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人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化 被引量:1
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作者 闫存玲 徐国宾 夏铁安 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期812-817,共6页
提取人心肌组织总RNA,RT PCR扩增出人心肌肌钙蛋白I(cardiactroponinI,cTnI)和肌钙蛋白C(TnC)基因,利用人工合成的可编码 19个中性氨基酸残基为主的DNA序列(Linker),将cTnI和TnC基因连接,插入到质粒pET15b中,将鉴定正确的重组pET15b质... 提取人心肌组织总RNA,RT PCR扩增出人心肌肌钙蛋白I(cardiactroponinI,cTnI)和肌钙蛋白C(TnC)基因,利用人工合成的可编码 19个中性氨基酸残基为主的DNA序列(Linker),将cTnI和TnC基因连接,插入到质粒pET15b中,将鉴定正确的重组pET15b质粒转化入大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中,用异丙基 β D$C硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达.结果在大肠杆菌中成功实现了全长cTnI C融合蛋白(cTnI linker TnC)的稳定可溶性高表达,在摇瓶中表达量可达 2 1mg/L.利用目的蛋白N端的组氨酸 标签"(His tag),经一步Ni2 + Sepharose柱亲和层析纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯蛋白质.经初步研究,cTnI C具有较好的免疫原性和稳定性,有望成为cTnI测定系统可溯源的候选参考物质。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白i-c 融合蛋白 表达 纯化
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NT-proBNP和肌钙蛋白I在慢性阻塞性肺疾病合并肺源性心脏病检测中的临床意义 被引量:10
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作者 曾仲麟 梁锦泉 +2 位作者 谭柏松 丘仲柳 林雅媛 《吉林医学》 CAS 2017年第2期293-295,共3页
目的:探讨在慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺源性心脏病患者中检测血浆N末端脑钠肽前体(NTproBNP)和肌钙蛋白I(cTnI)的临床意义。方法:共30例患者纳入研究,此30例患者均经历急性加重期及治疗缓解期,测量患者的血浆NT-proBNP和cTnI的水平... 目的:探讨在慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺源性心脏病患者中检测血浆N末端脑钠肽前体(NTproBNP)和肌钙蛋白I(cTnI)的临床意义。方法:共30例患者纳入研究,此30例患者均经历急性加重期及治疗缓解期,测量患者的血浆NT-proBNP和cTnI的水平变化并前后对比。结果:COPD合并肺源性心脏病的患者处于急性加重期时的血浆NT-proBNP和cTnI水平分别为(1819.5±476.3)和(1.26±0.63),处于治疗缓解期时的血浆NT-proBNP和cTnI水平分别为(342.7±178.9)和(0.48±0.25),两者比较有明显统计学差异(P<0.01)。结论:COPD合并肺源性心脏病患者的血浆NT-proBNP和cTnI水平明显升高,尤其是处于急性加重期的患者,所以血浆NT-proBNP和cTnI可作为评估COPD合并肺源性心脏病的重要指标。 展开更多
关键词 N末端脑钠肽前体 肌钙蛋白i 慢性阻塞性肺疾病 肺源性心脏病
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异丙肾上腺素致SD大鼠心肌损伤标志物的研究 被引量:4
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作者 齐珍珍 张颖丽 +5 位作者 王三龙 王超 王雪 黄芝瑛 汪巨峰 李波 《生物医学工程研究》 2014年第4期240-244,272,共6页
