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南方红豆杉水提物抑制T790M突变及c-MET扩增导致的吉非替尼耐药体外研究 被引量：6
1
作者 张郜晨茜 杨兴辉 舒琦瑾 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期715-720,共6页
目的研究南方红豆杉水提物抑制T790M突变及c-MET扩增所致吉非替尼耐药机制。方法应用MTT法检测不同浓度南方红豆杉水提物(0.25、0.5、1、2、4 mg/mL)和吉非替尼(3、6、12、18、30μmol/L)对H1975、H820细胞株增殖的影响,根据结果筛选最... 目的研究南方红豆杉水提物抑制T790M突变及c-MET扩增所致吉非替尼耐药机制。方法应用MTT法检测不同浓度南方红豆杉水提物(0.25、0.5、1、2、4 mg/mL)和吉非替尼(3、6、12、18、30μmol/L)对H1975、H820细胞株增殖的影响,根据结果筛选最佳后续实验药物浓度,计算各组半数抑制浓度(IC50)和两药联合指数(CI);将对照组(1640培养液)、南方红豆杉组(0.25μmol/L)、吉非替尼组(3μmol/L)及联合组(南方红豆杉0.25μmol/L+吉非替尼3μmol/L)H1975和H820细胞药物处理72 h后,采用Western Blot检测EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT及PI3K蛋白表达,采用qRT-PCR检测EGFR、PI3K及AKT mRNA表达。结果在H1975和H820细胞中联合组达到IC50所需的吉非替尼浓度明显小于吉非替尼组,且CI<1。在H1975细胞中,与对照组比较,南方红豆杉组EGFR、p-EGFR、PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05),吉非替尼组AKT蛋白表达降低(P<0.05),联合组EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT及PI3K蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05)。与吉非替尼组比较,南方红豆杉组EGFR、p-EGFR、p-AKT蛋白表达降低(P<0.01),联合组EGFR、p-EGFR、PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P<0.01)。在H820细胞中,与对照组比较,南方红豆杉组EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达下调(P<0.01),联合组p-EGFR、PI3K、p-AKT蛋白表达降低(P<0.01)。与吉非替尼组比较,南方红豆杉组EGFR、p-AKT蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05),联合组p-EG-FR、PI3K、p-AKT蛋白表达降低(P<0.01)。在H1975及H820细胞中,与对照组比较,吉非替尼组AKT及PI3K mRNA表达降低(P<0.01,P<0.05),南方红豆杉组及联合组EGFR、AKT及PI3K mRNA表达降低(P<0.01)。与吉非替尼组比较,联合组EGFR、AKT及PI3K mRNA表达降低(P<0.01)。结论南方红豆杉水提物能增强吉非替尼对H1975、H820细胞增殖抑制作用,可抑制T790M突变和c-MET扩增所致的吉非替尼耐药,其机制与抑制EGFR/PI3K/AKT通路有关。 展开更多
关键词 南方红豆杉 吉非替尼 T790M突变 c-met基因扩增 耐药机制
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