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阳离子脂质体的转染机制及转染效率影响因素 被引量:24
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作者 陈彦祥 乔卫红 +1 位作者 刘栋良 李宗石 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期776-780,共5页
阳离子脂质体是一种非常具有发展前景的基因载体。简要介绍了阳离子脂质体的结构特点;着重讨论了阳离子脂质体作为基因载体时介导基因转移的机制以及在转染过程中对基因转染效率产生影响的主要因素。
关键词 阳离子脂质体 基因治疗 转染机制 转染效率
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以叶酸受体为靶向的阳离子脂质体的制备与性质考察 被引量:17
2
作者 闫颖 齐宪荣 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1134-1139,共6页
为了研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸受体靶向脂质体,将叶酸(folate,folic acid,F)、聚乙二醇二胺(polyoxyethylene-bis-amine,NH2-PEG-NH2)、琥珀酸酐(succinic anhydride,SUC)和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(distearoyl... 为了研制一种能通过叶酸受体途径靶向肿瘤细胞的叶酸受体靶向脂质体,将叶酸(folate,folic acid,F)、聚乙二醇二胺(polyoxyethylene-bis-amine,NH2-PEG-NH2)、琥珀酸酐(succinic anhydride,SUC)和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(distearoylphosphatidylethanolamine,DSPE)按序共价连接,并使用薄层色谱和飞行时间质谱确证合成产物为叶酸-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(folate-polyethyleneglycol-distearoylphosphatidylethanolamine,F-PEG-DSPE)。膜材选用二棕榈酰磷脂酰胆碱(dipalmitoylphosphatidylcholine,DPPC),3β-[N-(N′,N′-二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇(3β-[N(N′,N′-dimethylaminoethane)carbamoyl]cholesterol,DC-Chol)和F-PEG-DSPE,以10∶10∶0.75(摩尔比)的配比,以荧光素标记的阴离子葡聚糖(dextran fluorescein anionic,DFA)为模型,用薄膜分散法制备含DFA的叶酸受体靶向脂质体,其包封率较高(〉55%)、稳定性好,平均粒径为144 nm,体外释放慢。MTT法考察其对细胞的毒性结果表明该阳离子脂质体具有一定的细胞毒性,在低浓度时(0.012 5-0.1μmol.L-1)脂质体的细胞毒性与DC-chol浓度成正比。流式细胞技术检测KB细胞和HepG2细胞对DFA脂质体的摄取,结果表明叶酸受体靶向的长循环阳离子脂质体能提高细胞对脂质体的摄取。该研究为进一步研究叶酸受体靶向阳离子脂质体在肿瘤基因治疗中的应用提供了理论基础。 展开更多
关键词 脂质体 叶酸受体靶向 荧光素标记的阴离子葡聚糖 体外评价 基因治疗
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阳离子脂质体介导的基因转染真核细胞的研究 被引量:8
3
作者 李劲松 叶展 +1 位作者 赵涵芳 陈诗书 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第10期1025-1029,共5页
