[目的]探讨miR-346靶向基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对绒毛膜癌细胞株JAR细胞侵袭增殖的影响。[方法]设绒毛膜癌细胞株JAR组、miR-NC组、miR-346 mimics组、miR-346 inhibitor组,培养72 h。MTT法检测绒毛膜癌细胞株JAR活力、癌细胞细胞集落...[目的]探讨miR-346靶向基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对绒毛膜癌细胞株JAR细胞侵袭增殖的影响。[方法]设绒毛膜癌细胞株JAR组、miR-NC组、miR-346 mimics组、miR-346 inhibitor组,培养72 h。MTT法检测绒毛膜癌细胞株JAR活力、癌细胞细胞集落,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,Transwell实验测定细胞侵袭水平,RT-PCR法及蛋白电泳法测定miR-346、MMP-9水平。[结果]与绒毛膜癌细胞株JAR组和miR-NC组比较,miR-346 mimics组OD值、存活率、细胞集落、穿膜数、迁移距离、MMP-9 mRNA和蛋白水平降低[0.73±0.03、0.72±0.03 vs 0.41±0.04,(78.24±6.25、76.37±7.35 vs 42.74±7.34)%,619.47±89.35、614.88±75.27 vs 239.32±35.53,693.85±184.74、702.28±111.52 vs 293.85±95.28,(100.25±18.55、98.54±17.45 vs 68.25±12.24)μm, 3.85±0.25、3.90±0.23 vs 2.04±0.24,0.90±0.22、0.89±0.23 vs 0.37±0.26],细胞凋亡率、miR-346水平[(12.38±1.37、12.26±1.20 vs 25.39±1.47)%,3.17±0.33、3.15±0.36 vs 5.68±0.37]升高(P<0.05),miR-346 inhibitor组OD值、存活率、细胞集落、穿膜数、迁移距离、MMP-9 mRNA和蛋白水平(0.90±0.04,86.95%±6.24%,1062.28±102.79,1917.34±425.35,198.25μm±25.66μm, 4.63±0.28,1.48±0.34)升高,细胞凋亡率、miR-346水平(6.62±0.54,1.42±0.38)降低(P<0.05)。[结论] miR-346对绒毛膜癌细胞株JAR细胞侵袭、增殖具有明显抑制作用,其机制可能与miR-346靶向抑制MMP-9表达有关。展开更多
[目的]探讨乳腺癌细胞分泌琥珀酸盐促进巨噬细胞极化的潜在机制。[方法]不同乳腺癌细胞系或正常乳腺上皮细胞的培养上清培养人巨噬细胞后,分析TAM标志物Arg1、Fizz1、Mgl1的表达以及巨噬细胞极化为TAM水平。检测乳腺癌细胞和正常乳腺上...[目的]探讨乳腺癌细胞分泌琥珀酸盐促进巨噬细胞极化的潜在机制。[方法]不同乳腺癌细胞系或正常乳腺上皮细胞的培养上清培养人巨噬细胞后,分析TAM标志物Arg1、Fizz1、Mgl1的表达以及巨噬细胞极化为TAM水平。检测乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞中琥珀酸盐的水平并评估其对巨噬细胞极化为TAM的影响。分子对接和表面等离子共振分析琥珀酸与琥珀酸受体(SUCNR1)的结合位点。[结果]乳腺癌细胞上清培养的巨噬细胞中TAM标志物的表达水平上升(1.00±0.08 vs 19.71±1.80,P<0.05),并且巨噬细胞极化为TAM的水平上升(1.00±0.10 vs 4.89±0.44,P<0.05)。乳腺癌细胞上清中琥珀酸的水平显著上升[(0.09±0.01 vs 0.63±0.04)mmol/L,P<0.05]。不同浓度琥珀酸处理后,巨噬细胞中TAM标志物的表达水平呈浓度依赖性上升(1.00±0.01 vs 26.14±0.21,P<0.05),并且巨噬细胞极化为TAM的水平上升(1.00±0.04 vs 4.10±0.23,P<0.05)分子对接和表面等离子共振显示琥珀酸盐与SUCNR1结合于R81、N173和S178位点。[结论]乳腺癌细胞分泌的琥珀酸盐与巨噬细胞SUCNR1的R81、N173和S178结合后促进了巨噬细胞发生M2极化为TAM(1.00±0.10 vs 4.89±0.44)。展开更多
目的:探讨Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)对人绒癌JAR细胞侵袭、转移、黏附的影响及MMP-9、VEGF表达的变化。方法:用不同浓度的5F作用JAR细胞,MTT比色法,Transwell小室,细胞黏附实验观察其增殖、侵袭、迁移、黏附...目的:探讨Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)对人绒癌JAR细胞侵袭、转移、黏附的影响及MMP-9、VEGF表达的变化。方法:用不同浓度的5F作用JAR细胞,MTT比色法,Transwell小室,细胞黏附实验观察其增殖、侵袭、迁移、黏附能力的变化;Western blot方法检测5F对JAR细胞MMP-9、VEGF表达水平的影响。结果:作用6 h,5F能抑制JAR细胞的增殖、转移、侵袭、黏附,其抑制率呈剂量效应(P<0.05)。5F作用24 h JAR细胞,MMP-9、VEGF蛋白表达水平能明显下调。结论:5F能抑制JAR细胞的侵袭、转移、黏附并下调MMP-9、VEGF蛋白表达水平。展开更多
