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MTT法和CCK-8法检测悬浮细胞增殖的比较 被引量:60
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作者 侯春梅 李新颖 +3 位作者 叶伟亮 曹曦元 肖鹤 黎燕 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2009年第4期400-400,F0003,共2页
关键词 细胞增殖 MTT cck-8 检测 TDR掺入 MTT比色 悬浮 细胞学实验
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CCK-8法与MTT法检测人前列腺癌PC3细胞活性的比较研究 被引量:32
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作者 万文婷 李宁 +1 位作者 刘静 金林红 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期3046-3048,共3页
目的探讨CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。方法以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,采用CCK-8和MTT法检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞增殖的影响。结果 CCK-8法的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量... 目的探讨CCK-8法和MTT法的最佳实验条件。方法以人前列腺癌PC3细胞作为研究对象,采用CCK-8和MTT法检测抗肿瘤药物阿霉素(ADM)对PC3细胞增殖的影响。结果 CCK-8法的最佳检测波长为450 nm,最佳检测时间为加入CCK-8试剂后4 h,适宜细胞数量范围为8×102~1×105个。结论 CCK-8法较MTT法检测的灵敏度高,准确性好,是一种优于MTT法的检测细胞增殖活性的方法。 展开更多
关键词 cck-8 MTT 检测时间 人前列腺癌 PC3细胞增殖 细胞增殖活性 比较研究 Cell Proliferation Experiment Study 抗肿瘤药物 研究对象 数量范围 实验条件 灵敏度高 检测波长 准确性 阿霉素 试剂
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提取溶剂对何首乌肝细胞毒性的影响 被引量:33
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作者 吕旸 王伽伯 +10 位作者 嵇扬 赵艳玲 马致洁 李奇 邹正升 梁庆生 滕光菊 鄢丹 张萍 肖小河 喻长远 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第20期268-272,共5页
目的:比较不同溶剂提取何首乌对肝细胞毒性的差异,探讨提取方式对何首乌安全性的影响。方法:制备不同提取方式的何首乌样品,均按生药量的5 g·L-1给药,以CCK-8法检测人肝细胞(L02细胞)抑制率为评价指标,考察提取溶剂,溶剂量和提取时... 目的:比较不同溶剂提取何首乌对肝细胞毒性的差异,探讨提取方式对何首乌安全性的影响。方法:制备不同提取方式的何首乌样品,均按生药量的5 g·L-1给药,以CCK-8法检测人肝细胞(L02细胞)抑制率为评价指标,考察提取溶剂,溶剂量和提取时间3个因素对何首乌肝细胞毒性的影响。同时建立何首乌的UPLC指纹图谱,采用偏最小二乘法(PLS)回归分析肝细胞毒性与化学成分之间的关系。结果:建立了基于CCK-8比色的何首乌对人正常肝细胞毒性的检测方法。何首乌75%乙醇提取物的肝细胞毒性显著>水提取(P<0.01)。进一步正交试验显示,乙醇浓度对何首乌肝细胞毒性具有显著性影响(P<0.01),提取物肝细胞毒性顺序:50%乙醇提取物>75%乙醇提取物>95%乙醇提取物。通过偏最小二乘法回归分析,发现了2个与毒性密切相关的色谱峰。结论:不同提取溶剂对何首乌肝细胞毒性有较大影响,50%乙醇提取物毒性最强,而何首乌泡酒主要采用50度左右的白酒,提示何首乌泡酒服用的方式可能有较大肝损害风险,应予以高度重视。 展开更多
关键词 何首乌 肝损害 cck-8 人肝细胞 谱-效相关
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台盼蓝拒染法、MTT法、CCK-8法在研究As_2O_3细胞毒性作用中的意义 被引量:32
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作者 陈冲 焦宁 +1 位作者 靖景艳 徐瑞荣 《中国医药导报》 CAS 2013年第12期24-26,共3页
