中药有效成分影响宫颈癌Hela细胞凋亡机制的研究进展 被引量：17

1

作者 史海敏 丁库克 张新 《环球中医药》 CAS 2015年第1期124-127,共4页

目的随着宫颈癌发病率的逐年上升,中药在治疗宫颈癌放化疗副反应及术后并发症中的作用逐渐被重视。大量研究发现诱导宫颈癌Hela细胞凋亡可以通过影响Bcl-2基因家族、Caspase蛋白酶家族、Fas/Fasl基因系统、某些相关基因的表达等方式来... 目的随着宫颈癌发病率的逐年上升,中药在治疗宫颈癌放化疗副反应及术后并发症中的作用逐渐被重视。大量研究发现诱导宫颈癌Hela细胞凋亡可以通过影响Bcl-2基因家族、Caspase蛋白酶家族、Fas/Fasl基因系统、某些相关基因的表达等方式来实现。文章从目前国内外研究比较热门的一些中药入手,综述这些中药的有效成分在宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用。例如文中提到中药温莪术有效成分β-榄香烯是通过下调Bcl-2基因表达来促进Hela凋亡;栝楼根的有效活性成分天花粉蛋白促凋亡过程与Caspase家族有关;薏苡仁酯诱导Fas表达上调、Fasl表达下调来促进宫颈癌Hela细胞凋亡。研究中药有效成分影响宫颈癌Hela细胞凋亡机制的目的是为临床应用中药治疗宫颈癌提供科学依据和筛选抗宫颈癌新药提供思路。 展开更多

关键词 中药有效成分 宫颈癌hela细胞 细胞凋亡机制 综述

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脂蟾毒配基对人宫颈癌Hela裸鼠移植瘤生长的抑制作用 被引量：12

2

作者 王传社 李燕燕 +6 位作者 陈娜 李寅增 肖军军 孟书聪 董晓敏 果德安 黄启福 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期184-187,F0003,共5页

目的观察脂蟾毒配基对人宫颈癌Hela裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法于给药前、给药期间(15d)及停药期间(6d)每3d测量肿瘤的长径及短径,并计算近似瘤体积,停药第6天取瘤称重并进行病理学观察。结果①高剂量脂蟾毒配基(15mg/kg)有较强的... 目的观察脂蟾毒配基对人宫颈癌Hela裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法于给药前、给药期间(15d)及停药期间(6d)每3d测量肿瘤的长径及短径,并计算近似瘤体积,停药第6天取瘤称重并进行病理学观察。结果①高剂量脂蟾毒配基(15mg/kg)有较强的急性神经毒性。②脂蟾毒配基对荷瘤鼠体重无明显影响。③高剂量脂蟾毒配基(15mg/kg)对人宫颈癌Hela裸鼠移植瘤生长有明显的抑制作用,停药后没有明显的后续抑制作用,15mg/kg的脂蟾毒配基与5mg/kg平阳霉素对肿瘤增长的抑瘤强度相当。④脂蟾毒配基未发现明显的近期毒性。结论脂蟾毒配基对裸鼠的Hela宫颈癌移植瘤有明显的抑瘤作用,脂蟾毒配基是中药蟾酥抗癌的重要成分,但也发现该化合物有明显的急性神经毒性,进一步开发需要慎重。 展开更多

关键词 脂蟾毒配基 肿瘤 抑制生长 宫颈癌hela 裸鼠

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穿心莲内酯抑制宫颈癌Hela细胞生长和迁徙的研究 被引量：8

3

作者 王忠玲 唐文哲 林芳荣 《中国药师》 CAS 2019年第4期614-618,共5页

目的:研究穿心莲内酯对宫颈癌细胞株(Hela细胞)生长及迁徙的影响,并探究其相关作用机制。方法:体外培养宫颈癌Hela细胞,采用不同浓度穿心莲内酯(0,15,30,60μmol·L^(-1))处理细胞,穿心莲内酯浓度为0μmol·L^(-1)时为对照组。... 目的:研究穿心莲内酯对宫颈癌细胞株(Hela细胞)生长及迁徙的影响,并探究其相关作用机制。方法:体外培养宫颈癌Hela细胞,采用不同浓度穿心莲内酯(0,15,30,60μmol·L^(-1))处理细胞,穿心莲内酯浓度为0μmol·L^(-1)时为对照组。采用MTT法检测细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移能力变化,流式细胞术检测细胞凋亡水平变化,平板克隆实验检测细胞克隆形成情况,蛋白质免疫印迹实验检测内质网应激相关蛋白CHOP、凋亡相关蛋白前体caspase-3和caspase-9表达变化。结果:随着穿心莲内酯浓度的升高,Hela细胞存活率、迁移数及克隆形成率逐渐降低,凋亡率逐渐升高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。随着穿心莲内酯浓度的增加,Hela细胞中CHOP、钙黏附蛋白-E(E-cadherin)表达量逐渐升高,caspase-3、caspase-9、血管内皮生长因子(VEGF)及Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)蛋白表达量逐渐降低(P<0.05)。结论:穿心莲内酯能够有效抑制Hela细胞生长及迁徙,其抑制迁徙的机制可能与提升E-cadherin蛋白表达及抑制VEGF、Rac1蛋白表达相关。 展开更多

