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不对称还原苯乙酮酸甲酯的生物转化菌种选育及条件优化
1
作者 李忠琴 许小平 +3 位作者 黄雅燕 郭黛苹 周训胜 郭养浩 《福州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2004年第2期252-256,共5页
选用酵母菌、乳酸菌、粪链球菌、假丝酵母等4个种属共15株菌株,研究其对苯乙酮酸甲酯的不对称还原催化特性.以具有R(-)-扁桃酸甲酯较高转化活力的菌株S.cNo.1、S.cNo.3、S.cNo.9作为出发菌株,采用紫外与微波复合诱变的方法,筛选获得S.c3... 选用酵母菌、乳酸菌、粪链球菌、假丝酵母等4个种属共15株菌株,研究其对苯乙酮酸甲酯的不对称还原催化特性.以具有R(-)-扁桃酸甲酯较高转化活力的菌株S.cNo.1、S.cNo.3、S.cNo.9作为出发菌株,采用紫外与微波复合诱变的方法,筛选获得S.c3.5.16突变株.考察培养温度、pH值对该突变株转化活力的影响,结果表明,S.c3.5.16菌株的R(-)-扁桃酸甲酯生物转化最适反应条件为培养基pH6.5、温度38℃,苯乙酮酸甲酯转化为扁桃酸甲酯的得率达到99.3%,R(-)-扁桃酸的光学纯度达到95.5%e.e.. 展开更多
关键词 手性生物转化 菌株筛选 紫外诱变 微波诱变 R(-)-扁桃酸甲酯
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应用混合菌系实现右旋磷霉素手性生物转化的初步研究 被引量：2
2
作者 周丽沙 安海英 +3 位作者 李慧 杨伟超 徐慧 史荣久 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第S1期374-377,共4页
探索了一条通过混合菌系把右旋磷霉素转化为左旋磷霉素的生物转化新途径。采用"右旋磷霉素利用菌"和"左旋磷霉素抗性菌"两种筛选模型,从某制药厂土壤中筛选到了7株右旋磷霉素利用菌和6株左旋磷霉素抗性菌。将上述1... 探索了一条通过混合菌系把右旋磷霉素转化为左旋磷霉素的生物转化新途径。采用"右旋磷霉素利用菌"和"左旋磷霉素抗性菌"两种筛选模型,从某制药厂土壤中筛选到了7株右旋磷霉素利用菌和6株左旋磷霉素抗性菌。将上述13株菌混合接种到以0.5%右旋磷霉素为唯一碳源的无机盐培养基中,30℃、150r/min培养3～5d,经磷霉素敏感菌生物检测、薄层层析(TLC)检测,初步确证了转化产物中存在左旋磷霉素。对右旋磷霉素的手性生物转化条件进行了初步探索,发现接种时带入少量肉汤培养基对转化有促进作用,而微量元素Co^(2-)和VO_3^-对转化没有促进作用。为在磷霉素生产中减少资源浪费和提高产量提供了理论依据。 展开更多
关键词 右旋磷霉素 左旋磷霉素 混菌发酵 手性生物转化 生物检测
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高效液相色谱法测定手性生物转化中肾上腺素与肾上腺酮 被引量：2
3
作者 李忠琴 郭黛苹 +2 位作者 杨凯 王武 许小平 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期624-626,638,共4页
应用离子对反相离子对高效液相色谱法测定了手性生物转化中肾上腺素和肾上腺酮的含量,将活化的菌株接种至液体培养基中,培养24 h后加入肾上腺酮(910 mg.L-1),在pH 5.5振荡培养并定时取样,取发酵液离心10 min(转速10 000 r.min-1),取上... 应用离子对反相离子对高效液相色谱法测定了手性生物转化中肾上腺素和肾上腺酮的含量,将活化的菌株接种至液体培养基中,培养24 h后加入肾上腺酮(910 mg.L-1),在pH 5.5振荡培养并定时取样,取发酵液离心10 min(转速10 000 r.min-1),取上层清液经0.2μm滤膜过滤后供HPLC测定。用色谱柱(ODS C18)作固定相,流动相由甲醇及25 mmol.L-1乙酸-乙酸钠缓冲液按15比85体积比混合后组成。此缓冲液中含4 mmol.L-1庚烷磺酸钠,流速为1 mL.min-1,测定时采用紫外检测,波长为233 nm。肾上腺素及肾上腺酮分别在质量浓度为28～1 800 mg.L-1及36～1 350 mg.L-1范围内与相应的峰面积之间呈线性关系,信噪比S/N为3时,两者的检出限分别为1.4,2.8 mg.L-1,回收率试验所得结果在99.3%～100.3%之间。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 肾上腺素 肾上腺酮 手性生物转化
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反相离子对色谱法测定手性生物转化中扁桃酸与苯乙酮酸 被引量：2
4
作者 阮文兵 林美新 +1 位作者 陈素华 许小平 《福州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期286-289,共4页
建立一种同时测定生物不对称转化发酵液中扁桃酸及苯乙酮酸含量的反相离子对高效液相色谱方法.色谱柱为HypersilC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-25mmol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(内含6mmol·L-1四丁基溴化铵,NaOH调pH... 建立一种同时测定生物不对称转化发酵液中扁桃酸及苯乙酮酸含量的反相离子对高效液相色谱方法.色谱柱为HypersilC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-25mmol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(内含6mmol·L-1四丁基溴化铵,NaOH调pH至7.0)(体积分数15∶85),流速为1.0mL·min-1,检测波长220nm,柱温为室温.扁桃酸与苯乙酮酸在0.5～20mmol·L-1内,其浓度与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.9994,0.9997).二者的加样回收率均为96.5%～100.6%.当信噪比(S/N)为3时,二者的最低检测浓度分别为2.4和8μmol·L-1.该方法简便、准确、灵敏度高,可用于手性生物转化中扁桃酸与苯乙酮酸的定量分析. 展开更多
关键词 反相离子对高效液相色谱 手性生物转化 扁桃酸 苯乙酮酸
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