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植物CBL/CIPK网络系统逆境应答研究进展 被引量:16
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作者 赵晋锋 余爱丽 +4 位作者 王高鸿 田岗 王寒玉 杜艳伟 常海霞 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2011年第4期32-38,共7页
大多数信号转导过程都伴随着细胞内钙离子浓度变化,CBL/CIPK信号系统是近几年在高等植物中发现的一类依赖于钙离子的信号系统,包括感知钙离子浓度变化的CBL蛋白(calcineurin B-like proteins)和与之互作的CIPK蛋白(CBL-interacting prot... 大多数信号转导过程都伴随着细胞内钙离子浓度变化,CBL/CIPK信号系统是近几年在高等植物中发现的一类依赖于钙离子的信号系统,包括感知钙离子浓度变化的CBL蛋白(calcineurin B-like proteins)和与之互作的CIPK蛋白(CBL-interacting protein kinase)。研究表明CBL/CIPK信号系统在植物对逆境应答过程中起重要作用。在介绍CBL和CIPK的结构和特征基础上对不同植物CBL/CIPK信号系统在逆境应答中的研究现状况进行了综述,以期为基因工程改良作物抗逆育种提供新的思路和种质资源。 展开更多
关键词 CbL CIPK 蛋白激酶 逆境应答
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植物CBL基因家族的研究进展 被引量:15
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作者 董连红 史素娟 +6 位作者 S M Nuruzzaman Manik 苏玉龙 刘朝科 冯祥国 胡晓明 王倩 刘好宝 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期892-898,共7页
细胞中游离的Ca2+是植物细胞中普遍存在的第二信使,类钙调神经素B亚基蛋白CBL作为一种特殊的钙感受器在植物生长发育和逆境胁迫响应过程中发挥重要作用。本文主要对植物CBL家族的起源与进化、蛋白结构、亚细胞定位以及CBL的功能进行综述... 细胞中游离的Ca2+是植物细胞中普遍存在的第二信使,类钙调神经素B亚基蛋白CBL作为一种特殊的钙感受器在植物生长发育和逆境胁迫响应过程中发挥重要作用。本文主要对植物CBL家族的起源与进化、蛋白结构、亚细胞定位以及CBL的功能进行综述,并对今后钙感受器CBL家族的研究重点和发展方向进行了展望。 展开更多
关键词 Ca^2+信号 CbL CIPK 非生物逆境 信号转导
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杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白PbCBL10基因的克隆和表达特性研究 被引量:9
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作者 李慧 丛郁 +2 位作者 常有宏 蔺经 盛宝龙 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期550-556,共7页
【目的】为了探明杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CalcineurinB—likeprotein,CBL)基因的序列特征和表达特点,【方法】以杜梨幼苗为试材,运用同源克隆和半定量RT—PCR对PbCBLIO基因进行克隆和表达分析。【结果】结果表明.PbCBLIO基因... 【目的】为了探明杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CalcineurinB—likeprotein,CBL)基因的序列特征和表达特点,【方法】以杜梨幼苗为试材,运用同源克隆和半定量RT—PCR对PbCBLIO基因进行克隆和表达分析。【结果】结果表明.PbCBLIO基因编码区cDNA长度为801bp,编码的多肽由266个氨基酸组成。该多肽预测的等电点为4.56,估计的相对分子质量为30.45ku。其对应基因组DNA序列长1983bp,包括9个外显子和8个内含子。通过PSORT进行亚细胞定位分析发现PbCBLl0蛋白位于质膜上的几率最大。PbCBLIO基因编码的多肽具有4个钙离子结合域EF手形结构和1个钙调磷酸酶A亚基结合位点。PbCBLl0与番茄S1CBLIO(NP_001239045)和拟南芥AtCBLl0(NP_195026)蛋白间的同源性较高,分别为82%和77%,并与AtCBL10亲缘关系最近。PbCBL10基因在杜梨幼苗根、茎和叶片中均为诱导型表达,50~200mmol·L^(-1)CaCl2、20μmol·L^(-1)ABA、100mmol·L^(-1)NaCl、10%(w/v)PEG6000或180mmol·L^(-1)甘露醇处理后其表达量明显上调。【结论】PbCBLIO基因具备植物CBL基因家族的固有特征,能够响应胞内钙浓度变化,对ABA、盐碱、干旱和渗透胁迫均存在转录响应。 展开更多