关键词 穿心莲内酯 宫颈癌hela细胞 细胞增殖 细胞转移 细胞凋亡

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藤梨根中乌苏烷三萜化合物A对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响 被引量：8

4

作者 程齐来 喻亚飞 +2 位作者 李映辰 黄志勤 刘塔斯 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期84-87,共4页

目的:从赣南藤梨根中提取分离得到乌苏烷三萜化合物A(2β,3β,23-三羟基^(-1)2-烯-28-乌苏酸,ursolic compound A),研究其对人宫颈癌He La细胞株的增殖抑制作用。方法:应用E-MEM培养基建立宫颈癌He La细胞体外培养体系,将4种不同浓度(0.... 目的:从赣南藤梨根中提取分离得到乌苏烷三萜化合物A(2β,3β,23-三羟基^(-1)2-烯-28-乌苏酸,ursolic compound A),研究其对人宫颈癌He La细胞株的增殖抑制作用。方法:应用E-MEM培养基建立宫颈癌He La细胞体外培养体系,将4种不同浓度(0.5,1.0,2.0,4.0μmol·L^(-1))的ursolic compound A作用后的宫颈癌细胞(每孔含2 000细胞)在96孔细胞培养板上培养24,48 h;细胞活力采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测,乳酸脱氢酶(LDH)活性用噻唑蓝(MTT)法测定,肿瘤细胞增殖情况采用免疫比色法检测。结果:与对照组相比,用0.5~4.0μmol·L^(-1)ursolic compound A处理过的He La细胞,其乳酸脱氢酶释放率随着剂量增大和时间延长而增加(P<0.05,P<0.01);CCK-8和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)检测结果表明,化合物A比对照药物抗宫颈癌活性相对较强,作用效果呈浓度与时间依赖性,宫颈癌细胞的活性也相应不断下降,同时该化合物对宫颈癌细胞株的增殖抑制作用也较明显(P<0.05,P<0.01)。结论:Ursolic compound A对HeLa细胞增殖有一定抑制作用。 展开更多

关键词 乌苏烷三萜化合物A 增殖抑制 人宫颈癌He La细胞株

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基于3D微流控芯片分析鸡血藤总鞣质对宫颈癌细胞HeLa的药理作用 被引量：6

5

作者 王妮佳 王嘉仡 +3 位作者 孟宪生 包永睿 王帅 李天骄 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期103-108,共6页

目的:研究鸡血藤总鞣质的化学成分,并分析该有效部位对宫颈癌细胞HeLa的药效与作用机制,为鸡血藤抗宫颈癌提供实验依据。方法:运用UPLC-Q-TOF/MS对鸡血藤鞣质类化学成分进行定性分析。将不同质量浓度的鸡血藤总鞣质作用于宫颈癌细胞HeLa... 目的:研究鸡血藤总鞣质的化学成分,并分析该有效部位对宫颈癌细胞HeLa的药效与作用机制,为鸡血藤抗宫颈癌提供实验依据。方法:运用UPLC-Q-TOF/MS对鸡血藤鞣质类化学成分进行定性分析。将不同质量浓度的鸡血藤总鞣质作用于宫颈癌细胞HeLa,通过3维(3D)微流控芯片筛选合适的给药浓度及时间。运用流式细胞仪测定鸡血藤总鞣质对宫颈癌细胞HeLa周期与凋亡的影响,分别应用Flow Jo v10. 0. 7及ModFit LT 3. 2软件进行分析。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)测定经鸡血藤总鞣质作用后,宫颈癌细胞HeLa上清液中血管内皮生长因子-A(VEGF-A)与半胱天冬酶-3(Caspase-3)因子的含量变化。结果:鉴定并推断了鸡血藤总鞣质中15种成分。最终确定鸡血藤总鞣质低、中、高给药质量浓度分别为0. 5,1. 0,2. 0 g·L^-1,36 h为最佳给药时间。经鸡血藤总鞣质作用后宫颈癌细胞HeLa早凋与晚凋比例明显增加,宫颈癌细胞HeLa DNA合成前期(G0/G1期)明显增加,DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2/M期)减小。经鸡血藤总鞣质作用后,宫颈癌细胞HeLa上清液中VEGF-A因子显著降低,Caspase-3因子显著增加。结论:鸡血藤中含有丰富的鞣质类成分,此类成分对宫颈癌细胞HeLa有明显的抑制其增殖并促进其凋亡的作用,为该有效部位的后续研究与开发提供了实验依据。 展开更多

关键词 鸡血藤 总鞣质 3D微流控芯片 宫颈癌细胞hela 细胞凋亡 细胞周期 酶联免疫吸附测定法

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靶向熊果酸脂质纳米粒抗宫颈癌的作用研究 被引量：4

6

作者 杨光 陈晓青 陈中强 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期2185-2192,共8页

