重组鸡白介素2和干扰素α融合蛋白的表达及生物学活性的检测

1

作者 苗天姿 赵款 +5 位作者 雷白时 张武超 庞敬红 梁飞 袁万哲 汪恩强 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期85-91,共7页

为表达鸡的白介素-2(Interleukin-2,IL-2)和干扰素α(Interferon-α,IFN-α)融合蛋白,并进一步探究融合蛋白的生物学活性,本试验根据GenBank登录的鸡IL-2和IFN-α基因序列,使用linker连接成为嵌合基因,合成pET-32a-rChIL-2-IFN-α原核... 为表达鸡的白介素-2(Interleukin-2,IL-2)和干扰素α(Interferon-α,IFN-α)融合蛋白,并进一步探究融合蛋白的生物学活性,本试验根据GenBank登录的鸡IL-2和IFN-α基因序列,使用linker连接成为嵌合基因,合成pET-32a-rChIL-2-IFN-α原核表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达。通过MTT法检测重组融合蛋白促鸡外周血淋巴细胞(PBLC)增殖活性;通过细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的抗病毒活性;通过RT-qPCR检测了融合蛋白对干扰素刺激基因和内源性干扰素的作用。结果表明,重组融合蛋白促PBLC增殖活性效果显著,在CEF上具有抗VSV活性;重组融合蛋白能够显著地上调CEF中5种干扰素刺激基因和内源性干扰素的mRNA转录水平。综上所述,本试验表达的重组融合蛋白具有促淋巴细胞增殖活性和抗病毒作用,试验结果为进一步探究融合蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡IL-2 鸡IFN-α 融合蛋白 抗病毒 干扰素刺激基因

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重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性评价方法研究 被引量：4

2

作者 杨晓璐 闫若潜 +4 位作者 李勤楠 赵雪丽 谢彩华 刘梅芬 张书阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期3153-3159,共7页

为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应... 为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性;采用细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在DF1细胞上抑制水疱性口炎病毒(VSV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)增殖活性;采用MTS法分别测定重组融合蛋白促鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)和脾淋巴细胞增殖活性。结果表明,重组融合蛋白可以与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应;重组融合蛋白在DF1细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV活性高于抗IBDV活性,且均明显高于rChIFN-α蛋白对照;不同浓度的重组融合蛋白均具有明显的促鸡PBLC和脾淋巴细胞增殖活性,且其促增殖活性明显高于rChIFN-α蛋白对照。本研究成功建立了重组融合蛋白体外活性检测评价方法,为进一步探究重组融合蛋白在鸡体内协同作用奠定基础。 展开更多

关键词 鸡α干扰素 鸡白细胞介素-2 重组融合蛋白 体外活性

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鸡α干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性的测定 被引量：3

3

作者 王秀丽 徐慧琳 +5 位作者 刘新文 郭东春 郭伟伟 邹敏 李陆梅 杜元钊 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期626-629,共4页

将克隆的鸡α干扰素(ChIFNα)基因亚克隆至酵母表达载体pPICZα-A中,构建重组质粒pPIC-ChIFNα,线性化后电转化整合到毕赤酵母菌株X-33基因组中,得到阳性菌株。经1%甲醇连续诱导4 d,SDS-PAGE检测结果表明鸡α干扰素在酵母中获得了分泌... 将克隆的鸡α干扰素(ChIFNα)基因亚克隆至酵母表达载体pPICZα-A中,构建重组质粒pPIC-ChIFNα,线性化后电转化整合到毕赤酵母菌株X-33基因组中,得到阳性菌株。经1%甲醇连续诱导4 d,SDS-PAGE检测结果表明鸡α干扰素在酵母中获得了分泌型表达,表达产物分子质量约为18 ku。细胞病变抑制法检测其效价为1×10^(7.69)U/mL;在鸡胚中能有效抑制禽流感病毒H9N2的增殖。针对Ⅰ群4型禽腺病毒YBAV-4株强毒的动物攻毒保护试验结果显示,表达的蛋白具有较好的抗病毒活性。 展开更多

关键词 鸡α干扰素 分泌表达 抗病毒

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蛋鸡α-干扰素基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达与复性研究

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作者 马凤龙 傅兴伦 +3 位作者 乔彦良 李春荣 李朝阳 刘焕珍 《中国兽药杂志》 2007年第6期4-8,共5页

