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膜联蛋白A5低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响 被引量：12
1
作者 王小杰 杨艳杰 +3 位作者 田焕娜 梁秀军 陈龙 李欣 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期487-492,共6页
目的探讨膜联蛋白A5(ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组... 目的探讨膜联蛋白A5(ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组ANXA5的表达以鉴定抑制效率;细胞划痕实验检测各组HeLa细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组HeLa细胞的侵袭能力;RT-PCR和Western blotting分别检测ANXA5低表达对E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA及蛋白表达的影响。结果干扰组ANXA5蛋白及mRNA的表达均明显低于阴性对照组(P<0.05);其表达均被显著抑制,干扰组细胞的迁移及侵袭能力比阴性对照组明显增强(P<0.05),E-cadherin mRNA及蛋白的表达显著低于阴性对照组(P<0.05);干扰组MMP-9mRNA及蛋白的表达均显著高于阴性对照组(P<0.05)。结论靶向ANXA5的siRNA可有效抑制ANXA5的表达,且ANXA5低表达可能通过影响E-cadherin和MMP-9的表达来促进HeLa细胞的迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 HELA 迁移性 侵袭性 细胞划痕实验 Transwell实验
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脊髓康含药血清对脂多糖诱导的小胶质细胞迁移功能的影响 被引量：2
2
作者 郭杨 苑文超 +4 位作者 潘娅岚 马勇 徐桂华 王磊 刘家欢 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2882-2885,共4页
目的观察中药复方脊髄康(JSK)含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞迁移功能的影响。方法采用摇床法提取原代小肢质细胞进行培养、鉴定;制备JSK含药血清;将小肢质细胞分为空白血清组、LPS组、JSK低、中、高剤量组、黄芪甲苷(AS-IV)组... 目的观察中药复方脊髄康(JSK)含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞迁移功能的影响。方法采用摇床法提取原代小肢质细胞进行培养、鉴定;制备JSK含药血清;将小肢质细胞分为空白血清组、LPS组、JSK低、中、高剤量组、黄芪甲苷(AS-IV)组;选取细胞划痕实验、Transweil小室迁移实验、鬼笔环肽免疫荧光实验对LPS诱导后的原代小胶质细胞的迁移功能进行检测。结果空白血清组、JSK低、中、高剂量组、AS-IV组小胶质细胞的迁移能力均低于LPS组(P<0.01);JSK高刑量组、AS-IV组小肢质细胞的迁移能力均低于JSK低、中剂量组(P<0.05);JSK高剂量组与AS-IV组相比无明显差异(P>0.05)。结论中药复方脊髓康(JSK)含药血清对LPS诱导的小胶质细胞迁移功能具有一定的抑制作用,从抑制小肢质细胞迁移的角度为中医药治疗脊敌损伤提供一定的依据。 展开更多
关键词 脊髓康 含药血清 小胶质细胞 迁移 划痕实验 Transwell小室迁移实验 鬼笔环肽免疫荧光实验
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血清含量对HaCaT细胞生长特性及迁移能力的影响 被引量：2
3
作者 张泽曦 李墨灵 +2 位作者 杜天乐 夏庆梅 张晗 《天津中医药大学学报》 CAS 2015年第6期369-372,共4页
[目的]考察不同血清含量以及培养不同时间对人永生化角质形成细胞（HaCaT）细胞的生长及迁移特性的影响,为HaCaT细胞划痕实验条件优化提供实验数据支撑。[方法]培养HaCaT细胞,按10%血清浓度全培基（全培基阳性对照组）、2%低浓度血清培... [目的]考察不同血清含量以及培养不同时间对人永生化角质形成细胞（HaCaT）细胞的生长及迁移特性的影响,为HaCaT细胞划痕实验条件优化提供实验数据支撑。[方法]培养HaCaT细胞,按10%血清浓度全培基（全培基阳性对照组）、2%低浓度血清培基（低血清培基组）及无血清培基（对照组）分组,通过进行细胞划痕实验,CCK-8细胞活力检测、Brdu细胞增殖实验,分析HaCaT生长特性。[结果]在24h内,低血清培基组HaCaT细胞与全培基组相比,细胞增殖能力无明显差异,细胞活力有增高的趋势。细胞孵育48h后,全培基组细胞增殖能力及活力明显升高。24~48h,全培基组细胞增殖能力及细胞活力的提升速度明显高于低血清培基组。[结论]培养基中血清含量对HaCaT细胞生长特性及迁移能力具有重要影响,培养24h内低血清培养条件有利于划痕实验的观察与测定。 展开更多
