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软骨脱细胞基质多孔支架与骨髓基质干细胞体外构建组织工程软骨的研究 被引量:15
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作者 杨强 彭江 +9 位作者 卢世璧 夏群 胡永成 徐宝山 郭全义 汪爱媛 赵斌 张莉 姚军 许文静 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期1161-1166,共6页
目的探讨关节软骨脱细胞基质多孔支架(CEDPS)与骨髓基质干细胞(BMSCs)体外培养组织工程软骨的可行性。方法粉碎人关节软骨,脱细胞处理后差速离心法收集细胞外基质悬液,采用冷冻干燥技术制备三维多孔支架。扫描电镜观察其微观结构... 目的探讨关节软骨脱细胞基质多孔支架(CEDPS)与骨髓基质干细胞(BMSCs)体外培养组织工程软骨的可行性。方法粉碎人关节软骨,脱细胞处理后差速离心法收集细胞外基质悬液,采用冷冻干燥技术制备三维多孔支架。扫描电镜观察其微观结构,并进行组织学观察,生化成分定量检测其胶原、氨基葡聚糖(GAG)、DNA含量,生物力学方法测量其干性及覆水状态下压缩弹性模量;分离培养犬骨髓基质干细胞,TGF-β1成软骨诱导,PKH26标记,接种到支架卜体外继续诱导培养,荧光显微镜及扫描电镜观察培养3d后细胞在支架内的黏附、分布情况。结果制备的CEDPS支架无细胞碎片残留,软骨细胞外基质特异性染色阳性,具有相互贯通的三维孔隙结构;支架生化成分定量检测:总胶原含量为(708.2±44.7)μ/mg,GAG含量为(254.7±25.9)μ/mg,DNA含量为(0.021±0.007)μ/mg;支架纵向压缩弹性模量E=(1.226±0.288)MPa,覆水后压缩弹性模量E=(0.052±0.007)MPa。荧光显微镜、电镜检查结果表明细胞广泛均匀的分布在支架内部,呈圆形或椭圆形,在支架上增殖显著,细胞基质分泌明显。结论CEDPS支架在生化组成和结构上与软骨细胞外基质成分类似,去细胞彻底,具有良好生物力学特性,是一种较为理想的软骨组织工程支架载体;成软骨诱导的BMSCs与CEDPS支架在体外可初步构建类软骨样组织。 展开更多
关键词 生物医学工程 软骨 细胞支架 髓样组细胞 细胞培养
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软骨前体细胞及微小RNA-140在骨关节炎软骨损伤修复中的作用 被引量:10
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作者 斯海波 梁明玮 +1 位作者 程惊秋 沈彬 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期650-656,共7页
目的总结软骨前体细胞(cartilage progenitor cells,CPCs)及微小RNA-140(microRNA-140,miR-140)在骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨损伤修复中的作用及应用前景。方法查阅国内外近年有关CPCs、miR-140及OA软骨损伤修复的相关研究,归纳... 目的总结软骨前体细胞(cartilage progenitor cells,CPCs)及微小RNA-140(microRNA-140,miR-140)在骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨损伤修复中的作用及应用前景。方法查阅国内外近年有关CPCs、miR-140及OA软骨损伤修复的相关研究,归纳总结后进行综述。结果 CPCs具有良好的自我增殖性、干细胞表面抗原表达特性及多向分化潜能等特点,其成软骨分化能力优于其他组织来源MSCs。CPCs与OA发生发展密切相关,但其在OA软骨损伤部位自主活化及成软骨分化能力方面并不能达到软骨完全修复的要求。miR-140具有软骨特异性,参与OA发病机制,具有抑制Notch信号通路、诱导活化CPCs并增强其增殖及成软骨分化的能力,从而促进OA软骨损伤修复的潜能。关节腔局部给药是目前治疗OA的主要方式之一,关节腔注射miR-140虽然对大鼠软骨退变具有显著抑制作用,但也存在非靶向聚集、生物利用度低及清除快等问题,基于关节软骨特性构建具有良好安全性、软骨靶向性且能高效递送miR-140的载体材料具有良好应用前景。此外,CPCs主要分散在软骨表层,而OA软骨损伤也开始于该层,因此强调OA早期干预至关重要。结论 miR-140具有诱导活化CPCs、促进OA早期软骨损伤修复的潜能,进一步探索miR-140在OA发生机制中的作用及研发基于miR-140的新的OA治疗策略具有重要临床意义。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨前体细胞 微小RNA-140 软骨损伤修复
