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婴幼儿奶粉和米粉中蜡样芽胞杆菌及其毒素、毒力基因的调查研究 被引量:26
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作者 章乐怡 张秀尧 +2 位作者 李毅 蔡欣欣 王欣 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2014年第6期600-604,共5页
目的了解婴幼儿奶粉及米粉中蜡样芽胞杆菌污染状况及其毒素、毒力基因的携带特点。方法采用稀释培养计数(MPN计数)法分离蜡样芽胞杆菌,采用PCR技术检测10种蜡样芽胞杆菌的腹泻毒素及呕吐毒素基因,在流动相A为0.1%甲酸-乙腈溶液,流动相B... 目的了解婴幼儿奶粉及米粉中蜡样芽胞杆菌污染状况及其毒素、毒力基因的携带特点。方法采用稀释培养计数(MPN计数)法分离蜡样芽胞杆菌,采用PCR技术检测10种蜡样芽胞杆菌的腹泻毒素及呕吐毒素基因,在流动相A为0.1%甲酸-乙腈溶液,流动相B为0.1%甲酸-0.2 mmol/L乙酸铵溶液条件下,用Acquity BEH300C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)对样品进行分离,采用超高效液相色谱-串联质谱法检测样品中的呕吐毒素(cereulide)。结果本研究共监测39份样品,28份检出蜡样芽胞杆菌,检出率为71.79%(28/39);2份检出呕吐毒素,检出率为5.13%(2/39)。检出的蜡样芽胞杆菌菌株大多属于携带复合型毒素的菌株,均携带3种以上的腹泻毒素基因,非溶血性的肠毒素nhe基因(nhe A、nhe B和nhe C)和肠毒素FM基因(ent FM)为主要的毒力基因,其中nhe ABC基因携带率为100%,ent FM基因携带率为35.71%(10/28),cyt K基因是检测到的最少的一种毒力基因。结论应加强婴幼儿奶粉及米粉中的蜡样芽胞杆菌污染监测及其毒力基因致病性研究,以科学评估蜡样芽胞杆菌对婴幼儿食品可能构成的食品安全风险。 展开更多
关键词 蜡样芽胞杆菌 食源性疾病 呕吐毒素 毒力基因 食源性致病菌 婴幼儿奶粉 米粉
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蜡样芽胞杆菌呕吐毒素引发的米面制品食物中毒快速确证方法研究 被引量:4
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作者 崔霞 王莉莉 +3 位作者 刘平 段佳丽 赵榕 范赛 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期573-578,共6页
目的建立快速测定米面制品中蜡样芽胞杆菌呕吐毒素的超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS),为蜡样芽胞杆菌呕吐毒素引起的食物中毒提供应急处置措施。方法单一基... 目的建立快速测定米面制品中蜡样芽胞杆菌呕吐毒素的超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS),为蜡样芽胞杆菌呕吐毒素引起的食物中毒提供应急处置措施。方法单一基质米面样品用乙腈水溶液提取,以盐析分层,离心过膜后直接上机检测;炒米饭、炒面等复杂基质样本用乙腈水溶液提取,经HLB-P小柱净化,采用ACQUITY UPLC Peptide BEH C18300?色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离后于电喷雾正离子模式下,采用多反应监测扫描(multiple reaction monitoring,MRM)进行测定,以溶剂标准曲线法定量。结果蜡样芽胞杆菌呕吐毒素在蒸米饭、馒头、面条等阴性样品中加标水平在0.5、1.0和5.0μg/kg下回收率为87.4%~98.3%,精密度为1.4%~4.2%(n=6)。在炒米饭、炒面等阴性样本中加标水平在1.0、2.0、5.0μg/kg下,回收率为89.5%~99.3%,精密度为1.1%~7.5%(n=6)。目标化合物的检出限为0.2~0.3μg/kg,定量限为0.5~1.0μg/kg。对北京某地引起食物中毒的实际样品进行了检测,中毒样品中蜡样芽胞杆菌呕吐毒素含量为1287~7398μg/kg,2份原料凉面中蜡样芽胞杆菌呕吐毒素含量分别为0.4和9.4μg/kg。结论该方法操作简便、快速,灵敏度和准确度高,实现了蜡样芽胞杆菌引发食物中毒的快速处置。 展开更多
关键词 蜡样芽胞杆菌 呕吐毒素 食物中毒 液相色谱-串联质谱
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饲料和饲料添加剂中蜡样芽孢杆菌分离鉴定及其呕吐毒素基因检测 被引量:6
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作者 文英会 李孟 +2 位作者 李金磊 高延玲 吴志明 《饲料研究》 CAS 北大核心 2019年第4期40-43,共4页
为了掌握饲料及饲料添加剂中蜡样芽孢杆菌分布及其呕吐毒素基因携带情况,从规模化饲料生产企业采集饲料及饲料添加剂样品246批。通过细菌分离、纯化、PCR检测和BD PhoenixTM-100全自动微生物鉴定系统鉴定,共分离蜡样芽孢杆菌63株,分离率... 为了掌握饲料及饲料添加剂中蜡样芽孢杆菌分布及其呕吐毒素基因携带情况,从规模化饲料生产企业采集饲料及饲料添加剂样品246批。通过细菌分离、纯化、PCR检测和BD PhoenixTM-100全自动微生物鉴定系统鉴定,共分离蜡样芽孢杆菌63株,分离率为25.6%,从混合型饲料添加剂中检出4株含芽孢杆菌呕吐毒素基因,携带率为13.3%。试验结果表明,饲料和饲料添加剂中存在蜡样芽孢杆菌,尤其是含呕吐毒素蜡样芽孢杆菌污染风险。 展开更多
