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慢病毒介导HMGN5基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制研究 被引量：15
1
作者 孙娟 信艳萍 +2 位作者 张国梅 田晓娜 刘会敏 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第6期485-490,共6页
目的观察慢病毒介导的高迁移率族核小体结合域5(HMGN5)基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并对其机制进行初步探讨。方法RT qPCR法检测人卵巢上皮细胞株IOSE及4株不同卵巢癌细胞中HMGN5的表达情况,将HMGN5 shRNA慢病毒载体转... 目的观察慢病毒介导的高迁移率族核小体结合域5(HMGN5)基因沉默对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并对其机制进行初步探讨。方法RT qPCR法检测人卵巢上皮细胞株IOSE及4株不同卵巢癌细胞中HMGN5的表达情况,将HMGN5 shRNA慢病毒载体转染至人卵巢癌细胞SKOV3中,RT qPCR和Western blot检测SKOV3细胞中HMGN5 mRNA和蛋白表达情况,MTT法检测沉默HMGN5基因对细胞增殖能力的影响,划痕实验检测沉默HMGN5基因对细胞迁移能力的影响,Tran swell实验检测沉默HMGN5基因对细胞侵袭能力;Western blot检测SKOV3细胞中PCNA、MMP 9、Wnt1和β 连环蛋白(β catenin)蛋白表达水平。结果与卵巢上皮细胞株IOSE相比,HMGN5在卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、HO 8910、Caov3中的表达明显升高(P<0.05)。与Blank组和NC组相比,sh HMGN5组SKOV3细胞中HMGN5 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显下降(P<0.05),细胞中PCNA、MMP 9、Wnt1和β catenin蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论沉默HMGN5可能通过阻碍Wnt/β catenin信号通路的激活抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 HMGN5基因 卵巢癌细胞 增殖 迁移 侵袭 Wnt/β catenin信号通路
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靶向Rae1的siRNA对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞的影响
2
作者 王海业 麻颖宜 《医学新知》 CAS 2019年第3期297-301,共5页
探讨siRNA靶向抑制Rael表达对口腔鳞状细胞癌HSC -3细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的HSC-3细胞分为未转染组(未做任何处理)、siNC组(转染siRNA-NC)和siRacl组(转染siRNA - Rael )。 RT - PCR检测各组细胞中Rael m... 探讨siRNA靶向抑制Rael表达对口腔鳞状细胞癌HSC -3细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的HSC-3细胞分为未转染组(未做任何处理)、siNC组(转染siRNA-NC)和siRacl组(转染siRNA - Rael )。 RT - PCR检测各组细胞中Rael mRNA的表达,MTT法、Transwell小室和流式细胞仪分别检测各组细胞的增殖、侵袭和凋亡情况,Western blot检测细胞中Rael蛋白、Wnt/β- catenin信号通路相关蛋白β- catenin、c - Myc及其下游凋亡相关蛋白Bel -2、Cleaved Caspase -3的表达量。结果与未转染组比较,siRacl组细胞的吸光度(0D)值明显下降,侵袭细胞数明显减少,Rael mRNA和Rael、β-catenin、c - Myc、Bel -2蛋白的表达水平均明显降低,而细胞凋亡率和Cleaved Caspase -3蛋白的表达水平明显升高(均P<O.05或0.01);而siNC组与未转染组比较无显著差异(P>0.05)。结论靶向Rael的siRNA可抑制HSC -3细胞增殖、侵袭并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化有关。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 Rael 细胞增殖 侵袭 凋亡 Wnt/β- catenin信号通路
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黄精皂苷对糖尿病肾病大鼠肾损伤的保护作用及Wnt/β-catenin信号通路的影响 被引量：53
3
作者 彭静 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2518-2521,共4页
目的探讨黄精皂苷对糖尿病肾病大鼠肾损伤的保护作用及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法采用单次腹腔注射大剂量链脲佐菌素(55 mg/kg)建立糖尿病肾病大鼠模型,并随机分为模型组,黄精皂苷低(35 mg/kg)、高(70 mg/kg)剂量组及厄贝沙坦(... 目的探讨黄精皂苷对糖尿病肾病大鼠肾损伤的保护作用及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法采用单次腹腔注射大剂量链脲佐菌素(55 mg/kg)建立糖尿病肾病大鼠模型,并随机分为模型组,黄精皂苷低(35 mg/kg)、高(70 mg/kg)剂量组及厄贝沙坦(17.5 mg/kg)组,每组10只;另随机选取10只健康Wistar大鼠作为正常组,各组灌胃给药,1次/d,正常组及糖尿病肾病模型组灌胃等体积蒸馏水,给药时间为16周。检测各组大鼠一般状态、肾脏系数、尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白总量、肾脏组织病理形态变化、Ⅳ型胶原及Wnt4、β-catenin表达。结果与模型组比较,黄精皂苷组大鼠一般状态及肾脏病理形态均得到一定程度改善;与模型组比较,黄精皂苷组大鼠肾脏系数,尿素氮、血肌酐及第8、12、16周的24 h尿蛋白总量明显减少(P<0.05);与模型组比较,黄精皂苷组大鼠Ⅳ型胶原及Wnt4、β-catenin表达均也明显降低(P<0.05)。结论黄精皂苷可以通过阻断Wnt/β-catenin信号通路的激活,抑制肾小管间质纤维化进程,最终发挥肾脏保护作用。 展开更多