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运动性软骨损伤的问题及潜在性治疗方案 被引量:4
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作者 石松源 彭志辉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第31期5059-5064,共6页
背景:关节软骨损伤在运动中非常普遍,主要由慢性关节应力或急性创伤性扭伤引起,往往会导致关节功能进行性损害,并限制相关运动和锻炼的参与。现有的关节软骨修复技术可以修复高冲击运动所致的关节软骨损伤,但这种治疗方法不产生正常的... 背景:关节软骨损伤在运动中非常普遍,主要由慢性关节应力或急性创伤性扭伤引起,往往会导致关节功能进行性损害,并限制相关运动和锻炼的参与。现有的关节软骨修复技术可以修复高冲击运动所致的关节软骨损伤,但这种治疗方法不产生正常的关节软骨,限制了软骨修复的成功率和耐久性。目的:综述近年国内外治疗运动性软骨损伤中出现的问题及潜在性的治疗进展。方法:以"运动""软骨""回顾""治疗"为中文关键词,在中国知网、维普、万方等中文数据库进行检索,并以"cartilage""exercise""review""back pain""treat"作为外文关键词,在PubMed、Google Scholar、Web of Science等数据库进行检索,重点筛选近5年的文献,检索文献语种为中文和英文。共检得文献627篇,依据纳入和排除标准,最终纳入相关文献44篇。结果与结论:(1)治疗运动性关节软骨损伤的目标是减少疼痛,改善膝关节功能,最重要的是让运动员恢复到受伤前的运动水平;(2)目前已有一些手术技术已经实现可变耐用的关节软骨修复,让运动员重返体育运动和锻炼,然而手术不会产生完全正常的透明软骨;(3)研究发现,关节软骨中存在软骨祖细胞,具有迁移行为、多分化能力和克隆形成性,由于不同性质和程度的机械损伤刺激软骨祖细胞,导致凋亡0细胞释放化学引诱物,从而分化成软骨原细胞,修复损伤软骨;(4)基于此,生物打印富含软骨祖细胞的特异性骨软骨结构,以替代受损关节仍是未来的潜在性战略方案。 展开更多
关键词 关节软骨损伤 运动 治疗 生物打印 凋亡细胞 软骨祖细胞 国家自然科学基金
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大鼠软骨非全层损伤模型的建立及活化细胞与整合素β_1表达关系的研究 被引量:3
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作者 张凯彬 石晶 +4 位作者 李杨 蒋逸秋 丁朋 杨晓霏 桂鉴超 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期432-439,共8页
目的探讨大鼠软骨非全层损伤模型的制备及术后细胞变化及细胞活化与整合素β_1表达的关系。方法 10周龄SD雄性大鼠45只,体质量300~400 g,随机分为手术组、假手术组和对照组,每组15只。手术组采用划痕法制造软骨非全层损伤模型;假手术组... 目的探讨大鼠软骨非全层损伤模型的制备及术后细胞变化及细胞活化与整合素β_1表达的关系。方法 10周龄SD雄性大鼠45只,体质量300~400 g,随机分为手术组、假手术组和对照组,每组15只。手术组采用划痕法制造软骨非全层损伤模型;假手术组打开膝关节囊后直接缝合;对照组不行手术。术后1、7、14 d各组分别处死5只大鼠,取材行大体观察;并行HE、番红O组织学染色,评估并比较各组HE染色改良组织学评分及番红O染色灰度值;行Brd U、CD105免疫荧光染色和CD105/整合素β_1双标记染色,采用标准双盲法计数并比较各组各时间点CD105阳性细胞数。