目的探讨靶向熊果酸脂质纳米制剂抗宫颈癌的作用效果。方法利用新型靶向性功能材料叶酸-CONH-聚乙二醇-NH-胆固醇合成靶向熊果酸脂质纳米粒,采用MTT法对比靶向熊果酸脂质纳米粒的人宫颈癌HeLa细胞和宫颈正常鳞状上皮细胞的增殖抑制作用... 目的探讨靶向熊果酸脂质纳米制剂抗宫颈癌的作用效果。方法利用新型靶向性功能材料叶酸-CONH-聚乙二醇-NH-胆固醇合成靶向熊果酸脂质纳米粒,采用MTT法对比靶向熊果酸脂质纳米粒的人宫颈癌HeLa细胞和宫颈正常鳞状上皮细胞的增殖抑制作用的差异性;用流式细胞术考察其促细胞凋亡作用;应用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测Bcl-2、Bax、Livin及Caspase-3的蛋白表达,用实时荧光定量-聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测基因表达,探索靶向熊果酸脂质纳米粒抗宫颈肿瘤的作用机制。初步考察靶向熊果酸脂质纳米粒在荷瘤鼠体内的抗肿瘤作用。结果靶向熊果酸脂质纳米粒对HeLa细胞具有显著的细胞增殖抑制及促细胞凋亡作用;使细胞中Livin、Bcl-2基因或蛋白表达增加,Caspase-3、Bax基因或蛋白表达减少;体内抑瘤效率高于普通熊果酸脂质纳米粒。结论靶向熊果酸脂质纳米粒可有效传输药物至肿瘤组织,抑制细胞的增殖,促使其凋亡,具有一定的体内抗肿瘤效果。 展开更多

关键词 熊果酸 靶向脂质纳米粒 宫颈癌hela细胞 抗肿瘤 叶酸 细胞增殖 细胞凋亡

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苦胆草多糖抗氧化及抗人宫颈癌HeLa细胞的作用及机制

7

作者 黄丽金 李自霖 +2 位作者 杨紫焰 王涵 陈贵元 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第18期80-88,共9页

目的:探讨苦胆草多糖(APP)抗氧化及抗人宫颈癌HeLa细胞的作用及机制。方法:细胞功能试验通过细胞增殖与活性检测法(CCK-8)、划痕试验、Transwell试验检测APP(400、450、500 mg·L^(-1))对HeLa细胞的增殖、迁移、侵袭的作用;分子机... 目的:探讨苦胆草多糖(APP)抗氧化及抗人宫颈癌HeLa细胞的作用及机制。方法:细胞功能试验通过细胞增殖与活性检测法(CCK-8)、划痕试验、Transwell试验检测APP(400、450、500 mg·L^(-1))对HeLa细胞的增殖、迁移、侵袭的作用;分子机制实验通过流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测APP对HeLa细胞凋亡及周期相关调控mRNA及蛋白表达的影响;DPPH^(+)、OH^(-)、还原力实验检测APP的抗氧化活性。结果:与空白组比较,APP(400、450、500 mg·L^(-1)),均能明显抑制HeLa细胞的迁移、增殖、侵袭能力,具有时间、浓度依赖(P<0.05,P<0.01);流式细胞术碘化丙啶(PI)单染法检测检测细胞周期,结果显示,与空白组比较,APP(400、450、500 mg·L^(-1))作用HeLa细胞48 h后,HeLa细胞G2/M期所占比例升高,提示APP可将HeLa细胞阻滞在G_(2)/M期,流式细胞术异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/PI凋亡试剂盒检测细胞凋亡,与空白组比较,APP(400、450、500 mg·L^(-1))作用HeLa细胞48 h,早期凋亡和晚期凋亡的细胞比例均明显增加(P<0.05,P<0.01),并且具有浓度依赖性,提示APP促进HeLa细胞的凋亡;与空白组比较,APP(400、450、500 mg·L^(-1))作用48 h,细胞周期依赖性激酶-1(CDK-1)、细胞周期蛋白B_(1)(Cyclin B_(1))、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)mRNA和蛋白表达均下降,胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),以上指标均具有浓度依赖性,与流式细胞结果一致;体外抗氧化实验,APP(50~1 000 mg·L^(-1))具有清除DPPH^(+)、OH^(-)的能力,具有一定的抗氧化活性。结论:APP具有抗氧化活性并能够抑制HeLa细胞的活性,促进HeLa细胞凋亡的能力。 展开更多

关键词 苦胆草多糖 宫颈癌hela细胞 抗肿瘤 抗氧化 凋亡

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黑蒜提取液对宫颈癌HeLa细胞移植瘤辐射增敏及保护机制研究 被引量：4

