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Caspase-3基因表达调控研究进展 被引量:32
1
作者 冯骁 田聆 黄倩 《生命科学》 CSCD 2014年第9期936-942,共7页
Caspase-3是细胞凋亡过程中发挥重要功能的凋亡执行蛋白之一。Caspase-3介导的非凋亡功能也倍受关注。Caspase-3发挥功能建立在酶原活化基础之上,因此,大量研究关注于caspase-3的活化过程。然而,越来越多证据显示caspase-3基因表达水平... Caspase-3是细胞凋亡过程中发挥重要功能的凋亡执行蛋白之一。Caspase-3介导的非凋亡功能也倍受关注。Caspase-3发挥功能建立在酶原活化基础之上,因此,大量研究关注于caspase-3的活化过程。然而,越来越多证据显示caspase-3基因表达水平变化与诸多疾病过程密切相关。因此,就caspase-3基因表达调控相关研究进行综述,介绍caspase-3基因及5'-侧翼序列结构,并从表观遗传水平、转录水平、转录后microRNA作用、翻译水平等层面介绍caspase-3基因表达调控。 展开更多
关键词 caspase-3 基因表达调控 凋亡 转录因子 MICRORNA
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川芎嗪-黄芪甲苷降低缺血/再灌注损伤的大鼠脑组织中IL-1β和Caspase-3基因的表达:实时定量PCR的研究(英文) 被引量:28
2
作者 朱振洪 万海同 李金辉 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期272-280,共9页
本文旨在运用实时荧光PCR技术建立大鼠脑缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)中IL-1β和Caspase-3基因绝对定量分析方法。成年雄性Sprague-Dawely大鼠被随机分成了5组:假手术组、I/R模型组、黄芪甲苷组、川芎嗪-黄芪甲苷组、尼莫地... 本文旨在运用实时荧光PCR技术建立大鼠脑缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)中IL-1β和Caspase-3基因绝对定量分析方法。成年雄性Sprague-Dawely大鼠被随机分成了5组:假手术组、I/R模型组、黄芪甲苷组、川芎嗪-黄芪甲苷组、尼莫地平组。除假手术组外,其余各组均进行脑I/R处理,然后通过腹膜内注射进行药物处理,时间为脑I/R后0h、12h、1d、2d直至7d。假手术组和I/R模型组注射生理盐水(5mL/kg),黄芪甲苷组中黄芪甲苷剂量为20mg/kg,川芎嗪-黄芪甲苷组中川芎嗪和黄芪甲苷剂量分别为10mg/kg和20mg/kg,而尼莫地平组中尼莫地平剂量为10mg/kg。通过常规RT-PCR克隆了大鼠的IL-1β和Caspase-3基因,运用TA克隆技术分别构建了重组质粒pTA2-IL1和pTA2-Casp3,重组质粒经过紫外分光光度计测定A260/A280比值,并计算拷贝数。以该质粒作为标准品,首先对实时荧光PCR反应的引物进行筛选和验证,然后进行反应退火温度的优化,最后定量检测各组损伤的脑组织中IL-1β和Caspase-3的基因表达情况。结果显示,从候选引物中各筛选到一对最佳引物,熔解度曲线分析显示单一峰,琼脂糖电泳表明反应产物与预计目标产物大小一致。梯度退火温度实验表明IL-1β和Caspase-3基因的最佳退火温度分别是59°C和61.2°C。实时荧光PCR检测结果表明,与假手术组相比,I/R模型组中的IL-1β和Caspase-3表达显著升高;和I/R模型组相比,黄芪甲苷组、川芎嗪-黄芪甲苷组、尼莫地平组中IL-1β和Caspase-3基因表达水平均有所下降,特别是川芎嗪-黄芪甲苷组基因下调最显著。以上这些结果提示,本研究建立的方法适用于中药处理I/R模型后IL-1β和Caspase-3基因的定量分析。 展开更多
关键词 实时PCR IL-1Β caspase-3 基因 缺血再灌注损伤
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三氧化二砷对激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞Caspase-3活性及Survivin基因表达的影响 被引量:23
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作者 阳东荣 陈昭典 单玉喜 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期20-22,共3页
目的 探讨三氧化二砷对激素非依赖性前列腺癌PC 3细胞株细胞增殖、细胞凋亡、Caspase 3活性及Survivin基因表达的影响。方法 以 1、2、3、6、10 μmol/L的三氧化二砷作用于体外培养的PC 3细胞 ,48h后对细胞增殖、细胞凋亡、Caspase 3... 目的 探讨三氧化二砷对激素非依赖性前列腺癌PC 3细胞株细胞增殖、细胞凋亡、Caspase 3活性及Survivin基因表达的影响。方法 以 1、2、3、6、10 μmol/L的三氧化二砷作用于体外培养的PC 3细胞 ,48h后对细胞增殖、细胞凋亡、Caspase 3活性 ,SurvivinmRNA表达进行检测。结果  48h后各浓度的三氧化二砷均可抑制PC 3细胞增殖 ,3、6、10 μmol/L处理组可检测到细胞凋亡 ,凋亡率分别为 11.8%、12 .7%、2 9.6% (P <0 .0 0 1)。1、2、3、6、10 μmol/L三氧化二砷组Cas pase 3活性较对照组升高10 .5、2 7.5、3 1.5、3 4.5及 42倍。对照组及 1、2、3、6、10 μmol/L组的Sur vivin基因表达强度分别为 1.11± 0 .2 4、0 .99± 0 .0 6、0 .89± 0 .12、0 .78± 0 .0 4、0 .5 1± 0 .0 6、0 .4±0 .0 5 ,差异具有统计学意义意义 (P <0 .0 1)。结论 三氧化二砷可抑制PC 3细胞的增殖 ,诱导凋亡 ,与三氧化二砷的浓度相关 ,这一作用与三氧化二砷抑制PC 3细胞中Survivin基因表达及增加Caspase 3的活性有关。 展开更多