关键词 饲料 饲料添加剂 蜡样芽孢杆菌 呕吐毒素 分离 鉴定
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基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法快速测定米饭和乳制品中蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide
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作者 曾羲 王宇 +3 位作者 徐巨才 黄穗东 王涓 徐振林 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第1期232-238,共7页
建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)法分析蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的快速检测方法。分析了Cereulide标准物质的裂解规律,考... 建立基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)法分析蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的快速检测方法。分析了Cereulide标准物质的裂解规律,考察基质种类、点靶方式、基质溶剂和用量、激光强度等对Cereulide的质谱信号强度的影响,并进行方法学验证和实际样品检测。结果表明,选择以α-氰基-4-羟基肉桂酸为基质,均匀分散在50%乙腈-水(含0.1%三氟乙酸)中,采用先点基质再点样品的点样方式,反射线性正离子模式下选择激光强度70%进行食品中MALDI-TOF MS筛查时,可检测到Cereulide的[M+Na]^(+)和[M+K]^(+)目标离子峰,此质谱信号稳定、强度高、响应重复性好。方法学验证结果表明,Cereulide的[M+Na]^(+)和[M+K]^(+)目标离子峰在5~100 ng/mL范围内线性好,相关系数(r)>0.99;方法的检出限分别为3.0 ng/g和5.0 ng/g;对米饭和牛乳样品的加标回收率为73.3%~118.2%,相对标准偏差为0.3%~10.9%(n=6)。本方法分析速度快、准确性高、灵敏度好、抗干扰能力强、无需内标即可实现对米饭和乳制品中Cereulide的批量筛查和检测。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱 蜡样芽孢杆菌 呕吐毒素 α-氰基-4-羟基肉桂酸
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饲料中蜡样芽孢杆菌致病性及其毒素检测方法研究进展 被引量:6
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作者 施琴 韩振海 +3 位作者 于思玉 林思敏 李顺琴 何诚 《中国家禽》 北大核心 2017年第10期36-40,共5页
蜡样芽孢杆菌是一种革兰氏阳性菌,菌株主要通过产生呕吐毒素和肠毒素而发挥致病性,临床分为呕吐型和腹泻型。文章对蜡样芽孢杆菌血清分型、污染来源、致病性特点、检测方法和防控措施进行综述,旨在系统了解蜡样芽孢杆菌致病机制,为防控... 蜡样芽孢杆菌是一种革兰氏阳性菌,菌株主要通过产生呕吐毒素和肠毒素而发挥致病性,临床分为呕吐型和腹泻型。文章对蜡样芽孢杆菌血清分型、污染来源、致病性特点、检测方法和防控措施进行综述,旨在系统了解蜡样芽孢杆菌致病机制,为防控蜡样芽孢杆菌提供新的思路。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 肠毒素 呕吐毒素 检测方法 饲料
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The Sources of Bacillus cereus Contamination and their Association with Cereulide Production in Dairy and Cooked Rice Processing Lines
6
作者 杨朔 王雅婷 +4 位作者 任凡冲 王旭 张晚桐 裴晓燕 董庆利 《Food Quality and Safety》 SCIE CAS CSCD 2023年第3期425-438,共14页