关键词 HACAT细胞 划痕实验 创伤修复 方案优化
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松萝烟酰胺对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡、细胞周期及迁移的影响 被引量：1
4
作者 尤雨桐 贺小琼 +4 位作者 陆地 连文静 屈倩倩 段灵 周樟屏 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1024-1030,共7页
目的探讨松萝烟酰胺对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用及机制。方法体外培养SGC-7901细胞,分为对照组和不同浓度的松萝烟酰胺实验组,显微镜观察各组细胞形态;MTT法测定SGC-7901细胞增殖;AnnexinV/PI双染和DAPI荧光染色检测细胞凋亡;流... 目的探讨松萝烟酰胺对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用及机制。方法体外培养SGC-7901细胞,分为对照组和不同浓度的松萝烟酰胺实验组,显微镜观察各组细胞形态;MTT法测定SGC-7901细胞增殖;AnnexinV/PI双染和DAPI荧光染色检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期;细胞划痕实验检测细胞的迁移。结果松萝烟酰胺处理SGC-7901细胞后,细胞发生皱缩、变形,贴壁细胞脱落;MTT结果显示,松萝烟酰胺对SGC-7901增殖抑制作用呈明显的浓度依赖性和时间依赖性;AnnexinV/PI双染结果显示,松萝烟酰胺使SGC-7901细胞的晚期凋亡率增加,且DAPI染色可观察到明显的细胞凋亡的核浓缩、核碎裂;流式结果显示,松萝烟酰胺使SGC-7901细胞周期停滞在S期;划痕实验显示,随着时间的延长、浓度的增加,松萝烟酰胺使SGC-7901细胞迁移率下降越明显。结论松萝烟酰胺对SGC-7901细胞具有增殖抑制作用,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡、阻滞细胞于S期,从而抑制细胞的迁移。 展开更多
关键词 松萝烟酰胺 胃癌SGC-7901细胞 增殖 细胞凋亡 细胞周期 细胞划痕实验
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慢病毒转导敲低Smad7表达对大鼠原代心肌成纤维细胞增殖、迁移、细胞表型分化和Ⅰ型胶原蛋白表达的影响 被引量：1
5
作者 罗红 高歌 +3 位作者 张光琼 刘欢 杨红宇 沈祥春 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期578-584,共7页
目的探讨Smad7敲低后对原代心肌成纤维细胞增殖、迁移、胶原分泌和细胞表型转化的影响。方法原代培养10只SD大鼠乳鼠的心肌成纤维细胞,免疫组织化学染色鉴定细胞。采用慢病毒转染方法敲低心肌成纤维细胞Smad7的表达,Western blotting验... 目的探讨Smad7敲低后对原代心肌成纤维细胞增殖、迁移、胶原分泌和细胞表型转化的影响。方法原代培养10只SD大鼠乳鼠的心肌成纤维细胞,免疫组织化学染色鉴定细胞。采用慢病毒转染方法敲低心肌成纤维细胞Smad7的表达,Western blotting验证Smad7蛋白敲低效率,实时无标记细胞仪检测心肌成纤维细胞的增殖情况,细胞划痕实验检测细胞的迁移情况,Western blotting检测Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果成功培养心肌成纤维细胞,并进行细胞鉴定。慢病毒转染的心肌成纤维细胞感染复数(MOI)值为100,转染后88.33%的细胞表达绿色荧光蛋白,慢病毒敲低组Smad7的蛋白表达明显下调(P<0.05)。慢病毒敲低Smad7后细胞增殖明显下降(P<0.01),细胞迁移率明显减少(P<0.01)。与对照组相比,慢病毒敲低组细胞ColⅠ表达明显下降(P<0.01),α-SMA表达明显升高(P<0.01)。结论Smad7表达敲低后,心肌成纤维细胞的细胞功能发生明显改变,这些改变可能与Smad7下调导致心肌纤维化程度加重有关。 展开更多
关键词 心肌成纤维细胞 慢病毒沉默 SMAD7 α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原蛋白 实时无标记细胞分析术 细胞划痕实验 大鼠
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