关键词 三氧化二砷 PC-3细胞 SURVIVIN基因 caspase-3 表达 激素非依赖性前列腺癌 活性 细胞凋亡 细胞增殖 体外培养
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郁金水煎剂对四氯化碳致急性肝损伤小鼠肝细胞p53和caspase-3表达的影响及其对肝损伤的保护作用 被引量:25
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作者 张婉娴 朱彤彤 +3 位作者 鲁育铭 赵丽晶 刘鹏 赵丽娟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期82-86,I0003,共6页
目的:探讨单味郁金水煎剂对四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡基因p53和caspase-3蛋白表达的影响,阐明郁金对肝损伤保护作用的机制。方法:ICR小鼠60只,随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、郁金低剂量... 目的:探讨单味郁金水煎剂对四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡基因p53和caspase-3蛋白表达的影响,阐明郁金对肝损伤保护作用的机制。方法:ICR小鼠60只,随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、郁金低剂量组(2.5g·kg-1)、郁金中剂量组(5.0g·kg-1)、郁金高剂量组(10.0g·kg-1)和阳性药组(甘利欣22.5mg·kg-1);连续给药7d后,除空白对照组外各组小鼠均通过CCl4复制小鼠急性肝损伤模型。计算肝指数,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,HE染色观察肝组织形态学变化;RT-PCR法检测肝细胞p53基因转录情况;免疫组织化学法检测肝细胞caspase-3蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠肝指数明显增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠肝指数明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组小鼠血清ALT增高(P<0.01);与模型组比较,阳性药组及郁金高、中剂量组小鼠血清ALT明显降低(P<0.05)。肝脏形态学变化,肉眼观察,空白对照组小鼠肝脏呈现粉红色,质软而富有弹性,模型组小鼠肝脏明显肿大、呈微黄色,表面可见散在点状及片状黄褐色斑点,质脆,各给药组小鼠肝脏大小、颜色及质地均界于空白对照组与模型组之间,且表面无明显黄褐色斑点;镜下观察,空白对照组小鼠肝脏结构正常,模型组小鼠细胞呈明显局灶性气球样变、水样变性和死亡,而阳性药组和郁金中、高剂量组小鼠与模型组比较肝组织上述病灶数量减少。与空白对照组比较,模型组小鼠肝细胞p53基因转录明显增强(P<0.05);与模型组比较,郁金高剂量组小鼠肝细胞p53基因转录显著减弱(P<0.05)。与模型组比较,郁金给药组小鼠肝细胞caspase-3蛋白表达减弱。结论:郁金对CCl4致小鼠急性肝损伤有一定的拮抗作用,其机制之一可能与下调凋亡基因p53和caspase-3蛋白的表达、阻碍肝细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 郁金 急性肝损伤 四氯化碳 p53基因 caspase-3
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Survivin在白血病中表达及其与Caspase、Fas相关性研究 被引量:17
5
作者 肖延风 刘雅 +1 位作者 田玮 任利芬 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期13-15,i001,共4页
目的 研究Survivin在白血病中表达的临床意义及其在白血病细胞凋亡中的作用。方法 应用蛋白印迹法检测1 8例白血病患者和 1 0例正常对照组患儿外周血中单个核细胞Survivin的表达 ;采用免疫组化法测定Fas和Caspase表达 ;运用四格表的... 目的 研究Survivin在白血病中表达的临床意义及其在白血病细胞凋亡中的作用。方法 应用蛋白印迹法检测1 8例白血病患者和 1 0例正常对照组患儿外周血中单个核细胞Survivin的表达 ;采用免疫组化法测定Fas和Caspase表达 ;运用四格表的确切概率法进行Survivin表达与白血病患者临床特点和Fas、Caspase表达的进行相关性分析。结果  1 .白血病患者1 8例中 1 3例Survivin表达阳性 (72 .2 % ) ,正常对照组 1 0例Survivin检测均为阴性。Survivin表达在不同白血病类型、WBC组间有显著差异 (P <0 .0 5)。 2 .白血病患者 1 8例中 ,9例Fas表达阳性。经统计学分析 ,Survivin表达与Fas表达无相关性(P =0 .1 1 6)。 3 .白血病患者 1 8例中 5例Caspase 3表达阳性 ,两者比较 (P =0 .0 0 2 ) ,有显著性差异。结论 Survivin基因可选择性的在白血病患者外周血单个核细胞中表达 ,而在对照组中无Survivin表达 ,表明Survivin表达与白血病的发生有一定关系。Survivin表达情况可能成为白血病临床诊断、预后判断的有效指标。Survivin的作用位点可能不在Fas水平 ,而主要通过抑制Caspase 3表达 ,在凋亡途径的下游发挥抗凋亡作用。 展开更多