Bacillus cereus,a spore-forming bacterium and frequent cause of food poisoning,poses a safety threat to dairy and rice industries due to its high contamination rates and ability to produce toxins such as cereulide.Bec... Bacillus cereus,a spore-forming bacterium and frequent cause of food poisoning,poses a safety threat to dairy and rice industries due to its high contamination rates and ability to produce toxins such as cereulide.Because of widespread presence and thermal resistance of the spores,B.cereus cannot be eliminated from the environment and may survive in processing plants.Surviving spores can develop into vegetative cells,leading to a heightened risk of cereulide production in the processing environment.Both spores and vegetative cells have the ability to adhere to the surfaces of dairy plants and form biofilms,serving as the site for cereulide production and accumulation.Therefore,it is crucial for the food industry to address potential sources and pathways of B.cereus contamination and their connections to cereulide production in processing lines.In this review,sources of contamination of B.cereus,including spores,vegetative cells,and biofilms and their potential role in cereulide production at each stage of dairy and cooked rice processing were analyzed.In addition,control methods to prevent B.cereus contamination and cereulide production in processing lines were proposed,offering valuable insights for improving microbial risk management in the food industry. 展开更多
关键词 Bacillus cereus cereulide processing lines DAIRY cooked rice
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细菌型豆豉中呕吐型蜡样芽孢杆菌的产毒研究 被引量:3
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作者 贡献 佟硕秋 吴拥军 《中国调味品》 CAS 北大核心 2020年第8期50-53,60,共5页
对贵阳某食品厂同一批次自然发酵与纯种发酵豆豉取样,运用PCR对蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus,BC)计数为阳性的豆豉样本(共27份)中的呕吐毒素基因ces进行检测,之后运用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术对呕吐毒素(cereulide)进... 对贵阳某食品厂同一批次自然发酵与纯种发酵豆豉取样,运用PCR对蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus,BC)计数为阳性的豆豉样本(共27份)中的呕吐毒素基因ces进行检测,之后运用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术对呕吐毒素(cereulide)进行定量分析。结果显示:在蜡样芽孢杆菌阳性豆豉样本中呕吐毒素基因ces的检出率为92.6%,自然发酵和纯种发酵豆豉中cereulide含量分别为(0.0106±0.0006)μg/kg和(0.029±0.0002)μg/kg。对比国标GB 2761-2017,远低于发酵豆制品中次生有毒代谢产物的限定含量5.0μg/kg,表明两种方式发酵豆豉成品中的cereulide均符合食品安全要求。研究通过对豆豉样本中呕吐型蜡样芽孢杆菌的检测及呕吐毒素含量的测定对豆豉的食用安全性进行评价,表明该细菌型豆豉目前暂不存在cereulide引起的食用安全性问题。 展开更多
关键词 细菌型豆豉 呕吐型蜡样芽孢杆菌 呕吐毒素 超高效液相色谱-串联质谱 食品安全
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基于MALDI-TOF MS技术快速检测产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌 被引量:1
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作者 陈楷 黄志深 +5 位作者 曾羲 雷燕 林秀敏 蒋佳希 陈贤驰 肖剑 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2022年第11期351-357,共7页