目的筛选三氧化二砷(As203)对HL一60细胞毒性的有效剂量及作用时间的检测方法,并对其结果进行分析。方法采用台盼蓝拒染法、M1Tr法、CCK~8法测定不同浓度的As203,体外作用HL一60细胞株的细胞存活率.采用单因素方差分析其与剂量一... 目的筛选三氧化二砷(As203)对HL一60细胞毒性的有效剂量及作用时间的检测方法,并对其结果进行分析。方法采用台盼蓝拒染法、M1Tr法、CCK~8法测定不同浓度的As203,体外作用HL一60细胞株的细胞存活率.采用单因素方差分析其与剂量一时间依赖反应的关系。结果4.0、8.0μmol/L作用48、72h及8.0μmol/L作用24h被染细胞小于5%,其余均未观察到蓝染细胞。MTY法检测在1.0~8.0μmol/LAs20,剂量范围内培养24、48、72h(P〈0.05),各组均能够抑制HL-60细胞活性。CCK-8法检测在0.5~8.0μmol/LAs203剂量范嗣内培养24、48、72h(P〈0.05),各组均能够抑制HL-60细胞活性。HL-60细胞在不同时间、不同浓度均能出现细胞存活率明显降低,As20,的毒副作用呈现明显的剂量-时间依赖反应。结论在研究As203的细胞毒性时,用CCK-8法优于M11’法,均比台盼蓝法更为灵敏。 展开更多
关键词 台盼蓝拒染 MTT cck-8 三氧化二砷 HL-60 线粒体
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CCK-8法检测药物影响肿瘤细胞增殖的优化研究 被引量:24
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作者 张会鲜 何琪杨 《药学研究》 CAS 2016年第2期63-66,共4页
目的通过优化CCK-8的实验条件,提高检测药物影响肿瘤细胞增殖的敏感性和可靠性。方法以人肺癌A549细胞和白血病Molt-4细胞为研究对象,CCK-8法和MTT法分别检测细胞增殖的变化,并与Coulter细胞计数法和克隆形成率法进行比较。结果在相同... 目的通过优化CCK-8的实验条件,提高检测药物影响肿瘤细胞增殖的敏感性和可靠性。方法以人肺癌A549细胞和白血病Molt-4细胞为研究对象,CCK-8法和MTT法分别检测细胞增殖的变化,并与Coulter细胞计数法和克隆形成率法进行比较。结果在相同的细胞数下,CCK-8法的检测灵敏度明显高于MTT法。以细胞密度1 000个/孔接种,抗肿瘤药物多柔比星处理96 h后,CCK-8法检测到的变化与克隆形成率法相当。分析Molt-4悬浮细胞发现:CCK-8法与Coulter细胞计数法的检测灵敏度无明显差异(P>0.05)。结论优化实验条件后,CCK-8法是一种灵敏度高、可靠性良好的细胞增殖检测方法。 展开更多
关键词 cck-8 细胞增殖 药效 多柔比星
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大黄素对人胰腺癌Panc-1细胞增殖和凋亡的影响 被引量:20
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作者 刘岸 邓姿峰 +4 位作者 胡金喜 韩邵伟 黄莉莉 柯品妤 林胜璋 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期756-759,共4页
目的探讨大黄素对人胰腺癌细胞株Panc-1增殖和凋亡的影响。方法人胰腺癌细胞株Panc-1经不同浓度大黄素(10、20、40、80、160μmol/L)分别作用24、48、72 h后,应用CCK-8法检测细胞增殖,光学显微镜下观察细胞形态学改变,流式细胞术检测细... 目的探讨大黄素对人胰腺癌细胞株Panc-1增殖和凋亡的影响。方法人胰腺癌细胞株Panc-1经不同浓度大黄素(10、20、40、80、160μmol/L)分别作用24、48、72 h后,应用CCK-8法检测细胞增殖,光学显微镜下观察细胞形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡。结果大黄素对Panc-1细胞的增殖抑制作用呈明显的浓度和时间依赖性,20、40、80μmol/L大黄素作用Panc-1细胞24 h后凋亡率分别为7.1%、15.2%、21.4%。结论大黄素可显著抑制人胰腺癌Panc-1细胞生长,大黄素对人胰腺癌Panc-1细胞株的增殖抑制作用可能以诱导细胞凋亡方式为主。 展开更多
关键词 大黄素 胰腺癌 增殖 凋亡 cck-8
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CCK-8法评价口腔粘结材料的体外细胞毒性研究 被引量:18
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作者 邹颖 王文梅 +1 位作者 朱雅男 杨卫东 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期673-675,共3页
