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汉防己甲素对TGF-β1诱导的MRC-5细胞中Col-I及FN表达的影响 被引量：6
1
作者 席苑 张海静 +4 位作者 高云航 侯红平 李晗 叶祖光 张广平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期94-99,共6页
目的:探讨汉防己甲素(Tet)对人转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人胚肺成纤维细胞MRC-5的影响。方法:不同质量浓度的TGF-β1(0,2.5,5,10,20,40μg·L^-1)作用于MRC-5细胞,应用细胞增殖与毒性检测法(CCK-8)检测TGF-β1对MRC-5细胞的... 目的:探讨汉防己甲素(Tet)对人转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人胚肺成纤维细胞MRC-5的影响。方法:不同质量浓度的TGF-β1(0,2.5,5,10,20,40μg·L^-1)作用于MRC-5细胞,应用细胞增殖与毒性检测法(CCK-8)检测TGF-β1对MRC-5细胞的增殖毒性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MRC-5细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及波形蛋白(Vimentin)表达水平的变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测MRC-5细胞上清液中I型胶原(Col-I)及纤维黏连蛋白(FN)表达水平的变化,以筛选出TGF-β1活化MRC-5细胞的适宜浓度。结合筛选出的TGF-β1的浓度条件,与不同浓度的Tet(0,2.5,5,10,20,40μmol·L^-1)共同作用于MRC-5细胞,再次应用CCK-8法筛选TGF-β1及Tet共培养对MRC-5细胞的安全浓度,Western blot检测MRC-5细胞中α-SMA及Vimentin表达水平的变化,ELISA检测MRC-5细胞上清液中Col-I及FN表达水平的变化。结果:与空白组比较,给药24 h时,20μg·L^-1及40μg·L^-1的TGF-β1对MRC-5细胞有毒性作用(P<0.05),给药48 h时,10,20,40μg·L^-1的TGF-β1对MRC-5细胞有毒性作用(P<0.05);加入Tet培养24 h时,对MRC-5细胞的半数抑制浓度(IC50)值为14.07μmol·L^-1,培养48 h时,IC50值为7.51μmol·L^-1;与空白组比较,5μg·L^-1的TGF-β1刺激MRC-5细胞时,细胞中α-SMA,FN及Col-I的相对含量明显升高(P<0.05),Vimentin相对含量显著升高(P<0.01),10μg·L^-1组细胞中α-SMA,Vimentin,FN及Col-I的相对含量显著升高(P<0.01);10μg·L^-1的TGF-β1与不同浓度的Tet共培养,与TGF-β1组比较,Tet 5μmol·L^-1组,细胞中α-SMA,Vimentin及FN相对含量显著降低(P<0.01),Col-I相对含量明显降低(P<0.05),Tet 10μmol·L^-1组,细胞中α-SMA,Vimentin,FN及Col-I的相对含量均显著降低(P<0.01)。结论:TGF-β1能够升高MRC-5细胞中Col-I,FN等细胞外基质的水平,而Tet可以有效抑制这种变化的发生,提示Tet可能对肺纤维化的形成中,成纤维细胞大量分泌细胞外基质的过程有抑制作用。 展开更多
关键词 汉防己甲素 转化生长因子-β1(TGF-β1) MRC-5 i型胶原(col-i) 纤维黏连蛋白(FN)
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结缔组织生长因子在晶状体上皮细胞转分化和细胞外基质合成中的作用 被引量：3
2
作者 马波 裴澄 +3 位作者 康前雁 秦莉 张小玲 崔丽珺 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期773-778,共6页
目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在人晶状体上皮细胞(human lens epithelium cells,HLECs)转分化和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成中的作用。方法采用不同质量浓度CTGF(0、5、15、30、60μg... 目的探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在人晶状体上皮细胞(human lens epithelium cells,HLECs)转分化和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成中的作用。方法采用不同质量浓度CTGF(0、5、15、30、60μg/L)对体外培养的人晶状体上皮细胞诱导24h,倒置显微镜下观察细胞形态的变化,免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在细胞中的表达,Real-time PCR和Western blot方法检测α-SMA、Ⅰ型胶原纤维(COL-I)和纤维连接蛋白(Fn)的表达。结果正常人晶状体上皮细胞为多角形贴壁细胞,不同浓度CTGF诱导24h后,晶状体上皮细胞由单层多角形变为长梭形,细胞间隙变大,呈纤维细胞样改变。CTGF可诱导α-SMA在HLECs胞质表达。CTGF能促进HLECsα-SMA、Fn、COL-I蛋白和mRNA的表达,且这种作用随CTGF浓度的增加而增强(P<0.05)。结论 CTGF能促进人晶状体上皮细胞转分化及CEM的合成。 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 晶状体上皮细胞 后囊膜混浊 a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA) i型胶原纤维(col—i) 纤维连接蛋白(Fn)