8

作者 李颖 周群 +1 位作者 王义善 杨桂青 《中医学报》 CAS 2018年第10期1851-1855,共5页

目的:观察黑蒜提取液对宫颈癌He La细胞移植瘤辐射增敏及保护机制。方法:通过构建宫颈癌He La细胞小鼠皮下移植瘤模型,并将其随机分成4组,空白对照组、γ照射组、黑蒜组、黑蒜+γ照射组。将其分别用生理盐水、γ射线照射、黑蒜提取液、... 目的:观察黑蒜提取液对宫颈癌He La细胞移植瘤辐射增敏及保护机制。方法:通过构建宫颈癌He La细胞小鼠皮下移植瘤模型,并将其随机分成4组,空白对照组、γ照射组、黑蒜组、黑蒜+γ照射组。将其分别用生理盐水、γ射线照射、黑蒜提取液、黑蒜提取液联合γ射线照射来进行处理,然后对各组移植瘤生长的速度进行观察。实验完成后,将参与实验的小鼠处死,除去瘤体后,称量小鼠的体质量,通过计算得到肿瘤生长抑制率。称量胸腺和脾脏质量,计算胸腺指数与脾脏指数。计算Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞刺激指数、外周血白细胞计数个数。通过紫外分光光度计法检测各组小鼠血清中超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase,SOD)及过氧化氢酶(catalase,CAT)的活力变化。结果:与γ照射组及空白对照组比较,黑蒜提取液+γ照射组小鼠移植瘤生长速度得到有效抑制(P <0. 05);与空白对照组比较,γ照射组胸腺及脾脏指数明显降低,黑蒜组及黑蒜+γ照射组胸腺及脾脏指数升高(P <0. 05),与γ照射组比较,黑蒜+γ照射组及黑蒜组小鼠胸腺及脾脏指数升高(P <0. 05);γ照射组淋巴细胞刺激指数(1. 257 2±0. 238 0),黑蒜提取液+γ照射组淋巴细胞刺激指数(1. 826 1±0. 301),可见黑蒜提取液可显著促进脾淋巴细胞增殖反应;与空白对照组比较,γ照射组小鼠SOD及CAT活力值、白细胞计数呈现下降趋势,黑蒜+γ照射组及黑蒜组小鼠SOD及CAT活力值、白细胞计数呈现上升趋势(P <0. 05),与γ照射组比较,黑蒜+γ照射组及黑蒜组小鼠SOD及CAT活力值、白细胞计数呈现上升趋势(P <0. 05)。结论:黑蒜提取液对He La细胞移植瘤具有辐射增敏作用,通过增强免疫功能,提高外周血白细胞计数和机体抗氧化能力,以提高对机体的辐射保护作用。 展开更多

关键词 黑蒜提取液 宫颈癌He La细胞 辐射保护 Γ射线照射 机制研究

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内质网应激对γ射线照射诱导肿瘤细胞死亡的影响 被引量：3

9

作者 李晓雯 周梅 +4 位作者 沈嶔健 杨业鹏 朱蓉 韩南银 李载权 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第5期23-24,共2页

目的探讨内质网应激反应下肿瘤细胞对辐射敏感性的影响。方法将人宫颈癌HeLa细胞置于60Co设备行γ射线照射;采用反转录PCR方法检测内质网应激反应标志分子X盒结合蛋白1(XBP1)mRNA剪切;细胞克隆形成试验检测内质网应激反应剂二硫苏糖醇(D... 目的探讨内质网应激反应下肿瘤细胞对辐射敏感性的影响。方法将人宫颈癌HeLa细胞置于60Co设备行γ射线照射;采用反转录PCR方法检测内质网应激反应标志分子X盒结合蛋白1(XBP1)mRNA剪切;细胞克隆形成试验检测内质网应激反应剂二硫苏糖醇(DTT)作用后对HeLa细胞的生存变化。结果DTT作用后XBP1 mRNA出现剪切;克隆形成试验发现HeLa细胞存活率明显提高。结论在内质网应激反应下,增加肿瘤细胞的辐射抵抗性。 展开更多

关键词 二硫苏糖醇 内质网应激剂 宫颈肿瘤hela细胞 克隆形成试验 60Coγ射线

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F10基因siRNA干扰对宫颈癌细胞侵袭和凋亡的影响及机制研究 被引量：3

10

作者 韦娟冰 林静 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期1584-1589,共6页

目的:以小干扰RNA(siRNA)抑制人宫颈癌Hela细胞中F10基因的表达,研究下调F10基因的表达对细胞侵袭及凋亡的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法:采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测宫颈癌细胞株Hel... 目的:以小干扰RNA(siRNA)抑制人宫颈癌Hela细胞中F10基因的表达,研究下调F10基因的表达对细胞侵袭及凋亡的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法:采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测宫颈癌细胞株Hela及正常宫颈上皮细胞株H8中F10 mRNA和蛋白表达水平。在宫颈癌Hela细胞中转染F10 siRNA,并以转染siRNA control的细胞为阴性对照,以不做任何处理的细胞为空白对照组,转染后24 h,分别以qRT-PCR和Western blot检测转染效率。Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)和磷酸化的信号转导与转录因子3(p-STAT3)蛋白表达水平。结果:在宫颈癌细胞中F10 mRNA和蛋白呈高表达。转染F10 siRNA能够抑制Hela细胞中F10 mRNA和蛋白的表达。下调F10的表达能够明显抑制Hela细胞的侵袭能力,诱导细胞凋亡,下调MMP-2和p-STAT3的表达,上调细胞中Cleaved Caspase-3的表达。结论: F10在宫颈癌细胞中呈高表达,抑制其表达能够抑制Hela细胞的侵袭能力,诱导细胞发生凋亡,其作用机制可能与下调MMP-2和p-STAT3的表达,激活Caspase-3有关。 展开更多