关键词 杜梨 类钙调磷酸酶b亚基蛋白 基因克隆 表达特性
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水稻类钙调磷酸酶亚基B蛋白质在叶片生长和白叶枯病抗性反应中的表达 被引量:7
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作者 刘雨萌 兰金苹 +5 位作者 曹英豪 刘钊 刘丽娟 李莉云 曹振伟 刘国振 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期483-490,共8页
钙信号介导植物对多种外部刺激的反应并参与调控广泛的生理学过程。钙离子结合蛋白质,如类钙调磷酸酶亚基B蛋白质(calcineurin B-like protein,CBL),对感受和传递钙信号具有重要作用。根据基因组测序及注释分析,水稻(Oryzasativa)基因... 钙信号介导植物对多种外部刺激的反应并参与调控广泛的生理学过程。钙离子结合蛋白质,如类钙调磷酸酶亚基B蛋白质(calcineurin B-like protein,CBL),对感受和传递钙信号具有重要作用。根据基因组测序及注释分析,水稻(Oryzasativa)基因组中有10个CBL家族成员。采用基于抗体的蛋白质组学策略,利用免疫印迹方法研究了水稻CBL蛋白质在叶片生长不同时期的表达,揭示了其在正常发育过程中的表达模式。然后对Xa21介导的水稻白叶枯病抗性反应不同时间点的蛋白质表达进行检测,发现OsCBL-1、OsCBL-3、OsCBL-5、OsCBL-9和OsCBL-10这5个蛋白质的表达发生了变化;进一步比较它们在抗病、感病和对照处理中的表达情况,发现其在不同反应间的表达也有区别,提示了CBL蛋白质在水稻-白叶枯病菌互作过程中的功能。该研究为深入了解水稻CBL蛋白质的功能提供了有价值的线索。 展开更多
关键词 白叶枯病菌 类钙调磷酸酶亚基b蛋白质 水稻 Xa21
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水稻类钙调磷酸酶亚基B蛋白质在逆境胁迫下的表达 被引量:7
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作者 贾霖 刘雨萌 +8 位作者 范伟 关明俐 贾盟 窦世娟 魏健 彭业博 刘丽娟 李莉云 刘国振 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-8,共8页
【目的】了解水稻CBL蛋白质在逆境胁迫下的表达模式进而探讨水稻耐逆的分子机理。【方法】采用基于抗体的蛋白质组学策略,以超级杂交稻父本9311为材料,采用免疫印迹(western blotting,WB)技术调查了CBL家族主要成员在冷、热、旱、淹和... 【目的】了解水稻CBL蛋白质在逆境胁迫下的表达模式进而探讨水稻耐逆的分子机理。【方法】采用基于抗体的蛋白质组学策略,以超级杂交稻父本9311为材料,采用免疫印迹(western blotting,WB)技术调查了CBL家族主要成员在冷、热、旱、淹和盐胁迫等5种逆境中的表达特征。【结果】发现CBL1、CBL5和CBL6在冷胁迫中表达下调,CBL1和CBL2在热胁迫中表达下调,CBL1和CBL5在旱胁迫中表现下调,而CBL6、CBL8和CBL10在旱胁迫中表现上调,CBL1、CBL5、CBL6、CBL8和CBL10在淹涝胁迫中表达上调,而CBL2表现下调。【结论】鉴定了水稻在重要逆境胁迫下发生丰度变化的6个CBL蛋白质。 展开更多
关键词 水稻 免疫印迹 逆境胁迫 CbL 蛋白质表达
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两个菜心CBL基因的克隆、生物信息学分析及其表达特性分析 被引量:1
6
作者 朱云娜 符质 +4 位作者 冯慧敏 王斌 沈雪晴 汤婉君 刘建国 《山东农业科学》 北大核心 2023年第7期1-9,共9页
本研究以‘油绿501’菜心(Brassica campestris L.ssp.chinensis var.utilis Tsen et Lee)为材料,采用同源克隆方法对其CBL1、CBL9基因进行克隆,运用DNAMAN和MEGA软件对其编码蛋白序列进行同源性分析和系统进化分析,并利用qRT-PCR技术... 本研究以‘油绿501’菜心(Brassica campestris L.ssp.chinensis var.utilis Tsen et Lee)为材料,采用同源克隆方法对其CBL1、CBL9基因进行克隆,运用DNAMAN和MEGA软件对其编码蛋白序列进行同源性分析和系统进化分析,并利用qRT-PCR技术分析二者在菜心组织中及不同氮素形态条件下的表达模式。