成人急性淋巴细胞白血病免疫治疗进展 被引量：5

1

作者 张宜婧 沈利 +3 位作者 向春丽 陈秋妮 史玉叶 于亮 《临床血液学杂志》 CAS 2022年第1期82-86,共5页

急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是一种淋巴细胞恶性增殖性疾病,多见于儿童,且儿童ALL获得了高于90%的临床治愈,然而成人ALL预后依然较差[1]。对于成人ALL来说,除标准化疗及造血干细胞移植外,免疫治疗的出现拓宽... 急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是一种淋巴细胞恶性增殖性疾病,多见于儿童,且儿童ALL获得了高于90%的临床治愈,然而成人ALL预后依然较差[1]。对于成人ALL来说,除标准化疗及造血干细胞移植外,免疫治疗的出现拓宽了ALL的治疗方案选择,如抗CD22抗体药物Inotuzumab治疗急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)。 展开更多

关键词 急性淋巴细胞白血病 免疫治疗 Inotuzumab ozogamicin Blinatumomab 嵌合抗原受体T细胞

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BCMA-CAR-T细胞治疗多发性骨髓瘤的研究进展 被引量：7

2

作者 赵万红 蒙珊 《临床血液学杂志》 CAS 2018年第4期495-498,共4页

多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是一种恶性克隆性浆细胞大量增殖所致的血液系统恶性肿瘤。近年来硼替佐米、来那度胺等新型治疗药物的出现显著提高了MM的治疗效果,但由于骨髓瘤干细胞的存在,多数患者最终难免复发、死亡^（[1]）... 多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是一种恶性克隆性浆细胞大量增殖所致的血液系统恶性肿瘤。近年来硼替佐米、来那度胺等新型治疗药物的出现显著提高了MM的治疗效果,但由于骨髓瘤干细胞的存在,多数患者最终难免复发、死亡^（[1]）。随着生物医学及免疫学的发展,采用嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）修饰的T细胞的免疫治疗以其惊人的疗效迅速引起极大关注。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 B细胞成熟抗原 CAR-T细胞 免疫治疗

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CART细胞在血液系统恶性肿瘤疾病中的临床转化研究 被引量：7

3

作者 韩为东 魏建树 罗灿 《临床血液学杂志》 CAS 2016年第4期547-552,共6页

近年来,免疫治疗在血液系统肿瘤治疗中取得了长足进步,特别是嵌合抗原受体修饰的T细胞（chimeric antigen receptor modified T cells,CART cells）在B细胞系血液肿瘤治疗中的突破,为血液肿瘤的治疗提供了新的可选方案。其中以CD19为靶... 近年来,免疫治疗在血液系统肿瘤治疗中取得了长足进步,特别是嵌合抗原受体修饰的T细胞（chimeric antigen receptor modified T cells,CART cells）在B细胞系血液肿瘤治疗中的突破,为血液肿瘤的治疗提供了新的可选方案。其中以CD19为靶点的CART疗法由于效果显著、研究广泛,已成为多数临床研究机构开展基因修饰T细胞治疗研究的模式疗法。 展开更多

关键词 免疫治疗 血液肿瘤 嵌合抗原受体修饰的T细胞

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NK及CAR-NK细胞在肿瘤过继免疫治疗中的运用现状及研究进展 被引量：6

4

作者 徐道俊 段清堂 刘馨 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第15期1806-1813,共8页

NK细胞及CAR-NK细胞作为肿瘤过继免疫细胞治疗技术之一,展现出细胞毒性能力强、经济、off-the-self(现成的)、容易规模化制备的特点,特别在实体瘤临床运用中展现出很好的疗效。文章主要对NK及CAR-NK细胞在肿瘤过继免疫治疗中的运用现状... NK细胞及CAR-NK细胞作为肿瘤过继免疫细胞治疗技术之一,展现出细胞毒性能力强、经济、off-the-self(现成的)、容易规模化制备的特点,特别在实体瘤临床运用中展现出很好的疗效。文章主要对NK及CAR-NK细胞在肿瘤过继免疫治疗中的运用现状及研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 NK细胞 嵌合抗原受体修饰的NK细胞 肿瘤过继免疫治疗 临床研究

