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1株堆肥耐低温纤维素降解菌的筛选、鉴定及生长特性的初步研究 被引量：14
1
作者 尚晓瑛 程旭艳 +1 位作者 霍培书 李季 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期558-562,共5页
为增加用于堆肥的耐低温纤维素分解菌的资源,通过微生物筛选实验及纤维素酶活力测定实验,从黑龙江双峰林场采集的腐殖土样中筛选得到8株耐低温纤维素降解菌,其中菌株B6-15的纤维素酶活性最高,为24.94U/mL,且该菌在初始pH 7.0,NaCl质量分... 为增加用于堆肥的耐低温纤维素分解菌的资源,通过微生物筛选实验及纤维素酶活力测定实验,从黑龙江双峰林场采集的腐殖土样中筛选得到8株耐低温纤维素降解菌,其中菌株B6-15的纤维素酶活性最高,为24.94U/mL,且该菌在初始pH 7.0,NaCl质量分数0.25%,20℃环境中培养时生长量最大。采用形态学、生理生化特征及16SrDNA核酸序列分析鉴定的方法,初步确定该菌属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。对菌株B6-15所产纤维素酶的热稳定性进行研究,结果显示在10℃存放后仍能保持54.43%的酶活性,表明该耐低温菌所产的纤维素酶为低温酶。 展开更多
关键词 耐低温菌 纤维素降解 假单胞菌属 筛选 生长特性
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低温纤维素降解菌的筛选及其产酶研究 被引量：12
2
作者 任红梅 刘左军 +2 位作者 袁惠君 水清照 禄亚芬 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期127-130,134,共5页
从甘南州玛曲县高寒草甸土壤中筛选出一株低温纤维素降解菌M7。通过形态观察、生理生化及16SrRNA序列比对分析,发现菌株M7与Bacillus subtili strain XS6进化距离最近,初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtili)。通过Box-Benhnken中心... 从甘南州玛曲县高寒草甸土壤中筛选出一株低温纤维素降解菌M7。通过形态观察、生理生化及16SrRNA序列比对分析,发现菌株M7与Bacillus subtili strain XS6进化距离最近,初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtili)。通过Box-Benhnken中心组合设计和响应面分析法(RSM),对其生长和产羧甲基纤维素酶(CMCase)条件进行优化。结果表明:温度20℃,培养基初始pH5.0,转速175r/min,酵母膏2.5g/L和微晶纤维素2.5g/L,蛋白胨5g/L,菌株M7所产CMCase达到最大值。 展开更多
关键词 羧甲基纤维素酶 响应面 低温细菌 高寒草甸 优化
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低温菌启动子探针质粒的构建 被引量：3
3
作者 魏云林 林连兵 +1 位作者 季秀玲 井申荣 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期530-534,共5页
为了在宿主菌Acinetobacter sp.DWC6中构建低温菌蛋白表达载体,以pBR322质粒为基础,去除质粒上β-内酰胺酶基因的启动子片段,取而代之为来源于质粒pJRD215的卡那霉素抗性基因片段,并在pBR322中插入Acinetobacter菌属特异性ori的DNA片段... 为了在宿主菌Acinetobacter sp.DWC6中构建低温菌蛋白表达载体,以pBR322质粒为基础,去除质粒上β-内酰胺酶基因的启动子片段,取而代之为来源于质粒pJRD215的卡那霉素抗性基因片段,并在pBR322中插入Acinetobacter菌属特异性ori的DNA片段,构建了能在Acinetobacter sp.DWC6和E.coli中正常复制的启动子探针质粒pBAP1。通过在质粒pBAP1中的β-内酰胺酶基因上游随机导入Acinetobacter sp.DWC6基因组片段,通过检测宿主细胞的氨苄青霉素抗性和β-内酰胺酶活性,来筛选强启动子片段,并分析了启动子探针质粒载体的功能及启动子的强度。 展开更多
关键词 低温菌 启动子探针质粒载体 Β-内酰胺酶
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低温菌穿梭质粒的构建及转化方法研究 被引量：1
4
作者 魏云林 林连兵 +1 位作者 季秀玲 井申荣 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期525-528,535,共5页
由于低温微生物在细胞结构上的特殊性,使得对它们进行遗传操作受到很大的限制.以分离自冻土的低温菌Acinetobactersp.DWC6为宿主菌,构建了一套外源DNA导入系统.通过在质粒pBR322和pUC118中插入一段Acinetobacter属特异性的Ori片段,成功... 由于低温微生物在细胞结构上的特殊性,使得对它们进行遗传操作受到很大的限制.以分离自冻土的低温菌Acinetobactersp.DWC6为宿主菌,构建了一套外源DNA导入系统.通过在质粒pBR322和pUC118中插入一段Acinetobacter属特异性的Ori片段,成功构建了一系列穿梭质粒,并建立了稳定的转化方法,所有重组质粒均可在Escherichia coli和Acinetobactersp.DWC6中正常复制.通过优化转化方法,使质粒在低温菌Acinetobactersp.DWC6中的转化率达3×106转化子/μg DNA. 展开更多
关键词 低温菌 穿梭质粒 转化
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一株低温厌氧纤维素降解细菌的分离、鉴定及其酶学性质的研究 被引量：12
5
作者 宋文芳 胡国全 徐彦胜 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期1317-1322,共6页
从若尔盖草甸淤泥中获得一株低温厌氧纤维素菌CD-2,分离菌株革兰氏染色阴性,直杆状,严格厌氧,菌体大小为0.3μm×2.8～3.1μm,生长温度范围5～40℃(最适温度20℃);pH范围6.5～8.0(最适pH7);NaCl浓度范围0.1%～0.4%(最适NaCl浓度0.2%... 从若尔盖草甸淤泥中获得一株低温厌氧纤维素菌CD-2,分离菌株革兰氏染色阴性,直杆状,严格厌氧,菌体大小为0.3μm×2.8～3.1μm,生长温度范围5～40℃(最适温度20℃);pH范围6.5～8.0(最适pH7);NaCl浓度范围0.1%～0.4%(最适NaCl浓度0.2%)。分离菌株能利用滤纸、纤维素粉MN300、微晶纤维素、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、木聚糖等。在菌株CD-2的纤维素酶系中,存在外切-β-1,4-葡聚糖酶(C1酶)、内切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx酶)和β-葡萄糖苷酶3种组分,最适温度分别为30、30和25℃。该菌株还存在木聚糖酶,最适温度为30℃。通过16S rDNA序列分析表明,菌株CD-2属于梭菌属Clostridium,与C.papyrosolvens的相似性为99.1%。 展开更多
关键词 适冷厌氧纤维素菌 酶学性质 16S RDNA序列 系统发育分析
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