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单纯Ⅱ型胶原酶消化法分离、培养人退变椎间盘髓核细胞的形态学观察 被引量:13
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作者 王锋 吴小涛 +2 位作者 王运涛 邵建树 张明 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期300-304,共5页
目的:探讨单纯Ⅱ型胶原酶消化法体外培养扩增人退变椎间盘髓核细胞的可行性。方法:收集20例人退变椎间盘髓核,单纯Ⅱ型胶原酶消化分离出髓核细胞并连续培养传代,倒置相差显微镜和HE染色观察细胞形态学变化,甲苯胺蓝染色检测髓核细胞内... 目的:探讨单纯Ⅱ型胶原酶消化法体外培养扩增人退变椎间盘髓核细胞的可行性。方法:收集20例人退变椎间盘髓核,单纯Ⅱ型胶原酶消化分离出髓核细胞并连续培养传代,倒置相差显微镜和HE染色观察细胞形态学变化,甲苯胺蓝染色检测髓核细胞内聚集蛋白聚糖的表达,免疫细胞化学法行Ⅱ型胶原染色,观察髓核细胞的类软骨表型表达情况。结果:单纯Ⅱ型胶原酶消化法可较好的分离培养人退变椎间盘髓核细胞,20例人退变椎间盘髓核,培养成功16例;原代髓核细胞平均7d贴壁,呈类圆形或多角形,P1代髓核细胞平均12h贴壁,呈大梭形或多角形,两代细胞融合95%所需时间分别为30d和7d,差异有统计学意义(P<0.01);聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原主要表达于原代和P1代髓核细胞浆内,被甲苯胺蓝染成天蓝色,免疫细胞化学染色主要表现为黄褐色沉淀,两代间聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达无统计学差异(P>0.05)。结论:单纯Ⅱ型胶原酶消化法可简化髓核细胞分离步骤,提高培养效率;传一代后髓核细胞增殖速率提高,但仍维持类软骨表型,表达聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原。 展开更多
关键词 椎间盘退行性变 髓核细胞 胶原酶 细胞培养 甲苯胺蓝 免疫细胞化学
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辽宁省首次发现的新布尼亚病毒其培养特性的研究 被引量:11
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作者 刘芸 姚文清 +9 位作者 耿英芝 孙英伟 陈静乙 王博 韩仰欢 孙海波 雷露 李建东 于丹梅 宫润妍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期237-240,共4页
目的探讨发热伴粒细胞血小板减少综合征布尼亚病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunya-virus,SFTSV)在细胞分离培养时表现的特异性。方法收集发病一周以内发热伴粒细胞血小板减少综合征患者的血液,首先做血清学检测排... 目的探讨发热伴粒细胞血小板减少综合征布尼亚病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunya-virus,SFTSV)在细胞分离培养时表现的特异性。方法收集发病一周以内发热伴粒细胞血小板减少综合征患者的血液,首先做血清学检测排除汉坦病毒(Hantavirus,HV),然后将样本采用多种细胞培养的方法进行病毒分离。最后采用逆转录(RT-PCR)方法对病毒进行鉴定。结果从我省发热伴出血征候群血液样本分离出病毒12株,经鉴定均为新布尼亚病毒。结论我省东部山区及丘陵地带有新布尼亚病毒流行,其临床症状及体征与肾综合征出血热极为相似。但体外细胞培养及核苷酸序列却存在着明显的差别。 展开更多
关键词 新布尼亚病毒 RT-PCR 细胞培养
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远志皂苷元对新生大鼠海马神经干细胞分化的影响 被引量:10
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作者 陈玉静 黄小波 +1 位作者 陈文强 王宁群 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2014年第11期1028-1030,共3页
