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题名用cDNA差式分析法克隆受GA抑制的豌豆基因
被引量：12
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作者
朱玉贤
张翼凤
李慧英
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机构
北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室
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出处
《中国科学（C辑）》
CSCD
1997年第3期253-257,共5页
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文摘
采用新兴的cDNA差式分析法(representational difference analysis,RDA)比较了经过赤霉素(GA)处理和未经过处理G2豌豆基因表达的差异,发现该豌豆细胞内有数个被GA特异性抑制的mRNA.克隆其中分子量较大的片段PGAS1～3(PeaGA suppressed cDNA 1～3),经Northern杂交证实这些基因只在未经GA处理的豌豆细胞内表达.比较现行核DNA(或 cDNA)减法及差式显示(Differential display)等技术,认为本方法不仅操作简单、易于推广,而且重复性好,假阳性少,是分子克隆技术的重要进步.
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关键词
豌豆
基因克隆
赤霉素
cdna差示分析
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分类号
S643.303.2
[农业科学—蔬菜学]
S188
[农业科学—园艺学]
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题名豌豆乙酰羟酸还原异构酶基因的cDNA克隆及其表达
被引量：2
- 2
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作者
徐华松
徐云剑
顾雪松
胡廷章
苏彦辉
朱玉贤
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机构
北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室
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出处
《科学通报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001年第12期1022-1026,共5页
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文摘
用ｃＤＮＡ差示分析法从Ｇ２ 豌豆总ＲＮＡ中筛选到一个ＧＡ＿３特异诱导表达的基因片段，用该片段作探针进一步筛选Ｇ２豌豆ｃ ＤＮＡ文库，得到一个全长２０３６ ｂｐ 的ｃ ＤＮＡ序列．经分析，该ｃ ＤＮＡ含有一个 １７４６ ｂｐ 的可读框，编码的蛋白质含有 ５８１个氨基酸，理论分子量为 ６４ ｋｕ， ｃ ＤＮＡ及推导的氨基酸序列分别与不同来源的乙酰羟酸还原异构酶相应序列有较高的同源性．将该基因转入表达载体中并在大肠杆菌中表达，获得了具有显著酶活性的外源蛋白．
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关键词
G2豌豆
基因克隆
乙酰羟酸还原异构酶
原核表达
cdna文库
cdna差示分析法
序列分析
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分类号
Q943
[生物学—植物学]
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题名差异筛选与基因克隆
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作者
朱玉贤
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机构
北京大学
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出处
《科学中国人》
2003年第7期44-45,共2页
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文摘
1995年,科学家首次发表研究报告,证实受发育过程特异性诱导表达的启动子指导细菌异戊烯转移酶基因,导致转基因植物发育后期细胞分裂素含量显著提高,从而延缓植物叶片的衰老过程.1999年,又有人发表论文证实用上述启动子指导同源域转录调控因子基因Knotted1表达,也能明显延缓烟草叶片的衰老.与此同时,有学者撰文称在番茄中过量表达拟南芥己糖酸化酶基因,导致转基因植物衰老进程加快.此后,不少作者相续报道了不同基因或不同成份对植物生长发育的调控作用.
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关键词
基因克隆
转基因植物
cdna差示分析法
PPF1基因
细菌异戊烯转移酶基因
细胞分裂素
差异筛选
G2豌豆
生长发育
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分类号
Q785
[生物学—分子生物学]
S551.9
[农业科学—作物学]
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