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骨形态发生蛋白-7在雷奈酸锶促进骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的作用 被引量：9
1
作者 李正 王瑒 +2 位作者 王小娜 兰爱平 吴文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1949-1953,共5页
目的探讨骨形态发生蛋白-7（BMP-7）在雷奈酸锶（Strontium ranelate,Sr）促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨细胞分化中的作用。方法体外分离培养4周龄大鼠BMSCs,取第3~4代,用细胞碱性磷酸酶标法检测不同浓度Sr作用下碱性磷酸酶... 目的探讨骨形态发生蛋白-7（BMP-7）在雷奈酸锶（Strontium ranelate,Sr）促进大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）向成骨细胞分化中的作用。方法体外分离培养4周龄大鼠BMSCs,取第3~4代,用细胞碱性磷酸酶标法检测不同浓度Sr作用下碱性磷酸酶（ALP）活性的表达;用茜素红染色法检测钙结节的表达;用Western blot测定BMP-7的表达水平。结果在0.1~3.0 mmol/L的浓度范围内,Sr呈浓度依赖性地增加ALP活性,其浓度为3 mmol/L时,ALP活性表达最高,并明显促进钙结节的表达;Sr（0.1~3.0 mmol/L）呈浓度依赖性地上调BMP-7表达,其中浓度为3 mmol/L时,BMP-7表达最高;BMP-7阻断剂（noggin）（100 ng/ml）不仅抑制Sr诱导的BMP-7表达,而且使ALP活性及钙结节的表达明显下降。结论 Sr可通过上调BMP-7表达促进BMSCs向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 雷奈酸锶 骨髓间充质干细胞 成骨分化 骨形成蛋白-7 碱性磷酸酶 钙结节
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骨碎补总黄酮促进骨膜细胞增殖及对兔骨不连的治疗作用 被引量：9
2
作者 江丽霞 袁瑞娟 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第19期2953-2958,共6页
背景:骨碎补总黄酮是一种传统中药,目前认为其主要具有预防骨质疏松、调节血脂等功效。骨碎补总黄酮对骨膜细胞的相关作用尚无相关研究。目的:探讨骨碎补总黄酮对兔骨膜细胞增殖的影响,进一步研究其对骨膜细胞治疗兔骨不连的促进作用。... 背景:骨碎补总黄酮是一种传统中药,目前认为其主要具有预防骨质疏松、调节血脂等功效。骨碎补总黄酮对骨膜细胞的相关作用尚无相关研究。目的:探讨骨碎补总黄酮对兔骨膜细胞增殖的影响,进一步研究其对骨膜细胞治疗兔骨不连的促进作用。方法:①选取第3代兔骨膜细胞,分别用10^(-5),10^(-6),10^(-7) g/L骨碎补总黄酮及10^(-8) mol/L雌二醇培养,于第1,2,4,6天检测骨膜细胞增殖情况;②选取第3代兔骨膜细胞,分别用10^(-5)g/L骨碎补总黄酮、10^(-8)mol/L雌二醇、纯净水培养,于第1,5,9,13天检测骨膜细胞中碱性磷酸酶的活性,于第5,10,15,20天用Von Kossa法检测骨膜细胞中钙结节数量;③选取第3代兔骨膜细胞,分别用10^(-5)g/L骨碎补总黄酮、10^(-5)g/L骨碎补总黄酮+1μmol/L雌激素受体拮抗剂ICI182780、PBS培养,于第1,2,4,6天检测骨膜细胞增殖情况;④建立兔桡骨骨不连模型,将10^(-5)g骨碎补总黄酮和1×10~3骨膜细胞注入骨不连处,观察其对骨不连愈合的影响。结果与结论:①各组骨膜细胞吸光度值均随时间增加而增加,以10^(-5)g/L骨碎补总黄酮组和雌二醇组最明显,并于第6天达最大值;②10^(-5)g/L骨碎补总黄酮组和雌二醇组骨膜细胞碱性磷酸酶活性均高于对照组(P <0.05),两组碱性磷酸酶活性比较差异无显著性意义(P> 0.05);③骨碎补总黄酮诱导骨膜细胞的增殖作用被10^(-8) mol/L雌激素受体拮抗剂ICI182780完全阻断;拮抗剂组与对照组相比,骨膜细胞吸光度值差异无显著性意义(P> 0.05);④骨碎补总黄酮和骨膜细胞联合治疗能促进骨愈合;⑤结果表明,骨碎补总黄酮能促进骨膜细胞增殖和成骨分化,其促进细胞增殖的作用与雌激素受体有关;骨碎补总黄酮能在体内和骨膜细胞一起共同治愈骨不连。 展开更多
关键词 骨不连 骨碎补总黄酮 骨膜细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶 钙结节 骨愈合