结果大体观察示手术组划痕周围软骨欠光滑,非透明,有软骨软化、纤维化改变,且随造模时间延长逐渐加重;假手术组和对照组软骨呈白色透明状,无软化、纤维化改变。HE染色示手术组在划痕周围细胞数增多,大小不等,排列分布不均;假手术组和对照组细胞大小均一,染色均匀,排列有序。手术组术后各时间点HE染色改良组织学评分均显著高于假手术组及对照组(P〈0.05),各组组内各时间点间比较差异均无统计学意义(P〉0.05)。番红O染色示手术组各时间点染色欠均匀,划痕周围区域着色较浅;假手术组和对照组各时间点染色均匀,无失染。术后各时间点各组间比较以及各组内各时间点间比较番红O染色灰度值,差异均无统计学意义(P〉0.05)。Brd U免疫荧光染色示手术组划痕周围细胞排列紊乱,分布不均;假手术组和对照组细胞排列分布均匀,无聚集现象。CD105免疫荧光染色示手术组划痕周围有较多阳性细胞聚集,细胞大小不一、分布不均;假手术组和对照组软骨层见少数阳性细胞,分布均匀。手术组术后各时间点CD105阳性细胞数均显著多于假手术组和对照组(P〈0.05);手术组内随时间延长CD105阳性细胞数逐渐增多,各时间点间比较差� 展开更多
关键词 软骨非全层损伤 软骨前体细胞 CD105 BRDU 整合素Β1 大鼠
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膝关节内干细胞/祖细胞在软骨再生中作用研究进展 被引量:3
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作者 杨振 李浩 +15 位作者 付力伟 高仓健 赵天元 陈威 廖志垚 李品学 李旭 王福鑫 田广招 孙志强 查康康 曹福洋 周建 眭翔 刘舒云 郭全义 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2021年第1期51-56,共6页
关节软骨(AC)由于缺乏血管、神经和淋巴,一旦损伤无法自我修复。虽然以外源性细胞为基础的治疗策略在一定程度上能够再生关节软骨,但仍然存在手术间隔长、供体有限、细胞体外培养易去分化和病原体传播等风险。成人膝关节存在许多类型干... 关节软骨(AC)由于缺乏血管、神经和淋巴,一旦损伤无法自我修复。虽然以外源性细胞为基础的治疗策略在一定程度上能够再生关节软骨,但仍然存在手术间隔长、供体有限、细胞体外培养易去分化和病原体传播等风险。成人膝关节存在许多类型干细胞/祖细胞(SCPCs),当软骨损伤时,就会被动员,迁移到损伤部位,参与再生修复。因此,基于趋化内源性SCPCs到损伤部位的AC原位再生修复策略,充分利用机体自我修复潜力,同时避免了外源性细胞策略的缺点,已经成为研究的热点。本综述主要介绍膝关节内SCPCs类型、迁移路径以及其在软骨损伤修复中的作用。重点介绍内源性AC再生修复策略的研究现状,以期吸引更多的研究人员参与这一有前景的研究领域。 展开更多
关键词 膝关节 软骨损伤 干细胞 祖细胞 再生
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软骨前体细胞的分离鉴定及IL-1β对其成软骨分化的影响 被引量:2
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作者 周建新 杨晓斐 +3 位作者 李阳 丁朋 蒋逸秋 桂鉴超 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期863-869,共7页
目的对正常软骨中的软骨前体细胞进行分离、鉴定,并对不同浓度IL-1β对软骨前体细胞的成软骨分化影响进行研究。方法取正常成年新西兰大白兔的软骨细胞,通过纤连蛋白粘连分离出软骨前体细胞,采用流式细胞仪对其细胞表型进行鉴定,倒置相... 目的对正常软骨中的软骨前体细胞进行分离、鉴定,并对不同浓度IL-1β对软骨前体细胞的成软骨分化影响进行研究。方法取正常成年新西兰大白兔的软骨细胞,通过纤连蛋白粘连分离出软骨前体细胞,采用流式细胞仪对其细胞表型进行鉴定,倒置相差显微镜观察其克隆增殖,并行成骨、成脂、成软骨三系分化观察。培养软骨前体细胞团并分为4组,分别加入普通H-DMEM培养基(A组)、成软骨诱导分化培养基(B组)、成软骨诱导分化培养基+0.1 ng/mL IL-1β(C组)、成软骨诱导分化培养基+1.0 ng/mL IL-1β(D组),培养3周行组织学、生物化学、实时荧光定量PCR等检测,观察IL-1β的影响。