结果表明:菜心CBL1、CBL9基因的cDNA全长均为642 bp,编码213个氨基酸,分别命名为BcCBL1和BcCBL9,具有CBL蛋白结合Ca2+所必需的EF-hand型结构域(EFh)。BcCBL1、BcCBL9编码的氨基酸序列与拟南芥(Arabidopsis thaliana)、大白菜(Brassica rapa)等物种的同源性均达95%以上;二者分别与大白菜的BrCBL1、BrCBL9遗传距离最近,并与拟南芥AtCBL1、AtCBL9共同聚类为一支。BcCBL1和BcCBL9在菜心各组织器官中均有表达,前者在菜心叶片中表达水平较高,后者在菜心荚果等组织中表达水平较高;两者表达受氮素形态及水平影响,前者在低浓度NO_(3)^(-)或NH_(4)^(+)处理后上调表达,后者表达随NH_(4)^(+)浓度增加而上调表达。该研究结果可为进一步研究菜心CBL1和CBL9在氮素吸收利用过程中的功能及其调控机制提供一定理论基础。 展开更多
关键词 菜心 氮素形态 类钙调磷酸酶b亚基蛋白 基因克隆 生物信息学分析 表达分析
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大豆类钙调磷酸酶B亚基GmCBL1互作候选蛋白的筛选 被引量:4
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作者 李林蔚 张双喜 +6 位作者 周永斌 裴丽丽 陈明 李连城 马有志 刘生祥 徐兆师 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期359-363,共5页
Ca2+是非生物胁迫信号转导途径中的重要信号分子,植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CBL,calcineurin B-like proteins)是一类重要的钙信号受体蛋白,主要通过与其他蛋白的特异结合传递信号,使植物形成对非生物胁迫的响应。本实验室已经获得大豆... Ca2+是非生物胁迫信号转导途径中的重要信号分子,植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CBL,calcineurin B-like proteins)是一类重要的钙信号受体蛋白,主要通过与其他蛋白的特异结合传递信号,使植物形成对非生物胁迫的响应。本实验室已经获得大豆Gm CBL1基因,功能鉴定显示Gm CBL1增强了转基因拟南芥对非生物胁迫的耐性。为了进一步研究Gm CBL1的作用机理,本研究构建诱饵载体p GBKT7::Gm CBL1,利用酵母双杂交技术筛选大豆Gm CBL1的互作蛋白。通过对筛选获得的106个蛋白基因测序和Blast比对分析,并根据其可能的生理功能对这些候选蛋白归类,整理得到4类蛋白:能量代谢相关蛋白、修饰蛋白、防御蛋白、钙信号转导相关蛋白。筛选得到候选蛋白的功能预测初步表明,大豆Gm CBL1参与多条信号途径,为进一步研究探索大豆CBL介导的抗逆信号转导途径奠定了基础。 展开更多
关键词 大豆 类钙调磷酸酶b亚基 GmCbL1 酵母双杂交 互作蛋白
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杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因PbCBL2的克隆和功能初探 被引量:4
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作者 李慧 李刚波 +3 位作者 丛郁 常有宏 蔺经 盛宝龙 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1445-1455,共11页
类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBLs)是植物中一类重要的钙离子传感器,参与调控植物生长发育及逆境胁迫响应过程。为了探明杜梨CBLs家族成员PbCBL2的序列特征和表达模式,以杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge)幼苗为试... 类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBLs)是植物中一类重要的钙离子传感器,参与调控植物生长发育及逆境胁迫响应过程。为了探明杜梨CBLs家族成员PbCBL2的序列特征和表达模式,以杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge)幼苗为试材,运用EST搜索结合RACE技术、染色体步移法对PbCBL2的cDNA、DNA和启动子进行克隆,采用半定量RT-PCR和原核表达研究该基因在非生物胁迫下的表达模式。结果表明,PbCBL2基因cDNA序列长681bp,编码一个含有226个氨基酸残基的蛋白。基因组DNA序列长1927bp,包括8个外显子和7个内含子,启动子序列包含光反应元件、厌氧诱导必需顺式作用元件、赤霉素反应元件和水杨酸响应顺式作用元件。PbCBL2编码的多肽具有植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白结合Ca2+所必需的4个EF手型结构和1个典型的植物钙调磷酸酶A亚基结合位点。未经处理的杜梨幼苗(对照)根和叶中未检测到PbCBL2的表达,PbCBL2的表达受NaCl、PEG6000、甘露醇和ABA诱导上调。PbCBL2转入大肠杆菌BL21(DE3)后,能够明显减轻NaCl、甘露醇和PEG6000对该菌株的生长抑制。PbCBL2基因具备植物CBLs基因家族的固有特征,对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA处理均存在转录响应,大肠杆菌转入该基因后能够提高对盐胁迫和渗透胁迫的耐受能力。 展开更多