该研究探讨了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪快速鉴别产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的方法。通过对标准品进行分析,重新对特征峰进行定位并测定其灵敏度,并用正交试验分析不同培养条件下检验结果的差异,用优化后的培养条件对49株野生蜡... 该研究探讨了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪快速鉴别产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌的方法。通过对标准品进行分析,重新对特征峰进行定位并测定其灵敏度,并用正交试验分析不同培养条件下检验结果的差异,用优化后的培养条件对49株野生蜡样芽胞杆菌及3株标准菌株进行特异性检验。研究表明,MALDI-TOF MS可检测到产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌中呕吐毒素相应m/z值为1175的[M+Na]^(+)和m/z值为1191的[M+K]^(+)加合物特征峰,具有较高的灵敏度(0.01μg/mL),经极差分析显示,选用MYP培养基30℃培养12 h后的菌落能获得最稳定、响应值高(>104)的检验结果;方法应用验证表明,49株野生菌株中2株含ces基因的蜡样芽胞杆菌均检出,其余未含有ces基因的菌株均未检出。该研究建立的MALDI-TOF MS检测方法能直接快速准确检出产呕吐毒素蜡样芽胞杆菌,该方法检测特异性强(100%),灵敏度高(0.01μg/mL),对于食品安全事故快速精准分析研判有重要的意义。 展开更多
关键词 MALDI-TOF MS 蜡样芽胞杆菌 呕吐毒素
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一起由蜡样芽胞杆菌致吐毒素引起的食物中毒案例分析 被引量:15
9
作者 江南 苏彦萍 +1 位作者 赵凤玲 王艳春 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第19期2402-2403,共2页
目的回顾并分析一起发生在冬季的由蜡样芽胞杆菌致吐毒素引起的食物中毒事件,为该类食物中毒防控提供参考。方法开展流行病学及卫生学调查,采集样品并进行实验室检测。结果所有患者符合典型蜡样芽胞杆菌致吐毒素中毒流行病学特征及临床... 目的回顾并分析一起发生在冬季的由蜡样芽胞杆菌致吐毒素引起的食物中毒事件,为该类食物中毒防控提供参考。方法开展流行病学及卫生学调查,采集样品并进行实验室检测。结果所有患者符合典型蜡样芽胞杆菌致吐毒素中毒流行病学特征及临床表现,在剩炒饭、环境拭子及厨师手涂拭子等多份样本中检出蜡样芽胞杆菌。结论制售环境及剩米饭中蜡样芽胞杆菌产生的致吐毒素是导致本次食物中毒的主要原因,寒冷季节细菌性食物中毒仍不容忽视。 展开更多
关键词 食物中毒 蜡样芽胞杆菌 致吐毒素 冬季
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蜡样芽孢杆菌致吐毒素的研究现状 被引量:12
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作者 顿玉慧 赵更峰 郑启伟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第9期259-263,共5页
蜡样芽孢杆菌致吐毒素是热处理也不能灭活的毒素,没有方法可以去除食品中致吐毒素Cereulide。因此,探讨食品中哪些因素影响致吐毒素产生显得至关重要。本文对蜡样芽孢杆菌孢子、致吐毒素产生株的特点及致吐食源性中毒,分离、检测和定量... 蜡样芽孢杆菌致吐毒素是热处理也不能灭活的毒素,没有方法可以去除食品中致吐毒素Cereulide。因此,探讨食品中哪些因素影响致吐毒素产生显得至关重要。本文对蜡样芽孢杆菌孢子、致吐毒素产生株的特点及致吐食源性中毒,分离、检测和定量食品中Cereulide的国内外新方法及影响致吐毒素产生的因素等进行了综述。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 致吐毒素cereulide
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超高效液相色谱串联质谱法检测食品中蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide 被引量:13
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作者 张秀尧 蔡欣欣 李毅 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1267-1273,共7页
建立了快速检测食品中蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的超高效液相色谱三重四极杆质谱联用分析方法。样品提取液经硅胶和Carb固相萃取柱净化后,以0.1%甲酸-0.2 mmol/L乙酸铵溶液和0.1%甲酸-乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,在Acquity BE... 建立了快速检测食品中蜡样芽孢杆菌呕吐毒素Cereulide的超高效液相色谱三重四极杆质谱联用分析方法。样品提取液经硅胶和Carb固相萃取柱净化后,以0.1%甲酸-0.2 mmol/L乙酸铵溶液和0.1%甲酸-乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,在Acquity BEH 300 C18柱上实现分离,正离子ESI-MS/MS MRM方式检测,以13C6-Cereulide作为内标的稳定同位素稀释法进行定量分析。一次进样分析时间为7 min。米饭、添加33%玉米胚油的米饭和婴儿配方奶粉中平均加标回收率分别为85.7%~87.5%,85.3%~110%和94.2%~113%;相对标准偏差为4.6%~13%,5.9%~9.1%和3.4%~6.5%(n=6);定量限为10 ng/kg(S/N=10)。方法灵敏、准确,适合于食品样品中Cereulide的测定,并已成功应用于食物中毒样品的检测。 展开更多
