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抗RIP3抗体的制备及其亚细胞定位
被引量:
4
1
作者
谢琳娜
张娜
+2 位作者
陈明谅
李勤喜
周化民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期660-663,共4页
目的:制备兔抗受体相互作用蛋白3(RIP3)的抗体,并探讨其在鼠源NIH3T3细胞株中的定位。方法:用RTPCR技术从NIH3T3细胞株中克隆鼠rip3基因,进行原核表达及电洗脱纯化。以高纯度的RIP3抗原免疫新西兰兔制备抗血清并纯化。用Westernblot检...
目的:制备兔抗受体相互作用蛋白3(RIP3)的抗体,并探讨其在鼠源NIH3T3细胞株中的定位。方法:用RTPCR技术从NIH3T3细胞株中克隆鼠rip3基因,进行原核表达及电洗脱纯化。以高纯度的RIP3抗原免疫新西兰兔制备抗血清并纯化。用Westernblot检测该抗体的特异性,以免疫荧光法确定RIP3在NIH3T3细胞株中的定位,以及TNFα和zVAD.fmk对其定位的影响。结果:获得特异性的兔抗RIP3蛋白的抗体。免疫荧光的结果显示,RIP3定位于细胞质中。单用TNFα或zVAD.fmk处理NIH3T3细胞后,RIP3的定位均无明显变化;而用zVAD.fmk和TNFα共同处理细胞后,在核内外均有RIP3分布。结论:成功地克隆rip3基因并制备高特异性的兔抗RIP3抗体。RIP3在NIH3T3细胞株中定位于细胞质中,为进一步研究RIP3在TNFα诱导的caspase非依赖的细胞凋亡途径中的作用奠定了基础。
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关键词
RIP3
多克隆抗体
亚
细胞
定位
caspase
非
依赖
的
细胞凋亡
途径
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职称材料
题名
抗RIP3抗体的制备及其亚细胞定位
被引量:
4
1
作者
谢琳娜
张娜
陈明谅
李勤喜
周化民
机构
厦门大学生命科学院
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期660-663,共4页
基金
国家自然科学基金面上项目(30500273)
文摘
目的:制备兔抗受体相互作用蛋白3(RIP3)的抗体,并探讨其在鼠源NIH3T3细胞株中的定位。方法:用RTPCR技术从NIH3T3细胞株中克隆鼠rip3基因,进行原核表达及电洗脱纯化。以高纯度的RIP3抗原免疫新西兰兔制备抗血清并纯化。用Westernblot检测该抗体的特异性,以免疫荧光法确定RIP3在NIH3T3细胞株中的定位,以及TNFα和zVAD.fmk对其定位的影响。结果:获得特异性的兔抗RIP3蛋白的抗体。免疫荧光的结果显示,RIP3定位于细胞质中。单用TNFα或zVAD.fmk处理NIH3T3细胞后,RIP3的定位均无明显变化;而用zVAD.fmk和TNFα共同处理细胞后,在核内外均有RIP3分布。结论:成功地克隆rip3基因并制备高特异性的兔抗RIP3抗体。RIP3在NIH3T3细胞株中定位于细胞质中,为进一步研究RIP3在TNFα诱导的caspase非依赖的细胞凋亡途径中的作用奠定了基础。
关键词
RIP3
多克隆抗体
亚
细胞
定位
caspase
非
依赖
的
细胞凋亡
途径
Keywords
RIP3
polyclonal antibody
subcellular Iocalizations
caspase
-independent cell apoptosispathway
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗RIP3抗体的制备及其亚细胞定位
谢琳娜
张娜
陈明谅
李勤喜
周化民
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
4
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