关键词 黄精皂苷 糖尿病 肾损伤 WNT/Β-catenin信号通路
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丹参酮ⅡA对COX-2激活Wnt/β-catenin信号通路介导的人肠癌细胞VEGF表达的调控作用 被引量：46
4
作者 刘宣 王炎 +5 位作者 李丹光 周利红 殷佩浩 隋华 范忠泽 李琦 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期108-112,共5页
目的:探讨丹参酮ⅡA通过环氧化酶-2(COX-2)-Wnt/β-catenin信号通路调控人肠癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的作用机制。方法:分别采用PGE2和COX-2选择性抑制剂NS-398上调及抑制LoVo细胞COX-2表达,Western Blot检测COX-2对β-cateni... 目的:探讨丹参酮ⅡA通过环氧化酶-2(COX-2)-Wnt/β-catenin信号通路调控人肠癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的作用机制。方法:分别采用PGE2和COX-2选择性抑制剂NS-398上调及抑制LoVo细胞COX-2表达,Western Blot检测COX-2对β-catenin蛋白表达的影响;分别采用丹参酮ⅡA、PGE2和/或GSK-3β选择性抑制剂SB-216763作用人肠癌HCT-116细胞24h,Western Blot法检测丹参酮ⅡA对COX-2和β-catenin蛋白表达的影响;ELISA法检测丹参酮ⅡA对VEGF表达的影响。结果:与对照组比较,PGE2能够显著上调LoVo细胞中COX-2蛋白表达,同时显著上调β-catenin在细胞总蛋白、浆蛋白和核蛋白中的表达水平;反之,COX-2抑制剂NS-398能够显著下调COX-2和β-catenin蛋白表达水平。丹参酮ⅡA能够显著下调COX-2和β-catenin蛋白在人肠癌LoVo细胞中表达水平,并且能够显著下调PGE2诱导的COX-2和β-catenin蛋白的高表达;同时,丹参酮ⅡA能够显著下调人肠癌LoVo细胞VEGF表达水平,并且能够下调PGE2和GSK-3β抑制剂SB-216763诱导的VEGF高表达。结论:丹参酮ⅡA通过抑制人肠癌细胞中COX-2的表达,阻止细胞中β-catenin的累积,从而阻断Wnt/β-catenin信号通路,下调VEGF表达,这可能是丹参酮ⅡA抗大肠癌血管新生的作用机制之一。 展开更多
关键词 结肠癌 丹参酮ⅡA 环氧化酶-2 WNT Β-catenin信号通路 血管内皮生长因子
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白术多糖对肝癌细胞增殖及侵袭的抑制作用及其机制 被引量：44
5
作者 朱云 李成 +2 位作者 林鑫盛 孙晶晶 程旸 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1180-1185,共6页
目的探讨白术多糖(PAM)对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法体外培养肝癌细胞HepG2分别给予不同浓度的PAM处理,通过CCK-8和Transwell实验检测肝癌细胞的增殖、侵袭能力。采用免疫荧光技术检测肝癌细胞中β-catenin蛋白表达水... 目的探讨白术多糖(PAM)对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法体外培养肝癌细胞HepG2分别给予不同浓度的PAM处理,通过CCK-8和Transwell实验检测肝癌细胞的增殖、侵袭能力。采用免疫荧光技术检测肝癌细胞中β-catenin蛋白表达水平,采用RT-PCR技术和免疫印迹法检测AKT、GSK-3β的基因和蛋白表达水平及其磷酸化表达,检测MMP-2的基因和蛋白表达水平。HepG2细胞给予LiCl/PAM/LiCl联合PAM处理,检测细胞增殖、侵袭能力改变,检测GSK-3β磷酸化和MMP2的蛋白水平。结果与空白对照组相比,PAM处理后肝癌细胞体外增殖能力下降、侵袭能力下降(P<0.05);PAM处理可以下调β-catenin蛋白表达、下调MMP-2基因与蛋白表达水平,同时抑制AKT与GSK-3β的磷酸化(P<0.05)。PAM对肝癌细胞体外增殖、侵袭及AKT/GSK-3β/β-catenin通路的影响呈浓度依赖性:PAM的浓度越高,对肝癌细胞体外增殖、侵袭的抑制作用越强;对AKT与GSK-3β的磷酸化的抑制作用越强,对β-catenin表达的抑制作用也越强。LiCl可以逆转PAM对肝癌细胞增殖、侵袭的抑制作用,同时可以逆转PAM对GSK-3β磷酸化和MMP2的蛋白表达的抑制。结论PAM对肝癌细胞的体外增殖和侵袭能力具有抑制作用,PAM可能通过影响Wnt/β-catenin信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 白术多糖 肝癌细胞 增殖 侵袭 WNT/Β-catenin信号通路
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鳖甲煎丸对肝纤维化模型大鼠肝组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白及其靶基因表达的影响 被引量：36
6
作者 孙海涛 文彬 +6 位作者 陈冠新 贾文燕 孙嘉玲 安海燕 庞杰 杨雪梅 贺松其 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期876-881,共6页