关键词 超高效液相色谱串联质谱 蜡样芽孢杆菌 呕吐毒素 食品
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蜡样芽孢杆菌致吐毒素的毒性作用与生物合成研究进展 被引量:4
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作者 崔一芳 郑敏 +1 位作者 丁双阳 朱奎 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2666-2674,共9页
蜡样芽孢杆菌是一类兼性厌氧的革兰氏阳性杆菌,可以产生芽孢抵抗不良环境,并广泛存在于土壤、水、空气和多种食物中。致病性蜡样芽孢杆菌是常见的食源性条件致病菌之一,其引发的食物中毒主要是由其产生的毒素导致的。致吐毒素cereulide... 蜡样芽孢杆菌是一类兼性厌氧的革兰氏阳性杆菌,可以产生芽孢抵抗不良环境,并广泛存在于土壤、水、空气和多种食物中。致病性蜡样芽孢杆菌是常见的食源性条件致病菌之一,其引发的食物中毒主要是由其产生的毒素导致的。致吐毒素cereulide是致病性蜡样芽孢杆菌产生的重要毒素之一,是一种小分子亲脂性十二环肽,结构性质十分稳定。Cereulide能够引起恶心、呕吐等轻微的食物中毒症状,也可导致如肝性脑病、急性肝脏衰竭等严重致死的疾病。当前对于cereulide的毒性作用机制研究局限于其刺激传入迷走神经引起呕吐症状,以及作为钾离子载体,诱导线粒体膜电位丧失,并最终导致细胞死亡,而对于其导致的严重肝脏和脑部病变的毒性作用机制研究仍十分不足。Cereulide是由cereulide合成酶基因簇(ces)编码,非核糖体肽合成酶(nonribosomal peptide-synthetase,NRPS)系统控制合成的。Cereulide由两个羟基酸和两个氨基酸残基[-D-HIC-D-Ala-L-HIV-L-Val-]经3次迭代组成三聚体缩酚酞,其结构特殊并有很强的代表性,但因NRPS合成系统的灵活性会产生许多变体,因此cereulide的毒性与其生物合成过程息息相关。文章在现有文献报道和研究数据的基础上,总结并提出了cereulide的生物合成机理:首先,cereulide合成基因簇的CesA和CesB结构域分别识别D-α-酮羧酸、L-丙氨酸、L-α-酮异戊酸和L-缬氨酸,通过共价结合形成cereulide的主要合成单元二肽;其次,依照上述过程重复合成四肽;再通过重复反应合成第二个四肽,两个四肽通过酯化形成八肽;再次重复上述反应,形成三元络合的产物肽;最后,由于ces-NRPS的硫酯酶结构域活性中心表面结构阻止外部水分子进入,并诱导内部亲核攻击反应,最终释放出环状cereulide。目前,由产cereulide的蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒风险被低估。并且,本团队前期研究发现部分芽孢� 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 致吐毒素cereulide 生物合成 非核糖体肽合成酶 毒性
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食品中呕吐毒素Cereulide特性及检测方法研究进展
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作者 罗信旭 谢珊 《食品安全导刊》 2021年第27期142-143,共2页
近年来我国的食品安全形势依然严峻,食品安全问题受到社会的高度关注。目前我国常见的细菌性食源性疾病中,由蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒事件总量仅次于沙门氏菌。蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒,有呕吐型和腹泻型两种类型。我国主要以呕... 近年来我国的食品安全形势依然严峻,食品安全问题受到社会的高度关注。目前我国常见的细菌性食源性疾病中,由蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒事件总量仅次于沙门氏菌。蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒,有呕吐型和腹泻型两种类型。我国主要以呕吐型中毒为主,由耐热型肠毒素呕吐毒素(Cereulide)引起,中毒潜伏期较短。感染该毒素的患者伴有恶心、呕吐,部分有腹泻的症状,严重者可致肝损伤。因此全面掌握食品中Cereulide的影响因素,建立快速检测方法十分重要。本文就Cereulide特性、影响因素及检测方法进行综述。 展开更多
关键词 cereulide特性 影响因素 检测方法
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