结果在正常软骨细胞中存在软骨前体细胞,经鉴定有干细胞表型阳性表达,有与干细胞相似的克隆增殖能力及分化能力。HE染色示,C、D组中细胞团块较B组明显减小,细胞呈肥大样改变。番红O、Ⅱ型胶原及Ⅹ型胶原染色示,B组较A组染色深,C、D组均浅于B组,D组浅于C组。生物化学成分测定示,C、D组的总胶原、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)相对含量及GAG/DNA比值均显著低于B组,D组显著低于C组,差异均有统计学意义(P<0.05);C、D组DNA相对含量均显著高于B组(P<0.05),但C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。实时荧光定量PCR检测示,C、D组Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原、Sox-9 mRNA相对表达量均显著低于B组,D组显著低于C组,差异均有统计学意义(P<0.05);而C、D组Runx-2和MMP-13mRNA相对表达量均显著高于B组,D组显著高于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在正常软骨组织中存在一种有干细胞特性的软骨前体细胞,其有克隆和潜在分化的能力。IL-1β对软骨前体细胞成软骨分化有抑制作用,并有促进成骨分化的可能。 展开更多
关键词 软骨前体细胞 炎性因子 IL-1Β 诱导分化 软骨修复
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骨形态发生蛋白-2基因转染骨髓基质干细胞复合壳聚糖体外构建组织工程软骨的实验研究 被引量:2
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作者 郭庆华 刘强 +1 位作者 李平 卢向东 《中国药物与临床》 CAS 2010年第1期21-24,共4页
目的观察转人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因的骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨细胞方向分化的能力,并种植于壳聚糖体外构建组织工程软骨。方法应用慢病毒介导把人BMP-2基因和增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因转入大鼠BMSCs,通过荧光观察、反转... 目的观察转人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因的骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨细胞方向分化的能力,并种植于壳聚糖体外构建组织工程软骨。方法应用慢病毒介导把人BMP-2基因和增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因转入大鼠BMSCs,通过荧光观察、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westernblot、免疫组织化学等方法检测BMP-2、Ⅱ型胶原表达及软骨基质分泌情况;噻唑蓝(MTT)检测转基因后细胞的增殖活力。结果BMP-2基因和eGFP基因成功转染BMSCs,Ⅱ型胶原及蛋白聚糖的表达均显著增强,细胞种植壳聚糖支架后生长、粘附良好。结论BMP-2可在BMSCs内表达,并诱导其向软骨方向分化;与壳聚糖复合培养可构建组织工程骨。 展开更多
关键词 软骨 骨髓祖代细胞 骨形态发生蛋白质类
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人原发性骨关节炎与正常人关节软骨间充质祖细胞多向分化能力的对比研究
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作者 刘军 王洪伟 +3 位作者 陈语 于海龙 王琪 项良碧 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期826-833,共8页