目的观察远志皂苷元对体外培养的胎鼠海马神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法利用无血清DMEM/F12体外培养技术从新生Wistar大鼠大脑海马中培养NSCs,添加不同浓度(0、1、2、4μg/ml)远志皂苷元。应用免疫荧光技术对NSCs及其分化后的... 目的观察远志皂苷元对体外培养的胎鼠海马神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法利用无血清DMEM/F12体外培养技术从新生Wistar大鼠大脑海马中培养NSCs,添加不同浓度(0、1、2、4μg/ml)远志皂苷元。应用免疫荧光技术对NSCs及其分化后的细胞进行鉴定。结果培养的NSCs能够表达Nestin,并具有分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞的能力。在同一接种密度条件下,远志皂苷元干预组的Nestin阳性细胞数较对照组减少(P<0.05),神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞数较对照组增加(P<0.05)。结论远志皂苷元能促进新生大鼠大脑海马NSCs的分化。 展开更多
关键词 远志皂苷元 神经干细胞 细胞培养 细胞分化 大鼠
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白细胞介素-1β诱导人椎间盘髓核细胞凋亡 被引量:5
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作者 王新光 叶伟 +4 位作者 郭汉明 康明 陈秋兰 杜开利 黄东生 《中国医药导报》 CAS 2011年第21期20-24,共5页
目的:探讨人正常椎间盘髓核细胞的培养方法以及白细胞介素-1β(IL-1β)对人椎间盘髓核细胞凋亡的作用。方法:取特发性脊柱侧弯患者腰椎间盘髓核组织,用胰酶、胶原酶序贯消化法消化细胞,并用甲苯胺蓝、番红-O染色和Ⅱ型胶原免疫组化分别... 目的:探讨人正常椎间盘髓核细胞的培养方法以及白细胞介素-1β(IL-1β)对人椎间盘髓核细胞凋亡的作用。方法:取特发性脊柱侧弯患者腰椎间盘髓核组织,用胰酶、胶原酶序贯消化法消化细胞,并用甲苯胺蓝、番红-O染色和Ⅱ型胶原免疫组化分别检测糖胺多糖、蛋白多糖和Ⅱ型胶原表达,分别用20μg/L和200μg/L重组人IL-1β刺激髓核细胞24 h,检测其凋亡率。结果:用酶消化法可成功分离培养人椎间盘髓核细胞,检测所培养细胞可表达糖胺多糖、蛋白多糖和Ⅱ型胶原,IL-1β20μg/L组中细胞凋亡率(8.46%)和IL-1β200μg/L组(19.00%)分别为空白对照组(2.86%)的2.95倍和6.63倍(P<0.05),IL-1β200μg/L组是IL-1β20μg/L组的2.24倍(P<0.05)。结论:用酶消化法可成功培养人椎间盘髓核细胞,IL-1β可以诱导椎间盘髓核细胞凋亡,并且随着浓度升高凋亡率增加,提示炎症因子IL-1β在退变椎间盘细胞凋亡中起了重要的作用。 展开更多
关键词 椎间盘退变 髓核细胞 细胞培养 白细胞介素-1Β 凋亡
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兔不同节段椎间盘髓核细胞培养特性的比较 被引量:5
5
作者 于占革 杨威 +3 位作者 温莹 徐学振 魏伟 李念龙 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期689-693,共5页
目的:探讨兔颈段、胸段及腰段椎间盘髓核细胞的培养特性。方法:3~4月龄兔10只,麻醉后,在无菌条件下手术分离整段脊柱,分别取颈段(C1/2~C7/T1)、胸段(T1/2~T7/L1)、腰段(L1/2~L7/S1)髓核细胞进行培养,于培养后的24h计算贴壁率。并于... 目的:探讨兔颈段、胸段及腰段椎间盘髓核细胞的培养特性。方法:3~4月龄兔10只,麻醉后,在无菌条件下手术分离整段脊柱,分别取颈段(C1/2~C7/T1)、胸段(T1/2~T7/L1)、腰段(L1/2~L7/S1)髓核细胞进行培养,于培养后的24h计算贴壁率。并于贴壁后的第3、7、14及21天计算细胞死亡/成活比,判断细胞活力并检测蛋白多糖的含量。结果:颈段、胸段、腰段细胞贴壁率差异具有显著性,腰段细胞贴壁率最高(P<0.01)。不同节段之间,在多个时间点观察髓核细胞死亡/存活比差异具有显著性,腰段椎间盘髓核细胞的死亡/成活比最低(P<0.01)。不同节段之间,不同时间点观察的蛋白多糖含量差异具有显著性,且腰段椎间盘髓核细胞的蛋白多糖含量最高(P<0.01)。结论:腰段椎间盘髓核细胞较颈段及胸段的髓核细胞生长状态好,兔腰椎髓核细胞更适宜作为细胞培养的种子细胞。 展开更多
关键词 髓核细胞 不同节段 细胞活力 细胞培养
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人脐带华通胶间充质干细胞的分离培养及标记方法研究 被引量:2
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作者 韩华 李洁 +1 位作者 薛改 张俊勤 《医疗卫生装备》 CAS 2016年第12期28-31,共4页