目的探讨鳖甲煎丸治疗肝纤维化的可能作用机制。方法 48只大鼠随机分为空白对照组、模型组、秋水仙碱组和鳖甲煎丸低、中、高剂量组,每组8只。除空白对照组外其余各组大鼠腹腔注射四氯化碳(CCl4)建立肝纤维化模型。首次注射后第2天开始... 目的探讨鳖甲煎丸治疗肝纤维化的可能作用机制。方法 48只大鼠随机分为空白对照组、模型组、秋水仙碱组和鳖甲煎丸低、中、高剂量组,每组8只。除空白对照组外其余各组大鼠腹腔注射四氯化碳(CCl4)建立肝纤维化模型。首次注射后第2天开始给药,鳖甲煎丸低、中、高剂量分别给予为鳖甲煎丸混悬液0.55、1.1、2.2 g/(kg·d)灌胃,秋水仙碱组给予秋水仙碱片混悬液0.11 mg/(kg·d)灌胃,空白对照组和模型组给予2 ml生理盐水灌胃,共8周。Masson染色观察肝脏病理形态学改变;检测各组大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)等肝功能指标,及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(HYP)、转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)水平;Westernblot法检测大鼠肝组织中β-链蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK-3β)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的表达。结果与模型组比较,鳖甲煎丸各剂量组均不同程度纤维组织增生明显减少,血清ALT、AST含量及MDA、HYP、TGF-β1、CTGF、TNF-α、VEGF水平降低,SOD水平升高(P<0.05),肝组织中β-catenin、p-GSK-3β和p-AKT蛋白表达明显减少,且以鳖甲煎丸高剂量组效果更佳(P<0.05)。各组大鼠肝组织中GSK-3β和AKT蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论鳖甲煎丸能够显著减轻CCl4致大鼠肝纤维化的程度,可能与其抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化、减少其下游靶基因的表达水平有关。 展开更多
关键词 肝纤维化 鳖甲煎丸 肝功能 氧化应激 WNT/Β-catenin信号通路 靶基因
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基于YKL-40和Wnt/β-catenin通路探讨山茱萸颗粒对糖尿病肾病的保护作用 被引量：36
7
作者 陈烨 严瑞 +1 位作者 贾崇高 宋文玉 《中药材》 CAS 北大核心 2020年第4期961-967,共7页
目的:基于YKL-40和Wnt/β-catenin通路探讨山茱萸颗粒对糖尿病肾病(DN)的保护作用。方法:采用腹腔注射链脲佐菌素构建大鼠糖尿病肾病模型,实验分正常对照组、模型组、山茱萸颗粒(300 mg/kg)组、Wnt-C59(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂,30... 目的:基于YKL-40和Wnt/β-catenin通路探讨山茱萸颗粒对糖尿病肾病(DN)的保护作用。方法:采用腹腔注射链脲佐菌素构建大鼠糖尿病肾病模型,实验分正常对照组、模型组、山茱萸颗粒(300 mg/kg)组、Wnt-C59(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂,30 mg/kg)组,给药并观察记录各组大鼠的一般体征变化,连续2 w,造模第14天处死大鼠,检测大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);HE染色、PAS染色、Masson染色观察各组大鼠肾组织的形态变化,电镜观察各组大鼠肾组织的超微结构,免疫组化检测肾组织Ⅳ型胶原蛋白、转化生长因子(TGF-β1)的表达,Western blot和RT-PCR法检测肾组织YKL-40、Wnt4、β-catenin mRNA及蛋白表达。结果:与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠Scr、BUN显著升高(P<0.05),组织病理学改变明显,肾小球系膜区的PAS阳性表达及肾小球和肾小管中纤维性物质沉积明显增多,肾小球和肾小管结构改变明显,肾组织Ⅳ型胶原蛋白、TGF-β1表达及YKL-40、Wnt4、β-catenin mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,山茱萸颗粒组、Wnt-C59组大鼠Scr、BUN显著降低(P<0.05),组织病理学明显改善,肾小球系膜区PAS阳性表达及纤维性物质沉积在肾小球和肾小管中表达明显降低,肾小球和肾小管结构改变有所恢复,肾组织Ⅳ型胶原蛋白、TGF-β1表达及YKL-40、Wnt4、β-catenin mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);山茱萸颗粒组与Wnt-C59组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:山茱萸颗粒能改善DN大鼠的肾脏损伤,其作用机制可能与抑制YKL-40表达,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 山茱萸颗粒 糖尿病肾病(DN) WNT/Β-catenin信号通路 YKL-40
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骨质疏松相关信号通路研究进展 被引量：31
8
作者 查小云 胡予 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期205-209,共5页
骨代谢过程包括骨形成及骨吸收,当两者间的平衡被打破后便会出现骨硬化或者骨量减少甚至骨质疏松,其具体的分子调节通路不明。现代研究表明,在骨代谢过程中至少存在RANKL/RANK/OPG信号通路、Wnt/β-catenin信号通路、PTH信号通路、PPAR... 骨代谢过程包括骨形成及骨吸收,当两者间的平衡被打破后便会出现骨硬化或者骨量减少甚至骨质疏松,其具体的分子调节通路不明。现代研究表明,在骨代谢过程中至少存在RANKL/RANK/OPG信号通路、Wnt/β-catenin信号通路、PTH信号通路、PPAR-γ信号通路等,各个通路间还存在交叉。通过分子信号通路,可有效促进骨代谢研究,并开发具有治疗骨质疏松的新药。 展开更多