目的:CCK-8法评价口腔粘结材料的体外细胞毒性研究。方法:应用CCK-8比色法比较体外4种粘结材料(普通型玻璃离子、加强型玻璃离子、SuperBond C&B及SE BOND)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontalligament cell,HPDLC)的细胞毒性,... 目的:CCK-8法评价口腔粘结材料的体外细胞毒性研究。方法:应用CCK-8比色法比较体外4种粘结材料(普通型玻璃离子、加强型玻璃离子、SuperBond C&B及SE BOND)对人牙周膜成纤维细胞(human periodontalligament cell,HPDLC)的细胞毒性,初步探讨4种粘结材料的生物学性能。结果:4种粘结材料对HPDLC的生物相容性影响结果相似,其中普通型玻璃离子及SuperBond C&B无细胞毒性,加强型玻璃离子具极轻微细胞毒性,SE BOND具轻微细胞毒性。结论:4种粘结材料均满足口腔材料临床应用的生物相容性要求。 展开更多
关键词 cck-8 粘结材料 人牙周膜成纤维细胞 细胞毒性
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丹参酮ⅡA对TGF-β1诱导的人皮肤成纤维细胞增殖的影响及作用机制 被引量:17
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作者 许小琪 韩兵 +2 位作者 赖建辉 林宇建 时军 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第18期4685-4690,共6页
目的研究丹参酮ⅡA(TSA)对TGF-β1诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)的影响及作用机制。方法采用CCK-8法测定不同浓度TSA(2.5、5、10、20μmol/L)干预TGF-β1诱导HSF细胞增殖的影响;采用平板克隆形成实验分别分析不同浓度TSA处理48 h后HSF细... 目的研究丹参酮ⅡA(TSA)对TGF-β1诱导的人皮肤成纤维细胞(HSF)的影响及作用机制。方法采用CCK-8法测定不同浓度TSA(2.5、5、10、20μmol/L)干预TGF-β1诱导HSF细胞增殖的影响;采用平板克隆形成实验分别分析不同浓度TSA处理48 h后HSF细胞的克隆形成能力的变化;Western blotting检测HSF细胞中TGF-β1/Smad通路蛋白及α-SMA、VEGFA和COLI蛋白的表达水平。结果CCK-8和平板克隆形成实验结果表明,TSA显著抑制了HSF细胞的增殖和克隆形成能力(P<0.01);Western blotting结果显示,TSA各浓度组能够显著抑制p-Smad2和p-Smad3蛋白水平,下调p-Smad2/Smad2的比值(P<0.01)。5、10、20μmol/L TSA组明显下调p-Smad3/Smad3的比值;另外,HSF细胞中α-SMA、VEGFA和COLI蛋白表达水平随着TSA浓度的升高而显著降低(P<0.01)。结论TSA具有抑制HSF细胞增殖的能力,其作用机制可能与TGF-β1/Smad通路有关。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 人皮肤成纤维细胞 增生性瘢痕 增殖抑制 TGF-β1/Smad通路 cck-8 Western blotting α-SMA VEGFA COL I p-Smad2 p-Smad3
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应用CCK8法检测鸡淋巴细胞活性的检测最佳条件研究 被引量:15
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作者 刘素贞 曹晓敏 +3 位作者 许丽娟 白宇 卢立志 柴一秋 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第7期212-214,共3页
为了研究应用CCK-8法检测鸡淋巴细胞增殖的体外培养最佳条件,试验设置了不同种板细胞数、血清浓度、培养时间、孵育时间和检测波长等条件对其进行比较研究。结果表明:1 750 r/min转速的改良鸡外周血淋巴细胞分离方法效果最佳;在体外增... 为了研究应用CCK-8法检测鸡淋巴细胞增殖的体外培养最佳条件,试验设置了不同种板细胞数、血清浓度、培养时间、孵育时间和检测波长等条件对其进行比较研究。结果表明:1 750 r/min转速的改良鸡外周血淋巴细胞分离方法效果最佳;在体外增殖培养试验中,CCK-8加样4 h后在450 nm波长处检测OD值最理想,培养时间以44 h为最佳;在细胞数量一致的情况下,胎牛血清浓度为5%或者为10%差异不显著(P>0.05)。当细胞悬液浓度为1×10~6个/m L时,加入100,50,25,12.5μL不同细胞数,4组间比较均差异显著(P<0.05),并且随着细胞悬液浓度的增加OD值增加;最佳铺板细胞的细胞悬液浓度为2.0×10~6~3.0×10~6个/m L,取50~100μL为宜,即最佳细胞铺板数量控制在每孔1.5×10~5~2.0×10~5个/100μL。说明应用CCK-8法检测鸡外周血淋巴细胞活性的最佳条件除种板细胞数不同外,在检测波长、血清浓度、加样后孵化时间等方面与其他动物试验差别不大。 展开更多