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科学表征细胞体内过程,推动细胞治疗产品高质量发展

5

作者 魏春敏 潘鹏玉 +2 位作者 高丽丽 吴婷婷 王玉珠 《中国食品药品监管》 2024年第11期32-43,共12页

细胞治疗技术的突飞猛进引领了复杂难治性疾病治疗范式的重要转变,以CAR-T为代表的细胞治疗产品陆续获批上市,标志着药物治疗史上一个新时代的到来。与临床治疗新技术不同,用于上市申请的细胞治疗产品应遵循药品注册相关法规要求,开展... 细胞治疗技术的突飞猛进引领了复杂难治性疾病治疗范式的重要转变,以CAR-T为代表的细胞治疗产品陆续获批上市,标志着药物治疗史上一个新时代的到来。与临床治疗新技术不同,用于上市申请的细胞治疗产品应遵循药品注册相关法规要求,开展必要的临床药理学研究,科学表征其体内过程。为推动我国细胞治疗产品高质量发展,国家药品监督管理局药品审评中心组织起草了《细胞治疗产品临床药理学研究技术指导原则(试行)》,针对细胞治疗产品体内过程特点,重点阐述开展必要的细胞动力学、药效学及影响因素研究,探索细胞治疗产品安全有效性可控关键要素的相关考虑。 展开更多

关键词 细胞治疗产品 嵌合抗原受体修饰T细胞 肿瘤浸润淋巴细胞 T细胞受体工程化修饰T细胞

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抗间皮素嵌合抗原受体修饰T细胞治疗卵巢癌的实验研究 被引量：4

6

作者 杨永君 李瑶 +3 位作者 尹立 刘新东 卞修武 余时沧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期945-953,共9页

目的观察抗间皮素(mesothelin,MSLN)嵌合抗原受体修饰的T细胞对卵巢癌细胞的杀伤作用,探索新的卵巢癌治疗手段与策略。方法设计人源化抗人间皮素的嵌合抗原受体融合基因;构建慢病毒表达载体;感染人外周血单核细胞,制备稳定表达抗MSLN嵌... 目的观察抗间皮素(mesothelin,MSLN)嵌合抗原受体修饰的T细胞对卵巢癌细胞的杀伤作用,探索新的卵巢癌治疗手段与策略。方法设计人源化抗人间皮素的嵌合抗原受体融合基因;构建慢病毒表达载体;感染人外周血单核细胞,制备稳定表达抗MSLN嵌合抗原受体的T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cells,CART);Western blot、qRT-PCR、流式细胞术检测CAR的表达;免疫组织化学法和Western blot检测卵巢癌样本及细胞系中MSLN表达;体内和体外实验验证CART细胞对卵巢癌细胞的杀伤能力。结果与正常组织相比,卵巢癌组织MSLN表达显著升高(P<0.01);成功制备了抗MSLN-CART细胞;体外实验证明,抗MSLN-CART细胞能够特异性识别和杀伤MSLN阳性的卵巢癌细胞,效靶比为2^(-4)∶1时,MSLN-CART杀伤率仍达到80%;NOD/SCID小鼠卵巢癌原位移植瘤模型证明,经尾静脉回输抗MSLN-CART细胞(1×10~7/只,共2次),原位移植瘤消失。结论抗MSLN-CART细胞能有效、特异且安全地杀伤卵巢癌细胞,抑制肿瘤的生长。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 间皮素 嵌合抗原受体修饰T细胞 杀伤作用

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一例嵌合抗原受体修饰的T细胞治疗过程中腮腺炎并窦道形成的护理

7

作者 卢静 刘晓红 《中外医药研究》 2024年第29期93-95,共3页

回顾分析1例嵌合抗原受体修饰的T细胞治疗过程中出现严重腮腺炎并窦道形成的案例。充分评估伤口情况,多种清创方式相结合清除伤口坏死组织;亲水纤维银敷料外敷促进伤口愈合;加强全身营养支持及抗感染治疗;给予心理支持及舒适护理。经过... 回顾分析1例嵌合抗原受体修饰的T细胞治疗过程中出现严重腮腺炎并窦道形成的案例。充分评估伤口情况,多种清创方式相结合清除伤口坏死组织;亲水纤维银敷料外敷促进伤口愈合;加强全身营养支持及抗感染治疗;给予心理支持及舒适护理。经过精心治疗和护理,患者伤口痊愈。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体修饰的T细胞 腮腺炎 窦道 亲水纤维银敷料 护理