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血小板衍生生长因子BB诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 被引量：5
3
作者 魏琴 张雪 +6 位作者 马磊 李志强 寿玺 段明军 吴硕 贾麒钰 马创 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第19期2953-2957,共5页
背景:研究表明,小鼠前破骨细胞分泌的血小板衍生生长因子BB可以促进成骨细胞和成血管细胞形成,尚无血小板衍生生长因子BB是否可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的相关研究。目的:探讨血小板衍生生长因子BB诱导大鼠骨髓间充质干细... 背景:研究表明,小鼠前破骨细胞分泌的血小板衍生生长因子BB可以促进成骨细胞和成血管细胞形成,尚无血小板衍生生长因子BB是否可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的相关研究。目的:探讨血小板衍生生长因子BB诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的可行性。方法:①体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,第3代细胞经流式鉴定其表面标记物CD45、CD29和CD34的表达,选用纯度较高的骨髓间充质干细胞进行血小板衍生生长因子BB干预实验;②第3代骨髓间充质干细胞经25μg/L血小板衍生生长因子BB诱导3 d,进行Ⅰ型胶原免疫荧光染色,然后采用碱性磷酸酶改良钙钴法和偶氮偶联法、茜素红法对细胞进行染色,鉴定成骨细胞的表面特征,最后采用RT-PCR检测Runx-2和Gli-2的mRNA水平。结果与结论:①经细胞免疫荧光染色,诱导后细胞的Ⅰ型胶原绿色荧光表达率>90%;②经碱性磷酸酶改良钙钴法染色,可见细胞胞质中有黑色条索状附着,说明这些细胞均表达有活性的碱性磷酸酶;经碱性磷酸酶偶氮偶联法染色,可见细胞胞浆中含有蓝色的有活性的碱性磷酸酶;经茜素红染色,可见细胞聚集在一起形成小的红色的钙结节;③经RT-PCR检测,血小板衍生生长因子BB诱导后Gli-2和Runx-2的mRNA表达均高于未诱导骨髓间充质干细胞(P<0.05);④结果表明,大鼠骨髓间充质干细胞经血小板衍生生长因子BB诱导后可以分化为具有功能的成骨细胞。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓间充质干细胞 血小板衍生生长因子BB 成骨细胞 钙结节 碱性磷酸酶
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叶绿素铜钠对免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞的分化研究 被引量：3
4
作者 王灵聪 蔡斌 +6 位作者 楼益平 魏克民 金鑫 尹利明 潘庆 任莉 蒋慧芳 《医学研究杂志》 2011年第10期62-64,共3页
目的探讨叶绿素铜钠对免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCS)向成骨细胞分化的能力。方法建立免疫介导再障小鼠模型,随机分为正常对照(N)、模型对照(M)、叶绿素铜钠小剂量(X)、叶绿素铜钠中剂量(Z)... 目的探讨叶绿素铜钠对免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCS)向成骨细胞分化的能力。方法建立免疫介导再障小鼠模型,随机分为正常对照(N)、模型对照(M)、叶绿素铜钠小剂量(X)、叶绿素铜钠中剂量(Z)、叶绿素铜钠高剂量(G)、环孢菌素对照组(Cs)每组6只,15天后观察血常规,并取其骨髓行MSCS培养,比较F0MSCS、F1MSCS、F2MSCS、成骨细胞的形态学变化,及钙结节计数。结果 Z组小鼠的外周血白细胞数明显大于M组,M组小鼠的外周血红蛋白和血小板数明显小于其余5组。F2MSCS显微镜见各组长梭形的MSCS细胞比F0MSCS、F1MSCS的更加铺开而饱满。F3MSCS诱导后,各组均可以见到成骨细胞,M组钙结节计数明显小于其余5组。结论叶绿素铜钠能明显促进免疫介导再障小鼠MSCS向成骨细胞分化的能力。 展开更多
关键词 叶绿素铜钠 再生障碍性贫血 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 钙结节
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敲除NIPBL基因可下调小鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化能力 被引量：2
5