目的 :探讨从人脐带华通胶中分离培养间充质干细胞的方法,并对细胞进行标记,为细胞移植奠定基础。方法:采用组织块贴壁法分离培养人脐带华通胶间充质干细胞并进行传代,观察细胞的形态学特征,测定细胞生长曲线,通过流式细胞仪检测细胞免... 目的 :探讨从人脐带华通胶中分离培养间充质干细胞的方法,并对细胞进行标记,为细胞移植奠定基础。方法:采用组织块贴壁法分离培养人脐带华通胶间充质干细胞并进行传代,观察细胞的形态学特征,测定细胞生长曲线,通过流式细胞仪检测细胞免疫表型;用荧光染料PKH26对获取的细胞进行体外标记,观察标记细胞形态并记录其生长曲线。结果:组织块贴壁法可以成功地从人脐带华通胶中培养出间充质干细胞,并且在连续增殖传代过程中细胞形态未发生明显变化,细胞生长曲线相似;细胞能够高表达基质细胞抗原(CD29、CD90、CD44、CD105),而低表达造血干细胞抗原(CD34、CD45)和白细胞相关抗原(HLA-DR);PKH26可以标记脐带间充质干细胞,显示红色荧光,且标记细胞形态良好,与未标记细胞的生长曲线相似。结论:组织块贴壁法是一种简便有效的分离脐带间充质干细胞的方法;应用PKH26体外标记细胞成功率高、技术稳定。 展开更多
关键词 脐带华通胶 间充质干细胞 细胞培养 细胞标记 细胞移植
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人血管内皮细胞的体外培养 被引量:1
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作者 曹罡 郭婷 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2004年第3期151-153,共3页
目的 :观察体外培养的血管内皮细胞的生物学特性。方法 :应用酶消化法获取人主动脉和脐静脉血管内皮细胞 ,体外培养并传代 ;观察细胞形态、测定生长曲线和培养液中 6 -酮 -PGF1α的分泌量 ,应用免疫组化法对其进行鉴定 ,并对两种来源内... 目的 :观察体外培养的血管内皮细胞的生物学特性。方法 :应用酶消化法获取人主动脉和脐静脉血管内皮细胞 ,体外培养并传代 ;观察细胞形态、测定生长曲线和培养液中 6 -酮 -PGF1α的分泌量 ,应用免疫组化法对其进行鉴定 ,并对两种来源内皮细胞的生物学特性进行比较。结果 :应用酶消化法成功获取了人主动脉和脐静脉血管内皮细胞。两种来源的内皮细胞细胞形态相仿 ,均具有较强的生长增殖能力 ,在细胞对数生长期分泌PGI2 的能力旺盛。结论 :人主动脉和脐静脉均是良好的血管内皮细胞来源材料 ,适于体外培养 ,二者的生物学特性相似。 展开更多
关键词 内皮细胞 细胞培养 生物学特性
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构建大段组织工程骨的新型生物反应器的设计与制造 被引量:1
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作者 张宇 王臻 +2 位作者 栗向东 卢建熙 李涤尘 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第3期404-409,共6页
目的:设计、制造一种新的灌注式生物反应器,专门用于高效地构建大体积、β-磷酸三钙组织工程骨。方法:在普通模式灌注生物反应器的灌流室内生成间断性低压环境(-0.01 mpa,0.5 Hz),用材料色素颗粒洗脱实验进行验证后,将复合兔骨髓间充质... 目的:设计、制造一种新的灌注式生物反应器,专门用于高效地构建大体积、β-磷酸三钙组织工程骨。方法:在普通模式灌注生物反应器的灌流室内生成间断性低压环境(-0.01 mpa,0.5 Hz),用材料色素颗粒洗脱实验进行验证后,将复合兔骨髓间充质干细胞的大段、管状β-磷酸三钙材料分别在静态、反应器内常压灌注和间断低压灌注三种环境下培养4周。期间收集培养液检测葡萄糖日耗量、细胞活力(MTT比色法)、碱性磷酸酶比活性、骨桥蛋白水平,并进行硬组织切片检查。结果:色素颗粒洗脱实验证明,间断性低压可以改善低流量液流在材料内的分布;在培养2周和4周时,负压灌注组日均葡萄糖消耗量和细胞活力均显著高于常压灌注组:(t=20.254 P<0.05,t=64.794 P<0.05)及(t=17.586 P<0.05,t=7.583 P<0.05);碱性磷酸酶(ALP)比活性测定和骨桥蛋白水平(OPN)反映间断低压灌注组中骨髓间充质细胞向成骨细胞分化效率更高,但高峰相晚于常压灌注组和静态培养组;在间断低压灌注组中材料深部的占孔率最高,并且分布更均匀。结论:此新型灌注式生物反应器适用于构建大体积、特殊构型组织工程骨;其高效的促进细胞增殖效应可减少初始复合的种子细胞数量,缩短构建周期。 展开更多