关键词 杜梨 类钙调磷酸酶b亚基蛋白 基因克隆 基因表达特点 原核表达 逆境胁迫
原文传递
葡萄类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因VvCBL4的克隆与表达分析 被引量:3
9
作者 余义和 李秀珍 +4 位作者 郭大龙 杨英军 李桂荣 李学强 张国海 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期385-392,共8页
【目的】在京秀(Vitis vinifera‘Jingxiu’)葡萄中克隆类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因Vv CBL4及其启动子,分析Vv CBL4的表达特性与逆境胁迫的关系。【方法】用RACE技术克隆Vv CBL4的全长,实时荧光定量PCR检测Vv CBL4在不同逆境下的表达;用... 【目的】在京秀(Vitis vinifera‘Jingxiu’)葡萄中克隆类钙调磷酸酶B亚基蛋白基因Vv CBL4及其启动子,分析Vv CBL4的表达特性与逆境胁迫的关系。【方法】用RACE技术克隆Vv CBL4的全长,实时荧光定量PCR检测Vv CBL4在不同逆境下的表达;用同源克隆技术获得Vv CBL4的启动子,在烟草叶片中瞬时表达分析Vv CBL4启动子的活性。【结果】Vv CBL4全长为959 bp,ORF为642 bp,编码213个氨基酸,具有3个EF手钙结合结构域。Vv CBL4在根部表达量最高,其次是果实。Vv CBL4的转录本能对干旱、低温和盐胁迫处理快速做出响应。Vv CBL4启动子富含与逆境响应相关的顺式作用元件。干旱、低温和盐胁迫处理能够增强启动子活性。【结论】获得Vv CBL4及其启动子序列,Vv CBL4的表达能对逆境胁迫做出响应,Vv CBL4启动子的活性受逆境胁迫诱导,说明Vv CBL4在葡萄逆境胁迫反应中具有重要的作用。 展开更多
关键词 葡萄 类钙调磷酸酶b亚基蛋白 VvCbL4 逆境 表达分析
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苦荞FtCBL基因的鉴定及对干旱与高钙胁迫的响应 被引量:1
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作者 关志秀 汪燕 +3 位作者 梁成刚 韦春玉 黄娟 陈庆富 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期101-109,共9页
植物CBL基因在逆境胁迫应答方面具有重要作用,鉴定苦荞FtCBL基因,并探索其对干旱高钙胁迫的响应具有重要意义。利用生物信息学方法鉴定FtCBL基因,通过模拟胁迫实验,研究FtCBL基因在干旱、高钙和干旱+高钙下的表达规律。共鉴定到5个苦荞F... 植物CBL基因在逆境胁迫应答方面具有重要作用,鉴定苦荞FtCBL基因,并探索其对干旱高钙胁迫的响应具有重要意义。利用生物信息学方法鉴定FtCBL基因,通过模拟胁迫实验,研究FtCBL基因在干旱、高钙和干旱+高钙下的表达规律。共鉴定到5个苦荞FtCBL基因,均具有EF-hand钙结合结构域,分别定位于Ft3(2个)、Ft4(1个)和Ft5(2个)染色体上,cDNA长度在642-684 bp间,编码蛋白含213-227个氨基酸,序列高度保守。干旱下苦荞CAT与APX活性急剧升高,但在高钙下差异不显著,说明苦荞较适宜高钙环境生长。干旱下FtCBL1在8 h、24 h下调表达,FtCBL2上调表达,FtCBL3-1在8 h上调表达;高钙下FtCBL1在8 h、24 h和FtCBL9在24 h下调表达,FtCBL2上调表达;干旱+高钙下FtCBL3-1在8 h、24 h上调表达。共鉴定到5个FtCBL基因,其中FtCBL1、FtCBL2响应干旱、高钙胁迫,FtCBL3-1响应干旱、干旱+高钙胁迫,FtCBL9响应高钙胁迫。 展开更多
关键词 苦荞 类钙调磷酸酶b蛋白 干旱胁迫 高钙胁迫 干旱高钙胁迫
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大豆GmCBL7-2生物信息学及非生物胁迫表达分析
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作者 陈炯辛 张军 +5 位作者 马婷婷 李铭杨 于海伟 李珊珊 兰红宇 翟莹 《齐齐哈尔大学学报(自然科学版)》 2022年第5期74-78,共5页