[目的]观察原发性骨关节炎及正常人关节软骨间充质祖细胞的生长和增殖特性及其成软骨、成骨和成脂分化能力,探讨关节软骨间充质祖细胞在原发性骨关节炎发病中的重要作用。[方法]观察原发性骨关节炎及正常人关节软骨间充质祖细胞成软骨(... [目的]观察原发性骨关节炎及正常人关节软骨间充质祖细胞的生长和增殖特性及其成软骨、成骨和成脂分化能力,探讨关节软骨间充质祖细胞在原发性骨关节炎发病中的重要作用。[方法]观察原发性骨关节炎及正常人关节软骨间充质祖细胞成软骨(微团培养)诱导分化后的细胞形态变化,TB、Ⅱ型胶原、Aggrecan染色,GAG含量及Ⅱ型胶原mRNA表达;成骨(单层传代培养)诱导分化后细胞形态变化,钙结节染色,ALP活性及BGPmRNA表达;成脂(单层传代培养)诱导分化后细胞形态变化,油红染色,油红染色阳性细胞比率及TG含量。[结果]原发性骨关节炎及正常人关节软骨间充质祖细胞成软骨诱导分化后细胞TB、Ⅱ型胶原、Aggrecan染色均呈阳性,原发性骨关节炎者GAG含量减少及Ⅱ型胶原mRNA表达减弱(P<0.05);成骨诱导分化后细胞钙结节染色均呈阳性,原发性骨关节炎者ALP含量减少及BGPmRNA表达减弱(P<0.05);成脂诱导分化后细胞油红染色均呈阳性,原发性骨关节炎者TG含量增加(P<0.05)。[结论]关节软骨间充质祖细胞经成软骨、成骨及成脂诱导后均能分化为具有相应功能细胞特性的分化细胞。原发性骨关节炎关节软骨间充质祖细胞成软骨和成骨分化能力降低,而成脂分化能力增加,提示原发性骨关节炎关节软骨间充质祖细胞分化功能出现异常,骨关节炎关节软骨细胞对软骨损伤修复能力降低。 展开更多
关键词 原发性骨关节炎 关节软骨 间充质祖细胞 多向分化
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关节表层软骨干细胞在骨关节炎中的作用研究进展 被引量:4
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作者 徐伟 廖冬发 +3 位作者 夏宁 刘达 王维 郑伟 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1045-1050,共6页
骨关节炎(OA)是一种引起关节软骨不可逆的进行性破坏的退行性疾病,目前尚无有效方法延缓其进展。干细胞技术的发展为OA的治疗带来了曙光,但利用外源性干细胞修复或再生软骨的研究面临许多困难,其产生的软骨样组织与正常关节软骨在生物... 骨关节炎(OA)是一种引起关节软骨不可逆的进行性破坏的退行性疾病,目前尚无有效方法延缓其进展。干细胞技术的发展为OA的治疗带来了曙光,但利用外源性干细胞修复或再生软骨的研究面临许多困难,其产生的软骨样组织与正常关节软骨在生物特性和功能上具有一定差距。为解决该问题,有研究者提出动员关节软骨内源干细胞以促进缺损部位进行自我修复。虽然关节软骨缺乏自我修复能力,但大量研究证实,关节软骨表层(SPZ)中存在软骨干细胞(CSPCs)。该文就关节表层软骨干细胞(SPZ-CSPCs)及其在OA中的作用研究进展进行综述。 展开更多
关键词 骨关节炎 关节表层 软骨干细胞 软骨再生 蛋白聚糖4
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大鼠关节软骨来源祖细胞的分离鉴定及成软骨分化 被引量:1
10
作者 沈序 陆英杰 +4 位作者 路冬冬 方跃鹏 周乃慧 朱雪松 朱月倩 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第21期3364-3370,共7页
背景:关节软骨来源祖细胞具有较强的软骨分化能力,同时其成骨分化能力有限,但是经过扩增后其细胞特性是否会发生改变及如何改变目前仍没有相关报道。目的:观察不同代次关节软骨来源祖细胞增殖、成骨和成软骨能力的改变情况,并与骨髓间... 背景:关节软骨来源祖细胞具有较强的软骨分化能力,同时其成骨分化能力有限,但是经过扩增后其细胞特性是否会发生改变及如何改变目前仍没有相关报道。目的:观察不同代次关节软骨来源祖细胞增殖、成骨和成软骨能力的改变情况,并与骨髓间充质干细胞相比较。方法:利用纤连蛋白分选从关节软骨细胞中获得关节软骨来源祖细胞。通过克隆形成实验和CCK-8实验观察关节软骨来源祖细胞增殖能力改变;通过茜素红染色和成骨相关基因表达观察关节软骨来源祖细胞和骨髓间充质干细胞成骨分化潜能的变化;通过Ⅱ型胶原免疫组化染色和成软骨相关基因表达观察关节软骨来源祖细胞和骨髓间充质干细胞成软骨分化潜能的变化。