关键词 白血病 Survivin凋亡 基因表达 蛋白印迹法 FAS caspase-3
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葛根素对脑缺血诱导神经细胞凋亡的保护作用 被引量:18
6
作者 徐晓虹 陈瑜 郑筱祥 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第21期1628-1631,共4页
目的探讨葛根素(puerarin,Pur)对脑缺血诱导神经细胞凋亡和凋亡蛋白抑制剂XIAP表达的影响。方法SD大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)的同时ip50,100mg.kg-1Pur,MCAO50min后再灌注24h,用TTC染色法、Annexin-V和PI双荧光标记结合流式细胞检测法、... 目的探讨葛根素(puerarin,Pur)对脑缺血诱导神经细胞凋亡和凋亡蛋白抑制剂XIAP表达的影响。方法SD大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)的同时ip50,100mg.kg-1Pur,MCAO50min后再灌注24h,用TTC染色法、Annexin-V和PI双荧光标记结合流式细胞检测法、半定量RT-PCR等技术分别检测大鼠脑水肿、梗死体积、细胞凋亡和坏死率、caspase-3活性、XIAPmRNA表达。结果Pur(100mg.kg-1)明显缓解缺血引起的脑水肿和神经行为障碍(P<0.05);减少脑梗死体积,以皮层尤其显著(P<0.01)。Pur(100mg.kg-1)还显著降低背外侧皮层的细胞凋亡和坏死率,抑制caspase-3活性,逆转缺血诱导的XIAPmRNA表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论Pur通过调节神经细胞XIAPmRNA表达,抑制细胞凋亡而保护缺血性脑损伤。 展开更多
关键词 葛根素 脑缺血 细胞凋亡 caspase-3活性 XIAP基因
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人骨肉瘤组织中Survivin mRNA的表达及与细胞凋亡的关系 被引量:14
7
作者 高大新 吕刚 +1 位作者 张海燕 黄涛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期343-344,共2页
目的 观察人骨肉瘤中Survivin基因表达 ,探讨其与细胞凋亡关系及对骨肉瘤生物学行为的影响。方法 采用原位杂交、免疫组织化学技术、DNA原位末端标记技术对 3 8例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织SurvivinmRNA及骨肉瘤中Caspase ... 目的 观察人骨肉瘤中Survivin基因表达 ,探讨其与细胞凋亡关系及对骨肉瘤生物学行为的影响。方法 采用原位杂交、免疫组织化学技术、DNA原位末端标记技术对 3 8例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织SurvivinmRNA及骨肉瘤中Caspase 3蛋白和细胞凋亡进行检测。结果 较正常骨 (0 % )和骨软骨瘤 (6.7% ) ,SurvivinmRNA显著表达于骨肉瘤 (65 .8% )中 ,并与骨肉瘤WHO分型和转移有关 (P <0 .0 5 ) ;骨肉瘤中Caspase 3蛋白与凋亡细胞阳性率分别为71.1%和 63 .2 % ,凋亡指数 (AI)均值为 8.3 % ;Survivin阴性组AI显著高于阳性组 (P <0 .0 1) ;Sur vivin与Caspase 3表达不相关。 结论 Survivin选择性表达于骨肉瘤中 ,通过抑制细胞凋亡 ,参与骨肉瘤发生发展 ,其可能是判断骨肉瘤预后的重要参考指标。 展开更多
关键词 骨肉瘤 SurvivinmRNA 表达 细胞凋亡 caspase-3蛋白
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紫杉醇对PTEN不同状态的子宫内膜癌细胞株的作用及其机制探讨 被引量:15
8
作者 许成芳 李小毛 +1 位作者 李田 王小韵 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1528-1532,共5页