关键词 生物反应器 组织工程骨 骨髓间充质细胞 细胞培养
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Structured PDMS Chambers for Enhanced Human Neuronal Cell Activity on MEA Platforms
9
作者 Joose Kreutzer Laura Yla-Outinen +5 位作者 Paula Karna Tiina Kaarela Jarno Mikkonen Heli Skottman Susanna Narkilahti Pasi KaUio 《Journal of Bionic Engineering》 SCIE EI CSCD 2012年第1期1-10,共10页
Structured poly(dimethylsiloxane) (PDMS) chambers were designed and fabricated to enhance the signaling of human Embryonic Stem Cell (hESC) - derived neuronal networks on Microelectrode Array (MEA) platforms. ... Structured poly(dimethylsiloxane) (PDMS) chambers were designed and fabricated to enhance the signaling of human Embryonic Stem Cell (hESC) - derived neuronal networks on Microelectrode Array (MEA) platforms. The structured PDMS chambers enable cell seeding on restricted areas and thus, reduce the amount of needed coating materials and cells. In addition, the neuronal cells formed spontaneously active networks faster in the structured PDMS chambers than that in control chambers. In the PDMS chambers, the neuronal networks were more active and able to develop their signaling into organized signal trains faster than control cultures. The PDMS chamber design enables much more repeatable analysis and rapid growth of functional neuronal network in vitro. Moreover, due to its easy and cheap fabrication process, new configurations can be easily fabricated based on investigator requirements. 展开更多
关键词 cell culturing electrical activity human embryonic stem cells microelectrode array poly(dimethylsiloxane)
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用于细胞培养的便携式电刺激器设计与实现
10
作者 邓维礼 楮文俊 黄欣杰 《传感器与微系统》 CSCD 2017年第5期113-115,119,共4页
设计了一种以STC89C51单片机为核心的数字化多功能电刺激器,可根据用户需要产生直流、方波、正弦波、三角波和锯齿波共5种类型的电刺激信号,同时可实现各个波形的幅值和频率可调,其幅值输出范围为0~5 V,频率范围为0~10 k Hz,实现相同温... 设计了一种以STC89C51单片机为核心的数字化多功能电刺激器,可根据用户需要产生直流、方波、正弦波、三角波和锯齿波共5种类型的电刺激信号,同时可实现各个波形的幅值和频率可调,其幅值输出范围为0~5 V,频率范围为0~10 k Hz,实现相同温度、湿度及培养基环境条件下,细胞培养过程中的电信号刺激以及高通量筛选。 展开更多
关键词 电刺激器 细胞培养 单片机 高通量
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肝细胞培养液液面乙烷测定与脂质过氧化作用
11
