素处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组,每组10只。对照组... 目的观察结缔组织生长因子(CTGF)及胶原蛋白合成在果王素(中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸)抗大鼠肺纤维化(PF)中的作用。方法雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、(60、120、240)mg/kg果王素处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组,每组10只。对照组大鼠以9 g/L氯化钠溶液气管内注射,后5组大鼠则气管内注射博莱霉素A5构建PF模型,建模后次日,后4组大鼠分别以(60、120、240)mg/kg果王素和5 mg/kg醋酸泼尼松灌胃,而前2组予9 g/L氯化钠溶液灌胃,均每天1次。处理后第28天,处死大鼠取肺组织,HE和Masson染色评价PF病变程度,测定羟脯氨酸(HYP)含量,实时荧光定量PCR检测CTGF、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达,Western blot法测定CTGF、α-SMA、1型胶原蛋白(Col1)、Col3的蛋白水平,免疫组织化学染色分析CTGF表达情况。结果与模型组相比,(60、120、240)mg/kg果王素处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组肺泡炎及PF程度显著减轻,肺组织HYP含量减少,CTGF、α-SMA mRNA与蛋白表达下调,Col1、Col3蛋白水平降低。上述指标的改变在(60、120、240)mg/kg果王素处理组之间有剂量依赖性。此外,(60、120)mg/kg果王素处理组上述指标较5 mg/kg醋酸泼尼松组升高,而240 mg/kg果王素处理组与后者相比差异不明显。结论果王素下调肺组织CTGF表达,降低α-SMA水平,进而减少Col1、Col3合成,发挥抗PF作用。 展开更多
关键词 果王素(中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸) 结缔组织生长因子 肺纤维化 α平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 1型胶原蛋白(col1) 3型胶原蛋白(col3)
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青藤碱阻断miR-21/ADAMTS-1信号通路改善博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化
3
作者 刘理静 钱红 +3 位作者 孟庆欣 张翔 魏英民 贺兼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期721-728,共8页
目的 探讨青藤碱对博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制。方法 培养MRC-5细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,以确定青藤碱最佳处理浓度与时间,选取80μmol/L青藤碱处理MRC-5细胞48 h,或者miR-21模拟物(miR-21 mimic... 目的 探讨青藤碱对博莱霉素A5诱导的大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制。方法 培养MRC-5细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,以确定青藤碱最佳处理浓度与时间,选取80μmol/L青藤碱处理MRC-5细胞48 h,或者miR-21模拟物(miR-21 mimic)或1型血小板应答蛋白基序的解整联蛋白样金属蛋白酶1(ADAMTS-1)小干扰RNA转染MRC-5细胞后,再用青藤碱处理,采用实时荧光定量PCR, Western blot法分别检测miR-21、 ADAMTS-1、 1型胶原蛋白(Col1)和3型胶原蛋白(Col3)表达。将SD大鼠随机分为对照组、青藤碱组和青藤碱联合miR-21激动剂(miR-21 agomir)组,每组10只。通过博莱霉素A5一次性注入大鼠气管内构建PF模型,分别给予9 g/L氯化钠溶液、青藤碱、青藤碱联合miR-21 agomir处理,28 d处死大鼠,分离肺组织行HE和Masson染色,实时荧光定量PCR、 Western blot法检测ADAMTS-1、 Col1和Col3表达,ELISA测定血清1型前胶原羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原氨基端前肽(P3NP)水平。结果 青藤碱下调MRC-5细胞miR-21表达,升高ADAMTS-1水平,促进Col1和Col3降解,干扰miR-21/ADAMTS-1信号通路部分逆转青藤碱对Col1、 Col3降解的促进作用。青藤碱减少SD大鼠肺泡炎与PF评分,降低血清P1CP、 P3NP水平,上调肺组织ADAMTS-1表达,下调Col1、 Col3表达,这些作用被miR-21 agomir逆转。结论 青藤碱阻断miR-21/ADAMTS-1途径促进Col1和Col3降解,抑制大鼠PF。 展开更多
关键词 青藤碱 肺纤维化 微小RNA21(miR-21) 1型血小板应答蛋白基序的解整联蛋白样金属蛋白酶1(ADAMTS-1) 1型胶原蛋白(col1) 3型胶原蛋白(col3)
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