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基于多链结构的CD30 CAR-T细胞的抗肿瘤作用研究

8

作者 宋羽佳 汪晨 +1 位作者 王恩秀 汪波 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期666-670,共5页

目的基于衔接蛋白DAP12的多链嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)开发靶向CD30的CAR-T细胞药物,研究CD30 CAR-T对霍奇金淋巴瘤肿瘤细胞的体外和体内临床前药效。方法通过基因合成和分子克隆技术,设计构建靶向CD30的CAR质粒,进行慢病毒包装,将得... 目的基于衔接蛋白DAP12的多链嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)开发靶向CD30的CAR-T细胞药物,研究CD30 CAR-T对霍奇金淋巴瘤肿瘤细胞的体外和体内临床前药效。方法通过基因合成和分子克隆技术,设计构建靶向CD30的CAR质粒,进行慢病毒包装,将得到的慢病毒转染T细胞,其中靶向CD30的多链CAR-T为CD30-KIRS2/Dap12-BB组,单链二代CAR-T为CD30-41BBζ组,未做病毒侵染的T细胞为NTD组,利用流式细胞术检测CAR阳性率情况,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放检测细胞的杀伤活性,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞因子干扰素γ(IFN-γ)的分泌水平,进一步通过小鼠异种移植瘤模型检测CD30 CAR-T在小鼠体内抗肿瘤活性。结果靶向CD30的多链CAR-T和单链二代CAR-T进行对比,研究发现多链CAR-T与单链CAR-T的杀瘤作用相似。但值得注意的是,多链CAR-T的IFN-γ分泌水平更高(P<0.001)。更重要的是,在小鼠的肿瘤模型实验中,多链CAR-T实现了肿瘤的完全消退。结论靶向CD30的多链CAR-T在抗肿瘤活性方面优于传统单链CAR-T。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体修饰的T细胞 CD30 霍奇金淋巴瘤 DAP12 过继性细胞疗法

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慢性淋巴细胞白血病治疗研究最新进展 被引量：3

9

作者 张冉 辛然 +1 位作者 窦立萍 靖彧 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1910-1915,共6页

慢性淋巴细胞白血病(CLL)是好发于中老年人群的一种低级别淋巴增殖性肿瘤,早期精准干预可以有效改善CLL患者的临床预后。既往治疗方案主要以化学治疗为主,随着分子生物学发展及免疫靶向药物的不断问世,针对B细胞受体信号通路的靶向药物... 慢性淋巴细胞白血病(CLL)是好发于中老年人群的一种低级别淋巴增殖性肿瘤,早期精准干预可以有效改善CLL患者的临床预后。既往治疗方案主要以化学治疗为主,随着分子生物学发展及免疫靶向药物的不断问世,针对B细胞受体信号通路的靶向药物在CLL诊治路径中表现出较高的临床应用价值。CAR-T等细胞免疫疗法也为复发难治CLL患者带来了希望。异基因造血干细胞移植和多药联合手段也在临床实践中表现出较为显著的效果。本文旨在就慢性淋巴细胞白血病的最新治疗研究进展作一综述。 展开更多

关键词 慢性淋巴细胞白血病 BTK抑制剂 BCL-2抑制剂 CAR-T

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嵌合抗原受体自然杀伤细胞免疫治疗多发性骨髓瘤研究进展 被引量：3

10

作者 唐文娇 李燕 +2 位作者 郑宇欢 张丽 牛挺 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期290-297,共8页

尽管新药的进展使多发性骨髓瘤(MM)患者的生存得到明显改善,但复发难治MM仍缺乏有效治疗方案,且预后差。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫治疗技术虽然在复发难治MM中有不错的疗效,但仍存在局限性,如细胞因子释放综合征、神经毒性等不良反... 尽管新药的进展使多发性骨髓瘤(MM)患者的生存得到明显改善,但复发难治MM仍缺乏有效治疗方案,且预后差。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫治疗技术虽然在复发难治MM中有不错的疗效,但仍存在局限性,如细胞因子释放综合征、神经毒性等不良反应和脱靶效应等。自然杀伤(NK)细胞作为机体固有免疫的重要成分,在肿瘤免疫监视中发挥重要功能,因此基于NK细胞的嵌合抗原受体自然杀伤细胞(CAR-NK)免疫治疗技术也越来越受到关注。目前CAR-NK免疫治疗MM的研究显示,多个靶点可作为CAR-NK免疫治疗技术特异性治疗靶点,并且在MM细胞及动物实验中也证实其抗肿瘤效应。本文总结了MM肿瘤微环境中NK细胞抗肿瘤机制、生物学特点和功能缺陷情况,以及CAR-NK免疫治疗MM的基础和临床研究进展。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 嵌合抗原受体自然杀伤细胞 复发 难治 治疗