结果与结论:①通过纤连蛋白分选可从关节软骨细胞中获得具有干细胞特性的关节软骨来源祖细胞,其具有较强增殖能力以及成骨、成软骨分化潜能;②CCK-8和克隆形成实验结果显示随着细胞代次的增加,关节软骨来源祖细胞增殖能力略有下降;③骨髓间充质干细胞具有较强的成骨分化潜能,并且随着细胞扩增未有明显改变,成软骨分化潜能随着细胞扩增逐渐降低;④关节软骨来源祖细胞具有较强的成软骨潜能,并且随着细胞扩增未有明显改变,成骨分化潜能随着细胞扩增逐渐降低;⑤结果表明,关节软骨来源祖细胞的成骨潜能明显低于骨髓间充质干细胞并且随着细胞扩增逐渐减低,成软骨潜能高于骨髓间充质干细胞并且随着细胞扩增成软骨能力未有明显改变,说明关节软骨来源祖细胞可能是一种更加理想的软骨组织工程种子细胞。 展开更多
关键词 关节软骨来源祖细胞 骨髓间充质干细胞 成骨潜能 成软骨潜能 软骨组织工程 纤连蛋白分选 细胞增殖 国家自然科学基金
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不同年龄耳廓来源软骨细胞的生物学特性研究 被引量:1
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作者 吴怡 董可欣 +3 位作者 杨峥 刘霞 肖苒 蒋海越 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期331-340,共10页
目的探讨不同年龄来源耳廓软骨的组织结构,软骨细胞的增殖、分化能力,以及相关基因和细胞表面标志物的表达差异。方法耳廓软骨组织来源为中国医学科学院整形外科医院收治的22例小耳畸形患者,年龄6~28岁,分为儿童组(6~12岁)、青少年组(13... 目的探讨不同年龄来源耳廓软骨的组织结构,软骨细胞的增殖、分化能力,以及相关基因和细胞表面标志物的表达差异。方法耳廓软骨组织来源为中国医学科学院整形外科医院收治的22例小耳畸形患者,年龄6~28岁,分为儿童组(6~12岁)、青少年组(13~18岁)和成人组(21~28岁)。提取得到不同年龄来源耳廓软骨细胞后,分别检测其增殖分化能力;同时应用荧光定量PCR检测细胞增殖和软骨细胞外基质相关基因在不同年龄软骨细胞中的表达差异;利用流式细胞术、免疫荧光、免疫组化等技术,检测间充质干细胞标志物CD90、CD44、CD73、CD105在这些细胞中的表达差异。结果儿童组耳廓软骨细胞的增殖能力较强,与成人组比较差异有统计学意义(P<0.05),与青少年组比较差异同样具有统计学意义(P<0.01);青少年和成人组软骨细胞增殖能力较弱;随着年龄的增加,软骨细胞外基质相关基因COL2A1的表达不断上升,儿童组与成人组比较P<0.01,青少年组与成人组比较P<0.01。细胞成骨分化能力随年龄的增长不断降低(P<0.05);但不同年龄来源软骨细胞的成脂分化能力比较差异无统计学意义;流式和荧光定量PCR的结果均表明间充质干细胞标志物的表达随着年龄的增长逐渐降低,以CD90最为明显(P<0.01)。结论年龄因素影响耳廓软骨组织来源细胞的生物学特性及干细胞含量。 展开更多
关键词 年龄 耳廓软骨 细胞增殖 细胞分化 软骨干细胞/祖细胞
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Notch信号通路在骨性关节炎软骨干细胞迁移及分化中的作用
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作者 乔天华 邹丰锴 +3 位作者 孙魏巍 陈民浩 王友华 徐华 《交通医学》 2022年第3期221-224,230,共5页
目的:探究炎症环境下Notch信号通路对软骨干细胞(CSPCs)迁移及成软骨分化能力的影响。方法:取5日龄SD大鼠CSPCs,利用IL-1β刺激大鼠CSPCs模拟骨性关节炎(osteoarthritis,OA)炎症微环境,通过划痕实验检测CSPCs迁移能力,RT-PCR检测Notch... 目的:探究炎症环境下Notch信号通路对软骨干细胞(CSPCs)迁移及成软骨分化能力的影响。方法:取5日龄SD大鼠CSPCs,利用IL-1β刺激大鼠CSPCs模拟骨性关节炎(osteoarthritis,OA)炎症微环境,通过划痕实验检测CSPCs迁移能力,RT-PCR检测Notch信号通路及成软骨分化相关基因的变化。结果:炎症环境下CSPCs迁移能力减弱,成软骨分化相关基因COL2A 1及SOX 9的表达明显下降,同时Notch信号通路受体Notch 1、配体Jagged 1以及下游分子HES 1的表达均显著上升。DAPT抑制Notch信号通路后可恢复CSPCs迁移和成软骨分化能力,激活Notch信号通路可抑制正常CSPCs迁移和成软骨分化能力。结论:Notch信号通路异常激活与CSPCs功能失调及骨关节炎的发生发展密切相关。 展开更多