作者 张阳 闫小君 +1 位作者 强蕴蕴 李广元 《西安医科大学学报》 CSCD 1993年第2期153-155,161,共4页
建立了乙烷气相色谱测定法,并用该法检测了低硒大鼠胎肝细胞及肝组织体外培养液液面气体乙烷的含量,同时与加硒组作了比较。结果有显著差异,提示乙烷的含量是代表脂质过氧化的良好指标,有较高的推广应用价值。
关键词 乙烷 气相色谱 细胞培养
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细胞培养法评价生物材料生物相容性研究进展 被引量:49
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作者 梁卫东 石应康 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第1期86-90,共5页
细胞培养法检测材料生物相容性是一种快速、简便、重复性好又价廉的方法,在材料生物相容性评价中起着越来越重要的作用。由于新材料不断涌现、材料植入体内的部位及使用目的日趋繁杂、材料毒性作用的强弱以及材料与机体反应的复杂性等... 细胞培养法检测材料生物相容性是一种快速、简便、重复性好又价廉的方法,在材料生物相容性评价中起着越来越重要的作用。由于新材料不断涌现、材料植入体内的部位及使用目的日趋繁杂、材料毒性作用的强弱以及材料与机体反应的复杂性等因素决定了细胞毒性试验中实验方法及实验细胞的多样性。根据生物材料本身的理化特性、植入体内的部位及使用目的选择适当的实验方法和实验细胞至关重要。以往对材料生物相容性的评价往往着眼于细胞的形态与数量的变化,近几年来研究材料对细胞生长、附着、增殖及代谢方面影响的报道日趋增多,并提出了以有活力的细胞数和细胞生长作为材料生物相容性评价标准的观点。通过结合免疫、化学、放射及影像学等多学科的技术发展,使人们进一步深入了解细胞结构和功能的变化关系,进而阐明材料对细胞的作用机制,是今后细胞培养法评价材料生物相容性的发展方向。 展开更多
关键词 生物材料 细胞培养 细胞毒性 生物相容性
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新生大鼠脑源性神经干细胞培养方法的优化 被引量:5
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作者 赵志英 胡海涛 +1 位作者 师社会 许杰华 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期544-547,共4页
目的寻求较理想的新生大鼠脑源性神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)分离培养方法。方法用不同的接种密度和多种配方的培养基:细胞种植密度采用1×104、1×105、1×106和1×107个/ml4个浓度;培养基除基础成分DMEM/F12外... 目的寻求较理想的新生大鼠脑源性神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)分离培养方法。方法用不同的接种密度和多种配方的培养基:细胞种植密度采用1×104、1×105、1×106和1×107个/ml4个浓度;培养基除基础成分DMEM/F12外,按照是否添加2%B27、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)以及开始培养时胎牛血清浓度不同而分别记为第1~8组。分离培养新生大鼠脑源性NSCs并诱导其分化,应用相差显微镜和免疫细胞化学法对其进行观察和比较。结果分离培养出的细胞聚集成神经球,可在体外大量增殖和长期存活,可诱导分化为神经元和神经胶质,具有神经干细胞特性。开始培养时培养液中加入5%胎牛血清有利于NSCs存活,当血清浓度采用10%时,克隆球迅速分化,干细胞收获量极少;干细胞增生速度在种植密度采用1×106个/ml时优于采用其它种植密度时,适当提高其种植密度可加快增生速度;培养基中加入2%B27、bFGF、EGF是必需的,2%B27、20ng/ml的bFGF和EGF同时加入时NSCs生长最好,bFGF和EGF对加快NSCs的增生具有协同作用。结论成功建立了较理想的新生大鼠脑源性NSCs分离培养方法,为进一步研究和应用奠定了基础。 展开更多
关键词 神经干细胞 大鼠 细胞免疫化学 细胞培养 生长因子
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新生大鼠骨骺前软骨干细胞培养及细胞库建立 被引量:6
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作者 游洪波 陈安民 程浩 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期238-240,共3页