关键词 骨质疏松 信号通路 RANKL/RANK/OPG信号通路 Wnt/β-catenin信号通路 PTH信号通路 PPAR-γ信号通路
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COX-2/PGE_2激活Wnt/β-catenin信号通路调控人肠癌细胞VEGF表达 被引量：32
9
作者 刘宣 李丹光 +5 位作者 周利红 王炎 殷佩浩 季青 范忠泽 李琦 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1178-1181,共4页
目的探讨环氧化酶2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)是否通过Wnt/β-catenin信号通路调控人肠癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达。方法将PGE2或COX-2选择性抑制剂NS-398作用LoVo细胞24h,采用蛋白质印迹法检测COX-2和β-catenin蛋白表达;将PGE... 目的探讨环氧化酶2(COX-2)/前列腺素E2(PGE2)是否通过Wnt/β-catenin信号通路调控人肠癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达。方法将PGE2或COX-2选择性抑制剂NS-398作用LoVo细胞24h,采用蛋白质印迹法检测COX-2和β-catenin蛋白表达;将PGE2和(或)β-catenin/tcf抑制剂FH-535作用LoVo细胞24h,采用ELISA法检测VEGF表达。以常规培养的LoVo细胞为对照。结果与对照组比较,PGE2能够上调LoVo细胞中COX-2蛋白表达,同时上调β-catenin在细胞总蛋白、细胞浆蛋白和核蛋白中的表达水平(分别是对照组的3.8倍、2.7倍和3.0倍,P均<0.01);COX-2抑制剂能够下调COX-2蛋白表达,同时下调β-catenin在细胞总蛋白、细胞浆蛋白和核蛋白中的表达水平(分别是对照组的0.3倍、0.3倍和0.2倍,P均<0.01)。与对照组比较,PGE2能够上调LoVo细胞VEGF表达水平(是对照组的1.6倍,P<0.01);β-catenin/tcf抑制剂能够下调VEGF表达(是对照组的0.68倍,P<0.01);将PGE2和β-catenin/tcf抑制剂同时作用LoVo细胞后VEGF表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 COX-2/PGE2通过上调β-catenin蛋白表达,从而激活Wnt/β-catenin信号通路,上调VEGF表达,这可能是COX-2/PGE2促进大肠癌血管新生的机制之一。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 环氧化酶2 WNT Β-catenin信号通路 血管内皮生长因子
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靶向siRNA阻断Wnt/β-catenin信号通路对子宫内膜异位症患者在位子宫内膜基质细胞VEGF、MMP-9表达的影响 被引量：31
10
作者 刘儒彪 刘义 +2 位作者 于岚 郑婷婷 王罡 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期6-11,26,共7页
目的通过观察人子宫内膜异位症在位子宫内膜基质细胞β-catenin的表达,及利用siRNA靶向沉默β-catenin基因以阻断Wnt/β-catenin信号通路来观察其下游靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶... 目的通过观察人子宫内膜异位症在位子宫内膜基质细胞β-catenin的表达,及利用siRNA靶向沉默β-catenin基因以阻断Wnt/β-catenin信号通路来观察其下游靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表达的变化,探讨Wnt/β-catenin信号通路在子宫内膜异位症发生机制中的作用。方法采用随机、对照设计,将体外分离、培养的24例子宫内膜异位症患者在位子宫内膜基质细胞分成3组(n=8):空白组、阴性组(以含阴性荧光siRNA 100pmol和转染试剂5μg的混合物转染)以及siRNA干扰组(以含β-catenin siRNA 100pmol和转染试剂5μg的混合物转染),并以10例非子宫内膜异位症患者子宫内膜基质细胞作为正常组。利用Real-time PCR和Western blot方法分别检测子宫内膜异位症在位子宫内膜空白组和非子宫内膜异位症正常组β-catenin的表达。转染24h后,用以上方法分别检测子宫内膜异位症空白组、阴性组和siRNA干扰组β-catenin、VEGF以及MMP-9的表达。结果子宫内膜异位症空白组β-catenin mRNA和蛋白的表达明显高于非子宫内膜异位症正常组(均P<0.05)。子宫内膜异位症siRNA干扰组β-catenin、VEGF以及MMP-9mRNA和蛋白的表达明显低于空白组和阴性组(均P<0.05),而空白组与阴性组之间差异无统计学意义(均P>0.05)。结论子宫内膜异位症在位子宫内膜基质细胞β-catenin的表达明显高于非子宫内膜异位症患者,阻断Wnt/β-catenin信号通路后,其下游靶基因VEGF、MMP-9的表达明显受到抑制。因此,Wnt/β-catenin信号通路可能在子宫内膜异位症的发生机制中起重要作用。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 WNT/Β-catenin信号通路 siRNA β-catenin VEGF MMP-9
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黄芪多糖通过Wnt/β-catenin信号通路促进肝癌细胞凋亡研究 被引量：31
11
作者 吕君 朱鹏飞 +2 位作者 刘艳民 曾庆磊 余祖江 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期5155-5160,共6页