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丹皮酚对肝星状细胞胶原合成的抑制作用 被引量：4
3
作者 黄慧 陈洪 +1 位作者 黄桂琼 袁维蔚 《海南医学》 CAS 2018年第14期2005-2008,共4页
目的探究丹皮酚对肝星状细胞(HSC)Ⅰ和Ⅲ型胶原(Col-Ⅰ和Col-Ⅲ)合成的影响。方法分别采用Western-blot法和实时荧光定量PCR法检测丹皮酚HSC的Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白的表达、m RNA表达,比较阳性对照组、不同剂量(即低、中、高剂量)丹皮... 目的探究丹皮酚对肝星状细胞(HSC)Ⅰ和Ⅲ型胶原(Col-Ⅰ和Col-Ⅲ)合成的影响。方法分别采用Western-blot法和实时荧光定量PCR法检测丹皮酚HSC的Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白的表达、m RNA表达,比较阳性对照组、不同剂量(即低、中、高剂量)丹皮酚HSC的Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白表达,以及阳性对照组、不同剂量丹皮酚HSC的Col-Ⅰ和Col-Ⅲm RNA表达,同时比较不同剂量的丹皮酚与Col-Ⅰ和Col-Ⅲm RNA相对表达量的相关性。结果低、中、高剂量的丹皮酚HSC的Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白表达分别为(119.35±11.35)和(116.35±11.35)、(131.22±10.89)和(128.22±10.89)、(153.36±11.88)和(150.36±11.88),明显弱于阳性对照组的(112.56±10.56)和(109.56±10.53),差异均有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量的丹皮酚HSC的Col-Ⅰ和Col-Ⅲm RNA表达分别为(1.66±0.10)和(1.73±0.11)、(1.17±0.17)和(1.25±0.12)、(0.62±0.14)和(0.68±0.18),明显弱于阳性对照组的(0.86±0.12)和(1.13±0.14),差异均有统计学意义(P<0.05),但只有高剂量组的抑制效果强于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不同剂量组的丹皮酚与Col-Ⅰ和Col-Ⅲm RNA相对表达量均呈负相关(P<0.05)。结论丹皮酚对TGF-β激活的HSC的Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白及其m RNA表达具有抑制作用,一定剂量内,剂量越大抑制作用越强。 展开更多
关键词 丹皮酚 肝星状细胞 Ⅰ型胶原 抑制作用
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菟丝子水提物对肾间质纤维化大鼠肾组织保护作用的研究 被引量：22
4
作者 徐瑜萍 向铮 +1 位作者 潘瑜 黄可新 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期2103-2108,共6页
目的探讨菟丝子水提物对大鼠单侧输尿管结扎诱导的肾间质纤维化的疗效。方法 SPF级SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、菟丝子组。通过复制肾间质纤维化大鼠模型,检测模型大鼠血清肌酐和尿素氮水平,观察肾组织病理变化,并采用免疫组... 目的探讨菟丝子水提物对大鼠单侧输尿管结扎诱导的肾间质纤维化的疗效。方法 SPF级SD大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、菟丝子组。通过复制肾间质纤维化大鼠模型,检测模型大鼠血清肌酐和尿素氮水平,观察肾组织病理变化,并采用免疫组化技术检测大鼠肾组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)、I型胶原(Col I)等表达情况。结果相比于模型组,菟丝子给药组大鼠血清肌酐和尿素氮水平显著降低,减少肾间质胶原沉积和肾组织α-SMA、CTGF、Col I表达。结论菟丝子水提物对肾间质纤维化大鼠肾组织有缓解保护作用。 展开更多
关键词 菟丝子水提物 肾间质纤维化 免疫组化 生化测试 平滑肌动蛋白 结缔组织生长因子 Ⅰ型胶原
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补骨脂酚对TGF-β诱导人肝星状细胞损伤的保护作用 被引量：8
5
作者 陈巧云 杨柳 +3 位作者 王业秋 李孟 张建辉 李建民 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期131-135,共5页
