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题名利用抑制消减杂交技术筛选猪蛔虫性别差异表达基因
被引量：16
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作者
吴绍强
邹丰才
翁亚彪
宋慧群
林瑞庆
朱兴全
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机构
华南农业大学兽医学院
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出处
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期1040-1045,共6页
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基金
国家杰出青年科学基金资助项目(30225033)
人事部留学回国人员科技活动择优资助项目
+1 种基金
广东省自然科学基金重点项目(36835)
中国博士后科学基金项目(2004035591)资助
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文摘
为了筛选线虫的性别特异性基因,为线虫乃至寄生虫的性别控制提供新的工具,本研究选择猪蛔虫(Ascarissuum)为模型,分别提取雌性和雄性成虫的mRNA后,采用Clontech公司的PCR-selectTM试剂盒进行反转录合成cDNA并进行抑制消减杂交(SSH),构建猪蛔虫雌、雄虫性别差异表达的消减cDNA文库,并采用地高辛(DIG)标记的cDNA探针进行Southern杂交检验所构建文库的消减效率。结果表明,雌、雄虫性别差异表达的消减cDNA文库均具有很强的性别特异性。随机从各库中各抽取25个克隆进行测序及在线BLAST分析,发现在25个雄虫ESTs中有20个已知ESTs,5个新的ESTs;25个雌虫ESTs中有11个已知ESTs,还有8个可能为新基因。猪蛔虫性别差异表达的消减cDNA文库的成功构建,为进一步研究性别特异基因的功能奠定了基础。
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关键词
抑制消减杂交技术
筛选
猪
蛔虫
性别差异基因
cdna文库
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Keywords
Ascaris suum
Subtractive spression hbridization(SSH)
Gender rlated gne
cdna lbrary
Southern blot
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分类号
S852.7
[农业科学—基础兽医学]
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