目的研究高效的阳离子转染NIH3T3的方法.方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,利用流式细胞仪比较三种脂质体转染效果,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件.结果转染效率 LipofectAMINE2000>Gene... 目的研究高效的阳离子转染NIH3T3的方法.方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,利用流式细胞仪比较三种脂质体转染效果,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件.结果转染效率 LipofectAMINE2000>GenePORTs>LipofectAMINE.在细胞融合度为60% ~ 70%,脂质体/DNA为3 μL/μg,脂质体的量为3 μL,转染时间为5 h时,转染效率最高.转染结束后表达时间可以达一个月.结论 LipofectAMINE2000转染效率最佳,并优化了其最佳转染条件. 展开更多
关键词 脂质体 转染 绿色荧光蛋白
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眼用维生素A棕榈酸酯阳离子脂质体-原位凝胶的研制及体外释药研究 被引量:12
4
作者 冯敏 何文 《中国药师》 CAS 2010年第5期631-634,共4页
目的:以维生素A棕榈酸酯(VAP)为模型,制备眼用阳离子脂质体-原位凝胶系统,并对其体外释药行为进行考察。方法:采用薄膜分散法制备VAP脂质体,根据胶凝温度筛选泊洛沙姆407的最佳处方浓度,采用无膜溶出模型对该制剂的体外释放行为进行考... 目的:以维生素A棕榈酸酯(VAP)为模型,制备眼用阳离子脂质体-原位凝胶系统,并对其体外释药行为进行考察。方法:采用薄膜分散法制备VAP脂质体,根据胶凝温度筛选泊洛沙姆407的最佳处方浓度,采用无膜溶出模型对该制剂的体外释放行为进行考察。结果:透射电镜显示VAP脂质体-原位凝胶(VAPL-ISG)粒径分布均匀,经N-三甲基壳聚糖(TMC)包衣后Zeta电位>40mV,泊洛沙姆407的最佳浓度为25%,VAPL-ISG中药物释放和凝胶溶蚀均呈现良好的零级释放特征。结论:VAPL-ISG具有阳离子脂质体和原位凝胶的优势,延缓了药物释放,为下一步研究其延长角膜滞留时间打下基础。 展开更多
关键词 维生素A棕榈酸酯 阳离子脂质体 原位凝胶 体外释药
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靶向肿瘤新生血管的阿霉素阳离子脂质体的体外研究 被引量:10
5
作者 赵惟 马会利 齐宪荣 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期982-988,共7页
本研究采用3β-[N-(N’,N’-二甲基胺乙基)胺基甲酰胺基]胆固醇(DC-Chol)和二棕榈酰磷脂酰胆碱为脂材制备了各种DC-Chol含量不同的阿霉素阳离子脂质体,考察了阿霉素阳离子脂质体的体外性质,同时以大鼠主动脉内皮细胞为模型,考... 本研究采用3β-[N-(N’,N’-二甲基胺乙基)胺基甲酰胺基]胆固醇(DC-Chol)和二棕榈酰磷脂酰胆碱为脂材制备了各种DC-Chol含量不同的阿霉素阳离子脂质体,考察了阿霉素阳离子脂质体的体外性质,同时以大鼠主动脉内皮细胞为模型,考察它们对不同阳离子脂质体的摄取情况,并采用静脉注射FITC-Dextran(Mt 500000)标记体内肿瘤新生血管,为体内靶向肿瘤血管提供依据。结果表明阿霉素阳离子脂质体包封率均在90%以上,粒径在100—200nm。随着DC-Chol含量的增加,zeta电位升高,但PEG的加入会降低zeta电位。DC-Chol含量的增加会增大阿霉素的释放量,同时也促进脂质体被内皮细胞的摄取,加快摄取速度。因此在进行体内靶向肿瘤血管考察时应充分关注这些体外实验结果。FITC-Dextran标记法可以显影体内新生血管,为体内肿瘤血管靶向实验提供直观的观察方法。 展开更多
关键词 肿瘤新生血管靶向 阳离子脂质体 阿霉素 内皮细胞
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凝胶电泳法及荧光光度法测定siRNA阳离子脂质体的含量和包封率 被引量:10
6
作者 沈雁 涂家生 +1 位作者 庞卉 朱家壁 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期430-435,共6页
建立siRNA含量测定方法,用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定。利用荧光染料SYBR Gold和Ribogreen与siRNA结合后能发出强烈荧光的原理,分别采用电泳法和荧光分光光度法测定脂质体中的siRNA含量,计算阳离子脂质体的包封率。SYBR G... 建立siRNA含量测定方法,用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定。利用荧光染料SYBR Gold和Ribogreen与siRNA结合后能发出强烈荧光的原理,分别采用电泳法和荧光分光光度法测定脂质体中的siRNA含量,计算阳离子脂质体的包封率。