钙调磷酸酶B类似蛋白(CBL)作为植物钙离子信号感受器,在植物非生物胁迫和信号转导中发挥重要作用。对大豆GmCBL7-2基因进行生物信息学分析及非生物胁迫下表达量的检测。GmCBL7-2基因开放阅读框全长639 bp,编码一个含212个氨基酸的蛋白质... 钙调磷酸酶B类似蛋白(CBL)作为植物钙离子信号感受器,在植物非生物胁迫和信号转导中发挥重要作用。对大豆GmCBL7-2基因进行生物信息学分析及非生物胁迫下表达量的检测。GmCBL7-2基因开放阅读框全长639 bp,编码一个含212个氨基酸的蛋白质,相对分子量24.4 kD,等电点4.56,属于亲水性蛋白。预测结果显示,GmCBL7-2蛋白主要定位于细胞质中,含有13个磷酸化位点。GmCBL7-2蛋白质3D结构模型中存在两个Ca2+结合位点。GmCBL7-2蛋白与拟南芥AtCBL7蛋白亲缘关系最近。表达量检测结果显示,GmCBL7-2在大豆幼苗中可以响应干旱、高盐及低温胁迫,且对干旱胁迫的响应更加显著。 展开更多
关键词 大豆 钙调磷酸酶b类似蛋白 生物信息学 非生物胁迫
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拟南芥CBL9的质膜定位对花粉管顶端生长的影响
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作者 周利明 房玮 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期58-63,共6页
旨在揭示拟南芥CBL9(Calcineurin B-like protein 9)在花粉管顶端生长中的作用。基于花粉管瞬时表达体系,通过基因枪技术将带有黄色荧光蛋白(YFP)标签的CBL9在烟草花粉中进行瞬时表达,观察其亚细胞定位及过表达表型。针对CBL9的N端酰基... 旨在揭示拟南芥CBL9(Calcineurin B-like protein 9)在花粉管顶端生长中的作用。基于花粉管瞬时表达体系,通过基因枪技术将带有黄色荧光蛋白(YFP)标签的CBL9在烟草花粉中进行瞬时表达,观察其亚细胞定位及过表达表型。针对CBL9的N端酰基化的保守位点,通过点突变技术构建CBL9G2A突变体,对比研究其表型及定位的改变情况。结果显示CBL9-YFP定位于花粉管顶端质膜及颗粒状细胞器上,CBL9过量表达可以引起显著的花粉管去极化生长。而CBL9G2A-YFP则表现出非特异性的胞内弥散定位,同时CBL9G2A过量表达没有显著影响花粉管的顶端生长。CBL9的N端酰基化位点是CBL9质膜定位的重要因素,而正确定位的CBL9才能发挥调控花粉管生长的相关功能。 展开更多
关键词 拟南芥 花粉管 顶端生长 钙离子 类钙调神经磷酸酶b亚基
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两个谷子CIPK基因在非生物逆境胁迫下的表达分析 被引量:12
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作者 余爱丽 赵晋锋 +5 位作者 王高鸿 杜艳伟 李颜方 张正 郭二虎 梁爱华 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期295-302,共8页
CIPK是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,该蛋白在植物响应逆境胁迫过程中发挥重要作用。本文利用生物信息学方法从谷子基因组中鉴定出2个CIPK基因,命名为Si CIPK6和Si CIPK16。序列分析表明Si CIPK6基因组序列长1994 bp,编码451个氨基酸;Si C... CIPK是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,该蛋白在植物响应逆境胁迫过程中发挥重要作用。本文利用生物信息学方法从谷子基因组中鉴定出2个CIPK基因,命名为Si CIPK6和Si CIPK16。序列分析表明Si CIPK6基因组序列长1994 bp,编码451个氨基酸;Si CIPK16基因组序列长1885 bp,编码473个氨基酸,2个基因均无内含子和可变剪切。生物信息学分析显示这2个基因在蛋白质序列和结构上与其他物种CIPK基因一样非常保守。实时定量PCR分析表明Si CIPK6和Si CIPK16在ABA、低温、高温、干旱、高盐诱导下表达量均有所上调,Si CIPK6基因在ABA、干旱和盐处理时表达量上调幅度较大,而Si CIPK16基因在低温、干旱和高温处理时表达量上调幅度较大。半定量PCR检测结果表明Si CIPK6和Si CIPK16两个基因在拔节、孕穗、灌浆期时均有表达,在相应生育时期受到干旱胁迫时它们表达量均有所提高。推测Si CIPK6和Si CIPK16基因在谷子的干旱或其他逆境胁迫中起一定作用。 展开更多
关键词 谷子 CIPK基因 逆境
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杜梨CBL1和CBL7基因对非生物逆境的响应 被引量:11