作者 林明 潘金勇 张惠荣 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第7期1002-1008,共7页
背景:德朗热综合征是一种多系统发育缺陷的遗传性疾病,NIPBL是其主要致病基因。目的:探讨NIPBL基因对骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化能力的影响。方法:采用NIPBL-Loxp小鼠与Cre小鼠构建NIPBL基因缺陷杂合子小鼠模型(NIPBL^+/-)并将其... 背景:德朗热综合征是一种多系统发育缺陷的遗传性疾病,NIPBL是其主要致病基因。目的:探讨NIPBL基因对骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化能力的影响。方法:采用NIPBL-Loxp小鼠与Cre小鼠构建NIPBL基因缺陷杂合子小鼠模型(NIPBL^+/-)并将其作为实验组,野生型(NIPBL^+/+)小鼠作为对照组,分离培养两组小鼠骨髓间充质干细胞,传至第3代时采用CCK-8法比较两组细胞增殖能力,然后进行成骨诱导培养比较两组细胞成骨分化能力。结果与结论:①实验组骨髓间充质干细胞的增殖能力低于对照组(P<0.05);②成骨诱导第7天,实验组细胞碱性磷酸酶活力明显低于对照组(P<0.05);③成骨诱导后,实验组Runx2、OCN基因及其蛋白的表达水平低于对照组(P<0.05);④成骨诱导第21天,茜素红染色后倒置显微镜下观察对照组较实验组可见更多的红色钙结节;⑤结果提示,敲除NIPBL基因降低了骨髓间充质干细胞的增殖、成骨分化能力。 展开更多
关键词 NIPBL基因 发育缺陷 骨髓间充质干细胞 细胞增殖 细胞分化 成骨诱导 钙结节 国家自然科学基金
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地塞米松浓度与脐带间充质干细胞的成骨分化 被引量：2
6
作者 洪敬欣 刘剑 +1 位作者 李琳芳 韩俊领 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第23期4204-4211,共8页
背景:在地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠的共同作用下,人脐带间充质干细胞可以向成骨细胞分化。作为糖皮质类激素的地塞米松,其浓度对人脐带间充质干细胞体外成骨分化存在着影响。目的:探寻人脐带间充质干细胞向成骨细胞诱导分化过程... 背景:在地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠的共同作用下,人脐带间充质干细胞可以向成骨细胞分化。作为糖皮质类激素的地塞米松,其浓度对人脐带间充质干细胞体外成骨分化存在着影响。目的:探寻人脐带间充质干细胞向成骨细胞诱导分化过程中地塞米松的优选浓度。方法:采用植块法从正常足月新生儿脐带中分离培养间充质干细胞。取第3代细胞进行日常细胞培养和诱导分化实验。流式细胞术检测所获细胞的表面标记表达情况,成脂、成骨诱导分化鉴定人脐带间充质干细胞。倒置相差显微镜观察成骨分化过程中细胞形态的变化。以含1×10-8mol/L,5×10-8mol/L,1×10-7mol/L3种浓度地塞米松的成骨诱导液对人脐带间充质干细胞进行成骨诱导。盐酸四环素荧光及Von Kossa染色法对比观察钙结节形成。反转录-聚合酶链反应法对比检测细胞骨桥蛋白基因表达。结果与结论:植块法分离的人脐带间充质干细胞形态均一,多为梭形,平行排列生长或旋涡状生长。流式细胞术检测CD29,CD73和CD90呈阳性表达,CD31,CD34和HLA-DR呈阴性表达。成脂诱导后可观察到细胞内有脂滴形成,油红O染色呈阳性。盐酸四环素荧光结果和Von Kossa染色结果显示,所形成的钙结节大小及数量,均随着地塞米松浓度的增加而增强、增多。反转录-聚合酶链反应检测结果显示,3种浓度地塞米松组的骨桥蛋白基因均有表达,且表达强度随着地塞米松浓度的增加而增强。提示成骨诱导液中地塞米松浓度为1×10-7mol/L时,能更有效地诱导人脐带间充质干细胞向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 干细胞 脐带脐血干细胞 地塞米松 优选浓度{成骨分化 成脂分化 钙结节 骨桥蛋白 细胞培养 细胞鉴定 细胞形态 干细胞图片文章
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rhBMP-2及其纳米微球缓释系统对成骨细胞钙结节影响的实验研究 被引量：1
7
作者 侯锐 毛天球 +3 位作者 杨耀武 程晓兵 陈富林 吴炜 《临床口腔医学杂志》 2005年第3期158-160,共3页