关键词 F10基因 宫颈癌hela细胞 侵袭 凋亡

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miR-503-5p通过靶向调控E2F3对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化的影响 被引量：3

11

作者 冉伟 曾玉华 +2 位作者 马晓洁 廖萍 刘兴兰 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期178-184,共7页

目的探讨miR-503-5p通过靶向调控E2F3对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化的影响。方法将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、mimic-NC组、miR-503-5p mimic组、E2F3组、mimic+E2F3组,并通过Lipofectamine2000将质粒分别或者联合转染... 目的探讨miR-503-5p通过靶向调控E2F3对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化的影响。方法将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、mimic-NC组、miR-503-5p mimic组、E2F3组、mimic+E2F3组,并通过Lipofectamine2000将质粒分别或者联合转染进入各组HeLa细胞,运用基因预测软件预测靶基因,荧光素实验验证靶向关系,RT-PCR检测miR-503-5p和E2F3的表达,MTT法检测细胞增殖,Western blot检测Ki67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、E-cadherin和N-cadherin的表达,Transwell检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移。将裸鼠分为对照组和miR-503-5p mimic组,在裸鼠右后肢腹侧皮下分别注射0.2 mL转染mimic-NC或miR-503-5p mimic的宫颈癌HeLa细胞悬液,第30天颈椎脱位法处死裸鼠,测量肿瘤质量,并用免疫组化方法检测肿瘤组织中Ki67和Vimentin表达情况。结果宫颈癌HeLa细胞中miR-503-5p的表达量明显下调,miR-503-5p与E2F3在3′UTR区存在结合位点,miR-503-5p直接靶向作用于E2F3,过表达miR-503-5p抑制E2F3表达;miR-503-5p过表达降低细胞生长速度、Ki67和PCNA表达量,减少侵袭细胞数目,增宽划痕、降低愈合率,上调E-cadherin表达、下调N-cadherin表达(P<0.01);miR-503-5p过表达减小移植瘤体积、减轻移植瘤重量,减少Ki67和Vimentin的阳性所占比率(P<0.01)。结论 miR-503-5p通过靶向调控E2F3抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化。 展开更多

关键词 miR-503-5p E2F3 宫颈癌hela细胞

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siRNA沉默MACC1基因表达对宫颈癌细胞增殖及侵袭的影响 被引量：1

12

作者 杜珍 陈志美 +1 位作者 周道秋 黄洁萍 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第10期80-84,共5页

目的探讨siRNA沉默结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达对Hela宫颈癌细胞增殖及侵袭的影响。方法通过脂质体将siRNA MACC1及siRNA NC转入Hela细胞中,RT-PCR及western blot检测转染效果,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell... 目的探讨siRNA沉默结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达对Hela宫颈癌细胞增殖及侵袭的影响。方法通过脂质体将siRNA MACC1及siRNA NC转入Hela细胞中,RT-PCR及western blot检测转染效果,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell法检测细胞侵袭能力,western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、cyclin E,基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9蛋白表达及细胞外调节蛋白激酶(ERK)磷酸化水平。结果与siRNA NC组比较,siRNA MACC1组中MACC1蛋白及mRNA表达量降低(P<0.01),细胞活力及侵袭能力下降(P<0.01),细胞周期阻滞在G1期,cyclin D1、cyclin E、MMP2、MMP9及p-ERK表达量下调(P<0.01)。结论siRNA MACC1能显著的抑制宫颈癌Hela细胞增殖与侵袭,可能与下调ERK磷酸化水平有关。 展开更多

关键词 结肠癌转移相关基因1(MACC1) 宫颈癌 增殖 侵袭

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miR-148a靶向STAT3对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的增强作用 被引量：2

13

作者 汤良君 孙艳 +1 位作者 张晓红 盛少琴 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2021年第8期762-768,共7页

目的探究miR-148a对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的影响及相关机制。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,设置顺铂浓度梯度检测IC20值;设置对照组、mimic对照组、miR-148a mimic组、inhibitor对照组和miR-148a inhibitor组,转染后使用qRT-PCR... 目的探究miR-148a对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感度的影响及相关机制。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,设置顺铂浓度梯度检测IC20值;设置对照组、mimic对照组、miR-148a mimic组、inhibitor对照组和miR-148a inhibitor组,转染后使用qRT-PCR法检测miR-148a和STAT3 mRNA表达;4μmol/L顺铂处理后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布,Western blot法检测p-STAT3/STAT3、CyclinD1、Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达。结果HeLa细胞的顺铂IC20约为4μmol/L。与mimic对照组相比,miR-148a mimic组HeLa细胞中miR-148a水平显著升高,STAT3 mRNA水平显著降低(P<0.05);与inhibitor对照组相比,miR-148a inhibitor组HeLa细胞中miR-148a水平显著降低,STAT3 mRNA水平显著升高(P<0.05)。顺铂处理后,与mimic对照组相比,miR-148a mimic组HeLa细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高,OD值、S期和G2/M期细胞比例及p-STAT3/STAT3、Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05);与inhibitor对照组相比,miR-148a inhibitor组HeLa细胞上述指标均朝相反的趋势显著变化(P<0.05)。结论miR-148a可通过靶向抑制STAT3增强宫颈癌HeLa细胞的顺铂化疗敏感度。 展开更多