根据GenBank中鸡IFN—α序列设计引物对，利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡（SPY）的IFN-α基因，命名ChIFN-S1，与GenBank中IFN-α比较，ORF长度均为582个核苷酸，其成熟肽包含162个氨基酸，相互间同源性在98．8％-99．8％。将其成熟肽... 根据GenBank中鸡IFN—α序列设计引物对，利用PCR技术克隆并测定了莱航鸡（SPY）的IFN-α基因，命名ChIFN-S1，与GenBank中IFN-α比较，ORF长度均为582个核苷酸，其成熟肽包含162个氨基酸，相互间同源性在98．8％-99．8％。将其成熟肽基因序列克隆入pQE30表达载体后，通过ITPG诱导，收集菌体高压破碎后提取包涵体并进行初步纯化，利用胱氨酸．半胱氨酸再氧化还原法对纯化后的变性液进行分段稀释法复性。细胞病变抑制法（CEF-VSV为检测系统）测定复性液的抗病毒比活性高达10^9U／mg以上． 展开更多

关键词 鸡 IFN-α基因 表达 包涵体 复性

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响应面法优化鸡α干扰素工程菌发酵培养基 被引量：1

5

作者 陈琼 曹丁 +4 位作者 昝继清 李学优 秦鹏 黄秀敏 张宜靖 《中国饲料》 北大核心 2019年第11期28-31,共4页

本研究采用单因素试验和响应面法相结合的方式优化毕赤酵母重组菌的发酵培养基,以提高毕赤酵母发酵液的生物量。首先,通过单因素试验确定最优碳、氮源分别为甘油和NH4H2PO4;然后,采用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及Box-Behnken响... 本研究采用单因素试验和响应面法相结合的方式优化毕赤酵母重组菌的发酵培养基,以提高毕赤酵母发酵液的生物量。首先,通过单因素试验确定最优碳、氮源分别为甘油和NH4H2PO4;然后,采用Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及Box-Behnken响应面分析并结合Design Expert统计分析软件构建响应方程。利用该方程预测得到最佳培养基配方:甘油46g/L,NH4H2PO414g/L,K2SO418g/L,MgSO415g/L,CaSO41.0g/L,KH2PO45g/L,KOH1.5g/L,初始pH6.96,PTM1盐4.4mL/L。此条件下毕赤酵母发酵后湿重具有最高值为175.54g/L,生物量比优化前提高了50%,并且培养基成本低廉,成分简单,方便调控,适合大规模发酵生产。 展开更多

关键词 响应面法 鸡α干扰素 重组毕赤酵母 培养基优化

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鸡α干扰素在毕赤酵母中的表达及糖基化对其表达的影响

6

作者 胡颖 熊向华 +2 位作者 汪建华 苏昕 张惟材 《生物技术通讯》 CAS 2012年第5期690-693,共4页

目的：实现鸡α干扰素（ChIFNα）在毕赤酵母GS115中的表达,并考察糖基化对其表达的影响。方法：人工合成按照毕赤酵母偏好密码子优化的ChIFNα基因,克隆至分泌表达载体pPIC9,电转到毕赤酵母GS115中进行表达。利用定点突变对ChIFNα基... 目的：实现鸡α干扰素（ChIFNα）在毕赤酵母GS115中的表达,并考察糖基化对其表达的影响。方法：人工合成按照毕赤酵母偏好密码子优化的ChIFNα基因,克隆至分泌表达载体pPIC9,电转到毕赤酵母GS115中进行表达。利用定点突变对ChIFNα基因序列中4个糖基化位点进行缺失,SDS-PAGE分析N-糖基化对毕赤酵母表达ChIFNα的影响。结果：ChIFNα在GS115中获得了表达,在摇瓶发酵条件下,表达量为35.2 mg/L;构建了缺失1~4个糖基化位点的4个突变体,在GS115中实现了表达,分析表达结果显示,与未突变的ChIFNα对照相比,突变体的糖基化程度和表达量都有大幅度下降。结论：N-糖基化对于毕赤酵母表达ChIFNα具有重要影响,无糖基化的ChIFNα在毕赤酵母中表达量极低。 展开更多

关键词 鸡α干扰素 定点突变 N-糖基化 毕赤酵母

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重组鸡α-干扰素的表达及其生物活性的初步研究 被引量：5

7

作者 程福亮 聂兆晶 +5 位作者 陈甜甜 刘洋庆 房栋 崔兆连 谷巍 王春凤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期35-39,共5页

