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Advances in chloroplast engineering 被引量:6
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作者 Huan-Huan Wang Wei-Bo Yin Zan-Min Hu 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2009年第7期387-398,共12页
The chloroplast is a pivotal organelle in plant cells and eukaryotic algae to carry out photosynthesis, which provides the primary source of the world's food. The expression of foreign genes in chloroplasts offers se... The chloroplast is a pivotal organelle in plant cells and eukaryotic algae to carry out photosynthesis, which provides the primary source of the world's food. The expression of foreign genes in chloroplasts offers several advantages over their expression in the nucleus: high-level expression, transgene stacking in operons and a lack of epigenetic interference allowing stable transgene expression. In addition, transgenic chloroplasts are generally not transmitted through pollen grains because of the cytoplasmic localization. In the past two decades, great progress in chloroplast engineering has been made. In this paper, we review and highlight recent studies of chloroplast engineering, including chloroplast transformation procedures, controlled expression of plastid transgenes in plants, the expression of foreign genes for improvement of plant traits, the production of biopharmaceuticals, metabolic pathway engineering in plants, plastid transformation to study RNA editing, and marker gene excision system. 展开更多
关键词 chloroplast plastid transformation homologous recombination protein expression marker excision
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质体基因工程中选择标记基因研究进展 被引量:2
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作者 何勇 罗岸 +4 位作者 母连胜 陈强 张艳 叶开温 田志宏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期810-827,共18页
与细胞核基因工程相比,质体基因工程能更安全、精确和高效地对外源基因进行表达,作为下一代转基因技术已广泛用于基础研究和生物技术应用领域。与细胞核基因工程一样,质体基因工程中也需要合适的选择标记基因用于转化子的筛选和同质化,... 与细胞核基因工程相比,质体基因工程能更安全、精确和高效地对外源基因进行表达,作为下一代转基因技术已广泛用于基础研究和生物技术应用领域。与细胞核基因工程一样,质体基因工程中也需要合适的选择标记基因用于转化子的筛选和同质化,但基于质体基因组的多拷贝性和母系遗传特点,转化子的同质化需要一个长期的筛选过程,这就决定了质体基因工程中选择标记基因的选择标准将不同于细胞核基因工程中广泛使用的现行标准。目前,质体基因工程的遗传转化操作中使用较多的是抗生素选择标记基因,出于安全性考虑,需要找到可替换、安全的选择标记基因或有效的标记基因删除方法。本文在对质体基因工程研究的相关文献分析基础之上,对主要使用的选择标记基因及其删除体系进行了综述,并对比了其优缺点,同时探讨了质体基因工程中所使用的报告基因,以期为现有选择标记基因及其删除体系的改进和开发提供一定参考,进一步推动质体基因工程,尤其是单子叶植物质体基因工程的发展。 展开更多
关键词 质体基因工程 叶绿体基因工程 质体遗传转化 叶绿体遗传转化 选择标记基因 标记基因删除
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番茄质体多顺反子定点整合表达载体的构建及其转烟草的研究 被引量:4
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作者 陆云华 马立新 蒋思婧 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期755-761,共7页
根据烟草叶绿体高频同源重组片段的已知序列(GenBank Z00044.1)设计引物,用PCR的方法克隆到1个3.663 kb的番茄叶绿体DNA片段(psbD/trnG),命名为ctDNA。该片段与GenBank中烟草的相应片段有96.7%同源性,与本文所用的烟草的相应片段有95.8... 根据烟草叶绿体高频同源重组片段的已知序列(GenBank Z00044.1)设计引物,用PCR的方法克隆到1个3.663 kb的番茄叶绿体DNA片段(psbD/trnG),命名为ctDNA。该片段与GenBank中烟草的相应片段有96.7%同源性,与本文所用的烟草的相应片段有95.8%同源性。以其为外源多顺反子定点整合介导的同源重组片段,与来自烟草叶绿体的强启动子Prrn和终止子psbA3′,以及甘露聚糖酶基因man、绿荧光蛋白基因gfp、氨基糖苷3′-腺苷酰基转移酶基因aadA构建番茄质体多顺反子定点整合表达载体pLM2(-psbD-Prrn-RBS-man-RBS-gfp-RBS-aadA-psbA3′t-rnG-)。将该载体用基因枪轰击烟草叶片,用添加了壮观霉素的选择分化培养基筛选,获得质体转基因烟草3株。用PCR、激光扫描、Western blot、RFLP等方法检测都证实man、gfp、aadA基因已整合到烟草质体基因组中,且均得到表达。用番茄质体多顺反子定点整合表达载体成功实现在烟草质体中的表达。 展开更多
关键词 多顺反子 番茄质体载体构建 烟草质体转化 基因枪法
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