关键词 cck-8 外周血淋巴细胞 增殖活性 检测波长 血清浓度 OD值
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4种细胞毒活性方法评价紫草素体外肿瘤细胞抑制作用效果 被引量:13
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作者 柴冰阳 陈泽慧 +2 位作者 张闪闪 应雪 张波 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期172-177,共6页
目的研究4种细胞毒活性测定方法对紫草素体外肿瘤细胞抑制作用的评价效果,对紫草萘醌为代表的天然色素在细胞毒活性评价中常出现的假阴性现象进行对比分析。方法将紫草素与其高敏感株急性早幼粒白血病HL-60细胞和低敏感株人非小细胞肺癌... 目的研究4种细胞毒活性测定方法对紫草素体外肿瘤细胞抑制作用的评价效果,对紫草萘醌为代表的天然色素在细胞毒活性评价中常出现的假阴性现象进行对比分析。方法将紫草素与其高敏感株急性早幼粒白血病HL-60细胞和低敏感株人非小细胞肺癌A549细胞体外共培养,通过台盼蓝法、磺酰罗丹明B(SRB)法、Cell Counting Kit-8(CCK-8)法和四甲基偶氮唑盐(MTT)法进行平行实验,测定紫草素在0.4~128μmol/L抑制细胞生长的量效关系曲线。结果台盼蓝法、SRB法、CCK-8法、MTT法测得紫草素对HL-60细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为0.57、0.77、1.36、1.01μmol/L,对A549细胞的IC50分别为6.30、10.38、13.48、15.24μmol/L。紫草素浓度分别在3.2、32μmol/L以下时,4种检测方法得到其对2种细胞的抑制率均呈线性增长,超过此浓度即出现差异。其中台盼蓝法与SRB法结果一致性良好,而MTT法与CCK-8法测得的抑制率较低。对于HL-60细胞,紫草素12.8μmol/L时,CCK-8测得抑制率为81%,台盼蓝法为96%;对于A549细胞,紫草素128μmol/L时,MTT法测得抑制率为89%,台盼蓝法为99%。紫草素的吸收光谱与甲臜在波长400~600 nm存在重叠,最大重叠峰在550~570nm,CCK-8试剂与紫草素对HL-60细胞存在协同抑制效应。台盼蓝法结果显示高浓度紫草素几乎完全杀死板孔内细胞,相比对照组差异显著,但MTT法和CCK-8法结果出现假阴性。结论紫草萘醌为代表的天然色素的细胞毒活性评价不建议使用MTT法和CCK-8法,推荐使用SRB法和台盼蓝法。 展开更多
关键词 紫草素 细胞毒活性评价 四甲基偶氮唑盐 磺酰罗丹明B cck-8 台盼蓝
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弓形虫对4种肿瘤细胞增殖及凋亡的影响 被引量:12
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作者 武欣 孙黎 +3 位作者 张力 刘正泉 罗强 张林西 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期157-159,共3页
用1×104个/ml^32×104个/ml 6个不同浓度刚地弓形虫RH株速殖子体外分别作用于对数生长期的乳腺癌MCF-7、前列腺癌DU-145、食管癌EC-109和肺癌A549细胞(5×104/ml)24 h,运用CCK-8法测定弓形虫对上述肿瘤细胞的抑制作用,计... 用1×104个/ml^32×104个/ml 6个不同浓度刚地弓形虫RH株速殖子体外分别作用于对数生长期的乳腺癌MCF-7、前列腺癌DU-145、食管癌EC-109和肺癌A549细胞(5×104/ml)24 h,运用CCK-8法测定弓形虫对上述肿瘤细胞的抑制作用,计算细胞抑制率。用1×104、2×104和4×104个/ml弓形虫速殖子体外作用于A549细胞24 h后,流式细胞仪检测肿瘤抑制基因P53和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)基因所编码蛋白质的表达情况。结果显示,随着弓形虫速殖子浓度升高,各肿瘤细胞增殖抑制率增高,其效果与剂量呈正相关。1×104个/ml弓形虫速殖子即对MCF-7、DU-145、EC-109和A549细胞增殖有抑制作用,其抑制率分别为19.7%、4.5%、28.0%和20.8%。各实验组肿瘤细胞增殖情况与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测A549细胞凋亡,凋亡率上升,且p53蛋白表达上调、Bcl-2蛋白表达下调。 展开更多