目的研究紫杉醇对不同PTEN状态子宫内膜癌细胞株中的作用及其相关机制。方法利用慢病毒载体系统,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ish-ikawa细胞,建立PTEN基因敲除(HEC-1-RNAi)细胞及过表达(Ishikawa-PTEN)的细胞模型。采... 目的研究紫杉醇对不同PTEN状态子宫内膜癌细胞株中的作用及其相关机制。方法利用慢病毒载体系统,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ish-ikawa细胞,建立PTEN基因敲除(HEC-1-RNAi)细胞及过表达(Ishikawa-PTEN)的细胞模型。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot观察磷酸化AKT蛋白和Caspase-3蛋白的表达。结果紫杉醇对不同PTEN状态的细胞株均有明显的生长抑制作用,抑制率与时间、剂量成正相关。紫杉醇处理不同PTEN状态的细胞24h后,PTEN阳性细胞的IC50和磷酸化AKT蛋白水平明显低于PTEN阴性细胞,PTEN阳性细胞的凋亡率、Caspase-3的蛋白水平明显高于PTEN阴性细胞。结论 PTEN基因能增加子宫内膜癌细胞株对紫杉醇的敏感性,其可能与抑制PI3K/AKT信号通路,增强Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 紫杉醇 PTEN基因 子宫内膜癌 PI3K caspase-3 慢病毒载体
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Survivin、caspase-3及AKT1在大肠癌中的表达及意义 被引量:12
9
作者 樊勇军 冯一中 +1 位作者 李海 郑晓娟 《实用癌症杂志》 2010年第1期26-30,共5页
目的探讨survivin、caspase-3和AKT1在大肠腺癌中的表达及其临床病理学意义以及三者在大肠腺癌癌变过程中的作用。方法运用免疫组织化学SP法检测58例大肠腺癌、12例大肠腺瘤和10例正常大肠黏膜中survivin、caspase-3和AKT1的表达情况,... 目的探讨survivin、caspase-3和AKT1在大肠腺癌中的表达及其临床病理学意义以及三者在大肠腺癌癌变过程中的作用。方法运用免疫组织化学SP法检测58例大肠腺癌、12例大肠腺瘤和10例正常大肠黏膜中survivin、caspase-3和AKT1的表达情况,并分析其与大肠腺癌临床病理特征之间的关系以及三者之间的关系。结果在大肠腺癌中survivin、caspase-3以及AKT1的阳性表达率分别为77.6%(45/58)、32.8%(19/58)及70.7%(41/58)。Survivin在大肠腺癌中的表达高于大肠腺瘤以及正常大肠黏膜(P<0.05,P<0.05),cspase-3在大肠腺癌中的表达低于正常大肠黏膜(P<0.05),AKT1在大肠腺癌中的表达高于正常大肠黏膜(P<0.05)。Survivin的表达与肿瘤分化程度关系密切(P<0.05),caspase-3的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移关系密切(P<0.05,P<0.05),AKT1的表达与TNM分期关系密切(P<0.05)。Survivin的表达与caspase-3的表达呈显著负相关(P<0.05),与AKT1的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论Survivin与AKT1在大肠腺癌中高表达,caspase-3在大肠腺癌中低表达,且survivin与caspase-3的表达显著负相关,survivin与AKT1的表达显著正相关,提示survivin可能下调caspase-3的表达而上调AKT1的表达,共同促进大肠腺癌的发生发展。 展开更多
关键词 大肠腺癌 SURVIVIN基因 caspase-3基因 AKT1基因 免疫组织化学
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人canstatin基因治疗人食管癌裸鼠移植瘤的实验研究 被引量:6
10
作者 郑香伟 李印 +3 位作者 唐芙爱 马军 郑鹏远 卢高峰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第4期350-355,共6页
背景与目的:Canstatin是一种新内源性血管生成抑制剂,以往的研究显示canstatin能有效的抑制肿瘤的生长,作用甚至强于endostatin。本研究将探讨人canstatin基因对人食管鳞状细胞癌移植瘤模型的抑制作用。方法:应用人食管癌细胞株KYSE150... 背景与目的:Canstatin是一种新内源性血管生成抑制剂,以往的研究显示canstatin能有效的抑制肿瘤的生长,作用甚至强于endostatin。本研究将探讨人canstatin基因对人食管鳞状细胞癌移植瘤模型的抑制作用。方法:应用人食管癌细胞株KYSE150建立移植瘤模型。将裸鼠随机分成3组:腺病毒携带的canstatin基因组(Ad-GFP-canstatin)、腺病毒携带的绿色荧光蛋白组(Ad-GFP)和磷酸盐缓冲液组(PBS)。治疗期间测量皮下移植瘤的长径和短径;30d后处死裸鼠,取下肿瘤行常规病理切片,观察药物的毒性反应;检测肿瘤组织中caspase-3、内皮细胞生长因子受体1(fetal liver kinase-1,Flk-1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达和微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:第二次注射病毒后3d,canstatin基因治疗组肿瘤体积显著小于其余两组(P<0.05),治疗第6天抑瘤率达到61%;HE染色显示:各组肿瘤组织中都有坏死,尤其在canstatin基因治疗组坏死更加明显;canstatin基因治疗组caspase-3表达高于空载体组和对照组(P<0.05);Flk-1的表达低于空载体组和对照组(P<0.05);VEGF的表达3组相比差异无统计学意义(P>0.05);canstatin基因治疗组MVD低于空载体组和对照组(P<0.05)。结论:人canstatin基因对人食管癌移植瘤的生长具有抑制作用,作用机制可能是降低Flk-1的表达进而抑制肿瘤的血管生成,抑制肿瘤的生长。 展开更多