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作者 韩金龙 李慧 +2 位作者 丛郁 常有宏 蔺经 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期529-535,共7页
【目的】克隆2个杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)基因,并对其序列特征、表达特点及抗逆功能进行比较研究。【方法】采用电子克隆、RT-PCR和长片段PCR克隆了PbCBL1和PbCBL7的cDNA和DNA序列,利用生物信息学方... 【目的】克隆2个杜梨类钙调磷酸酶B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)基因,并对其序列特征、表达特点及抗逆功能进行比较研究。【方法】采用电子克隆、RT-PCR和长片段PCR克隆了PbCBL1和PbCBL7的cDNA和DNA序列,利用生物信息学方法进行序列分析,半定量RT-PCR检测它们的表达特点,原核表达初步比较研究上述2个基因的抗逆功能。【结果】杜梨PbCBL1 cDNA编码区为642 bp,编码213个氨基酸,对应基因组DNA序列长2 969 bp;PbCBL7 cDNA编码区为639 bp,编码212个氨基酸,对应基因组DNA序列长1 788 bp;PbCBL1和PbCBL7均由8个外显子和7个内含子组成。PbCBL1和PbCBL7编码的多肽均具有植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白结合Ca2+所必需的4个EF手型结构和1个典型的植物钙调磷酸酶A亚基结合位点。未经处理的杜梨幼苗(对照)根和叶中PbCBL1和PbCBL7的表达非常微弱,NaCl、PEG6000、甘露醇和ABA处理后,它们在根和叶中的表达均上调,且PbCBL1在叶片中的表达量显著增加。2个CBL基因分别转入大肠杆菌BL21(DE3)后,均能够明显减轻NaCl、甘露醇和PEG6000对菌株的生长抑制,而转PbCBL1菌株的抗逆效果较为明显。【结论】PbCBL1和PbCBL7基因具备植物CBLs基因家族的固有特征,对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA处理均存在转录响应,上述基因的转入能够提高大肠杆菌BL21(DE3)对盐胁迫和渗透胁迫的耐受能力,转PbCBL1菌株的抗逆功能强于转PbCBL7菌株。 展开更多
关键词 杜梨 CbL基因 序列特征 表达特点 功能比较
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非生物胁迫诱导的玉米蛋白激酶基因ZmCIPK3的cDNA克隆和表达特性 被引量:6
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作者 边鸣镝 李文亮 +4 位作者 郭庆勋 王晶莹 周连霞 杨德光 黄丛林 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期52-57,共6页
类钙调磷酸酶B亚基互作蛋白激酶(calcineurin B-like calciumsensor interactingProtein Kinase,CIPK)在植物非生物胁迫信号转导中起重要作用。应用分子克隆的方法在玉米(Zea mays)中克隆了一个cDNA全长为1 350 bp的蛋白激酶基因ZmCIPK3... 类钙调磷酸酶B亚基互作蛋白激酶(calcineurin B-like calciumsensor interactingProtein Kinase,CIPK)在植物非生物胁迫信号转导中起重要作用。应用分子克隆的方法在玉米(Zea mays)中克隆了一个cDNA全长为1 350 bp的蛋白激酶基因ZmCIPK3(GenBank登录号为EU873319)。其编码的蛋白含有449个氨基酸,分子量为50.89kD,等电点为8.26。推断的ZmCIPK3催化结构域中包含蛋白激酶催化结构域保守的11个亚结构域,蛋白C端具有植物CIPK蛋白家族特有的包含24个氨基酸的NAF结构域。半定量RT-PCR结果表明,在玉米幼苗叶片中,ZmCIPK3响应甘露醇、氯化钠、ABA和4℃低温的诱导,其转录水平在12 h内呈上升趋势。ZmCIPK3是一个新的玉米蛋白激酶基因,响应多种非生物胁迫信号。 展开更多
关键词 玉米 类钙调磷酸酶b亚基互作蛋白激酶(CIPK) 非生物胁迫
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Preliminary Study on Function of Calcineurin B-Like Protein Gene OsCBL8 in Rice 被引量:4
16
作者 MA Bo-jun Gu Zhi-min +3 位作者 TANG Hai-juan CHEN Xi-feng LIU Feng ZHANG Hong-sheng 《Rice science》 SCIE 2010年第1期10-18,共9页