关键词 软骨干细胞 NOTCH信号通路 骨性关节炎 成软骨分化 迁移
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不同筛选方法分离兔耳软骨干/祖细胞的对比研究
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作者 杨峥 何乐人 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1062-1065,共4页
目的应用3种不同方法分离兔耳软骨来源干/祖细胞(CSPCs),对比3种方法的可靠性。方法2019年1月至2019年12月选取4个月龄健康日本大耳白兔(由中国医学科学院整形外科医院实验动物中心提供)取耳软骨,酶消化法得到软骨细胞,简单随机分为以下... 目的应用3种不同方法分离兔耳软骨来源干/祖细胞(CSPCs),对比3种方法的可靠性。方法2019年1月至2019年12月选取4个月龄健康日本大耳白兔(由中国医学科学院整形外科医院实验动物中心提供)取耳软骨,酶消化法得到软骨细胞,简单随机分为以下4组,纤维连接蛋白黏附+低密度筛选法(FN+LD组),单纯纤连蛋白黏附法(FN组),低密度筛选法(LD组),未经筛选的软骨细胞(CC组)。利用流式细胞术检测间充质干细胞标志物CD44和CD90的表达,比较细胞自我更新和多向分化能力的差异。两样本组间比较应用t检验,多组间比较采用方差分析。结果3种筛选方法获得的CSPCs均高表达CD44和CD90;FN+LD组与FN组CD44表达率均高于LD组[(98.13±0.25)%比(95.40±0.43)%,t=3.521,P<0.01;(97.77±1.33)%比(95.40±0.43)%,t=4.148,P<0.05];FN+LD组CD90表达高于LD组[(95.47±0.66)%比(92.07±1.20)%,t=9.087,P<0.01],差异均有统计学意义。与CC组比较,FN+LD、FN、LD组克隆形成率升高[(15.80±2.68)%比(4.80±0.75)%,t=8.751,P<0.01;(20.80±1.64)%比(4.80±0.75)%,t=19.400,P<0.01;(8.40±2.61)%比(4.80±0.75)%,t=2.939,P<0.05];FN+LD组克隆形成率高于LD组[(15.80±2.68)%比(8.40±2.61)%,t=4.422,P<0.01],低于FN组[(15.80±2.68)%比(20.80±1.64)%,t=3.553,P<0.01],差异均有统计学意义。成骨与成脂能力FN+LD、FN、LD组均显著高于CC组(66.84±1.72比59.42±2.20,t=5.939,P<0.01;69.46±1.95比59.42±2.20,t=7.630,P<0.01;63.34±1.44比59.42±2.20,t=3.330,P<0.01与26.34±0.57比13.40±0.84,t=26.080,P<0.01;26.41±1.12比13.40±0.84,t=20.820,P<0.01;26.58±0.76比13.40±0.84,t=26.080,P<0.01),差异均有统计学意义;FN+LD组成骨能力高于LD组(66.84±1.72比63.34±1.44,t=3.493,P<0.01),低于FN组(66.84±1.72比69.46±1.95,t=2.257,P<0.05),差异有统计学意义;3组间成脂能力差异无统计学意义(26.34±0.57比26.41±1.12比26.58±0.76,F=0.107,P>0.05)。结论纤维连接蛋白黏附+低密度筛选法、单纯纤连蛋白黏附法和低密度筛选法均能� 展开更多
关键词 软骨干细胞 差异黏附 低密度筛选 自我更新 多向分化
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