关键词 基因治疗 CANSTATIN caspase-3 内皮细胞生长因子受体1 血管内皮生长因子 食管肿瘤 移植瘤 小鼠
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脑缺血再灌流损伤神经细胞凋亡与Bcl-2和caspase-3的关系 被引量:8
11
作者 陈红兵 王鲁民 +2 位作者 许贞峰 郭宗君 郭云良 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期840-842,共3页
目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌流后神经细胞凋亡及其与 Bcl- 2和 caspase- 3基因表达的关系。方法 应用原位末端标记 (TUNEL)和原位杂交技术分别观察脑缺血再灌流不同时间点神经细胞凋亡的变化与 Bcl- 2 m RNA和 caspase- 3 m RNA的... 目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌流后神经细胞凋亡及其与 Bcl- 2和 caspase- 3基因表达的关系。方法 应用原位末端标记 (TUNEL)和原位杂交技术分别观察脑缺血再灌流不同时间点神经细胞凋亡的变化与 Bcl- 2 m RNA和 caspase- 3 m RNA的表达。结果  (1 )脑缺血再灌流后凋亡神经细胞主要分布于缺血周围区 ,随着再灌流时间的延长凋亡细胞数逐渐增加 ,至 2 4 h达高峰 ,2 d开始下降 ,1 4 d时仍高于假手术组。 (2 )脑缺血再灌注 2 h后 ,神经细胞 Bcl- 2 m RNA开始表达 ,并随着再灌流时间的延长而增强 ,1 2~ 2 4 h达高峰 ,2 d后逐渐下降 ,至 1 4 d略高于假手术组。 (3)脑缺血再灌流后 ,神经细胞 caspase- 3 m RNA的表达与 Bcl- 2 m RNA的表达规律相似 ,但于再灌流 2 4 h达高峰。结论 脑缺血再灌流后 ,缺血周围区神经细胞的凋亡是一个动态的渐进过程 ,Bcl- 2基因表达可能抑制细胞凋亡 ,caspase- 3基因在介导脑缺血损伤神经元凋亡过程中起关键作用。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌流损伤 神经细胞 细胞凋亡 BCL-2 caspase-3 原位末端标记 原位杂交技术
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Smac基因过表达对宫颈癌HeLa细胞放疗敏感性的影响 被引量:11
12
作者 郑丽端 汪良 +3 位作者 童强松 费世宏 熊宙芳 伍钢 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期245-247,共3页
目的探讨转染Smac基因过表达对宫颈癌细胞放疗敏感性的影响,寻求改善宫颈癌放疗疗效的新途径。方法将Smac基因转染入宫颈癌HeLa细胞株,G418筛选获得亚克隆细胞,RTPCR、Westernblot法检测癌细胞Smac基因表达。X射线照射后,采用MTT比色法... 目的探讨转染Smac基因过表达对宫颈癌细胞放疗敏感性的影响,寻求改善宫颈癌放疗疗效的新途径。方法将Smac基因转染入宫颈癌HeLa细胞株,G418筛选获得亚克隆细胞,RTPCR、Westernblot法检测癌细胞Smac基因表达。X射线照射后,采用MTT比色法检测癌细胞体外生长活性;透射电镜、AnnexinV-FITC和碘化丙啶双染色流式细胞仪法检测癌细胞凋亡及比率;Westernblot、比色法检测细胞内Caspase-3蛋白表达和活性水平。结果RTPCR和Westernblot证实所获宫颈癌亚克隆细胞HeLaSmac的SmacmRNA、蛋白表达水平均显著高于HeLa(P<0.01)。8GyX射线照射后,HeLaSmac细胞生长活性较HeLa细胞减弱10.19%(P<0.01),透射电镜下可见部分HeLaSmac细胞发生典型凋亡形态学改变,凋亡率为16.4%,显著高于对照组HeLa细胞(凋亡率为6.2%,P<0.01)。与HeLa细胞比较,HeLaSmac细胞内Caspase3表达显著增加(P<0.01),活性水平提高3.42倍(P<0.01)。结论稳定转染外源性Smac基因使其在宫颈癌细胞株中过表达,能提高癌细胞中Caspase3的表达和活性,增强放疗对癌细胞的诱导凋亡作用,有望成为改善宫颈癌放疗效果的新途径。 展开更多
关键词 宫颈癌HELA细胞 放疗敏感性 基因过表达 caspase-3表达 Western RT-PCR HeLa细胞株 Annexin X射线照射 MTT比色法 流式细胞仪法 细胞生长活性 宫颈癌细胞株 SMAC基因 诱导凋亡作用 克隆细胞 活性水平 蛋白表达 c基因表达
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大鼠脑缺血再灌流后神经细胞凋亡与caspase-3和caspase-9基因表达 被引量:7
13
作者 郭云良 陈红兵 高英茂 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期430-434,共5页