SYBR Gold电泳法的检测线性范围为0.2~2.0μmol·L-1(R=0.9930),高、中、低3个浓度的回收率分别为96.35%、96.92%和100.74%(n=3);日内日间精密度的RSD均小于5%(n=5)。Ribogreen荧光分光光度法的检测线性范围为10~50nmol·L-1(R=0.9971),高、中、低3个浓度的回收率分别为98.22%、99.88%和99.64%(n=3);日内日间精密度的RSD均小于5%(n=5)。利用这两种方法所测得3批阳离子脂质体中siRNA平均含量分别为98.52%和97.85%,平均包封率分别为99.20%和96.45%,经方差分析,两种方法无显著性差异。两种方法准确可靠、稳定性高和方便实用,均可用于阳离子脂质体中siRNA的含量和包封率测定。 展开更多
关键词 电泳法 荧光分光光度法 SIRNA 阳离子脂质体
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阳离子脂质体基因载体的细胞转染研究 被引量:9
7
作者 姜云霞 王冰 +5 位作者 崔韶晖 赵轶男 杨宝灵 段艳 王秀武 张树彪 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第17期7862-7864,共3页
研究阳离子脂质体在不同细胞中的转染效率及毒性。首先采用DNA延滞实验研究Lipofectamine2000、DOTAP转染试剂与DNA的结合能力。然后选用绿色荧光蛋白的质粒pGFP-N2作为报告基因模型和转染试剂制成复合物后转染Hela7、721、HT29细胞,比... 研究阳离子脂质体在不同细胞中的转染效率及毒性。首先采用DNA延滞实验研究Lipofectamine2000、DOTAP转染试剂与DNA的结合能力。然后选用绿色荧光蛋白的质粒pGFP-N2作为报告基因模型和转染试剂制成复合物后转染Hela7、721、HT29细胞,比较多种因素对转染的影响。最后使用MTT比色法分析Lipofectamine2000、DOTAP转染试剂对细胞的毒性。随着复合物中转染试剂比例的增加,Lipofectamine2000、DOTAP与DNA结合能力逐渐增强。Lipofectamine2000在Hela细胞转染最高效率约72%;在7721、HT29细胞转染效率较低,DOTAP在3种细胞的转染效率都很低;在转染效率最高时2种转染试剂的细胞存活率均在90%以上。对商品化的转染试剂研究和讨论以期为阳离子类脂非病毒载体的研究提供参考。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 转染效率 MTT
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非病毒基因递送技术研究进展 被引量:7
8
作者 李鹏 尚明美 宋海峰 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期809-814,共6页
基因递送是生物学和医学研究中一项重要且常用的技术,分为病毒感染法和非病毒转染法两大类。病毒载体具有较高转染效率,但产生不良反应等缺陷限制了其应用。非病毒载体具有低细胞毒性、低免疫原性、生物相容性好、可以生物降解等优点,... 基因递送是生物学和医学研究中一项重要且常用的技术,分为病毒感染法和非病毒转染法两大类。病毒载体具有较高转染效率,但产生不良反应等缺陷限制了其应用。非病毒载体具有低细胞毒性、低免疫原性、生物相容性好、可以生物降解等优点,而且不受基因大小的限制,具有很好的应用前景,但转染效率不高是其主要的瓶颈,目前研究人员正致力于寻找和开发高效率的非病毒转染方法。文中阐述了几种主要的生化转染法(阳离子多聚物、阳离子脂质体、磷酸钙)及物理转染法(电穿孔、超声/微气泡、显微注射和基因枪)的原理、优缺点以及研究进展。 展开更多
关键词 基因递送 非病毒载体 阳离子多聚物 阳离子脂质体 磷酸钙 电穿孔 超声 显微注射 基因枪
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脂质体包裹猪白细胞介素6基因对猪带绦虫抗原基因免疫小鼠的影响 被引量:8
9
作者 龙章富 高荣 +4 位作者 孟民杰 武梅 郑勇 刘昆 刘世贵 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第3期25-29,共5页
比较研究了BALb/c小鼠分别肌肉注射猪带绦虫抗原基因VTS76、猪白细胞介素 6(VPIL 6)联合VTS76及其阳离子脂质体包裹质粒等 5个处理的免疫效应。结果表明 ,VTS76联合VPIL 6共注射小鼠的IgG含量和抗体滴度 ,脾细胞增殖反应和IL 2诱生活性... 比较研究了BALb/c小鼠分别肌肉注射猪带绦虫抗原基因VTS76、猪白细胞介素 6(VPIL 6)联合VTS76及其阳离子脂质体包裹质粒等 5个处理的免疫效应。结果表明 ,VTS76联合VPIL 6共注射小鼠的IgG含量和抗体滴度 ,脾细胞增殖反应和IL 2诱生活性以及免疫细胞数量 ,均比注射VTS76的显著增强。经阳离子脂质体包裹的VTS76+VPIL 6在减少质粒用量 80 %时 ,免疫应答水平仍显著高于脂质体包裹VTS76,且明显高于VTS76+VPIL 6,证明VPIL 6能显著增强基因疫苗 (VTS76)免疫小鼠的免疫应答。 展开更多
