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基于造血活性小肽研究阿胶炮制原理 被引量：1
1
作者 付英杰 司子林 +4 位作者 刘月 贾玉民 陈智 陈小天 王建安 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2250-2258,共9页
目的基于造血活性小肽研究阿胶炮制原理。方法Orbitrap-MS法对阿胶及其炮制品(蛤粉炒、蒲黄炒)的酶解-超滤物进行数据解析,根据分值、丰度、韦恩图、热图聚类分析推断其可能具有造血活性或具有深入研究价值的肽序列。采用Fmoc固相合成... 目的基于造血活性小肽研究阿胶炮制原理。方法Orbitrap-MS法对阿胶及其炮制品(蛤粉炒、蒲黄炒)的酶解-超滤物进行数据解析,根据分值、丰度、韦恩图、热图聚类分析推断其可能具有造血活性或具有深入研究价值的肽序列。采用Fmoc固相合成法对其进行合成,检测纯度、三氟乙酸残留、净肽含量、内毒素等。以红细胞爆式集落形成单位为指标,检测阿胶及其炮制品的酶解-超滤物和13种合成肽活性。结果共检测出171种肽,其中127个来源于胶原蛋白。蛤粉炒阿胶26种新肽产生,21种肽消失;蒲黄炒阿胶16种新肽产生,52种肽消失,多数肽序列保持不变,但丰度有所改变。以其中13种肽作为对象进行Fmoc合成,发现其均可用于细胞培养。结论阿胶炮制后,造血活性升高,推测是胶原蛋白裂解并经消化产生ejp33(GVVGLPGQR)强活性肽、ejp131(GPAGPSGPPGKDGT)弱活性肽以达到增效作用,且其促造血效果是以ejp10(GPAGPIGPV)、ejp6(GPAGPTGPV)、ejp77(LSSPARSGASL)为主的数种肽的协同作用。 展开更多
关键词 阿胶 蛤粉炒 蒲黄炒 酶解 Orbitrap-MS 红细胞爆式集落形成单位 Fmoc固相合成
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鹿龙再生汤对重型再生障碍性贫血小鼠模型BFU-E和CFU-GM的影响 被引量：3
2
作者 朱丽 林赠华 刘红 《南通大学学报（医学版）》 2016年第1期22-25,共4页
目的 :研究鹿龙再生汤对重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)小鼠模型外周血象及红系爆式集落形成单位(burst-forming unit-erythroid,BFU-E)和粒单系集落形成单位(colony-forming unit-granulocyte macrophage,CFU-GM)的影... 目的 :研究鹿龙再生汤对重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)小鼠模型外周血象及红系爆式集落形成单位(burst-forming unit-erythroid,BFU-E)和粒单系集落形成单位(colony-forming unit-granulocyte macrophage,CFU-GM)的影响,探讨鹿龙再生汤促进造血作用的机制。方法 :BALB/c小鼠40只通过干扰素(interferon,IFN-γ)腹腔注射联合白消安灌胃,连续用药10 d,成功诱导建立了SAA模型,然后被随机分为4组(n=10),分别设为SAA组、SAA中药小剂量组(一般浓度)、SAA中药中剂量组(正常剂量的5倍浓度)、SAA中药大剂量组(正常剂量的10倍浓度),并分别予以生理盐水及3个不同剂量的鹿龙再生汤灌胃;另取10只正常BALB/c小鼠作为正常组,予以生理盐水灌胃和腹腔注射。5 d后收集各组小鼠眼眶血检测外周血象,取小鼠骨髓单个核细胞用甲基纤维素培养,培养7 d后观察并计数的BFU-E、CFU-GM。结果 :造模后SAA小鼠外周血的白细胞、血红蛋白、血小板、网织红细胞均有降低(P<0.05),经过不同剂量的鹿龙再生汤治疗后SAA小鼠的外周血均有不同程度升高,其中中剂量的鹿龙再生汤可以明显升高SAA模型小鼠外周血白细胞和网织红细胞的计数(P<0.05)。SAA组BFU-E和CFU-GM的集落形成较正常组明显下降(P<0.05),而SAA中药中剂量组BFU-E和CFU-GM的集落形成较SAA组明显上升(P<0.05)。结论 :中剂量的鹿龙再生汤可能通过促进SAA小鼠骨髓单个核细胞BFU-E、CFU-GM的生成,从而改善外周血象,相关实验结果可能为SAA的中药治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 红系爆式集落形成单位 粒单系集落形成单位 鹿龙再生汤 小鼠
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人胚胎干细胞来源红系细胞膜蛋白表达的研究
3
作者 李晴 邹庆 +7 位作者 毛斌 黄淑 赖默温 潘旭 孙文翠 陈谊金 刘嘉馨 马峰 《中国输血杂志》 北大核心 2017年第3期235-241,共7页