目的探讨黄芪多糖通过Wnt/β-catenin信号通路对人肝癌Hep G2细胞增殖及凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Hep G2细胞增殖能力和存活率;Annexin V-FITC/PI双染和Caspase-3活性检测细胞凋亡;荧光素酶实验检测黄芪多糖(100、200 ... 目的探讨黄芪多糖通过Wnt/β-catenin信号通路对人肝癌Hep G2细胞增殖及凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Hep G2细胞增殖能力和存活率;Annexin V-FITC/PI双染和Caspase-3活性检测细胞凋亡;荧光素酶实验检测黄芪多糖(100、200 mg/L)处理后Hep G2细胞Wnt/β-catenin通路活性改变;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting法检测细胞内的β-catenin、c-myc和CyclinD1表达水平。结果与对照组比较,随着黄芪多糖质量浓度的增加和作用时间的延长,Hep G2细胞存活率显著降低(P<0.05)。与对照组比较,黄芪多糖100、200mg/L组Hep G2细胞凋亡率显著升高(P<0.05);凋亡关键因子Caspase-3的相对活性显著升高(P<0.05),cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低;荧光素酶活性显著降低(P<0.05);β-catenin、c-myc和Cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论黄芪多糖通过下调Wnt/β-catenin信号通路抑制凋亡相关基因Bcl-2的表达,促进Hep G2细胞凋亡。 展开更多
关键词 HEPG2细胞 黄芪多糖 WNT Β-catenin信号通路 细胞凋亡 细胞增殖
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白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠Wnt/β-catenin和TGF-β1-Smad2/3信号通路的影响 被引量：32
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作者 肖伟伟 奚悦 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期3033-3038,共6页
目的探究白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠Wnt/βcatenin和TGFβ1 Smad2/3信号通路的影响。方法利用链脲佐菌素一次性注射制作糖尿病肾病模型,40只SD大鼠随机分成白藜芦醇组(5mg/kg)、氯沙坦组(30mg/kg)、白藜芦醇联合氯沙坦组(5mg/kg藜芦醇联... 目的探究白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠Wnt/βcatenin和TGFβ1 Smad2/3信号通路的影响。方法利用链脲佐菌素一次性注射制作糖尿病肾病模型,40只SD大鼠随机分成白藜芦醇组(5mg/kg)、氯沙坦组(30mg/kg)、白藜芦醇联合氯沙坦组(5mg/kg藜芦醇联合30mg/kg氯沙坦)和模型组,每组小鼠10只,1次/d,均持续作用8周。检测尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、24 h尿蛋白及空腹血糖水平,计算肾脏指数,实时荧光定量PCR、Western blot法及免疫组化法检测Wnt4、βcatenin及TGFβ1、Smad2/3表达。结果与模型组比较,白藜芦醇组、氯沙坦组、白藜芦醇联合氯沙坦组的BUN、Scr、24h尿蛋白和空腹血糖水平显著降低(P<0.05),肾脏指数降低(P<0.05),Wnt4、βcatenin、TGFβ1、Smad2/3mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);与白藜芦醇联合氯沙坦组比较,白藜芦醇组以上指标差异无统计学意义(P>0.05),而氯沙坦组以上指标明显增加(P<0.05)。结论白藜芦醇能够降低Wnt/βcatenin和TGFβ1 Smad2/3信号通路的表达水平,改善DN肾脏病理进程,减少肾脏受到的损害。 展开更多
关键词 白藜芦醇 糖尿病肾病 Wnt4/βcatenin信号通路 TGFΒ1 SMAD2/3
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骨质疏松肾阳虚、肾阴虚证型下右归丸含药血清对大鼠成骨细胞ERK1/2、Wnt/β-catenin信号通路的影响 被引量：30
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作者 章建华 邢婧 +1 位作者 范连霞 尹华 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期3018-3022,共5页
目的:研究骨质疏松症(OP)肾阳虚和肾阴虚证型下右归丸含药血清对大鼠成骨细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)表达的作用,及对成骨细胞ERK1/2、Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin、ERK1、ERK2mRNA及蛋白表达的作用。方法:分别用OP肾阳虚... 目的:研究骨质疏松症(OP)肾阳虚和肾阴虚证型下右归丸含药血清对大鼠成骨细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)表达的作用,及对成骨细胞ERK1/2、Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin、ERK1、ERK2mRNA及蛋白表达的作用。方法:分别用OP肾阳虚、OP肾阴虚及OP组(对照组)所得的右归丸含药血清及空白血清干预成骨细胞,采用MTS法检测细胞增殖情况,ELISA法检测ALP表达,RT-PCR法检测ERK1、ERK2、β-catenin mRNA的表达,Western Blot法检测ERK1、ERK2、β-catenin蛋白的表达。结果:OP肾阳虚证型下右归丸含药血清在促进成骨细胞增殖、ALP表达以及对成骨细胞ERK1/2、Wnt/β-catenin信号通路相关因子β-catenin、ERK1、ERK2 mRNA及蛋白表达方面比OP肾阴虚证型下右归丸含药血清的作用更强。结论:与"右归丸补肾阳"的中医理论相吻合,为临床辨证治疗OP提供科学依据。 展开更多