目的 :观察rhBMP 2聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微球缓释系统对成骨细胞钙结节的影响。方法 :培养诱导成骨细胞形成钙结节 ,并对其行特异性染色 ;在rhBMP 2纳米微球对钙结节作用后 ,采用扫描电镜观察其表面形态的改变 ,采用能谱仪分析比较其... 目的 :观察rhBMP 2聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微球缓释系统对成骨细胞钙结节的影响。方法 :培养诱导成骨细胞形成钙结节 ,并对其行特异性染色 ;在rhBMP 2纳米微球对钙结节作用后 ,采用扫描电镜观察其表面形态的改变 ,采用能谱仪分析比较其组成成分的改变。结果 :rhBMP 2纳米微球能明显促进钙结节形成 ,且rhBMP 2纳米微球作用后钙结节中钙磷含量显著高于单纯rhBMP 2组。结论 :rhBMP 2纳米微球缓释系统促进成骨的作用优于单纯rhBMP 2。 展开更多
关键词 重组人骨形成蛋白-2 聚氰基丙烯酸正丁酯 纳米微球 骨髓间充质干细胞 钙结节
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人甲状旁腺素(1-34)对新生鼠成骨细胞钙含量及钙化结节形成的影响 被引量：2
8
作者 韩志岩 程锦轩 刘景生 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 1999年第2期5-8,共4页
目的研究外源性ｈＰＴＨ（１－３４）对新生大鼠成骨细胞基质钙含量及钙化结节形成的影响。方法新生大鼠成骨细胞原代培养，原子吸收分光光度法测细胞基质钙含量，ｖｏｎＫｏｓｓａ染色鉴定钙化结节。结果１０－１０～１０－７ｍｏｌ... 目的研究外源性ｈＰＴＨ（１－３４）对新生大鼠成骨细胞基质钙含量及钙化结节形成的影响。方法新生大鼠成骨细胞原代培养，原子吸收分光光度法测细胞基质钙含量，ｖｏｎＫｏｓｓａ染色鉴定钙化结节。结果１０－１０～１０－７ｍｏｌ·Ｌ－１ｈＰＴＨ（１－３４）持续作用于细胞，基质钙含量与对照相比显著降低；１０－８ｍｏｌ·Ｌ－１ｈＰＴＨ（１－３４）在以４８小时为一循环的前１２小时给药循环８次时基质钙含量达最高峰，与对照组相比增加５７６％，且形成钙化结节最多。结论ｈＰＴＨ（１－３４）刺激成骨细胞基质钙含量及钙化结节形成与给药方式及药物浓度有关，低浓度间歇性给与ｈＰＴＨ（１－３４）能提高成骨细胞基质钙及促进钙化结节形成。 展开更多
关键词 钙化 结节 PTH 成骨细胞 钙含量 新生大鼠 新生鼠 对照组 细胞基质 影响
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褐土碳酸钙结核的胶体特性研究 被引量：1
9
作者 胡宁 许晨阳 +2 位作者 耿增超 胡斐南 马璐璐 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1000-1009,共10页
碳酸钙是黄土母质发育土壤的重要胶结物质,对土壤团粒结构的形成具有重要作用。本文采集了碳酸盐褐土中的碳酸钙结核,采用物理分散法和化学分散法分别提取得到褐土碳酸钙结核纳米颗粒和褐土碳酸钙结核胶体,并以工业纳米碳酸钙作为对照... 碳酸钙是黄土母质发育土壤的重要胶结物质,对土壤团粒结构的形成具有重要作用。本文采集了碳酸盐褐土中的碳酸钙结核,采用物理分散法和化学分散法分别提取得到褐土碳酸钙结核纳米颗粒和褐土碳酸钙结核胶体,并以工业纳米碳酸钙作为对照对其胶体特性进行研究。采用X射线衍射仪、zeta电位仪和动态光散射仪对褐土碳酸钙结核胶体和工业纳米碳酸钙的矿物组成、zeta电位和胶体稳定性进行了表征。结果表明:褐土碳酸钙结核胶体、褐土碳酸钙结核纳米颗粒和工业纳米碳酸钙的初始颗粒直径分别为224.24、88.01和98.50nm,而褐土碳酸钙结核胶体和褐土碳酸钙结核纳米颗粒的多分散度高于工业纳米碳酸钙。褐土碳酸钙结核胶体中方解石含量为70.3%,其次含有石英、长石和伊利石等矿物;褐土碳酸钙结核纳米颗粒主要含有方解石和伊利石,含量分别为48%和45%。3种碳酸钙胶体表面均带负电荷,其zeta电位绝对值均随着溶液pH的增大而增大。褐土碳酸钙结核胶体在NaCl和CaCl_(2)溶液中的临界聚沉浓度分别为538.01mmol/L和2.08mmol/L,褐土碳酸钙结核纳米颗粒在NaCl和CaCl溶液中的临界聚沉浓度为82.18 mmol/L和1.11 mmol/L,而工业纳米碳酸钙的临界聚沉浓度为80.37 mmol/L和1.59 mmol/L。3种碳酸钙胶体的矿物组成差异是引发其凝聚行为差别的内在原因,化学分散剂的表面修饰作用、颗粒直径大小和溶液化学条件也是影响胶体稳定性的重要因素。本文研究结果表明,碳酸钙胶体的可变电荷特性可能是其具有胶结特性的本质原因,其对石灰性土壤团聚体结构的影响还需要进一步深入研究。 展开更多
关键词 碳酸钙结核 表面电荷 临界聚沉浓度 胶体稳定性
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