目的 建立新生大鼠骨骺前软骨干细胞 (precartilagious stem cells,PSCs)库 ,为 PSCs作为组织工程种子细胞修复骨骺损伤的研究奠定基础。 方法 利用磁性细胞分选系统分离纯化有成纤维细胞生长因子受体 3(fibroblast growth factor re... 目的 建立新生大鼠骨骺前软骨干细胞 (precartilagious stem cells,PSCs)库 ,为 PSCs作为组织工程种子细胞修复骨骺损伤的研究奠定基础。 方法 利用磁性细胞分选系统分离纯化有成纤维细胞生长因子受体 3(fibroblast growth factor receptor3,FGFR- 3)表面标志的骨骺 PSCs。将纯化后的 PSCs体外扩增至第 3代 ,采用液氮深低温保存细胞 ,应用 RT- PCR、免疫组织化学及免疫荧光等技术定期 (2、4周 )对复苏 PSCs行生物学特性鉴定。 结果 复苏后 PSCs存活率高 (>95 % ) ,细胞生长周期稍滞后。RT- PCR、免疫组织化学及免疫荧光检测均有较强的 FGFR- 3表达。经液氮冻存的 PSCs在细胞增殖、表型特征方面无显著变化 ,基本保持了原代 PSCs的生物学特性。 结论 成功建立了新生大鼠 PSCs细胞库 ,为应用组织工程技术修复骨骺损伤的研究提供良好的种子细胞。 展开更多
关键词 软骨干细胞 细胞培养 成纤维细胞生长因子受体3 新生大鼠 细胞库 骨骺损伤 骨修复
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成年皮肤干细胞原位培植研究的哲学思考
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作者 周建大 陈道瑾 罗成群 《中国烧伤创疡杂志》 2002年第3期189-191,共3页
干细胞是动物体内一种独特的基本细胞类型 ,当分化时 ,有些可发展成为特殊类型的细胞、组织和器官 ,另一些仍维持干细胞 ,准备替代机体损伤和衰老的细胞。它们本身能自我复制 ,以供机体终生组织更新的需要。干细胞的培育研究为人类治疗... 干细胞是动物体内一种独特的基本细胞类型 ,当分化时 ,有些可发展成为特殊类型的细胞、组织和器官 ,另一些仍维持干细胞 ,准备替代机体损伤和衰老的细胞。它们本身能自我复制 ,以供机体终生组织更新的需要。干细胞的培育研究为人类治疗破坏性和消耗性疾病带来了新的希望。国外学者着重于干细胞的离体培育研究 ,而我国徐荣祥运用整体性原则构建了成年皮肤干细胞生长发育的微环境 ,已原位培植成功 ,使烧伤创面达到再生愈合。 展开更多
关键词 皮肤干细胞 成年干细胞 原位培养 细胞培养 组织工程 医学伦理 离体培养
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TGF-β3对PLGA支架3-D培养兔髓核细胞影响的体外研究
16
作者 辛龙 徐卫星 +3 位作者 俞雷钧 宋洪浦 范顺武 王振斌 《中国生化药物杂志》 CAS 2016年第9期30-35,共6页
目的评价转化生长因子β3(transforming growth factor-β,TGF-β3)对兔髓核细胞在聚乳酸-羟基乙酸共聚物(polylacticco-glycolic acid,PLGA)支架3-D培养的影响。方法应用粒子沥滤法制备多孔PLGA支架培养兔髓核细胞(1×106/PLGA),分... 目的评价转化生长因子β3(transforming growth factor-β,TGF-β3)对兔髓核细胞在聚乳酸-羟基乙酸共聚物(polylacticco-glycolic acid,PLGA)支架3-D培养的影响。方法应用粒子沥滤法制备多孔PLGA支架培养兔髓核细胞(1×106/PLGA),分为100ng/m L TGF-β3/PLGA,500 ng/m L TGF-β3/PLGA,1μg/m L TGF-β3/PLGA,PLGA对照组。通过MTT分析细胞增殖分化,1,9-二甲基亚甲蓝(DMMB)法检测糖胺多糖(GAG),q PCR检测Ⅱ型胶原(COLⅡ)、Aggrean差异,组织学观察TGF-β3对兔髓核细胞在PLGA支架微孔环境生长形态学改变。结果培养7、14、21 d后TGF-β3/PLGA组的髓核细胞活性、GAG产量、COL II及Aggrecan mRNA表达均高于PLGA对照组(P<0.05)。随着TGF-β3浓度递增,细胞活性及基质表达有显著增加(P<0.05)。21 d组织学HE染色显示TGF-β3/PLGA组较PLGA对照组中微孔支架吸附、积聚更多髓核细胞生长。结论 TGF-β3对PLGA三维培养髓核细胞更好提高分化增殖能力,促进细胞基质分泌。TGF-β3/PLGA支架可作为生物学治疗退变椎间盘病变潜在选择方法。 展开更多
关键词 TGF-Β3 PLGA支架 兔髓核细胞 3-D培养