关键词 右归丸 成骨细胞 含药血清 骨质疏松症肾阳虚 肾阴虚 WNT/Β-catenin信号通路 ERK1/2信号通路
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低剂量雷公藤甲素抑制Wnt3α/β-catenin信号通路活性改善高剂量D-葡萄糖诱导的足细胞转分化 被引量：31
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作者 石格 吴薇 +6 位作者 万毅刚 何伟明 涂玥 韩文贝 刘不悔 刘莹露 万子玥 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期139-146,共8页
探讨雷公藤甲素（triptolide,TP）改善高剂量D-葡萄糖（高糖）诱导的足细胞上皮-间充质转分化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用和分子机制。将体外培养的小鼠永生化足细胞分为正常组（normal group,N）、高剂量D-葡萄... 探讨雷公藤甲素（triptolide,TP）改善高剂量D-葡萄糖（高糖）诱导的足细胞上皮-间充质转分化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的作用和分子机制。将体外培养的小鼠永生化足细胞分为正常组（normal group,N）、高剂量D-葡萄糖组（high dose of D-glucose group,H-TP）、低剂量TP组（low dose of TP group,L-TP）、高剂量TP组（high dose of TP group,H-TP）以及甘露醇组（mannitol group,MNT）,分别进行不同的干预：N组加入D-葡萄糖（D-glucose,DG,5 mmol·L^-1）;HG组加入HG（25mmol·L^-1）;L-TP组加入HG（25 mmol·L^-1）＋TP（3μg·L^-1）;H-TP组加入HG（25 mmol·L^-1）＋TP（10μg·L^-1）;MNT组加入DG（5 mmol·L^-1）＋MNT（24.5 mmol·L^-1）。在干预后的各时间点（24,48,72 h）,首先,观察TP对足细胞增殖活性的影响;其次,检测足细胞上皮细胞标志性分子（nephrin和podocin）、间充质细胞标志性分子（desmin和Ⅰ型胶原）以及EMT相关介质snail的蛋白表达水平;最后,检测足细胞Wnt3α/β-catenin信号通路关键信号分子Wnt3α和β-catenin蛋白表达水平。结果表明,HG不仅能引起足细胞nephrin和podocin蛋白低表达,desmin,Ⅰ型胶原和snail蛋白高表达,诱导足细胞EMT,而且,能促使足细胞Wnt3α和β-catenin蛋白高表达,激活Wnt3α/β-catenin信号通路。此外,L-TP对足细胞增殖能力没有影响,与HG联合干预不仅能明显恢复足细胞nephrin和podocin蛋白表达水平,抑制其desmin,Ⅰ型胶原和snail蛋白表达水平,改善足细胞EMT,而且,能明显降低HG诱导的足细胞Wnt3α和β-catenin蛋白高表达,抑制Wnt3α/β-catenin信号通路活性。总之,HG在体外能激活Wnt3α/β-catenin信号通路而诱导足细胞发生EMT;L-TP在体外能明显抑制Wnt3α/β-catenin信号通路活性而改善足细胞EMT,这可能是其干预足细胞EMT的作用和分子机制之一。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 雷公藤甲素 足细胞 上皮-间充质转分化 Wnt3α/β-catenin信号通路
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淫羊藿苷对成骨细胞成骨分化的影响及Wnt/-catenin信号系统的关系研究 被引量：30
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作者 涂艳 熊莉娜 +3 位作者 柳湘洁 雷超 李凝旭 张瑞芸 《中国中医急症》 2017年第3期448-450,466,共4页
目的探讨淫羊藿苷对成骨细胞分化及其细胞内Wnt/-catenin信号通路的影响。方法取SD大鼠,采用全骨髓贴壁法分离并体外培养骨髓间充质干细胞(rBMSC),并用贴壁筛选法进行体外培养rBMSC,给予淫羊藿苷3、6、9 d后,观察对照组与淫羊藿苷处理... 目的探讨淫羊藿苷对成骨细胞分化及其细胞内Wnt/-catenin信号通路的影响。方法取SD大鼠,采用全骨髓贴壁法分离并体外培养骨髓间充质干细胞(rBMSC),并用贴壁筛选法进行体外培养rBMSC,给予淫羊藿苷3、6、9 d后,观察对照组与淫羊藿苷处理组的碱性磷酸酶(ALP)活性,对碱性磷酸酶阳性克隆(CFUALP-F)以及矿化结节形成的影响。采用Western blot方法检测每组-catenin和Runx2组蛋白表达水,采用RT-PCR方法检测淫羊藿苷对Wnt10b、GSK-3、-catenin及LEF1 mRNA水平的影响。结果淫羊藿苷可以提高ALP的活性,碱性磷酸酶克隆数和矿化结节的形成。Western blot结果显示,淫羊藿苷可以提高-catenin和Runx2的蛋白表达水平;RT-PCR结果显示,淫羊藿苷可以提高Wnt10b、GSK-3、-catenin及LEF1表达水平。结论初步证明淫羊藿苷可以激活Wnt/-catenin信号通路,参与并调控BMSC的成骨分化。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 成骨细胞 成骨分化 wnt/-catenin信号通路
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当归多糖通过Wnt/β-catenin信号通路抑制骨关节炎软骨细胞氧化应激损伤与炎症反应 被引量：30