关键词 微小RNA-148a 信号转导和转录激活因子3 宫颈癌hela细胞 顺铂 化疗敏感度

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乌头碱调控miR-181d-5p/DDX3轴对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡的影响 被引量：1

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作者 赵丹丹 张素娥 +1 位作者 苗立业 王岩 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第9期922-928,共7页

目的探讨乌头碱通过调控微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)/DEAD-box RNA解旋酶3(DDX3)轴对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡的影响。方法使用不同剂量乌头碱处理宫颈癌HeLa细胞,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖确定给药剂量。将HeLa细胞分为对照组(... 目的探讨乌头碱通过调控微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)/DEAD-box RNA解旋酶3(DDX3)轴对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡的影响。方法使用不同剂量乌头碱处理宫颈癌HeLa细胞,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖确定给药剂量。将HeLa细胞分为对照组(正常培养,不进行处理),乌头碱低剂量组(4 mg/L)、中剂量组(8 mg/L)、高剂量组(16 mg/L),顺铂组(5 mg/L),乌头碱高剂量+miR-NC组[16 mg/L乌头碱+转染miR-181d-5p siRNA阴性对照(miR-NC)质粒]及乌头碱高剂量+miR-181d-5p低表达组[16 mg/L乌头碱+转染miR-181d-5p小干扰RNA(siRNA)质粒]。平板克隆形成实验及流式细胞仪分别检测各组HeLa细胞克隆形成数与凋亡情况;实时荧光定量PCR检测HeLa细胞中miR-181d-5p和DDX3 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测HeLa细胞中DDX3、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平;双萤光素酶报告基因实验验证miR-181d-5p与DDX3的靶向关系。结果以0.5~64 mg/L的乌头碱分别处理HeLa细胞24 h、48 h、72 h后,对HeLa细胞均有不同程度的抑制作用,选择剂量为4 mg/L、8 mg/L、16 mg/L的乌头碱用于后续实验。与对照组比较,乌头碱低、中、高剂量组及顺铂组HeLa细胞克隆形成数、DDX3 mRNA和蛋白、Cyclin D1、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平依次降低(P<0.05),凋亡率、miR-181d-5p、Bax、Caspase-3蛋白表达水平依次升高(P<0.05);与乌头碱高剂量组和乌头碱高剂量+miR-NC组比较,乌头碱高剂量+miR-181d-5p低表达组HeLa细胞克隆形成数、DDX3 mRNA和蛋白、Cyclin D1、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05),凋亡率、miR-181d-5p、Bax、Caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05);双萤光素酶报告基因检测证实miR-181d-5p与DDX3存在靶向关系。结论乌头碱可调控miR-181d-5p/DDX3轴,促进miR-181d-5p表达,抑制DDX3表达,进而抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 乌头碱 微小RNA-181d-5p DEAD-box RNA解旋酶3 宫颈癌hela细胞

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人参总皂苷诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡和自噬 被引量：2

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作者 赵月 赵跃刚 +4 位作者 李芳宇 卢姝言 边帅 王佳雯 赵大庆 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第4期63-66,I0027,共5页

目的探讨人参总皂苷(total ginsenosides extract, TGS)对宫颈癌HeLa细胞凋亡和自噬的影响。方法应用不同浓度的TGS作用HeLa细胞24 h,采用CCK-8法检测TGS对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响并筛选出最佳浓度;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术... 目的探讨人参总皂苷(total ginsenosides extract, TGS)对宫颈癌HeLa细胞凋亡和自噬的影响。方法应用不同浓度的TGS作用HeLa细胞24 h,采用CCK-8法检测TGS对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响并筛选出最佳浓度;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;通过GFP-LC3质粒转染HeLa细胞并加入TGS观察LC3斑点的数量,以及吖啶橙染色后观察自噬溶酶体的形成情况。蛋白质免疫印迹分析法检测细胞中凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的表达水平,对TGS诱导的凋亡和自噬进行验证。结果 CCK-8法显示TGS显著了抑制HeLa细胞增殖,且具有浓度依赖性(P<0.05);流式细胞仪检测结果表明,TGS处理后HeLa细胞凋亡率明显升高;GFP-LC3质粒转染分析结果显示,TGS在HeLa细胞中明显增加了LC3斑点的数量;吖啶橙染色后观察到细胞内自噬溶酶体明显增多;蛋白质免疫印迹分析法结果表明与对照组比较,TGS各剂量细胞中凋亡抑制因子Bcl-2表达水平降低,凋亡促进因子Bax表达水平升高;自噬相关因子p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR比值逐渐降低,LC3B-Ⅱ和Beclin-1的表达水平均明显上调,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论人参总皂苷显著抑制宫颈癌HeLa细胞增殖并具有剂量依赖性,促进其发生细胞凋亡并引起AKT/mTOR途径相关的细胞自噬。 展开更多