关键词 小鼠 白细胞介素-6基因 阳离子脂质体 猪带绦虫抗原基因 免疫应答 免疫增强剂 疫苗
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阳离子脂质体基因载体的研究进展 被引量:5
10
作者 张昌明 吴永寿 余宏 《医学综述》 2009年第12期1768-1770,共3页
肿瘤基因治疗的最大挑战之一是研制安全有效的基因转染载体。基因治疗载体一般分为病毒性载体和非病毒性载体。由于病毒型载体存在安全性问题,目前非病毒性载体的研究越来越受到人们的重视。脂质体作为常用的非病毒性载体容易制备,安... 肿瘤基因治疗的最大挑战之一是研制安全有效的基因转染载体。基因治疗载体一般分为病毒性载体和非病毒性载体。由于病毒型载体存在安全性问题,目前非病毒性载体的研究越来越受到人们的重视。脂质体作为常用的非病毒性载体容易制备,安全性高,但亦存在质控要求高,体内基因导入效率较低,且无靶向性,使得其应用受到限制。pH敏脂质体、阳离子脂质体等大大提高了脂质体的转运效率,也为非病毒载体在临床上的应用开辟了广阔的前景,本文就阳离子脂质体作为基因载体的研究予以综述。 展开更多
关键词 基因治疗 载体 脂质体 阳离子脂质体
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阳离子脂质体Lipofectamine 3000对贴壁细胞、悬浮细胞和原代细胞转染效率比较的研究 被引量:8
11
作者 吴婷 吴江 +3 位作者 金书欣 席晔斌 钮晓音 陈广洁 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期89-94,共6页
为了比较阳离子脂质体Lipofectamine 3000(Lipo3000)在不同细胞类型中的转染效率,课题组分别在贴壁细胞NIH3T3、悬浮细胞EL4和原代细胞CD4+T细胞中,利用Lipo3000将不同浓度的miRNA mimics转染至细胞内,通过流式细胞术检测的方法,比较不... 为了比较阳离子脂质体Lipofectamine 3000(Lipo3000)在不同细胞类型中的转染效率,课题组分别在贴壁细胞NIH3T3、悬浮细胞EL4和原代细胞CD4+T细胞中,利用Lipo3000将不同浓度的miRNA mimics转染至细胞内,通过流式细胞术检测的方法,比较不同细胞之间以及同一细胞、不同浓度的miRNA mimics组之间转染效率的差异。结果显示,在NIH3T3细胞中,miRNA mimics为100nmol/L时,转染效率最高,可达(41.47±8.10)%;而在EL4和CD4+T细胞中,随着miRNA mimics浓度的增加,转染效率呈上升的趋势,最高分别可达(12.13±1.16)%和(3.80±0.60)%。可见,Lipo3000在贴壁细胞和悬浮细胞的转染效率明显高于原代细胞。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 转染效率 贴壁细胞 悬浮细胞 原代细胞
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CpG序列及阳离子脂质体对猪带绦虫抗原基因免疫应答的影响 被引量:6
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作者 武梅 高荣 +9 位作者 李江凌 孟明杰 龙章富 唐漫书 殷雪 沈翼 王丽焕 巫雪艳 谢鸿观 刘世贵 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第7期39-41,共3页
本实验将猪带绦虫抗原基因VTS76分别与pUC1 8质粒、重组pUC1 8 CpG质粒联合及阳离子脂质体包装后免疫小鼠。结果表明 :pUC1 8和 pUC1 8 CpG能显著提高免疫小鼠总IgG和特异性抗体水平 ,增加小鼠免疫细胞数量 ,增强淋巴细胞增殖活性及白... 本实验将猪带绦虫抗原基因VTS76分别与pUC1 8质粒、重组pUC1 8 CpG质粒联合及阳离子脂质体包装后免疫小鼠。结果表明 :pUC1 8和 pUC1 8 CpG能显著提高免疫小鼠总IgG和特异性抗体水平 ,增加小鼠免疫细胞数量 ,增强淋巴细胞增殖活性及白细胞介素 2的诱生活性。其中 ,pUC1 8 CpG的免疫增强效果更显著。阳离子脂质体包裹具有减少质粒用量。 展开更多