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作者 徐翀 申利民 苑文杰 《陕西中医》 CAS 2022年第6期700-703,770,共5页
目的:研究当归多糖通过Wnt/β-catenin信号通路对骨关节炎软骨细胞的氧化应激损伤及炎症反应的影响。方法:在大鼠膝关节中注射碘乙酸建立关节炎模型,3 mg/只,对照组注射等量的0.9%氯化钠溶液;将关节炎模型大鼠分为模型组和当归多糖组。... 目的:研究当归多糖通过Wnt/β-catenin信号通路对骨关节炎软骨细胞的氧化应激损伤及炎症反应的影响。方法:在大鼠膝关节中注射碘乙酸建立关节炎模型,3 mg/只,对照组注射等量的0.9%氯化钠溶液;将关节炎模型大鼠分为模型组和当归多糖组。给药3周后,采用酶联免疫吸附法测定SD大鼠血清中炎症因子水平、氧化应激参数水平[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]、膝关节软骨中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA表达水平和c-Fos蛋白表达水平。采用酶标仪测定当归多糖处理48 h后的IL-1β,损伤SW1353细胞8 h后的细胞活性。通过PCR法检测MMP-13 mRNA、β-catenin mRNA、ADAMTS4 mRNA的表达水平。通过Western blot法测定β-catenin、MMP-13蛋白表达水平。结果:当归多糖治疗后,IL-1β、TNF-α、MDA、SOD、CAT水平及MMP-13 mRNA和c-Fos蛋白均低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。在IL-1β刺激的SW1353损伤模型中,经过10、50、100μg/ml当归多糖处理后,SW1353细胞活性较模型组增加,组间比较差异有统计学意义(均P<0.05);Wnt 4a、GSK-3β、β-catenin、ADAMTS4 mRNA和MMP-13 mRNA蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:当归多糖通过Wnt/β-catenin信号通路抑制骨关节炎软骨细胞的氧化应激损伤与炎症反应。 展开更多
关键词 关节炎 软骨细胞 WNT/Β-catenin信号通路 氧化应激损伤 炎症反应 当归多糖
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黄芪丹参颗粒药对干预肾纤维化Wnt/β-catenin信号通路的实验研究 被引量：29
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作者 付旭 李均 +3 位作者 阳小敏 赵任杰 周萍 顾铜 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第1期103-108,共6页
目的:观察黄芪丹参颗粒药对对肾纤维化信号通路Wnt/β-catenin的影响,并初步明确其量效关系。方法:40只雄性SD大鼠,随机分为5组,即正常组,模型组,黄芪丹参颗粒药对(1∶1)低剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对(1∶1)中剂量治疗组,黄芪丹参颗粒... 目的:观察黄芪丹参颗粒药对对肾纤维化信号通路Wnt/β-catenin的影响,并初步明确其量效关系。方法:40只雄性SD大鼠,随机分为5组,即正常组,模型组,黄芪丹参颗粒药对(1∶1)低剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对(1∶1)中剂量治疗组,黄芪丹参颗粒药对高剂量(1∶1)治疗组。除正常组外,其余大鼠均建立单侧输尿管梗阻(UUO)模型。各组给予相应药物治疗,收集尿液检测24 h尿蛋白、α1-微球蛋白(α1-Microglobulin,α1-MG)的含量,光镜观察肾组织病理;Western Blot技术检测肾组织Wnt4和β-catenin蛋白表达。结果:①24 h尿蛋白和α1-MG检测结果,与正常组比较,模型组24 h尿蛋白和α1-MG均明显升高(P<0.05);与模型组比较,各治疗组24 h尿蛋白和α1-MG明显降低(P<0.05);与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组24h尿蛋白均明显降低(P<0.05),各剂量组之间α1-MG差异无显著性。②HE染色结果,各治疗组病理变化较模型组均有明显改善,与颗粒低剂量组比较,颗粒中、高剂量组评分明显减少(P<0.05)。③肾组织Wnt4和β-catenin免疫印迹检测结果,与正常组比较,模型组和各剂量组大鼠肾组织Wnt4和β-catenin具有明显有升高趋势,各治疗组均有不同程度下降,尤以颗粒中、高剂量组下降明显。结论:黄芪丹参(1∶1)颗粒药对可以保护UUO大鼠肾小管功能,一定程度改善UUO大鼠肾脏病理改变,其机制可能与干预Wnt/β-catenin信号通路有关。黄芪丹参颗粒药对可以干预UUO大鼠肾组织中Wnt4、β-catenin的表达,并存在一定的量效关系。 展开更多
关键词 肾纤维化 黄芪丹参颗粒药对 WNT Β-catenin信号通路
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Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白在补肾活血颗粒含药血清影响成骨细胞过程中的表达及意义 被引量：29
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作者 许应星 吴承亮 +2 位作者 吴岩 童培建 肖鲁伟 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期537-541,共5页
