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题名植酸酶根特异表达载体的构建及大豆转化
被引量：3
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作者
李桂兰
乔亚科
李明刚
崔姗姗
乔潇
乔坤艳
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机构
河北科技师范学院生命科技学院
南开大学生命科学学院
上海大学
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出处
《核农学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期892-897,共6页
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基金
国家科技部转基因生物新品种培育重大科技专项(2009ZX08004-004B,2009ZX08004-001B)
河北省自然科学基金(C2009000868)
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文摘
应用PCR方法分别从胡萝卜基因组中扩增出96bp的外展蛋白信号肽编码序列片段,从拟南芥基因组中扩增出1454bp的pyk10启动子片段,用RT-PCR方法从无花果曲霉(Aspergillus ficuum3.4322)中扩增出phyA基因,长1347bp。然后,分别克隆到pMD18-T载体。应用已设计的限制酶切位点,通过5个中间载体将3段DNA片段连接构成2.9kb的表达单元Ppyk10-S-phJA(KSA),将KSA片段插入初始载体pC-GENERAL,构建成植酸酶根特异表达载体pPC-KSA。利用农杆菌介导法将无花果曲霉植酸酶基因phyA转入到栽培大豆品种吉林35中,在大豆转基因植株中正确表达,产生有活性的植酸酶,且能分泌到根外。T3代植株根系分泌植酸酶活性比未转化植株提高了2～4倍。
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关键词
外展蛋白信号肽
pyk10启动子
PHYA基因
大豆
转基因
植酸酶
根特异表达
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Keywords
carrot extension signal peptide coding sequence
Pyk10promoter
phyA
Glycine max L.Merr
transgene
phytase
specific expression in root
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分类号
S565.1
[农业科学—作物学]
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