目的:探讨大鼠局灶性脑缺血再灌流后神经细胞凋亡及其与caspase-3和caspase-9基因表达的关系。方法:应用原位末端标记和原位杂交技术分别观察细胞凋亡与caspase-3 mRNA和caspase-9 mRNA表达。结果:脑缺血再灌流后,凋亡神经细胞主要分布... 目的:探讨大鼠局灶性脑缺血再灌流后神经细胞凋亡及其与caspase-3和caspase-9基因表达的关系。方法:应用原位末端标记和原位杂交技术分别观察细胞凋亡与caspase-3 mRNA和caspase-9 mRNA表达。结果:脑缺血再灌流后,凋亡神经细胞主要分布于缺血半影区,随着时间的延长凋亡细胞数逐渐增加,至24 h达高峰。在缺血半影区,再灌流后神经细胞caspase-3 mRNA和caspase-9 mRNA表达逐渐增强,到24 h阳性细胞数目最多,COD值最高,而缺血中心区两基因均弱表达。结论:脑缺血再灌流后神经细胞凋亡是一个动态的渐进过程。caspase-3和cas—pase-9基因表达在介导细胞凋亡过程中起重要作用。 展开更多
关键词 脑缺血再灌流 神经细胞 caspase-3 caspase-9 基因表达 细胞凋亡
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Bcl-2蛋白及caspase-3基因表达与暴发性肝衰竭肝细胞凋亡关系的研究 被引量:10
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作者 王玉梅 冯国和 +1 位作者 刘德刚 窦晓光 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期494-496,共3页
目的:研究Bcl-2蛋白与caspase-3基因表达在实验性暴发性肝衰竭(FHF)中对肝细胞凋亡的作用。方法:用脂多糖和D-氨基半乳糖制备FHF小鼠模型;免疫组化法检测肝组织内Bcl-2蛋白表达;原位杂交法检测肝组织内caspase-3基因表达;缺口原位末端... 目的:研究Bcl-2蛋白与caspase-3基因表达在实验性暴发性肝衰竭(FHF)中对肝细胞凋亡的作用。方法:用脂多糖和D-氨基半乳糖制备FHF小鼠模型;免疫组化法检测肝组织内Bcl-2蛋白表达;原位杂交法检测肝组织内caspase-3基因表达;缺口原位末端标记技术检测肝细胞凋亡。结果:模型组用药后2 h Bcl-2有较多表达,4 h表达最多,以后逐渐减少,4 h与2 h比较差别显著(P<0.05),与8 h、12 h比较差别十分显著(P<0.01)。模型组用药后2 h caspase-3开始少量表达,8 h达最高峰,并出现典型的肝细胞凋亡改变,12 h表达下降,且同时存在肝细胞凋亡和坏死。。Bcl-2与caspase-3表达及肝细胞凋亡均呈负相关。结论:在FHF中,肝细胞凋亡与caspase-3的激活有关;Bcl-2可能通过抑制caspase-3的活性而抑制肝细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝细胞凋亡 BCL-2蛋白 caspase-3基因
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川芎嗪对急性脊髓损伤大鼠神经细胞早期凋亡和Caspase-3mRNA表达的影响 被引量:10
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作者 王健 贾玉柱 +2 位作者 郑纯威 徐卫星 刘建 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第12期2662-2668,共7页
目的:观察川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞的早期凋亡及其对Caspase-3mRNA表达的影响,进一步认识Caspase-3在脊髓损伤后细胞凋亡中的作用机制。方法:采用改良Allen's重物打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型,120只成年SD大鼠,随机分... 目的:观察川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞的早期凋亡及其对Caspase-3mRNA表达的影响,进一步认识Caspase-3在脊髓损伤后细胞凋亡中的作用机制。方法:采用改良Allen's重物打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型,120只成年SD大鼠,随机分成4组:正常组、模型组、甲强龙及川芎嗪组,每组各30只,造模后模型组、甲强龙组和川芎嗪组分别按时注射同体积的生理盐水,甲强龙及川芎嗪注射液。损伤后各时间采用BBB法行神经功能评分,流式细胞术观察细胞凋亡情况,透射电镜观察细胞形态学变化,并应用RT-PCR技术检测Caspase-3mRNA表达的情况。结果:模型组伤后6h出现了神经细胞的早期凋亡,至伤后24h达到高峰,伤后48h比24h略有下降,但仍持续在较高的水平,差异无统计学意义(P>0.05);川芎嗪治疗组伤后各时间点细胞凋亡与甲强龙组伤后各时间点细胞凋亡比较差异无统计学意义(P>0.05),但川芎嗪组和甲强龙组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。伤后各时间点Caspase-3mRNA表达的趋势相近,都具有"量———时间"的依赖关系,川芎嗪治疗组与甲强龙组伤后各时间点Caspase-3mRNA比较差异无统计学意义(P>0.05),但川芎嗪组和甲强龙组分别与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:本研究发现大鼠SCI后神经细胞6h内的即出现早期凋亡,比电子显微镜下判断凋亡出现的时间要明显提早;SCI后,损伤区脊髓组织Caspase-3mRNA水平明显升高,与细胞凋亡的比例和细胞超微结构的变化具有明显的相关性;早期使用川芎嗪能减轻大鼠急性脊髓损伤后的神经细胞凋亡,对大鼠急性脊髓损伤有一定神经保护作用,主要机制可能和抑制细胞凋亡的"级联反应"有关。 展开更多