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CAR-T免疫疗法与非小细胞肺癌:瓶颈与曙光 被引量：3

11

作者 张立 李恒 +2 位作者 张飞越 王书廷 李高峰 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期916-920,共5页

伴随人们对威胁人类健康的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)更深入的病理生理和发病机制的全新理解,NSCLC治疗已进入一个新时代。从传统以手术、放化疗为基础的治疗过渡到以个体化精准化的靶向治疗和安全性及效能更高... 伴随人们对威胁人类健康的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)更深入的病理生理和发病机制的全新理解,NSCLC治疗已进入一个新时代。从传统以手术、放化疗为基础的治疗过渡到以个体化精准化的靶向治疗和安全性及效能更高的免疫治疗。免疫检查点抑制剂疗法已经被批准为晚期NSCLC一线或者二线的治疗方案,并且取得非同凡响的临床效果。然而,其他类型的免疫治疗在NSCLC中鲜有探索。嵌合抗原受体修饰T细胞(chimeric antigen receptor modified T cells, CAR-T cells)在治疗几种血液系统恶性肿瘤方面表现不俗。然而,其在治疗包括NSCLC在内的实体瘤患者方面却不甚理想。本综述旨在系统阐释CAR-T在NSCLC治疗中的最新进展,主要包括:CAR分子靶标选择、CAR-T功能增强及相关毒性的管理以及CAR-T治疗NSCLC的困境及展望,旨在为NSCLC的免疫治疗开拓新的视角和独特的思路,为肿瘤免疫治疗大厦添砖加瓦。 展开更多

关键词 肺肿瘤 嵌合抗原受体修饰T细胞 靶标 毒性

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嵌合抗原受体基因修饰T细胞免疫疗法在肺癌治疗中的研究进展 被引量：2

12

作者 陈富坤 吕娟 邓智勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期538-543,549,共7页

肺癌是全世界所有癌症中发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一,目前仍缺乏较好的治疗手段。嵌合抗原受体基因修饰T(CAR-T)细胞免疫疗法作为一种新的治疗方法在血液系统恶性肿瘤中疗效显著,也为肺癌等实体肿瘤的免疫治疗开辟了新途径。然而... 肺癌是全世界所有癌症中发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一,目前仍缺乏较好的治疗手段。嵌合抗原受体基因修饰T(CAR-T)细胞免疫疗法作为一种新的治疗方法在血液系统恶性肿瘤中疗效显著,也为肺癌等实体肿瘤的免疫治疗开辟了新途径。然而,由于实体瘤的异质性、肿瘤微环境免疫抑制、肿瘤靶抗原逃逸及脱靶毒性等问题,造成CAR-T细胞免疫疗法在肺癌治疗中的应用存在挑战和障碍。本文总结了CAR-T细胞免疫疗在肺癌治疗中的最新研究进展,包括CAR-T细胞生物学特征、靶点选择、早期临床研究和治疗不良反应,并提出肺癌CAR-T细胞免疫疗法的优化策略,旨在为肺癌的临床免疫治疗提供新思路。 展开更多

关键词 肺癌 嵌合抗原受体基因修饰T细胞 免疫治疗 肿瘤抗原

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血液肿瘤CAR-T细胞治疗的现状与挑战 被引量：2

13

作者 康云 梅恒(综述) 胡豫(审校) 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期49-54,共6页