目的：探讨补骨脂酚对转化生长因子-β（TGF-β）诱导人肝星状细胞损伤的保护作用及其机制。方法：通过噻唑蓝（MTT）比色法检测各组人肝星状细胞活性,筛选出补骨脂酚安全有效浓度;本实验分为空白组、模型组、补骨脂酚组（1×10^-5m... 目的：探讨补骨脂酚对转化生长因子-β（TGF-β）诱导人肝星状细胞损伤的保护作用及其机制。方法：通过噻唑蓝（MTT）比色法检测各组人肝星状细胞活性,筛选出补骨脂酚安全有效浓度;本实验分为空白组、模型组、补骨脂酚组（1×10^-5mol·L^-1）及雌二醇组（1×10^-6mol·L^-1）,同样检测各组细胞的活性,除空白组外,其余各组均加入10μg·L-1TGF-β诱导人肝星状细胞损伤;分别采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组细胞中超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）,丙二醛（MDA）的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测细胞中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）,胶原蛋白-Ⅰ（Col-Ⅰ）mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞中MMP-1,Col-Ⅰ蛋白的表达水平。结果：与模型组比较,1×10^-5mol·L^-1补骨脂酚显著提高TGF-β诱导人肝星状细胞及细胞中SOD,GSH-Px活性,显著降低细胞中MDA含量及Col-Ⅰ,MMP-1 mRNA和蛋白的表达（P〈0.01）。结论：补骨脂酚对TGF-α诱导人肝星状细胞损伤的保护作用,主要是通过提高细胞中抗氧化酶的活性、降低细胞中MMP-1,Col-ⅠmRNA和蛋白的含量。 展开更多
关键词 补骨脂酚 转化生长因子-β(TGF-β) 人肝星状细胞 抗氧化酶 基质金属蛋白酶-1(MMP-1) 胶原蛋白-Ⅰ(col-Ⅰ)
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转化生长因子-β_1/Smad信号通路在肾小球系膜细胞的表达及血管紧张素转化酶抑制剂对其影响 被引量：5
6
作者 邓颖 于力 +3 位作者 陈蓉燕 温跃强 温捷 郝志宏 《中华妇幼临床医学杂志（电子版）》 CAS 2011年第4期243-247,共5页
目的探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1/Smad信号传导通路在肾小球系膜细胞(glomerular measanial cell,GMC)中的作用,观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)福辛普利(fosinop... 目的探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1/Smad信号传导通路在肾小球系膜细胞(glomerular measanial cell,GMC)中的作用,观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)福辛普利(fosinopril,Fos)在该通路中对磷酸化Smad2/3(phosphorylationSmad2/3,P-Smad2/3)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)表达的影响,阐明福辛普利的肾保护作用机制。方法采用经典方法进行大鼠肾小球系膜细胞复苏、培养和传代后,将其按处理方式分为3组:TGF-β1组(TGF-β15ng/mL处理);②Fos组(TGF-β15ng/mL+Fos1×10-4mol/L处理);③对照组(空白)。甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法分别检测3组肾小球系膜细胞增殖光密度(optical density,OD)值,计算细胞抑制率;间接免疫荧光法检测磷酸化Smad2/3表达情况;酶联免疫吸附测定(enzyme linkedi mmunosorbent assay,ELISA)法测定Ⅰ型胶原蛋白的变化,计算抑制率。结果各时间点肾小球系膜细胞增殖荧光强度比较,TGF-β1组明显高于对照组,Fos组低于TGF-β1组,差异有显著意义(P<0.05)。磷酸化Smad2/3在对照组仅极微量表达,TGF-β1组在刺激30min后,荧光强度显著增强,且集中于细胞核。与TGF-β1组相比,Fos组磷酸化Smad2/3表达下降,细胞荧光强度较弱,差异有显著意义(P<0.05)。对照组Ⅰ型胶原蛋白仅少量基础性分泌。与对照组相比,TGF-β1组在各时间点Ⅰ型胶原蛋白分泌量显著上升,差异有显著意义(P<0.05);与TGF-β1组比较,Fos组Ⅰ型胶原蛋白在15min和6h的表达量比较,差异无显著意义(P>0.05);在12h和24h比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论人重组转化生长因子-β1能激活体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化-Smads表达,并激活转化生长因子-β/Smads信号途径,该途径激活能致Ⅰ型胶原分泌增多,并能诱导肾小球系膜细胞增殖,其作用呈一定的时间依赖性关系。福辛普利能部分阻断转化生长因子-β/ 展开更多
关键词 肾小球系膜细胞 Ⅰ型胶原蛋白 转化生长因子-Β1 SMAD蛋白 血管紧张素转化酶抑制剂
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辛伐他汀对大鼠肝纤维化的影响及其作用机制 被引量：2
7
作者 徐明 孙申 +1 位作者 冯盼盼 刘静 《科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期89-92,共4页