关键词 弓形虫 肿瘤细胞 流式细胞术 cck-8
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CCK-8法检测兔筋膜成纤维细胞增殖活性之最佳测试条件研究 被引量:12
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作者 辛培成 杨圣 +1 位作者 芦健民 赵德伟 《中外医学研究》 2011年第12期6-8,共3页
目的研究CCK-8法检测兔筋膜成纤维细胞(RFFBs)增殖活性的最佳测试条件。方法以兔筋膜作为成纤维细胞原代培养组织,利用传代至P3的成纤维细胞,对比CCK-8法在不同孵育时间及不同检测波长条件下吸光光度值的差异,研究CCK-8法检测兔筋膜成... 目的研究CCK-8法检测兔筋膜成纤维细胞(RFFBs)增殖活性的最佳测试条件。方法以兔筋膜作为成纤维细胞原代培养组织,利用传代至P3的成纤维细胞,对比CCK-8法在不同孵育时间及不同检测波长条件下吸光光度值的差异,研究CCK-8法检测兔筋膜成纤维细胞增殖活性的最佳检测时间及最佳检测波长。结果 CCK-8法检测兔筋膜成纤维细胞增殖活性的最佳检测时间为加入CCK-8试剂孵育后的4 h,最佳检测波长为450 nm。结论 CCK-8法在孵育4 h后及酶标仪450 nm波长下检测兔筋膜成纤维细胞的灵敏度最高。 展开更多
关键词 cck-8 成纤维细胞 增殖活性 测试条件
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CCK-8法检测九香虫血淋巴对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用 被引量:11
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作者 杨佳琪 檀军 +2 位作者 曹米兰 金道超 郭建军 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期193-197,220,共6页
为了明确九香虫血淋巴对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,本文利用Bradford法检测九香虫血淋巴浓度,用不同浓度的九香虫血淋巴处理体外培养的MCF-7细胞,采用CCK-8法检测九香虫血淋巴对MCF-7细胞的抑制作用。结果表明:九香虫血淋巴能显... 为了明确九香虫血淋巴对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,本文利用Bradford法检测九香虫血淋巴浓度,用不同浓度的九香虫血淋巴处理体外培养的MCF-7细胞,采用CCK-8法检测九香虫血淋巴对MCF-7细胞的抑制作用。结果表明:九香虫血淋巴能显著抑制人乳腺癌MCF-7细胞的生长,且对MCF-7的抑制率呈时间、剂量依赖关系。 展开更多
关键词 九香虫 血淋巴 乳腺癌 cck-8
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望江南蒽醌类成分的提取及抗肝癌活性研究 被引量:11
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作者 曾斐 李晓飞 +4 位作者 黄玉珊 周青 梁生林 宋晓琴 肖游章 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第9期2231-2235,I0014,共6页
目的:研究望江南蒽醌类成分的提取工艺及抗肝癌活性。方法:以植物望江南为研究对象,设计了望江南蒽醌类成分的提取工艺,并采用CCK-8法观察了望江南蒽醌类各化合物体外对肝癌细胞(HepG2)的可能作用。Hoechst 33258染色实验观察了胡萝卜... 目的:研究望江南蒽醌类成分的提取工艺及抗肝癌活性。方法:以植物望江南为研究对象,设计了望江南蒽醌类成分的提取工艺,并采用CCK-8法观察了望江南蒽醌类各化合物体外对肝癌细胞(HepG2)的可能作用。Hoechst 33258染色实验观察了胡萝卜苷、芦荟大黄素、大黄酚、大黄酸对Hep G2细胞凋亡的影响。结果:本文的提取工艺对望江南种子进行提取,结果分离并鉴定了7个化合物,分别为:β-谷甾醇(1)、胡萝卜苷(2)、大黄素甲醚吡喃葡糖苷(3)、大黄素甲醚(4)、芦荟大黄素(5)、大黄酚(6)、大黄酸(7)。其中,化合物1、2、3、5、7为首次从望江南中分离得到。胡萝卜苷、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酚、大黄酸等望江南中蒽醌类化合物均对肝癌Hep G2的具有抑制作用。不同望江南蒽醌类化合物对Hep G2细胞的抑制率是不同的。大黄酸药物干预组HepG2细胞凋亡比较明显,部分细胞核浓染呈亮蓝色,出现凋亡小体。结论:望江南可能具有良好的体外抗肝癌作用,作为天然抗肿瘤植物,具有很好的发展前景和开发利用价值。 展开更多