过继性细胞免疫疗法(adoptive cellular immunotherapy,ACI)是药物开发中一种全新模式,目前已具备在肿瘤疾病中带来临床益处的明确证据。其中嵌合抗原受体修饰的T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cells,CAR-T)疗法利用基因... 过继性细胞免疫疗法(adoptive cellular immunotherapy,ACI)是药物开发中一种全新模式,目前已具备在肿瘤疾病中带来临床益处的明确证据。其中嵌合抗原受体修饰的T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cells,CAR-T)疗法利用基因工程技术重编程T细胞,使其具备非主要组织相容性抗原复合物(major histocompability complex,MHC)限制性的靶向结合并杀伤肿瘤细胞的能力,并在急性B淋巴细胞性白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)、非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL)、多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者中展现出显著的缓解率,为难治复发性血液肿瘤疾病提供了治愈希望,因此多项商品化CAR-T产品也获批应用于临床,开拓了肿瘤免疫治疗的新时代。然而,细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)、免疫效应细胞相关神经毒性综合征(immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome,ICANS)和其他并发症的发生是其应用的安全性挑战,并且部分患者发生CAR-T治疗无效或复发,需要提出优化CAR-T细胞疗法的新策略,在不同水平强化肿瘤清除作用,以确保安全性和有效性。本文对血液肿瘤领域的CAR-T细胞疗法临床研究进展进行综述,并归纳了下一代CAR-T细胞疗法面临的主要挑战,为拓展CAR-T细胞基础研究及临床转化研究方向提供思路。 展开更多

关键词 血液恶性肿瘤 嵌合抗原受体T细胞 过继性细胞免疫治疗 抗原逃逸

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儿科人群嵌合抗原受体T细胞免疫疗法临床研究现状与分析 被引量：1

14

作者 丁倩 王谦 +2 位作者 张怡 梁宇光 郭春彦 《中国医院用药评价与分析》 2023年第12期1462-1466,共5页

目的:探讨儿科人群嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法临床研究现状,为国内研究者在儿科人群中开展CAR-T免疫疗法临床研究提供参考。方法:通过检索美国临床试验数据库网站采集CAR-T临床研究登记信息,对临床研究每年新增项目数、国家分布... 目的:探讨儿科人群嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法临床研究现状,为国内研究者在儿科人群中开展CAR-T免疫疗法临床研究提供参考。方法:通过检索美国临床试验数据库网站采集CAR-T临床研究登记信息,对临床研究每年新增项目数、国家分布、临床研究设计、研究阶段、申办者情况、疾病类型和靶点等方面进行统计分析。结果:截至2022年12月6日,按纳入与排除标准共筛选儿科人群CAR-T临床研究190项;我国登记研究数量居第1位(122项,占64.2%),美国为第2位(44项,占23.2%);研究类型主要为干预性研究(181项,占95.3%);儿科人群CAR-T临床研究多处于早期探索阶段;临床研究多由大学或研究机构和医疗机构发起,以科研探索为主;研究疾病类型主要集中于肿瘤及肿瘤样疾病,以血液肿瘤为主。结论:我国儿科人群CAR-T临床研究近年来发展较快,国家和各省市均发布了不同层面的法规和支持政策,虽然我国现行基因和细胞治疗产品监管体系需要进一步改进和完善,但是CAR-T治疗优势潜力巨大。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体T细胞 免疫疗法 儿科人群 临床研究

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嵌合抗原受体T细胞免疫疗法预处理方案的研究进展 被引量：2

15

作者 王玉洁 王桃 杨建民 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2020年第1期77-81,共5页

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法在复发/难治性血液系统恶性肿瘤患者的治疗中备受重视。CAR-T免疫疗法的疗效受到多种因素的影响,包括CAR-T的制备、在体内的扩增和杀伤,以及疾病类型、疾病状态、治疗前预处理方案等。输注CAR-T前接受... 嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法在复发/难治性血液系统恶性肿瘤患者的治疗中备受重视。CAR-T免疫疗法的疗效受到多种因素的影响,包括CAR-T的制备、在体内的扩增和杀伤,以及疾病类型、疾病状态、治疗前预处理方案等。输注CAR-T前接受淋巴细胞清除等预处理方案,可以提高CAR-T免疫疗法的疗效。目前其常用预处理方案包括环磷酰胺、氟达拉滨、喷司他丁、苯达莫司汀、阿糖胞苷等化疗和全身放射疗法(TBI)等。但是,CAR-T预处理方案的最佳选择、最适宜剂量等,尚无明确结论。笔者对近年来CAR-T免疫疗法预处理方案的研究现状及相关研究进展进行综述,旨在寻求最佳预处理方案,提高CAR-T疗效。 展开更多

关键词 血液肿瘤 移植预处理 T淋巴细胞 放射疗法 嵌合抗原受体T细胞

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淋巴瘤的免疫治疗 被引量：1

16

作者 王江涛 关涛 苏丽萍 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2017年第8期633-637,共5页

目前,应用免疫疗法对淋巴瘤进行治疗的重要性日益显现,嵌合抗原受体修饰的T细胞、双特异性抗体和免疫检查点抑制剂均被认为是具有突破性的治疗手段,这几种手段均有其各自独特的作用机制,而且更先进的治疗手段很可能在此基础上得以开发应用.