探讨心肌肌钙蛋白(cardiac troponin I,c Tn I)、心脏型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid-binding Protein,H-FABP)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)作为标志物在临床前毒理实验中诊断早期心肌损伤的应用价值。雄性SD大鼠单... 探讨心肌肌钙蛋白(cardiac troponin I,c Tn I)、心脏型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid-binding Protein,H-FABP)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)作为标志物在临床前毒理实验中诊断早期心肌损伤的应用价值。雄性SD大鼠单次腹腔注射给予异丙肾上腺素0.5、5、50 mg/kg,于给药后1、3、6、12、24 h采血及解剖。采用液态悬浮芯片系统Luminex测定血清c Tn I,ELISA法测定H-FABP与CRP水平,全自动生化分析仪测定血清谷草转氨酶(AST)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)活力,观察大鼠心脏组织病理学改变。通过ROC曲线比较给药后1-24 h各标志物的灵敏度与特异性。c Tn I在3-24 h内给药组与对照组相比有不同程度的升高;H-FABP在1-3 h时给药组明显高于对照组,早于可见病理损伤出现的时间;CRP在24 h时中、高剂量组略有升高。大鼠血清中c Tn I、H-FABP、CRP、AST、CK-MB的ROC曲线下面积AUC分别为:0.821、0.763、0.584、0.741、0.742。在本心肌损伤模型中,c Tn I和H-FABP诊断效能可能高于传统心肌酶谱,而CRP未表现出对早期心肌损伤的诊断价值。 展开更多
关键词 肌钙蛋白 心脏型脂肪酸结合蛋白 标志物 心肌损伤 ROc曲线
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cTnI-C质控物制备与评价 被引量:1
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作者 卢艳华 周志伟 +2 位作者 陈小燕 卢航 王小明 《生物化工》 2022年第1期38-43,共6页
目的:研制人心肌肌钙蛋白I-C(cTnI-C)质控物,并评价cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性。方法:使用重组的cTnI-C复合蛋白制备质控品,筛选合适基质和冻干保护剂,获得稳定的cTnI-C质控物。结果:胎牛血清基质更有利于cTnI-C质控物... 目的:研制人心肌肌钙蛋白I-C(cTnI-C)质控物,并评价cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性。方法:使用重组的cTnI-C复合蛋白制备质控品,筛选合适基质和冻干保护剂,获得稳定的cTnI-C质控物。结果:胎牛血清基质更有利于cTnI-C质控物的稳定,添加3%海藻糖可显著提高cTnI-C质控物的热稳定性,质控物瓶间均一性无显著差异(F<2.39),37℃加速条件下可保存14 d,2~8℃贮存有效期为13个月,复溶后在2~8℃下可保存7 d。结论:本研究制备的cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性良好,可作为cTnI检测系统的校准物和质控物原料,提高临床实验室cTnI检测质量。 展开更多
关键词 心肌肌钙蛋白i-c(cTni-c) 质控物 冻干保护剂 均一性 稳定性
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心脏型脂肪酸结合蛋白在急诊胸痛患者中的诊断价值 被引量:10
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作者 刘永娥 梁华 石宏宴 《大连医科大学学报》 CAS 2011年第4期388-390,405,共4页
[目的]探讨心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急诊胸痛患者中的诊断价值。[方法]筛选急诊胸痛患者128例(0~6 h),立即采用H-FABP快速诊断试纸进行定性检测,同时测定血浆肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超敏C反应蛋白(hs... [目的]探讨心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急诊胸痛患者中的诊断价值。[方法]筛选急诊胸痛患者128例(0~6 h),立即采用H-FABP快速诊断试纸进行定性检测,同时测定血浆肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,计算各项指标单独及联合检测在诊断急性心肌梗死(AMI)方面的灵敏度和特异度。[结果]入选患者最终确诊AMI者68例,在0-6 h内H-FABP、cTnI、CK-MB、hs-CRP检出AMI的灵敏度分别为88.23%、44.12%、41.18%、42.65%;特异度分别为83.33%、93.30%、86.67%、86.70%,在灵敏度方面H-FABP与其它指标比较差异有显著性意义(P〈0.05);但在特异度上H-FABP与其它指标比较差异无显著性意义(P〉0.05)。各项指标联合检测的灵敏度为92.64%、特异度为91.60%,阳性预测值及阴性预测值分别为98.00%、90.00%。[结论]H-FABP是筛查急诊胸痛患者是否发生急性心肌梗死的中最灵敏的指标,具有重要的临床诊断价值;与cTnI、CK-MB、hs-CRP联合检测更能提高诊断效率。 展开更多
关键词 心脏型脂肪酸结合蛋白 急性心肌梗死 肌钙蛋白i 超敏c-反应蛋白
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