关键词 望江南 蒽醌类 化合物 提取工艺 肝癌 cck-8 Hoechst 33258染色
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何首乌中1个新的木脂素酰胺类化合物 被引量:10
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作者 杨建波 高慧宇 +8 位作者 王雪婷 宋云飞 段宝忠 程显隆 魏锋 王莹 汪祺 胡笑文 马双成 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期5475-5482,共8页
目的对何首乌Polygonum multiflorum 70%乙醇提取物进行化学成分研究,并考察部分化合物对正常人L02肝细胞生长的影响。方法采用大孔吸附树脂(DM-8型)、ODS反相硅胶、MCI和制备液相等多种色谱技术进行分离纯化,运用质谱和现代波谱学技术... 目的对何首乌Polygonum multiflorum 70%乙醇提取物进行化学成分研究,并考察部分化合物对正常人L02肝细胞生长的影响。方法采用大孔吸附树脂(DM-8型)、ODS反相硅胶、MCI和制备液相等多种色谱技术进行分离纯化,运用质谱和现代波谱学技术对化合物进行结构鉴定;采用CCK-8法,以细胞抑制率为评价指标,考察部分化合物对L02肝细胞生长的影响。结果从何首乌70%乙醇提取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为(E)-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-[N-2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]carbamoyl-5-[N-2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]carbamoylethenyl-7-methoxybenzofuran(1)、cannabisin D(2)、grossamide(3)、eleutherinol(4)、isolariciresinol(5)、N,N-二甲基-色氨酸甲酯(6)、N-反式-阿魏酰酪胺(7)和N-反式阿魏酰-3-甲氧基酪胺(8)。化合物1、7和8对L02肝细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为3.02、190.35、300.61μmol/L。结论化合物1为新的木脂素酰胺类化合物,命名为何首乌庚素。化合物2~6均为首次从该植物中分离得到,并通过二维核磁谱补充了化合物4和6的核磁数据。化合物1对正常人L02肝细胞具有较强的抑制作用。 展开更多
关键词 何首乌 何首乌庚素 cck-8 L02肝细胞 N N-二甲基-色氨酸甲酯 eleutherinol
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丁香油超高压提取工艺的优化及其抗肿瘤研究 被引量:9
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作者 曾琼瑶 张文静 +2 位作者 张昱 李源栋 郭强 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2020年第3期303-308,共6页
目的优化丁香油的提取工艺并研究其抗肿瘤活性。方法采用超高压提取丁香干燥花蕾中的精油,通过单因素试验与正交试验优化其取工艺;并通过CCK-8法检测丁香油对正常结肠上皮细胞、HT29和SW480两种结肠癌细胞的增殖抑制情况;采用Western B... 目的优化丁香油的提取工艺并研究其抗肿瘤活性。方法采用超高压提取丁香干燥花蕾中的精油,通过单因素试验与正交试验优化其取工艺;并通过CCK-8法检测丁香油对正常结肠上皮细胞、HT29和SW480两种结肠癌细胞的增殖抑制情况;采用Western Blot法检测丁香油处理后的两种结直肠癌细胞中凋亡相关蛋白的表达情况。结果通过单因素与正交试验确定的最佳提取条件为:粉碎粒度60目,料液比1:14,保压时间50 min,提取压力400 MPa;得率最高可达19.58%,相比传统水蒸气蒸馏提取法的得率提高了33.92%。CCK-8法结果显示:丁香油对HT29和SW480两种结肠癌细胞增殖的抑制呈现时间-剂量依赖性,差异具统计学意义,且对正常结肠上皮细胞无不良反应。Western Blot结果显示:与空白对照组比较,中、高浓度丁香油能显著上调细胞内促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达;低、中、高浓度丁香油均能显著下调细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论丁香油可抑制结肠癌细胞的生长。 展开更多