关键词 脊髓损伤 大鼠 川芎嗪 细胞凋亡 caspase-3 基因
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E1A基因对裸鼠移植瘤生长抑制及其初步作用机制的实验研究 被引量:5
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作者 申良方 刘新菊 +3 位作者 王骋 赵凯 乐园 申海菊 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期198-200,207,共4页
目的:探讨E1A基因对人宫颈癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其相关作用机制。方法:通过裸鼠移植瘤实验,观察E1A基因对人宫颈癌细胞裸鼠移植瘤生长的的抑制作用。采用免疫组织化学染色检测E1A基因对肿瘤细胞凋亡及Survivin基因和Caspas... 目的:探讨E1A基因对人宫颈癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其相关作用机制。方法:通过裸鼠移植瘤实验,观察E1A基因对人宫颈癌细胞裸鼠移植瘤生长的的抑制作用。采用免疫组织化学染色检测E1A基因对肿瘤细胞凋亡及Survivin基因和Caspase-3基因表达的影响。结果:裸鼠移植瘤实验结果显示:Hela-E1A细胞形成的肿瘤较Hela和Hela-vect的出瘤时间晚,生长慢,瘤重小,抑瘤率分别为83.42%和84.74%。免疫组织化学染色显示:E1A基因组细胞凋亡数量较Hela和Hela-vect组明显增多,Caspase-3基因(凋亡促进因子)呈高表达,Survivin基因(调亡抑制因子)的表达明显降低。结论:E1A基因能够明显抑制人宫颈癌细胞裸鼠移植瘤的生长,该作用可能与E1A基因激活Caspase-3基因和降低Survivin基因的表达有关。 展开更多
关键词 E1A基因 人宫颈癌细胞裸鼠 移植瘤 Smwivin基因 caspase-3基因PEI-Fe3O4纳米粒
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浙江地区汉族人群caspase-3基因三个位点的单倍型研究 被引量:8
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作者 谢云 周韧 +2 位作者 叶月芳 杨水友 张伟 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期633-635,共3页
目的分析汉族人群caspase-3基因的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphisms,SNPs)位点及其构成的单倍型,为研究caspase-3基因对凋亡调节机制的个体差异提供线索。方法用变性高效液相色谱技术和DNA测序技术检测caspase-3基因的调... 目的分析汉族人群caspase-3基因的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphisms,SNPs)位点及其构成的单倍型,为研究caspase-3基因对凋亡调节机制的个体差异提供线索。方法用变性高效液相色谱技术和DNA测序技术检测caspase-3基因的调控区、第2~7外显子及部分侧翼序列的多态性位点;分析位点间的连锁不平衡关系,估算它们构成的单倍型。结果共检出3个SNP位点(C829A、A17532C、C20541T),分别位于caspase-3基因的5′端调控区、第4内含子和3′调控区;3个位点间存在强连锁不平衡,其中位点A17532C与C20541T呈完全连锁不平衡;54.3%的C-829/A-17532/C-20541是汉族人群的主要单倍型。结论浙江地区汉族人群caspase-3基因上的3个SNP位点间存在强连锁不平衡,它们构成的主要单倍型不同于北美人群。 展开更多
关键词 caspase-3基因 连锁不平衡 汉族人群 单倍型 SNP 位点 第4内含子 调控区 侧翼序列 DNA测序技术
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Caspase-3基因在大肠癌、大肠腺瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系 被引量:7
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作者 曾浩然 刘学勇 +4 位作者 陈德志 张红欣 程敏 张山 万祖安 《中国厂矿医学》 2008年第5期515-517,I0001,共4页
目的探讨大肠癌、大肠腺瘤中Caspase-3基因的表达及其与细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化S-P法和原位末端标记法分别检测28例大肠癌、10例大肠腺瘤及5例正常大肠黏膜中Caspase-3基因的表达水平及细胞凋亡。结果Caspase-3基因在大肠癌... 目的探讨大肠癌、大肠腺瘤中Caspase-3基因的表达及其与细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化S-P法和原位末端标记法分别检测28例大肠癌、10例大肠腺瘤及5例正常大肠黏膜中Caspase-3基因的表达水平及细胞凋亡。结果Caspase-3基因在大肠癌、大肠腺瘤和正常黏膜组织中表达分别为46·4%(13/28)、60·0%(6/10)、80·0%(4/5),三者之间有显著性差异(P<0·01)。大肠癌、大肠腺瘤中细胞凋亡指数显著高于正常黏膜组织(P<0·01),凋亡指数与肿瘤的分化程度有关(P<0·01),与病理类型、Dukes分期无关。大肠癌、大肠腺瘤中Caspase-3基因表达与细胞凋亡指数密切相关,阳性表达的细胞平均凋亡指数明显高于阴性表达的平均凋亡指数(P<0·01),而正常黏膜组织中二者无显著性差异(P>0·05)。结论肿瘤早期阶段的细胞凋亡异常和过度增生,可能是大肠癌的发病原因之一,作为细胞凋亡的调控因子,Caspase-3可能在大肠癌的发生发展中起重要作用。 展开更多