观察辛伐他汀对大鼠肝纤维化的影响并探讨其机制。60只健康的睡眠剥夺(Sleep Deprivation,SD)大鼠随机分为对照组、模型组和药物组。模型组和药物组,大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)油溶液造模,药物组造模同时给予辛伐他汀灌胃(5mg.kg-1.d-1... 观察辛伐他汀对大鼠肝纤维化的影响并探讨其机制。60只健康的睡眠剥夺(Sleep Deprivation,SD)大鼠随机分为对照组、模型组和药物组。模型组和药物组,大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)油溶液造模,药物组造模同时给予辛伐他汀灌胃(5mg.kg-1.d-1)至实验结束;对照组给予等量的橄榄油皮下注射。8周后处死所有动物,全自动生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)活性,苏木精-伊红染色观察肝组织病理学改变,免疫组织化学法检测各组肝组织中I、III型胶原及转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况。结果表明,与模型组相比,药物组大鼠肝脏炎症反应和纤维化较轻,I、III型胶原及TGF-β1的表达显著减少(P<0.05),血清ALT、AST水平降低(P<0.05)。由此得出,辛伐他汀可以减轻肝纤维化程度,其机制可能与抑制TGF-β1和I、III型胶原表达有关。 展开更多
关键词 辛伐他汀 肝纤维化 转化生长因子-Β1 i型胶原 iii型胶原
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积雪草苷对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用 被引量：1
8
作者 邢晨 杨治峰 +4 位作者 薄存香 唐琼 贾强 张振玲 邵华 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期12-17,共6页
目的探讨积雪草苷(AS)对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用及可能的作用机制。方法144只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药物对照组、AS低、中、高剂量组,每组24只。对照组大鼠气管内灌注1.0 ml生理盐水,其余组灌注1.0 ml 50 mg/ml... 目的探讨积雪草苷(AS)对染矽尘大鼠肺纤维化的干预作用及可能的作用机制。方法144只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药物对照组、AS低、中、高剂量组,每组24只。对照组大鼠气管内灌注1.0 ml生理盐水,其余组灌注1.0 ml 50 mg/ml二氧化硅(SiO_(2))混悬液。造模后第2天给大鼠灌胃,1次/d阳性药物对照组灌注30 mg/kg的汉方己甲素,AS低、中、高剂量组分别灌注20、40和60 mg/kg AS,对照组、模型组灌注等量的生理盐水。于灌胃第14、28、56天分批处死大鼠,取大鼠肺组织,检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,行HE、MASSON染色,观察肺组织病理学改变,Western Blot测定大鼠肺组织I型胶原蛋白(Col-I)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,酶联免疫(ELISA)法检测大鼠肺组织中TGF-β1、白细胞介素-18(IL-18)含量。结果SiO_(2)刺激14、28、56 d后,模型组大鼠肺组织有明显的炎症反应及胶原纤维的积聚,且炎症和纤维化程度随时间加重。造模后第14、28、56天模型组大鼠肺组织中HYP、IL-18和TGF-β1含量均高于对照组(P<0.05),与模型组比较,阳性药物对照组和AS中、高剂量组大鼠肺组织中HYP含量降低;阳性药物对照组和各AS剂量组肺组织中TGF-β1和IL-18含量均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,模型组大鼠肺组织中TGF-β1、Col-I、α-SMA蛋白表达水平升高(P<0.05),与模型组比较,阳性药物对照组和各AS剂量组大鼠肺组织Col-I和α-SMA蛋白表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论积雪草苷可以抑制SiO_(2)诱导的大鼠肺组织Col-I、TGF-β1、α-SMA含量的升高,减少肺组织中TGF-β1、IL-18炎性因子的释放,抑制大鼠肺组织细胞外基质的合成、沉积,改善矽肺纤维化。 展开更多
关键词 二氧化硅 肺纤维化 积雪草苷 羟脯氨酸 i型胶原蛋白 转化生长因子-β1 白介素-18
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复方六月青对肝星状细胞I型胶原合成的抑制作用 被引量：1
9
作者 张士军 陈兆霓 +3 位作者 张志伟 李勇文 林兴 黄仁彬 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期544-546,552,共4页
目的:研究复方六月青(CLYQ)对肝星状细胞(HSC)I型胶原(Col I)合成的影响。方法:采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测CLYQ对细胞的毒性,分别采用免疫细胞化学法和实时荧光定量PCR法检测CLYQ对HSC的Col I蛋白和mRNA表达的影响。结果:CLYQ对HSC毒... 目的:研究复方六月青(CLYQ)对肝星状细胞(HSC)I型胶原(Col I)合成的影响。方法:采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测CLYQ对细胞的毒性,分别采用免疫细胞化学法和实时荧光定量PCR法检测CLYQ对HSC的Col I蛋白和mRNA表达的影响。结果:CLYQ对HSC毒性很低。CLYQ各剂量组中HSC的Col I蛋白表达显著减弱(P<0.01)。CLYQ高、中剂量组均可显著下调HSC的Col I mRNA表达(P<0.01)。结论:CLYQ通过下调HSC的Col I蛋白及mRNA表达,从而减少细胞外基质(ECM)合成,发挥抗肝纤维化作用。 展开更多
关键词 复方六月青 肝纤维化 肝星状细胞 i型胶原
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