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人骨髓间充质干细胞的培养及多能性研究 被引量:48
17
作者 傅文玉 路艳蒙 朴英杰 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期202-204,共3页
目的 培养人骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)并检测其多能性。方法 抽取人胚胎股骨骨髓 ,Percoll分离液梯度分离后 ,将含MSC的低密度层培养于MSCGM培养基并扩增MSC。将MSC种植于裸鼠皮下 ,4周后观察MSC的分化情况。结果... 目的 培养人骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)并检测其多能性。方法 抽取人胚胎股骨骨髓 ,Percoll分离液梯度分离后 ,将含MSC的低密度层培养于MSCGM培养基并扩增MSC。将MSC种植于裸鼠皮下 ,4周后观察MSC的分化情况。结果 成功地进行了人MSC的原代和传代培养。植入裸鼠体内后MSC可分化成骨、软骨、脂肪、骨骼肌、肌腱样组织等结构。 展开更多
关键词 间充质干细胞 细胞培养 细胞分化 骨髓 组织工程
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细胞培养液乳酸脱氢酶漏出率的比色测定及其应用 被引量:70
18
作者 洪庆涛 宋岳涛 +1 位作者 唐一鹏 刘春梅 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期89-92,共4页
采用乳酸脱氢酶比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶的漏出率是一个稳定而实用的指标。本法既可客观衡量细胞的受损程度,也可进行药物干预的正确评价,也是进行药物筛选的一种有效方法。
关键词 细胞培养液 乳酸脱氢酶 漏出率 比色测定
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淫羊藿甙对体外培养成骨细胞增殖和分化的影响 被引量:65
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作者 王俊勤 胡有谷 +1 位作者 郑洪军 齐宗华 《中国临床康复》 CSCD 2002年第9期1307-1308,共2页
目的探讨淫羊藿甙对体外培养成骨细胞增殖和分化的影响及其作用机制。方法采用体外成骨细胞培养技术,进行细胞计数和碱性磷酸酶活性测定,观察淫羊藿甙对成骨细胞生长增殖和分化的影响。结果(1)不同浓度的淫羊藿甙对成骨细胞的生长增殖... 目的探讨淫羊藿甙对体外培养成骨细胞增殖和分化的影响及其作用机制。方法采用体外成骨细胞培养技术,进行细胞计数和碱性磷酸酶活性测定,观察淫羊藿甙对成骨细胞生长增殖和分化的影响。结果(1)不同浓度的淫羊藿甙对成骨细胞的生长增殖均有促进作用,以10ng/ml浓度时其作用最强(P<0.05);(2)淫羊藿甙可明显抑制分化早期成骨细胞内ALP活性,而对分化晚期成骨细胞内ALP活性具有促进作用;(3)淫羊藿甙对成骨细胞的作用与药物作用时间有关。结论淫羊藿甙促进成骨细胞增殖的同时,增强了成骨细胞活性。 展开更多
关键词 淫羊藿甙 成骨细胞 细胞培养 碱性磷酸酶 骨质疏松
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海藻酸钠和壳聚糖聚电解质微胶囊及其生物医学应用 被引量:72
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作者 刘袖洞 于炜婷 +3 位作者 王为 雄鹰 马小军 袁权 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第1期126-139,共14页
本文综述了天然多糖聚电解质海藻酸钠和壳聚糖的结构与化学性能(包括凝胶性能、生物相容性、生物可降解性及温和反应性);微胶囊制备技术及其强度性能和膜渗透性评价方法;微胶囊作为细胞载体在体内分泌治疗性物质(如:胰岛素、多巴胺)或... 本文综述了天然多糖聚电解质海藻酸钠和壳聚糖的结构与化学性能(包括凝胶性能、生物相容性、生物可降解性及温和反应性);微胶囊制备技术及其强度性能和膜渗透性评价方法;微胶囊作为细胞载体在体内分泌治疗性物质(如:胰岛素、多巴胺)或分解代谢毒性物质(如:尿素),作为三维药物筛选系统、干细胞增殖分化研究工具,以及药物释放载体等生物医学领域的研究进展;最后讨论了天然多糖微胶囊在研究与应用中需要解决的问题。 展开更多
关键词 海藻酸钠 壳聚糖 聚电解质 微胶囊 细胞移植 细胞培养 药物输送
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