目的观察Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白在补肾活血颗粒含药血清影响成骨细胞过程中的作用,为补肾活血颗粒含药血清治疗骨质疏松症作用机制的阐明提供实验依据。方法体外分离培养乳鼠颅骨来源成骨细胞,分为空白血清对照组和补肾活血颗... 目的观察Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白在补肾活血颗粒含药血清影响成骨细胞过程中的作用,为补肾活血颗粒含药血清治疗骨质疏松症作用机制的阐明提供实验依据。方法体外分离培养乳鼠颅骨来源成骨细胞,分为空白血清对照组和补肾活血颗粒含药血清组。连续培养6天后,定量检测各组成骨细胞的碱性磷酸酶活性,并进行碱性磷酸酶染色;18天后进行茜素红染色;同时应用酶联免疫法检测各组成骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白——β-连环蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)和T细胞因子(TCF)的表达情况。结果补肾活血颗粒含药血清能显著增加成骨细胞碱性磷酸酶的表达和促进矿化结节的形成。同时补肾活血颗粒含药血清也显著上调β-catenin、LRP5和TCF的蛋白表达。结论补肾活血颗粒含药血清能显著增加成骨细胞的成骨活性和矿化能力,这种作用与Wnt/β-catenin信号通路密切相关。提示Wnt/β-catenin信号通路在补肾活血颗粒治疗骨质疏松症的过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 WNT/Β-catenin信号通路 补肾活血颗粒 成骨细胞
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电针“关元”穴对绝经后骨质疏松症大鼠Wnt信号通路的影响 被引量：28
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作者 范怀玲 纪峰 +2 位作者 林莺 周棋 吴强 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期87-93,共7页
目的:观察电针"关元"穴对绝经后骨质疏松症大鼠血清骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)、骨生物力学、骨密度以及Wnt 3a、β-连环蛋白(catenin)、Runx 2表达的影响,探讨电针治疗绝经后骨质疏松症的可能机制。方法:SD雌性大鼠分为... 目的:观察电针"关元"穴对绝经后骨质疏松症大鼠血清骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)、骨生物力学、骨密度以及Wnt 3a、β-连环蛋白(catenin)、Runx 2表达的影响,探讨电针治疗绝经后骨质疏松症的可能机制。方法:SD雌性大鼠分为假手术组、模型组、关元组、非经非穴组,每组10只。采用双侧卵巢切除制备绝经后骨质疏松症模型。关元组电针"关元",非经非穴组电针胁下髂嵴上20~25mm、后正中线旁开20mm处,每日电针1次,每次20min,10d为1个疗程,共治疗3个疗程。治疗后光学显微镜下观察股骨组织形态结构,三点弯曲实验检测股骨生物力学性能,X线检测骨密度,酶联免疫法检测血清BGP,生化分析仪测定血清ALP,RT-PCR法和免疫组化法检测Wnt 3a、β-catenin、Runx 2表达。结果:电针"关元"穴能够显著改善绝经后骨质疏松症大鼠骨小梁结构松散、排列紊乱、密度降低等骨质疏松形态学改变,提高血清ALP、BGP水平,改善股骨最大载荷和断裂载荷,并提高骨密度,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05);RT-PCR及免疫组化结果表明电针"关元"穴较模型组能够明显上调Wnt 3a、β-catenin、Runx 2的表达(P<0.05)。非经非穴组不能显著改善上述生物学指标。结论:通过激活Wnt-β-catenin信号通路、提高骨代谢过程中的骨形成并增强骨强度可能是电针"关元"穴治疗绝经后骨质疏松症的机制之一。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松症 电针干预 骨密度 骨生物力学 血清骨钙素 碱性磷酸酶 Wnt-β-catenin信号通路
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白花蛇舌草通过调控Wnt/β-catenin通路抑制大肠癌细胞及大肠癌干细胞的生长 被引量：27
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作者 林久茂 魏丽慧 +2 位作者 李琼瑜 赖子君 彭军 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1805-1808,共4页
目的:从Wnt/β-catenin信号通路调控探讨白花蛇舌草(HDW)抑制大肠癌细胞及其干细胞生长的作用机制。方法:MTT法检测HDW对HT-29细胞活力的影响;建立HT-29皮下移植瘤模型,通过测量瘤体体积观察HDW对瘤体生长的影响,采用免疫组化检测HDW干... 目的:从Wnt/β-catenin信号通路调控探讨白花蛇舌草(HDW)抑制大肠癌细胞及其干细胞生长的作用机制。方法:MTT法检测HDW对HT-29细胞活力的影响;建立HT-29皮下移植瘤模型,通过测量瘤体体积观察HDW对瘤体生长的影响,采用免疫组化检测HDW干预后对移植瘤组织中ki-67表达的影响;采用SP法分析HDW对HT-29细胞干细胞比例的影响;同时,采用Western blotting及免疫组化法检测HDW干预后对HT-29细胞中干细胞标记物LGR-5、OCT-4表达和Wnt/β-catenin通路中APC、survivin、β-catenin及p-βcatenin表达的影响。结果:MTT检测结果显示不同浓度的HDW干预可显著降低HT-29细胞活力,呈现一定的剂量依赖;HDW显著抑制HT-29移植瘤瘤体的生长且能够下调ki-67的表达;HDW可降低HT-29细胞中干细胞的比例,体内外实验结果均显示HDW可明显抑制干细胞标记物LGR-5和OCT-4的表达,并且上调APC及p-β-catenin的表达,下调survivin的表达。结论:HDW对大肠癌细胞和大肠癌干细胞的生长具有显著抑制作用,抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化及调控关键因子的表达是其重要作用机制之一。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 大肠癌 WNT/Β-catenin信号通路 肿瘤干细胞
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