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circLAMP1靶向miR-1193调控肺癌细胞顺铂耐药性及机制
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作者 汤舒 陈永刚 邹吉利 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第23期5851-5857,共7页
目的探讨circ重组人溶酶体相关膜蛋白(LAMP)1对肺癌细胞顺铂(DDP)耐药性的影响及其机制是否与miR-1193有关。方法用浓度为1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00μg/ml的DDP处理A549细胞、A549/DDP细胞,噻唑蓝(MTT)检测A549、A549/DDP... 目的探讨circ重组人溶酶体相关膜蛋白(LAMP)1对肺癌细胞顺铂(DDP)耐药性的影响及其机制是否与miR-1193有关。方法用浓度为1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00μg/ml的DDP处理A549细胞、A549/DDP细胞,噻唑蓝(MTT)检测A549、A549/DDP细胞抑制率及半数抑制浓度(IC50);将A549/DDP细胞分为DDP+si-circLAMP1组、DDP+si-NC组、DDP+miR-1193组、DDP+miR-NC组、DDP+si-circLAMP1+anti-miR-1193组、DDP+si-circLAMP1+anti-miR-NC组;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测A549及A549/DDP细胞中circLAMP1和miR-1193的表达水平;CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验和Transwell分别检测迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹法检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circLAMP1和miR-1193的靶向关系。结果与A549细胞相比,A549/DDP细胞抑制率降低,IC50值升高,circLAMP1表达水平升高,miR-1193表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰circLAMP1表达或miR-1193过表达联合DDP处理后,A549/DDP细胞活性、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达降低,凋亡率及E-cadherin、cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。下调miR-1193表达逆转了干扰circLAMP1表达联合DDP对A549/DDP细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的作用。circLAMP1靶向负调控miR-1193。结论干扰circLAMP1表达可通过靶向调控miR-1193增强DDP对A549/DDP细胞增殖、迁移、侵袭的抑制和凋亡促进作用,可降低肺癌细胞的DDP耐药性。 展开更多
关键词 circ重组人溶酶体相关膜蛋白(lamp)1 miR-1193 肺癌 顺铂 耐药性
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