为获得重组鸡α-干扰素并对其进行生物活性研究,本试验对重组大肠杆菌进行诱导表达,收集重组鸡α-干扰素包涵体后进行复性纯化及免疫印迹试验,并通过测定病毒EID50,在接种H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的鸡胚中进... 为获得重组鸡α-干扰素并对其进行生物活性研究,本试验对重组大肠杆菌进行诱导表达,收集重组鸡α-干扰素包涵体后进行复性纯化及免疫印迹试验,并通过测定病毒EID50,在接种H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的鸡胚中进行干扰素抗病毒活性试验,运用微变量细胞病变抑制法进行重组鸡α-干扰素抗病毒效价的测定。结果显示复性后重组鸡α-干扰素的免疫印迹试验成功获得了预期条带,在鸡胚中重组鸡α-干扰素具有显著的抗H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒等活性作用。在CEF/VSV细胞系上测定重组鸡α-干扰素的抗病毒效价为1.5×210 U/mg左右,高浓度重组鸡α-干扰素具有一定的细胞毒性。结果表明重组鸡α-干扰素蛋白具有免疫原性和抗原性,在鸡胚内具有较好的抑制或杀灭H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的效果,呈广谱性,抗病毒效价较高,为下一步抗病毒制品的创制奠定基础。 展开更多

关键词 鸡α-干扰素 表达 生物活性

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重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白对鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响研究 被引量：4

8

作者 杨晓璐 闫若潜 +6 位作者 吴志明 刘梅芬 张代宝 张书阳 王淑娟 赵雪丽 刘毅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期175-178,共4页

为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白（rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白）对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白（第2组）和rChIFN-α蛋白（第3组）注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试... 为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白（rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白）对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白（第2组）和rChIFN-α蛋白（第3组）注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试验组鸡外周血T淋巴细胞（PBLC）中CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋百分含量以及CD4^＋/CD8^＋比值进行检测。结果表明,与对照组相比,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白在鸡体内接种后3～14d均可明显提高鸡外周血T淋巴细胞中CD3^＋CD4^＋细胞百分含量,降低CD3^＋CD8^＋细胞的百分含量,提高CD4^＋/CD8^＋比值;接种后3～7d期间,第2组鸡的CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋细胞含量及CD4^＋/CD8^＋比值与PBS对照组（第1组）相比差异均极显著（P〈0.01）,第3组与第1组相比差异均显著（P〈0.05）。以上结果表明,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白接种鸡体后均可显著影响鸡PBLC中淋巴细胞亚群百分含量,提高CD4^＋/CD8^＋比值,增强机体的细胞免疫功能;重组融合蛋白对鸡淋巴细胞亚群百分含量、CD4^＋/CD8^＋比值影响程度和细胞免疫功能的增强作用优于rChIFN-α蛋白;重组融合蛋白在体内发挥了鸡α干扰素和白细胞介素-2对细胞免疫功能的协同增强作用。 展开更多

关键词 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白 重组鸡α干扰素蛋白 T淋巴细胞亚群 CD4^+/CD8^+比值 免疫功能

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口服重组鸡α-干扰素对鸡新城疫病毒感染和疫苗免疫的影响 被引量：6

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作者 吴静 李玉峰 +2 位作者 马秀丽 林树乾 宋敏训 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第12期183-185,共3页

通过点眼、滴鼻的方式使SPF鸡感染新城疫La Sota株,感染8 h后在饮水中添加1000 U/mL重组鸡α-干扰素,每只鸡每天饮用干扰素剂量为20000 U,分别饮用不同时间。于感染后第7天采集气管组织,制备病理切片。结果显示,连续3 d以上饮用重组鸡α... 通过点眼、滴鼻的方式使SPF鸡感染新城疫La Sota株,感染8 h后在饮水中添加1000 U/mL重组鸡α-干扰素,每只鸡每天饮用干扰素剂量为20000 U,分别饮用不同时间。于感染后第7天采集气管组织,制备病理切片。结果显示,连续3 d以上饮用重组鸡α-干扰素的试验鸡,其气管的病理损伤可得到明显改善;检测饮用重组鸡α-干扰素后试验鸡的新城疫抗体效价,结果表明口服高剂量的干扰素可明显下调新城疫抗体的滴度。 展开更多

关键词 重组鸡α-干扰素 新城疫 口服 组织病理变化 HI抗体滴度

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鸡α干扰素基因的克隆与表达 被引量：4

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作者 焦道忠 王云龙 +1 位作者 李晨阳 李春利 《生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期48-51,共4页