The homozygous T3 transgenic lines with sense OsCBL8 gene and antisense OsCBL8 gene obtained by agro-transformation were used to investigate the function of OsCBL8 in rice. Semi-quantitative RT-PCR showed that the exp... The homozygous T3 transgenic lines with sense OsCBL8 gene and antisense OsCBL8 gene obtained by agro-transformation were used to investigate the function of OsCBL8 in rice. Semi-quantitative RT-PCR showed that the expression of OsCBL8 extremely increased in sense transgenic lines, and decreased to some extents in antisense transgenic lines. Such up- and down-regulation of the OsCBL8 gene in these transgenic lines had little effects on main agronomic traits, but significantly decreased the number of filled grains per panicle and seed setting rate in some of transgenic lines. By evaluation of the tolerance to 150 mmol/L NaCl, 20% PEG6000 and low temperature treatments, and relevant physiological indices, 8F12, a sense transgenic line with high salt tolerance, and 8R14, an antisense transgenic line with high drought tolerance, were obtained, which suggests that the OsCBL8 gene is involved in the response of rice to abiotic stresses. 展开更多
关键词 RICE abiotic stress expression calcineurin b-like protein gene TOLERANCE transgenic plants
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非生物胁迫下杜梨PbCBL4基因的表达 被引量:5
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作者 李刚波 李慧 +2 位作者 丛郁 常有宏 蔺经 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期1132-1138,共7页
为揭示PbCBL4基因在杜梨抗逆防御机制中的作用,采用PCR方法克隆了杜梨PbCBL4基因的cDNA和DNA序列,利用半定量RT-PCR和原核表达分析了该基因对非生物胁迫的转录响应。结果表明:PbCBL4基因的cDNA长度为639 bp,编码一个含212个氨基酸的蛋白... 为揭示PbCBL4基因在杜梨抗逆防御机制中的作用,采用PCR方法克隆了杜梨PbCBL4基因的cDNA和DNA序列,利用半定量RT-PCR和原核表达分析了该基因对非生物胁迫的转录响应。结果表明:PbCBL4基因的cDNA长度为639 bp,编码一个含212个氨基酸的蛋白;基因组DNA长度为1 645 bp,包含8个外显子和7个内含子。PbCBL4编码的蛋白具有植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白结合Ca2+所必需的4个EF手型结构,1个典型的植物钙调磷酸酶A亚基结合位点。PbCBL4与拟南芥AtCBL4亲缘关系最近,处于同一进化分支上。PbCBL4基因在杜梨叶中为诱导型表达,对盐碱、干旱、渗透胁迫和ABA处理均存在转录响应,而在杜梨根中检测不到该基因的表达;将其转入大肠杆菌BL21(DE3)后,能够明显减轻NaCl、甘露醇和PEG6000对该菌株的生长抑制。综上所述,PbCBL4基因主要在叶片中参与了杜梨对非生物胁迫的防御机制。转入PbCBL4的重组大肠杆菌对盐胁迫和渗透胁迫的耐受能力均得到提高。 展开更多
关键词 杜梨 CbL基因 基因特点 原核表达
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植物细胞钙靶蛋白的研究进展