关键词 CPG序列 阳离子脂质体 猪带绦虫抗原基因 免疫应答 小鼠
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豆甾醇糖苷/聚乙二醇衍生物修饰的阳性脂质体体内分布和肝实质细胞靶向性 被引量:6
13
作者 石靖 严文伟 +2 位作者 齐宪荣 杨莉 张鹂 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期551-555,共5页
目的 研究经豆甾醇糖苷 (sterylglucoside ,SG)修饰的以DC Chol为阳性脂材的脂质体体内分布情况和达到小鼠肝实质细胞靶向的可能性。方法 合成阳性脂材 3β [N (N′ ,N′ 二甲基氨乙基 )氨基甲酰基 ]胆固醇 (DC Chol) ,制备3H 胆固醇... 目的 研究经豆甾醇糖苷 (sterylglucoside ,SG)修饰的以DC Chol为阳性脂材的脂质体体内分布情况和达到小鼠肝实质细胞靶向的可能性。方法 合成阳性脂材 3β [N (N′ ,N′ 二甲基氨乙基 )氨基甲酰基 ]胆固醇 (DC Chol) ,制备3H 胆固醇标记的阳性脂质体 (caitonicliposome,CL) ,SG和聚乙二醇 二硬酯酰磷酯酰乙醇胺 (PEG DSPE)修饰的阳性脂质体 (SG PEG CL) ,以及包封1 2 5I标记的硫代反义寡核苷酸 (asODN)的阳性脂质体 (SG PEG CL asODN) ,分别测定CL ,SG PEG CL ,SG PEG CL asODN和asODN溶液 (asODN )在小鼠不同器官及CL ,SG PEG CL肝内不同细胞中的分布。结果 CL和SG PEG CL表现较高肝脏聚集性 ,SG PEG CL在肝实质细胞中浓度显著高于CL (P <0 0 1) ,非实质细胞中浓度明显小于CL(P <0 0 1)。SG PEG CL asODN相对于asODN表现出明显的肝脾聚集性 (P <0 0 1)。结论 用阳性脂质体包载基因药物能改善药物的体内分布 。 展开更多
关键词 阳性脂质体 DC—Chol 豆甾醇糖苷 组织分布 肝实质细胞
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两种阳离子脂质体介导基因转染的比较研究 被引量:7
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作者 支德福 王冰 +6 位作者 崔韶辉 杨宝灵 赵不凋 赵轶男 姜云霞 于世钧 张树彪 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期553-557,共5页
基因治疗作为一种革命性的治疗手段,对免疫缺陷病、肿瘤等多种疾病的疗效已得到验证。而基因治疗若要大规模进入临床治疗,还需进行很多基础性的研究。其中高效、稳定、无毒、具有靶向性的基因导入载体的研究是基因治疗基础研究进一步... 基因治疗作为一种革命性的治疗手段,对免疫缺陷病、肿瘤等多种疾病的疗效已得到验证。而基因治疗若要大规模进入临床治疗,还需进行很多基础性的研究。其中高效、稳定、无毒、具有靶向性的基因导入载体的研究是基因治疗基础研究进一步深入的关键。基因导入载体主要分为病毒型和非病毒型两种。目前大量应用的病毒类载体的缺陷是免疫原性高、容量小、制备困难、成本较高,而非病毒类基因载体可以克服这些缺点,作为非病毒类基因载体中重要的一种——阳离子脂质体因其操作简便,转染的安全性、高效性和通用性而得到广泛应用。 展开更多
关键词 基因载体 阳离子脂质体 LIPOFECTAMINE 2000 DOTAP 转染
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脂质体介导转染法原理及其研究近展 被引量:1
15
作者 周雪雁 关伟军 《吉林畜牧兽医》 2004年第11期15-16,20,共3页
脂质体是由脂质双分子层组成的囊状载体,阳离子脂质体介导的基因转染因其转染效率 高,操作简单而倍受人们重视,本文就脂质体介导转染法原理及其主要方面的应用进展作一概述。
关键词 脂质体 阳离子脂质体 转染 应用
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新型阳离子脂质体的制备及其转染效率的测定 被引量:5
16
作者 雷撼 钱桂生 +1 位作者 吴国明 黄桂君 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期139-142,共4页