关键词 人参总皂苷 宫颈癌hela细胞 凋亡 自噬

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帕瑞昔布钠对宫颈癌细胞COX-2/PGE2通路及细胞学行为的影响 被引量：1

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作者 容凤娇 杜佳楠 +1 位作者 蒋良富 徐夏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期186-190,共5页

目的:探究帕瑞昔布钠对宫颈癌HeLa细胞环氧化合酶-2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)通路及其上皮间质转化(EMT)、迁移和侵袭的影响。方法:磺酰罗丹明B(SRB)法检测帕瑞昔布钠在不同浓度和时间点对HeLa细胞存活率的影响,筛选出合适的浓度和时间... 目的:探究帕瑞昔布钠对宫颈癌HeLa细胞环氧化合酶-2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)通路及其上皮间质转化(EMT)、迁移和侵袭的影响。方法:磺酰罗丹明B(SRB)法检测帕瑞昔布钠在不同浓度和时间点对HeLa细胞存活率的影响,筛选出合适的浓度和时间点。将Hela细胞分为帕瑞昔布钠0μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L组,处理24 h后,Transwell小室法检测各组细胞迁移和侵袭能力,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组细胞中通路蛋白COX-2、PGE2及其下游转录激活子3(STAT3)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、磷酸化AKT(p-AKT)、上皮间质转化相关E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)以及迁移侵袭相关基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)蛋白表达水平。结果:帕瑞昔布钠作用24、48、72 h均可降低HeLa细胞存活率;与帕瑞昔布钠0μmol/L组相比,帕瑞昔布钠25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L组HeLa细胞迁移和侵袭能力、COX-2、PGE2、vimentin蛋白表达水平、STAT3、AKT磷酸化水平和MMP2/TIMP2蛋白比值依次降低,E-cadherin蛋白表达水平依次升高,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。结论:帕瑞昔布钠可降低HeLa细胞EMT及迁移侵袭能力,可能与抑制COX-2/PGE2通路有关。 展开更多

关键词 帕瑞昔布钠 宫颈癌hela细胞 环氧化合酶-2/前列腺素E2通路 细胞学行为

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miR-375靶向OTX1对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移的影响 被引量：1

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作者 田姗 江海 +4 位作者 刘慧 曹霞 张丹 牟尚东 李曾 《河北医药》 CAS 2021年第14期2090-2095,共6页

目的分析微小RNA-375(miR-375)、人同源盒基因1(OTX1)对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,分为空白对照组(Control组)、miR-375激动剂阴性对照组(mNC)组、miR-375激动剂组(miR-375 mimic组),miR-375... 目的分析微小RNA-375(miR-375)、人同源盒基因1(OTX1)对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,分为空白对照组(Control组)、miR-375激动剂阴性对照组(mNC)组、miR-375激动剂组(miR-375 mimic组),miR-375抑制剂剂组(miR-375 inhibitor组),miR-375抑制剂阴性对照组(iNC组);除Control组细胞正常培养外,其余4组转染相应的miR-375激动剂、抑制剂及阴性对照试剂。4组细胞均培养48 h后,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-375、OTX1 mRNA相对表达水平,MTT检测各组细胞增殖情况,Transwell检测细胞侵袭情况,细胞划痕实验检测细胞迁移,双荧光素报告基因检测宫颈癌HeLa细胞miR-375与OTX1的靶向关系,蛋白免疫印记(Western Blot)检测通路OTX1蛋白、增殖活性标志物-细胞增殖核抗原(Ki-67)蛋白、侵袭迁移相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)蛋白表达。结果与Control组、mNC组、iNC组相比,miR-375 inhibitor组的OTX1 mRNA及蛋白表达、增殖标志物Ki-67蛋白表达、侵袭及迁移相关分子MMP-2蛋白表达、增殖率、侵袭率、迁移率均增高(P<0.05),miR-375表达、侵袭及迁移抑制分子TIMP-2蛋白表达均降低(P<0.05);miR-375 mimic组的OTX1 mRNA及蛋白表达、Ki-67蛋白表达、MMP-2蛋白表达、增殖率、侵袭率、迁移率均降低(P<0.05),、miR-375表达、TIMP-2蛋白表达均升高(P<0.05)。Control组、mNC组及iNC组组间相比,上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告实验发现,与miR-375 NC+WT-OTX13’-UTR组相比,miR-375 mimic+WT-OTX13’-UTR组的荧光素酶相对活性降低(P<0.05)。结论miR-375过表达可靶向抑制OTX1表达,进而抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移。 展开更多