关键词 超高压提取 工艺优化 丁香 干燥花蕾 丁香油 结肠癌 增殖 凋亡 cck-8 Western Blot
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CCK-8法定量检测亚甲蓝对人髓核细胞的毒性 被引量:9
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作者 冯华龙 何升华 +4 位作者 黄飞强 赖居易 孙志涛 许福光 蓝志明 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第16期2532-2536,共5页
背景:前期细胞实验研究发现亚甲蓝确实对人髓核细胞具有毒性作用,且与药物浓度呈正相关,但是其毒性的临界范围未进行研究。目的:使用CCK-8法定量测定亚甲蓝对髓核细胞毒性作用的临界范围值。方法:选取1例椎间盘突出症患者的术后废弃髓... 背景:前期细胞实验研究发现亚甲蓝确实对人髓核细胞具有毒性作用,且与药物浓度呈正相关,但是其毒性的临界范围未进行研究。目的:使用CCK-8法定量测定亚甲蓝对髓核细胞毒性作用的临界范围值。方法:选取1例椎间盘突出症患者的术后废弃髓核组织,提取髓核细胞,培养1代后制作细胞悬液,分9组接种到96孔板,空白对照只有培养基、CCK-8溶液而没有细胞;0加药对照组只有培养基、细胞和CCK-8溶液;其余7个加药组分别加入1%,0.5%,0.1%,0.05%,0.01%,0.005%,0.001%浓度的亚甲蓝干预细胞生长繁殖。在培养24,48,72,96 h后使用CCK-8法测定吸光度,计算细胞活力并观察每一组颜色变化。结果与结论:(1)颜色变化:0加药对照组颜色最深,加药组颜色与药物浓度负相关,且0.05%、0.01%、0.005%、0.001%组颜色较深并与0加药组颜色接近;(2)各组吸光度值均数及细胞活力:与0加药组相比,1%组吸光度减小(P<0.05),1%与0.5%组比较差异均无显著性意义(P>0.05),0.1%组吸光度及细胞活力显著高于0.5%组,0.05%组显著高于0.1%组;(3)结论:亚甲蓝对人髓核细胞具有细胞毒性,毒性临界值在0.1%-0.05%之间且靠近0.05%,确切值还有待于进一步研究。 展开更多
关键词 亚甲蓝 细胞毒性 免疫 组织工程 人髓核细胞 细胞毒性 定量研究 组织构建 cck-8
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CCK-8与MTT法检测左归丸含药血清干预BMSCs增殖条件的比较 被引量:7
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作者 刘飞祥 谭峰 +6 位作者 樊巧玲 李星 叶素敏 张明玥 柴毅 麦聪英 吴丹 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期6-10,共5页
目的探讨CCK-8与MTT法在检测左归丸含药血清干预大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖时所需的最佳实验条件,并比较两种方法的优缺点。方法用左归丸含药血清进行干预P3 BMSCs,孵育结束后,分别加入CCK-8... 目的探讨CCK-8与MTT法在检测左归丸含药血清干预大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖时所需的最佳实验条件,并比较两种方法的优缺点。方法用左归丸含药血清进行干预P3 BMSCs,孵育结束后,分别加入CCK-8与MTT试剂,检测两种方法的最佳波长、培养时间、灵敏度和增殖时间。结果CCK-8法与MTT法检测BMSCs的最佳波长分别为450 nm和550 nm,孵育时间分别为3 h和4 h,细胞接种密度分别为0.1×10^(4)/孔和0.25×10^(4)/孔。CCK-8法与MTT法在BMSCs接种密度分别高于0.25×10^(4)/孔和0.5×10^(4)/孔时,两种方法检测所得OD值均提早进入平台期,易出现假S型增长曲线。而当密度分别低于0.05×10^(4)/孔和0.1×10^(4)/孔时,细胞增加缓慢,难以形成S型增长曲线,不能反映出BMSCs的增殖特性。与CCK-8法相比较,在细胞密度低于0.1×10^(4)/孔或高于2×10^(4)/孔时,MTT法对BMSCs在翻倍时OD值增加的响应量无明显变化,差异无统计学意义。而细胞密度为0.25×10^(4)/孔至1×10^(4)/孔时,MTT法对BMSCs在翻倍时OD值增加的响应量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MTT法更适用于左归丸含药血清干预BMSCs增殖和分化的研究。 展开更多
关键词 cck-8 MTT 骨髓间充质干细胞 左归丸
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皂角刺总黄酮粗提物与纯化物体外抗肿瘤活性研究 被引量:8