目的 制备以新型细胞转染素为阳性成分的阳离子脂质体 ,作为基因载体 ,用于基因转染的实验研究和肺部疾病的基因治疗。方法 用薄膜法制备N4 精胺胆固醇羰酰氨阳离子脂质体 ,通过电镜观察和电泳 ,检测其形态、结构和细胞转染条件 ,并对... 目的 制备以新型细胞转染素为阳性成分的阳离子脂质体 ,作为基因载体 ,用于基因转染的实验研究和肺部疾病的基因治疗。方法 用薄膜法制备N4 精胺胆固醇羰酰氨阳离子脂质体 ,通过电镜观察和电泳 ,检测其形态、结构和细胞转染条件 ,并对SPC肿瘤细胞进行转染 ,评估其转染效率。结果 制备的新型阳离子脂质体具有良好的微囊形态 ,当脂质体∶质粒为 (6~ 8)∶1时 ,其转染效率可达 60 %。结论 成功制备了新型阳离子脂质体 ,在适当条件下其具有较高的转染活性 ,为以后的基因转染和基因治疗打下基础。 展开更多
关键词 N^4-精氨胆固醇羰酰氨 阳离子脂质体 细胞转染素 基因转染 基因载体
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载siRNA阳离子脂质体的制备 被引量:7
17
作者 臧新龙 李季 +3 位作者 李晓巍 杜周琦 陈大为 赵秀丽 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期510-514,518,共6页
目的制备载siRNA阳离子脂质体并对其进行制剂学评价。方法利用siRNA与溴化乙锭结合能产生荧光的原理,采用预染溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)琼脂糖凝胶,氨基丁三醇-硼酸-乙二胺四乙酸(Tris-Boric acid-EDTA,TBE)电泳缓冲液将游离si... 目的制备载siRNA阳离子脂质体并对其进行制剂学评价。方法利用siRNA与溴化乙锭结合能产生荧光的原理,采用预染溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)琼脂糖凝胶,氨基丁三醇-硼酸-乙二胺四乙酸(Tris-Boric acid-EDTA,TBE)电泳缓冲液将游离siRNA分离并通过凝胶成像分析系统转换数据进行定性和定量,计算载siRNA阳离子脂质体包封率,并考察其阴离子的抵御能力和血清稳定性;利用Malver粒径和zeta电位测定仪对不同载siRNA阳离子脂质体进行评价。结果琼脂糖凝胶电泳法的线性为0.665~13.30 mg·L-1(R2=0.988 3),回收率为97%-103%,精密度RSD〈2%,阳离子脂质体对siRNA包封率较高,且具有良好的抵御阴离子能力和较强的血清稳定性;载siRNA阳离子脂质体的粒径和zeta电位变化与文献报道一致。结论所制备的载siRNA阳离子脂质体体外性质均良好。 展开更多
关键词 SIRNA 琼脂糖凝胶电泳 包封率 阳离子脂质体 血清稳定性 阴离子抵御
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阳离子脂质体包裹CpG对猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗免疫效应的影响 被引量:3
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作者 龙章富 高荣 +10 位作者 孟民杰 武梅 李江凌 沈翼 巫雪艳 王丽焕 谢鸿观 殷雪 刘昆 郑勇 刘世贵 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第3期15-19,共5页
对 3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗 (简称三联疫苗 )、CpG +三联疫苗、阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示 ,阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强 ,白细... 对 3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗 (简称三联疫苗 )、CpG +三联疫苗、阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示 ,阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强 ,白细胞介素 2 (IL 2 )诱生活性和免疫细胞数量、血液IgG含量较仅注射三联疫苗的小鼠显著增加。说明阳离子脂质体包裹CpG能增强小鼠对三联疫苗的体液和细胞免疫应答反应 。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 CPG 猪瘟 猪肺疫 猪丹毒 三联疫苗 免疫效应
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Lipofectamine ^(TM)2000介导pIRES2-EGFP-NT3转染新生小鼠离体耳蜗基底膜的实验研究 被引量:6
19