关键词 微小RNA-375 人同源盒基因1 宫颈癌hela细胞 增殖 侵袭 迁移

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虎杖粗提物对宫颈癌Hela细胞增殖与迁移作用机制研究

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作者 李彤晖 杨佳慧 李琛 《湖北医药学院学报》 CAS 2023年第6期579-583,F0002,共6页

目的:探究虎杖粗提物对宫颈癌Hela细胞增殖和迁移的机制。方法:使用CCK-8(Cell Counting Kit-8)、ATP(Adenosine 5′-triphosphate)、LDH(Lactate dehydrogenase)试剂盒检测虎杖粗提物对Hela细胞增殖的影响;采用划痕实验检测虎杖粗提物... 目的:探究虎杖粗提物对宫颈癌Hela细胞增殖和迁移的机制。方法:使用CCK-8(Cell Counting Kit-8)、ATP(Adenosine 5′-triphosphate)、LDH(Lactate dehydrogenase)试剂盒检测虎杖粗提物对Hela细胞增殖的影响;采用划痕实验检测虎杖粗提物对Hela细胞水平迁移能力的影响;采用流式细胞术检测虎杖粗提物对Hela细胞凋亡的影响;采用免疫印迹法(Western blotting)检测虎杖粗提物对Hela细胞caspase 1/3/8/9、PARP(poly ADP-ribose polymerase)以及GSDME(Gasdermin E)等蛋白表达的影响。结果:虎杖粗提物抑制了Hela细胞的增殖,显著抑制Hela细胞的迁移能力,诱导了Hela细胞凋亡,并显著增加了cleaved-caspase 3/8/9、PARP等Hela细胞中凋亡相关蛋白表达水平。结论:虎杖粗提物可以有效抑制Hela细胞的增殖和迁移,可能通过诱导细胞凋亡和导致线粒体功能障碍发挥作用。 展开更多

关键词 虎杖粗提物 宫颈癌hela细胞 凋亡 线粒体功能障碍

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慢病毒介导的DKC1基因沉默对人宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响

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作者 柳正春 蔡锐 +2 位作者 张凯丽 阮国柱 刘美莲 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期590-594,共5页

目的探讨降低角化不良蛋白基因(DKC1基因)表达对人宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响。方法以慢病毒为载体通过shRNA技术建立DKC1基因低表达的细胞模型,并利用RT-PCR、Western blot验证干扰效率。将细胞分为干扰组、空白对照组和阴性对照... 目的探讨降低角化不良蛋白基因(DKC1基因)表达对人宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响。方法以慢病毒为载体通过shRNA技术建立DKC1基因低表达的细胞模型,并利用RT-PCR、Western blot验证干扰效率。将细胞分为干扰组、空白对照组和阴性对照组,通过端粒重复序列扩增酶联免疫吸附试验(TRAP-ELISA法)检测端粒酶活性,实时PCR检测相对端粒长度,克隆形成实验计算克隆形成率,并利用单击多靶模型拟合细胞存活曲线、计算放射生物学相关参数(D0、Dq、N、SF2)及放射增敏比(SER)。结果以慢病毒为载体的DKC1干扰序列(Lv-shDKC1)转染HeLa细胞后,与空白对照组相比,干扰组DKC1 mRNA及蛋白表达水平均明显下降,其表达抑制率分别为(71.330±4.112)%(t=25.53,P<0.05)、(35.520±3.804)%(t=4.833,P<0.05)。与空白对照组及阴性对照组相比,干扰组端粒酶活性从0.900±0.044、0.897±0.031降到0.713±0.021(F=31.44,P<0.05),相对端粒长度从4.233±0.306、4.633±0.379降到2.667±0.404(F=39.15,P<0.05),而空白对照组及阴性对照组间端粒酶活性和相对端粒长度差异均无统计学意义(P>0.05)。干扰组存活分数(SF2)(0.571±0.006)明显低于空白对照组(0.861±0.009)及阴性对照组(0.807±0.002)(F=1812,P<0.05),SER为1.508。结论干扰DKC1的表达对人宫颈癌HeLa细胞有放射增敏作用,可通过抑制端粒酶活性、缩短相对端粒长度而发挥放射增敏作用,有望成为新的放射增敏靶点。 展开更多

关键词 DKC1基因 人宫颈癌hela细胞 放射敏感性 慢病毒 SHRNA

原文传递

宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究

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作者 孙迪 沈宜 +1 位作者 谢莹珊 隆霜 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期520-523,共4页

目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclinE)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blot检测UO-126阻断MAPK信号通路前后cyclin E和FBW7 mRNA及蛋白表达情况。结... 目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclinE)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blot检测UO-126阻断MAPK信号通路前后cyclin E和FBW7 mRNA及蛋白表达情况。结果:RT-PCR及Western blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞cyclin E mRNA表达水平无明显变化,cyclin E蛋白表达水平明显下降,FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞均明显增高。结论:宫颈癌HeLa细胞中FBW7异常表达与MAPK信号通路激活密切相关。UO-126阻断MAPK信号通路可下调cyclin E表达,上调FBW7表达。 展开更多

关键词 UO-126 MAPK 宫颈癌细胞株(hela细胞) 细胞周期素E FBW7

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