通过对鸡α干扰素基因的克隆,获取一定纯度的干扰素蛋白。从NCBI上搜索出鸡α干扰素基因的序列,根据其成熟蛋白编码序列设计引物,通过PCR从家鸡肝脏基因组中扩增出成熟鸡α干扰素的编码基因,利用基因重组技术构建出pUCm-T/IFN-α,再亚... 通过对鸡α干扰素基因的克隆,获取一定纯度的干扰素蛋白。从NCBI上搜索出鸡α干扰素基因的序列,根据其成熟蛋白编码序列设计引物,通过PCR从家鸡肝脏基因组中扩增出成熟鸡α干扰素的编码基因,利用基因重组技术构建出pUCm-T/IFN-α,再亚克隆至载体质粒pET-43.1a(+),构建出pET-43.1a(+)/IFN-α重组质粒,经酶切鉴定、DNA测序,证明重组质粒构建正确。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行发酵,IPTG诱导表达后进行纯化及SDS-PAGE分析。工程菌诱导表达后的电泳图谱在相对分子量约19kDa的位置出现明显目的条带,约占菌体总蛋白的30%,表达产物主要以包涵体形式存在,经过NI2+-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE电泳后经凝胶扫描纯度达95%以上。获得了纯度较高的目的蛋白,为下一步对鸡α干扰素进行复性及活性研究奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡α干扰素 PCR扩增 表达 纯化

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短期重复口服鸡α干扰素体内抑制H9N2亚型流感病毒复制 被引量：5

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作者 王萌 宋洁 +6 位作者 范文辉 刘丽蓉 黄卓然 杨成程 吴昊 刘文军 李晶 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1029-1040,共12页

为研究口服鸡α干扰素最佳的给药频率及与灭活病毒联合使用对鸡群的影响,文中将构建的原核表达质粒pET-22b-ChIFN-α转入大肠杆菌Escherichia coli BL21 (DE3),宿主菌经诱导表达收获重组包涵体蛋白,经变性、纯化、复性后获得重组鸡α干... 为研究口服鸡α干扰素最佳的给药频率及与灭活病毒联合使用对鸡群的影响,文中将构建的原核表达质粒pET-22b-ChIFN-α转入大肠杆菌Escherichia coli BL21 (DE3),宿主菌经诱导表达收获重组包涵体蛋白,经变性、纯化、复性后获得重组鸡α干扰素。SDS-PAGE结果分析显示,目的蛋白可在原核表达载体中高效表达,发酵液上清中目的蛋白浓度高达0.2 mg/mL,分子量约为20 kDa。将鸡α干扰素稀释至活性为2.5×10~4 U/羽份,与灭活H9N2亚型流感病毒联用以口服的方式免疫无特定病原(SPF)鸡群,试验结果表明,短期(96 h)重复免疫3次,鸡α干扰素具有较好的安全性,可诱导鸡群的外周血、脾脏及胸腺产生较高水平的抗病毒相关的诱导基因,攻毒结果显示鸡α干扰素使用次数为连续使用3–5 d鸡群排毒率最低,体现出较好的抗流感病毒能力。本研究结果获得了鸡α干扰素的最佳免疫频率及免疫时间,为干扰素的最佳临床应用方法提供理论支撑。 展开更多

关键词 鸡α干扰素 H9N2亚型流感病毒 口服 短期重复

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重组鸡α干扰素生物学活性测定用细胞的筛选

12

作者 王翠 谢彩华 +7 位作者 赵雪丽 王淑娟 柴茂 马震原 杨海波 刘影 王东方 闫若潜 《现代牧业》 2022年第4期20-24,共5页

比较鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡成纤维细胞系(DF-1)两种细胞在重组鸡α干扰素(rChIFN-α)生物学活性测定中的应用效果。选择了三个批次的rChIFN-α在CEF和DF-1上进行生物学活性测定,活性测定结果分别为4.19×10^(7) IU/mL、4.19×... 比较鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡成纤维细胞系(DF-1)两种细胞在重组鸡α干扰素(rChIFN-α)生物学活性测定中的应用效果。选择了三个批次的rChIFN-α在CEF和DF-1上进行生物学活性测定,活性测定结果分别为4.19×10^(7) IU/mL、4.19×10^(7) IU/mL、4.19×10^(7) IU/mL和4.19×10^(7) IU/mL、4.19×10^(7) IU/mL、2.10×10^(7) IU/mL。CEF制备繁琐、成本较高,DF-1比CEF更适合于rChIFN-α生物学活性的测定。 展开更多