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作者 段瑞君 熊辉岩 《青海大学学报(自然科学版)》 2004年第6期27-30,共4页
简述了植物细胞的钙离子调控过程,对钙调蛋白、钙调磷酸酶B类蛋白和钙离子依赖型蛋白质激酶3类钙靶蛋白的最新研究进展进行了综述。
关键词 钙离子 钙调蛋白 钙调磷酸酶b类蛋白 钙离子依赖型蛋白激酶
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生物信息学方法筛选华支睾吸虫成虫功能基因——钙调神经磷酸酶B亚基样蛋白 被引量:2
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作者 张红梅 余新炳 +1 位作者 徐劲 吴忠道 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期300-302,共3页
目的本文通过建立华支睾吸虫成虫cDNA文库,筛选其功能基因。方法应用SMART方法构建华支睾吸虫成虫cDNA文库,进行大量EST测序,然后应用生物信息学方法将EST序列与GenBank中登陆的序列进行同源性比对、序列拼接及基因完整性判断;并应用NCB... 目的本文通过建立华支睾吸虫成虫cDNA文库,筛选其功能基因。方法应用SMART方法构建华支睾吸虫成虫cDNA文库,进行大量EST测序,然后应用生物信息学方法将EST序列与GenBank中登陆的序列进行同源性比对、序列拼接及基因完整性判断;并应用NCBI上的RPSBLAST对所筛选基因的保守域进行搜索比对,利用PredictProtein分析、预测其功能域及二级结构。结果从华支睾吸虫成虫cDNA文库中筛选的钙调神经磷酸酶B亚基样蛋白(CsCBLP)基因,经同源性分析,CsCBLP与褐家鼠钙调神经磷酸酶(CaN)同源性为53%,与尾刺耐格里原虫CaNB同源性为40%,与新小杆线虫属结合蛋白的同源性为51%;保守域的比对及功能域、二级结构的预测显示所筛选的CsCBLP是钙调神经磷酸酶B亚基的的类似物,属于钙结合蛋白家族。结论应用生物信息学方法从华支睾吸虫成虫cDNA文库中筛选出钙调神经磷酸酶B亚基样蛋白基因。 展开更多
关键词 生物信息学 筛选 华支睾吸虫 成虫 功能基因 钙调神经磷酸酶b亚基样蛋白 EST
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类钙调磷酸酶B亚基蛋白GhCBL3-A01调控棉花黄萎病抗性的功能分析
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作者 高升旗 邵武奎 +3 位作者 赵准 邵盘霞 胡文冉 黄全生 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2023年第6期447-458,共12页
【目的】解析类钙调磷酸酶B亚基蛋白(calcium B-like protein,CBL)基因GhCBL3-A01在棉花抗黄萎病反应中的功能,为棉花抗病育种提供基因资源。【方法】从棉花基因组数据库获得GhCBL3-A01基因的同源序列,进行生物信息学分析。采用实时荧... 【目的】解析类钙调磷酸酶B亚基蛋白(calcium B-like protein,CBL)基因GhCBL3-A01在棉花抗黄萎病反应中的功能,为棉花抗病育种提供基因资源。【方法】从棉花基因组数据库获得GhCBL3-A01基因的同源序列,进行生物信息学分析。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)、茉莉酸甲酯(methyl jasminate,MeJA)和H2O2处理的棉株中GhCBL3-A01基因的表达量变化。利用病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)技术研究GhCBL3-A01在棉花抗黄萎病中的功能。通过检测活性氧积累以及相关基因的表达量,初步分析GhCBL3-A01的作用机制。【结果】陆地棉中GhCBL3-A01及其3个同源蛋白均含有3个CBL家族典型的EF-hand结构域。大丽轮枝菌、MeJA和H2O2处理后,GhCBL3-A01的表达量显著升高。VIGS沉默GhCBL3-A01导致病株率和病情指数显著降低,茎秆维管束褐变程度减轻,有病菌繁殖的茎段数量明显减少,增强了棉株对黄萎病的抗性。GhCBL3-A01基因沉默棉株叶片中活性氧积累增多,防御相关基因PR1、NPR1、PR4和PDF1.2以及茉莉酸信号通路关键基因AOS1、OPR3、MYC2和LOX2的表达量增加。【结论】GhCBL3-A01通过调控防御相关基因、茉莉酸信号通路基因的表达和活性氧积累负调控棉花对黄萎病的抗性,是提高棉花黄萎病抗性的候选基因。 展开更多
关键词 棉花 黄萎病 类钙调磷酸酶b亚基蛋白 GhCbL3-A01 抗病基因 病毒诱导的基因沉默
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