关键词 大肠癌 大肠腺瘤 caspase-3基因 细胞凋亡
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宫颈癌组织中caspase-3与nm23-H_1基因的表达及其意义 被引量:4
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作者 张保华 王泽华 卢实 《医药论坛杂志》 2004年第11期41-43,45,共4页
目的 探讨宫颈癌组织中caspase 3与nm2 3 H1基因表达的特征及相关性。方法 应用免疫组织化学方法 (SP法 )分别检测caspase 3和nm2 3 H1基因在 4 1例宫颈癌组织、17例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)和 10例正常宫颈组织中的表达 ,分析其与... 目的 探讨宫颈癌组织中caspase 3与nm2 3 H1基因表达的特征及相关性。方法 应用免疫组织化学方法 (SP法 )分别检测caspase 3和nm2 3 H1基因在 4 1例宫颈癌组织、17例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)和 10例正常宫颈组织中的表达 ,分析其与临床病理特征的相关性。结果 caspase 3在宫颈癌组织和CIN中的阳性表达率均明显低于正常宫颈组织中的阳性表达率 (P <0 0 5 ) ;caspase 3的表达与宫颈癌的组织类型、病理分级和临床分期无相关性 (P >0 .0 5 )。nm2 3 H1基因在宫颈癌组织中的阳性表达率与CIN及正常宫颈组织相比均具有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;nm2 3 H1的阳性表达与宫颈癌的临床分期、组织类型、病理分级无相关性 (P >0 0 5 )。caspase 3基因的表达与nm2 3 H1基因的表达无相关性 (P >0 0 5 )。结论 caspase 3和 /或nm2 3 H1基因的表达降低与宫颈癌的发生密切相关。 展开更多
关键词 宫颈癌 caspase-3 NM23-H1 基因表达 免疫组织化学 检测
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西红花苷对3β,5α,6β-三羟胆甾烷致内皮细胞凋亡和相关基因表达的影响 被引量:7
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作者 刘娟 钱之玉 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期254-259,共6页
目的:研究西红花苷(crocin)对3β,5α,6β-三羟胆甾烷(cholestane-3β,5α,6β-triol,Triol)致血管内皮细胞凋亡和相关基因表达的影响。方法:将内皮细胞分成正常对照组、模型组(25μmol/LTriol)、西红花苷(10-6mol/L,10-7mol/L,10-8mol/... 目的:研究西红花苷(crocin)对3β,5α,6β-三羟胆甾烷(cholestane-3β,5α,6β-triol,Triol)致血管内皮细胞凋亡和相关基因表达的影响。方法:将内皮细胞分成正常对照组、模型组(25μmol/LTriol)、西红花苷(10-6mol/L,10-7mol/L,10-8mol/L)+25μmol/LTriol组。采用诱导内皮细胞凋亡的模型,用比色法测定丙二醛含量。光学显微镜、电子显微镜观察细胞形态和超微结构的变化,电泳法检测DNA梯形条带、流式细胞仪分析法检测细胞凋亡率,逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)法检测Bcl2和BaxmRNA表达,免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达。结果:用Triol处理后,培养液中MDA含量增加(P<0.01vscontrol),细胞收缩,核浓缩,深染,线粒体肿胀空化,出现凋亡小体、DNA梯形条带和亚二倍体峰,细胞凋亡率为30.62%,BaxmRNA、Bax蛋白和Caspase3蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.01);Bcl2mRNA和蛋白表达低于正常对照组(P<0.01);西红花苷(10-7mol/L、10-6mol/L)+Triol组,MDA含量减少,内皮细胞形态结构完整,细胞凋亡率分别为24.4%、6.3%,细胞Bax和Caspase3基因表达明显下调,Bcl2基因表达上调(P<0.05orP<0.01vsTriol)。结论:西红花苷可能是通过调节Bcl-2,Bax和Caspase-3基因表达抑制Triol诱导的内皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 西红花苷 3β 6β-三羟胆甾烷 内皮细胞 凋亡Bax BCL-2 caspase-3 基因表达
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