作者 陈杰 高下 +3 位作者 朱敏生 张文程 麻晓峰 顾香芳 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2007年第6期419-423,共5页
目的构建真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3,检测其在阳离子脂质体介导下对新生小鼠离体耳蜗基底膜的转染情况。方法构建含有目的基因NT3的真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3后,在阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导下将其转染新生小鼠... 目的构建真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3,检测其在阳离子脂质体介导下对新生小鼠离体耳蜗基底膜的转染情况。方法构建含有目的基因NT3的真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3后,在阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导下将其转染新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织,转染后24 h,通过Confocal显微镜观察小鼠离体耳蜗基底膜的转染情况和转染效率。结果成功构建了真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3,通过阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导,该质粒在新生小鼠离体耳蜗基底膜转染的范围内转染进17个细胞,说明该质粒在阳离子脂质体介导下能转染新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织。结论含有目的基因NT3的真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3的成功构建,及其在阳离子脂质体介导下对新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织的有效转染,为研究NT3基因转染对正常及致聋小鼠耳蜗效应的实验奠定了基础。 展开更多
关键词 Neurotrophin3 柯替器 质粒 脂质体 耳蜗
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Bcl-xl/Lipofectamine^(TM)2000比值对人角膜基质细胞转染效率的影响 被引量:5
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作者 李新宇 李贵刚 朱雪菲 《眼科新进展》 CAS 2006年第7期524-526,共3页
目的检测Bclxl/LipofectamineTM2000复合物中两者比值对转染人角膜基质细胞转染效率的影响,探讨其用于人角膜基质细胞基因转染的最佳比值。方法选择Bclxl/LipofectamineTM2000比值1∶2、1∶4、1∶8、1∶10四个实验组制备载体复合物转染... 目的检测Bclxl/LipofectamineTM2000复合物中两者比值对转染人角膜基质细胞转染效率的影响,探讨其用于人角膜基质细胞基因转染的最佳比值。方法选择Bclxl/LipofectamineTM2000比值1∶2、1∶4、1∶8、1∶10四个实验组制备载体复合物转染人角膜基质细胞,转染时间24h。在转染后3d,采用半定量RTPCR检测目的基因Bclx1mRNA表达的变化;采用免疫组织化学染色法及流式细胞计数法检测目的基因Bclx1表达阳性细胞率。数据采用SPSS软件分析。结果Bclxl/LipofectamineTM2000载体复合物中两者比值能显著影响其对人角膜基质细胞的转染效率,存在最佳的比值。当Bclxl/LipofectamineTM2000比值为1∶8时,培养的人角膜基质细胞获得了最佳的转染效率。转染后3d,定量PCR显示1∶8组mRNA表达水平高于其他组(P<0.05),Bclx1免疫组化染色及流式细胞计数法均显示1∶8组转染效率最高,阳性细胞率为(45.6±2.0)%(免疫组织化学染色法),(48.3±3.0)%(流式细胞计数法)(P<0.05)。结论LipofectamineTM2000能有效介导外源基因Bclxl转染人角膜基质细胞。Bclxl/LipofectamineTM2000载体复合物比值为1∶8时转染效率最高。 展开更多
关键词 BCL-XL 角膜基质细胞 基因转染 阳离子脂质体
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