关键词 淋巴瘤 抗体 双特异性 嵌合抗原受体修饰的T细胞 免疫检查点抑制剂

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靶向卵巢癌叶酸受体α的CAR-NK-92细胞构建及功能鉴定 被引量：1

17

作者 杨宇 敖翔 +7 位作者 李伟强 郭韡 谭燕 敖罗权 何敏 王证程 徐祥 郭建新 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第1期14-19,共6页

目的卵巢叶酸受体α(αFR)在上皮性卵巢癌中高表达。文章拟构建靶向αFR的嵌合抗原受体(CAR)修饰NK-92细胞(NK-92-αFR-CAR),并验证其对αFR阳性靶细胞的杀伤效能,为卵巢癌的临床治疗提供新策略。方法选择偏爱密码子技术设计人源化抗αF... 目的卵巢叶酸受体α(αFR)在上皮性卵巢癌中高表达。文章拟构建靶向αFR的嵌合抗原受体(CAR)修饰NK-92细胞(NK-92-αFR-CAR),并验证其对αFR阳性靶细胞的杀伤效能,为卵巢癌的临床治疗提供新策略。方法选择偏爱密码子技术设计人源化抗αFR抗原的CAR分子基因;构建慢病毒表达载体pLenti-αFR-CAR;包装慢病毒并感染NK-92细胞;Western blot、qPCR及流式细胞术检测αFR-CAR分子在NK-92细胞中的表达效率。LDH释放实验和ELISA检测NK-92-αFR-CAR细胞对αFR阳性卵巢癌细胞的杀伤活性。结果双酶切pLenti-αFR-CAR重组质粒可见分子质量和αFR-CAR分子一致的基因片段。Western blot和qPCR证明αFR-CAR分子在NK-92细胞中确有表达,并且经嘌呤霉素筛选后,αFR-CAR的表达效率超过90%。NK-92-αFR-CAR细胞对卵巢癌细胞的杀伤效应及细胞因子分泌水平呈抗原依赖性,即肿瘤细胞表面αFR表达水平越高,NK-92-αFR-CAR细胞对其杀伤效应越强。NK-92-αFR-CAR细胞与SK-OV-3细胞或A2780细胞共培养后,其IFN-γ分泌水平(5007.81±180.37、2668.30±180.37)较NK-92细胞(360.80±8.44、285.86±12.39)和NK-92-EV细胞(378.75±21.76、292.10±21.76)表达更高(P<0.01);TNF-α分泌水平(964.27±74.95、585.73±83.53)较NK-92细胞(247.92±5.96、231.03±10.47)和NK-92-EV细胞(230.04±13.66、215.13±7.89)表达更高(P<0.01)。但与A-431细胞共培养,3种细胞中IFN-γ和TNF-α表达差异无统计学意义(P<0.05)。结论NK-92-αFR-CAR细胞具有分泌大量IFN-γ和TNF-α细胞因子并特异杀伤αFR阳性卵巢癌细胞的能力,这为NK-92-αFR-CAR细胞进入后续的临床前和临床研究奠定了基础。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体修饰NK-92细胞 卵巢癌 叶酸受体Α 肿瘤免疫

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靶向CD19嵌合抗原受体T细胞体外构建、扩增及抗肿瘤活性研究