关键词 重组鸡α干扰素 鸡胚成纤维细胞 鸡成纤维细胞系 活性

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鸡α-干扰素基因克隆及其在大肠杆菌中表达

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作者 王雷 凌红丽 +1 位作者 王宏华 孙海新 《中国动物检疫》 CAS 2013年第2期42-45,共4页

根据GenBank中鸡IFN-α基因设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了SPF鸡的IFN-α基因,再在成熟肽基因两侧设计一对引物,分别加入合适的酶切位点,将其亚克隆在表达载体pET上,转化BL21(DE3)后用IPTG诱导表达,用SDS-PAGE电泳分析表达形式,结... 根据GenBank中鸡IFN-α基因设计引物对,利用PCR技术克隆并测定了SPF鸡的IFN-α基因,再在成熟肽基因两侧设计一对引物,分别加入合适的酶切位点,将其亚克隆在表达载体pET上,转化BL21(DE3)后用IPTG诱导表达,用SDS-PAGE电泳分析表达形式,结果为蛋白以包涵体形式表达。提取的包涵体用7mol/L盐酸胍变性,利用胱氨酸—半胱氨酸再氧化法对包涵体变性液进行分段稀释法复性。细胞病变抑制法(CEF-VSV为基本检测系统)测定复性液的抗病毒活性不低于107.0U/mL。 展开更多

关键词 鸡α-干扰素 基因克隆 大肠杆菌 包涵体 活性

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多等温加速试验预测重组鸡α干扰素的稳定性

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作者 高应瑞 刘珂飞 +1 位作者 孟铁健 由天立 《天津农业科学》 CAS 2016年第9期60-62,共3页

在3种温度下对大肠杆菌表达重组鸡α干扰素进行了多等温加速稳定性试验和2℃保存的稳定性考察,预测重组鸡α干扰素的稳定性,为制品有效期的确定提供依据。采用多等温加速试验,将制品放在3种不同温度下孵放,定期取出样品,测定效价,根据... 在3种温度下对大肠杆菌表达重组鸡α干扰素进行了多等温加速稳定性试验和2℃保存的稳定性考察,预测重组鸡α干扰素的稳定性,为制品有效期的确定提供依据。采用多等温加速试验,将制品放在3种不同温度下孵放,定期取出样品,测定效价,根据制品的效价下降情况推算其在有效期内的稳定性。结果显示:用加速降解有关公式可以求出在2℃存放1年后的残余效价为226 492 682单位,下降率为9.9%,与实测值228 000 957单位基本吻合;2年后的残余效价为203 868 551单位,下降率为18.9%。即2℃保存2年后效价保持在80%以上,推算的结果与试验值较吻合,产品稳定性良好。 展开更多

关键词 多等温加速试验 重组鸡α干扰素 稳定性

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ASP-ChIFN-α融合基因的构建及表达

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作者 李丽 周学章 +1 位作者 李敏 王玉炯 《宁夏大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2008年第2期157-160,共4页

利用PCR技术从宁夏地方三黄肉鸡肝组织中扩增出α干扰素基因,构建成原核重组表达质粒pET-28a/ChIFN-α.从埃希氏菌属大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ(L-Asparaginase,ASP)信号肽基因,并与原核重组质粒pET-28a/ChI... 利用PCR技术从宁夏地方三黄肉鸡肝组织中扩增出α干扰素基因,构建成原核重组表达质粒pET-28a/ChIFN-α.从埃希氏菌属大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ(L-Asparaginase,ASP)信号肽基因,并与原核重组质粒pET-28a/ChIFN-α连接,构建成分泌型表达重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α.将重组质粒经IPTG诱导5 h,用SDS-PAGE分析表达蛋白含量,并用鸡α-干扰素ELISA(Western-blot)试剂盒检测表达的重组蛋白的特异性.结果表明,包涵体型重组质粒pET-28a/ChIFN-α和分泌型重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α在23 kD处均表达出目的蛋白,蛋白含量分别为27%和38%,pET-28a/ASP-ChIFN-α的蛋白表达含量比pET-28a/ChIFN-α的蛋白表达含量要高出11%,表达的重组蛋白具有特异性.实验实现了鸡α-干扰素成熟蛋白基因的高效表达,筛选出了可应用于临床的鸡α-干扰素高效表达菌株BL21(DE3)(pET-28a/ASP-ChIFN-α). 展开更多

关键词 鸡α-干扰素基因 L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ信号肽 克隆 表达

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