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作者 陈海霞 刘明华 +1 位作者 李茂 肖顺汉 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期101-102,共2页
目的研究皂角刺总黄酮粗提物及纯化物对体外四株肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法分别选用K562人白血病细胞株、Bel-7402人肝癌细胞株、SMMC-7721人肝癌细胞株和HCT116人结肠癌细胞株,以CCK-8法测定皂角刺总黄酮粗提物及纯化物对体外肿瘤... 目的研究皂角刺总黄酮粗提物及纯化物对体外四株肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法分别选用K562人白血病细胞株、Bel-7402人肝癌细胞株、SMMC-7721人肝癌细胞株和HCT116人结肠癌细胞株,以CCK-8法测定皂角刺总黄酮粗提物及纯化物对体外肿瘤细胞增殖作用的影响。结果皂角刺总黄酮纯化物(含量81.84%)对K562、HCT116、SMMC-7721、Bel-7402的IC50分别为(30.30±14.30)、(75.30±4.96)、(19.36±1.78)、(42.45±17.57)μg.ml-1;皂角刺总黄酮粗提物(含量58.84%)对K562、HCT116、SMMC-7721、Bel-7402的IC50分别为(106.04±35.59)、(106.85±35.77)、(120.68±16.22)、(68.89±2.30)μg.ml-1。皂角刺总黄酮粗提物及纯化物的抗肿瘤活性差异有统计学意义(P<0.05)。结论皂角刺总黄酮纯化物抗肿瘤活性优于粗提物。 展开更多
关键词 皂角刺总黄酮 粗提物 纯化物 抗肿瘤活性 cck-8
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大鼠骨髓间充质干细胞培养鉴定及复方扶芳藤合剂含药血清对细胞增殖的影响 被引量:7
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作者 周倍伊 吴亚姗 +5 位作者 周围 谢金玲 钟卫干 杨力强 黄正团 黄铠琴 《广西中医药》 2020年第2期56-61,共6页
目的:建立SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养方法,观察不同浓度的复方扶芳藤合剂大鼠含药血清对大鼠BMSCs增殖的影响。方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化BMSCs,对其进行细胞形态学观察,将BMSCs进行成骨、成脂定向诱导分... 目的:建立SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养方法,观察不同浓度的复方扶芳藤合剂大鼠含药血清对大鼠BMSCs增殖的影响。方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化BMSCs,对其进行细胞形态学观察,将BMSCs进行成骨、成脂定向诱导分化,采用流式细胞仪检测其表面标志物,分析其细胞周期,进行BMSCs鉴定;采用不同浓度(20%、10%和5%)的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续7 d对大鼠BM SCs进行干预,以CCK-8法检测其吸光度值,对比各组细胞生长情况。结果:BMSCs具有典型的成纤维样细胞形态,集落生长呈漩涡状。BMSCs成脂、成骨诱导后,油红O染色和茜素红染色均呈阳性。第3代BMSCs表型CD29、CD44、CD34、CD44表达分别为99.645%、99.677%、0.016%、0.133%;不同浓度的复方扶芳藤合剂含药血清和空白血清连续干预7 d后,CCK-8法检测显示:20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清组,其1~7 d的吸光度均值均高于20%浓度的空白血清组(P<0.05);10%的含药血清组的吸光度均值在3~7 d,高于10%的空白血清组(P<0.05);5%的含药血清组与5%的空白血清组比较无明显差异(P>0.05)。结论:全骨髓贴壁法分离、培养BM SCs,操作简单,方法稳定,可大量扩增BMSCs。扩增后的BMSCs具有间充质干细胞的生物学特性,具有多向分化潜能。复方扶芳藤合剂含药血清干预后的BMSCs增殖能力增强,其中20%浓度的复方扶芳藤合剂含药血清在本实验中为最佳干预浓度。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 原代培养 干细胞鉴定 复方扶芳藤合剂 含药血清 cck-8
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