18

作者 郑眉 丁亚红 +4 位作者 熊斐斐 刘雪颖 段鹏 姜凤婷 罗剑 《国际生物制品学杂志》 CAS 2020年第5期224-228,共5页

目的:探索特异性靶向CD19的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞的构建与制备方法,并研究其体外杀伤靶细胞的效果。方法:通过基因合成和分子克隆手段构建靶向CD19-CAR片段并将其插入pLenti6.3慢病毒载体,利用293FT悬浮细... 目的:探索特异性靶向CD19的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞的构建与制备方法,并研究其体外杀伤靶细胞的效果。方法:通过基因合成和分子克隆手段构建靶向CD19-CAR片段并将其插入pLenti6.3慢病毒载体,利用293FT悬浮细胞系包装慢病毒并转染人外周血单个核细胞来源的CD3^+T细胞。通过流式细胞术鉴定转染效率,并通过实时无标记细胞分析法和细胞计数试剂盒8检测靶向CD19-CAR-T细胞体外杀伤效果。结果:获得了表达抗CD19的单链抗体基因的慢病毒,病毒滴度可达3.2×10^8噬斑形成单位/ml。经慢病毒转染的CD3^+T细胞在体外培养14 d后,细胞扩增效率达(60.2±11.5)倍,靶向CD19-CAR-T细胞阳性率达90.57%。经检测,靶向CD19-CAR-T细胞均可有效杀伤CD19^+靶细胞。结论:建立了基于无血清悬浮细胞系的靶向CD19-CAR慢病毒包装系统,成功构建靶向CD19的CAR-T细胞,该细胞能特异性杀伤CD19^+肿瘤细胞。 展开更多

关键词 CD19 嵌合抗原受体T细胞 慢病毒属 免疫疗法

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嵌合抗原受体修饰的T细胞治疗致细胞因子释放综合征2例

19

作者 涂美娟 张春丽 +3 位作者 蒋善文 杨晓慧 方冰 王兴兵 《安徽医药》 CAS 2019年第5期1054-1056,共3页

目的观察嵌合抗原受体修饰的T细胞(CAR-T细胞)治疗复发难治性B细胞血液病的不良反应,探讨细胞因子释放综合征(Cytokine-Release Syndrome CRS)有效的护理措施。方法对2例复发难治急性B细胞白血病病人应用靶向CD19的CAR-T细胞治疗时因细... 目的观察嵌合抗原受体修饰的T细胞(CAR-T细胞)治疗复发难治性B细胞血液病的不良反应,探讨细胞因子释放综合征(Cytokine-Release Syndrome CRS)有效的护理措施。方法对2例复发难治急性B细胞白血病病人应用靶向CD19的CAR-T细胞治疗时因细胞因子释放引起的一系列不良反应、治疗和护理措施进行观察及统计。结果 2例病人在接受CAR-T细胞治疗并出现细胞因子释放综合征后,经过严密的生命体征监测,积极的治疗,全方位的生活护理和心理护理,病人症状均缓解,且白血病经骨髓细胞学检查提示完全缓解。结论细胞因子释放综合征是CAR-T治疗中最严重并发症之一,经过临床积极干预和护理后可获得良好效果。 展开更多

关键词 白血病 B细胞 免疫疗法 过继 嵌合抗原受体修饰的T细胞 细胞因子释放综合征 护理

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基于蛋白L染色方法的流式细胞术检测嵌合抗原受体的表达

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作者 邓海峰 韩为东 蒋敬庭 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第4期241-244,共4页

目的探讨以蛋白L(protein L)为基础的流式细胞染色方法用于检测患者T细胞表面嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)表达的技术可行性。方法单采2例CD19阳性淋巴瘤患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC... 目的探讨以蛋白L(protein L)为基础的流式细胞染色方法用于检测患者T细胞表面嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)表达的技术可行性。方法单采2例CD19阳性淋巴瘤患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),磁珠分选法获得T细胞,加入靶向CD19、CD22的CAR逆转录病毒,转染、诱导培养成CAR-T细胞。通过生物素化蛋白L(biotinylated protein L)-亲合素(streptavidin-PE)系统对CAR-T细胞表面的单链抗体片段(single-chain variable fragment,sc Fv)进行标记,用流式细胞术检测活化培养的T细胞中CD19-CAR、CD22-CAR表达阳性T细胞的比例,以常规Anti-Ig G染色的流式细胞检测方法作为对照组,进行结果对比。结果 sc Fv-biotinylated protein L-streptavidin-PE-流式细胞染色方法能够检测到CAR-T细胞表面CAR表达。2例患者蛋白L实验组和Anti-Ig G对照组CD19-CAR-T细胞比例分别为71.6%vs64.2%和49.3%vs 43.8%;CD22-CAR-T细胞比例分别为53.1%vs 46.3%和56.5%vs 64.0%,测定结果相似。结论以蛋白L为基础的染色方法可以作为流式细胞术检测CAR-T细胞的常规染色方法。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体T细胞 蛋白L 流式细胞术

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