文摘[目的]探讨miR-346靶向基质金属蛋白酶-9(MMP-9)对绒毛膜癌细胞株JAR细胞侵袭增殖的影响。[方法]设绒毛膜癌细胞株JAR组、miR-NC组、miR-346 mimics组、miR-346 inhibitor组,培养72 h。MTT法检测绒毛膜癌细胞株JAR活力、癌细胞细胞集落,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,Transwell实验测定细胞侵袭水平,RT-PCR法及蛋白电泳法测定miR-346、MMP-9水平。[结果]与绒毛膜癌细胞株JAR组和miR-NC组比较,miR-346 mimics组OD值、存活率、细胞集落、穿膜数、迁移距离、MMP-9 mRNA和蛋白水平降低[0.73±0.03、0.72±0.03 vs 0.41±0.04,(78.24±6.25、76.37±7.35 vs 42.74±7.34)%,619.47±89.35、614.88±75.27 vs 239.32±35.53,693.85±184.74、702.28±111.52 vs 293.85±95.28,(100.25±18.55、98.54±17.45 vs 68.25±12.24)μm, 3.85±0.25、3.90±0.23 vs 2.04±0.24,0.90±0.22、0.89±0.23 vs 0.37±0.26],细胞凋亡率、miR-346水平[(12.38±1.37、12.26±1.20 vs 25.39±1.47)%,3.17±0.33、3.15±0.36 vs 5.68±0.37]升高(P<0.05),miR-346 inhibitor组OD值、存活率、细胞集落、穿膜数、迁移距离、MMP-9 mRNA和蛋白水平(0.90±0.04,86.95%±6.24%,1062.28±102.79,1917.34±425.35,198.25μm±25.66μm, 4.63±0.28,1.48±0.34)升高,细胞凋亡率、miR-346水平(6.62±0.54,1.42±0.38)降低(P<0.05)。[结论] miR-346对绒毛膜癌细胞株JAR细胞侵袭、增殖具有明显抑制作用,其机制可能与miR-346靶向抑制MMP-9表达有关。
文摘[目的]探讨乳腺癌细胞分泌琥珀酸盐促进巨噬细胞极化的潜在机制。[方法]不同乳腺癌细胞系或正常乳腺上皮细胞的培养上清培养人巨噬细胞后,分析TAM标志物Arg1、Fizz1、Mgl1的表达以及巨噬细胞极化为TAM水平。检测乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞中琥珀酸盐的水平并评估其对巨噬细胞极化为TAM的影响。分子对接和表面等离子共振分析琥珀酸与琥珀酸受体(SUCNR1)的结合位点。[结果]乳腺癌细胞上清培养的巨噬细胞中TAM标志物的表达水平上升(1.00±0.08 vs 19.71±1.80,P<0.05),并且巨噬细胞极化为TAM的水平上升(1.00±0.10 vs 4.89±0.44,P<0.05)。乳腺癌细胞上清中琥珀酸的水平显著上升[(0.09±0.01 vs 0.63±0.04)mmol/L,P<0.05]。不同浓度琥珀酸处理后,巨噬细胞中TAM标志物的表达水平呈浓度依赖性上升(1.00±0.01 vs 26.14±0.21,P<0.05),并且巨噬细胞极化为TAM的水平上升(1.00±0.04 vs 4.10±0.23,P<0.05)分子对接和表面等离子共振显示琥珀酸盐与SUCNR1结合于R81、N173和S178位点。[结论]乳腺癌细胞分泌的琥珀酸盐与巨噬细胞SUCNR1的R81、N173和S178结合后促进了巨噬细胞发生M2极化为TAM(1.00±0.10 vs 4.89±0.44)。
文摘目的探究干扰小RNA(si RNA)沉默小窝蛋白-1(CAV1)基因表达对人绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能的作用机制。方法将人绒毛膜癌JEG-3细胞分为对照组(不进行转染)、阴性组(转染si RNA-NC)和si RNA-CAV1组(转染si RNA-CAV1)。Transwell法检测下调CAV1表达对细胞侵袭、迁移能力的影响;实时定量PCR(q RT-PCR)检测转染细胞中CAV1 m RNA的表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中CAV1、丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)、雷帕霉素靶蛋白(MTOR)、核糖体p70S6激酶(p70S6K)、磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化MTOR(p-MTOR)、磷酸化p70S6K(p-p70S6K)蛋白的表达水平。结果 si RNA-CAV1组JEG-3细胞中CAV1 m RNA和蛋白的相对表达量均低于对照组(P﹤0.05);si RNA-CAV1组JEG-3细胞的侵袭数目、迁移数目均低于对照组(P﹤0.05);si RNA-CAV1组JEG-3细胞中AKT、MTOR、p70S6K以及磷酸化水平均低于对照组(P﹤0.05)。结论沉默CAV1表达可以抑制人绒毛膜癌JEG-3细胞的侵袭和迁移能力,该作用与AKT/MTOR/p70S6K信号通路有关。
文摘目的:探讨Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)对人绒癌JAR细胞侵袭、转移、黏附的影响及MMP-9、VEGF表达的变化。方法:用不同浓度的5F作用JAR细胞,MTT比色法,Transwell小室,细胞黏附实验观察其增殖、侵袭、迁移、黏附能力的变化;Western blot方法检测5F对JAR细胞MMP-9、VEGF表达水平的影响。结果:作用6 h,5F能抑制JAR细胞的增殖、转移、侵袭、黏附,其抑制率呈剂量效应(P<0.05)。5F作用24 h JAR细胞,MMP-9、VEGF蛋白表达水平能明显下调。结论:5F能抑制JAR细胞的侵袭、转移、黏附并下调MMP-9、VEGF蛋白表达水平。