目的探讨人胚胎干细胞(h ESCs)来源红系细胞在发育过程中其膜蛋白,包括膜表型分子、膜骨架蛋白和跨膜蛋白的表达情况。方法 h ESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾(m AGM-S3)基质细胞共培养产生造血干祖细胞(CD34+CD45+)和GPA+细胞,挑取共培养1... 目的探讨人胚胎干细胞(h ESCs)来源红系细胞在发育过程中其膜蛋白,包括膜表型分子、膜骨架蛋白和跨膜蛋白的表达情况。方法 h ESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾(m AGM-S3)基质细胞共培养产生造血干祖细胞(CD34+CD45+)和GPA+细胞,挑取共培养12 d的细胞,同时磁珠分选人脐血中的CD34^+细胞,在多种特定细胞因子SCF、IL-6、IL-3、FLT3-L、TPO、EPO等诱导下,分别进行集落培养12-14 d产生红系爆发式集落形成单位(BFU-E),运用流式细胞术(FACs)、qRT-PCR和免疫荧光染色等方法检测并比较hESCs和人脐血CD34^+细胞2种来源的红系细胞膜蛋白的表达情况,并以后者作为对照组。结果 hESCs来源BFU-E的膜蛋白的表达趋势与对照组相近:其膜骨架蛋白和跨膜蛋白的基因,如SPTA、SPTB、ANK1、EPB41等基因转录水平都在逐渐增强,而一些膜蛋白如黏附分子CD49d、CD29、CD71等的表达逐渐降低,CD47基本不表达;带3蛋白(Band 3)表达量较高且与成体型血红蛋白β-globin的表达呈正相关。结论在hESCs向红系诱导生成过程中,一些膜表型分子表达在逐渐降低,而膜蛋白表达逐渐增强。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 红系细胞 膜蛋白表达 红系爆发式集落形成单位 带3蛋白
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重型再生障碍性贫血患者免疫抑制治疗后骨髓造血祖细胞水平的变化及其意义 被引量：5
4
作者 邵宗鸿 郑以州 +4 位作者 张益枝 陈桂彬 李莉 孙娟 储榆林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期405-408,共4页
为更好地评价重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)后骨髓造血功能恢复程度,采用造血祖细胞体外培养技术,动态观察了48例接受IBT的SAA患者及20例正常对照者骨髓晚期红系爆式集落形成单位(mBFU-E)及粒-巨噬系集落形成单位(CFU-... 为更好地评价重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)后骨髓造血功能恢复程度,采用造血祖细胞体外培养技术,动态观察了48例接受IBT的SAA患者及20例正常对照者骨髓晚期红系爆式集落形成单位(mBFU-E)及粒-巨噬系集落形成单位(CFU-GM)的水平变化。结果表明,IST前所有SAA患者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平均显著低于正常对照组(P<0.001);IST后1年,29例有效者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平显著增高,增高程度与其临床疗效相关;12例mBFU-E及10例CFU-GM水平恢复正常,其中8例患者mBFU-E及CFU-GM水平同时恢复正常。这表明SAA确是一组异质性疾病,其造血功能衰竭与异常免疫关系密切,若去除这种异常,造血功能可获得部分甚至完全重建。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 免疫抑制治疗 骨髓造血祖细胞 红系爆式集落形成单位 粒-巨噬系集落形成单位 造血功能
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地黄低聚糖对快速老化模型小鼠造血功能的影响 被引量：22
5
作者 刘福君 赵修南 +3 位作者 汤建芳 茹祥斌 张永祥 顾国明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期509-512,共4页
目的：研究地黄低聚糖（ＲＧＯＳ）对快速老化模型小鼠（ＳＡＭＰ８）造血功能的影响。方法：采用造血祖细胞体外克隆培养等实验血液学方法。结果：ＲＧＯＳ１０，２０ｍｇ·ｋｇ－１可使ＳＡＭＰ８小鼠的ＣＦＵ－Ｓ、ＣＦＵ－ＧＭ... 目的：研究地黄低聚糖（ＲＧＯＳ）对快速老化模型小鼠（ＳＡＭＰ８）造血功能的影响。方法：采用造血祖细胞体外克隆培养等实验血液学方法。结果：ＲＧＯＳ１０，２０ｍｇ·ｋｇ－１可使ＳＡＭＰ８小鼠的ＣＦＵ－Ｓ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ明显增多，并可使外周血中降低的ＷＢＣ数明显增加。提示ＲＧＯＳ可刺激ＳＡＭＰ８小鼠造血干细胞、祖细胞的增殖分化。集落刺激活性实验显示ＲＧＯＳ可使小鼠体内的集落刺激因子产生明显增多。小鼠骨髓组织学研究结果也进一步证实了ＲＧＯＳ增强ＳＡＭＰ８小鼠造血功能的作用。结论：ＲＧＯＳ可以增强ＳＡＭＰ８小鼠的造血功能。 展开更多
关键词 地黄低聚糖 老化 造血干细胞 造血祖细胞 药理
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当归多糖促进5-氟尿嘧啶作用后小鼠应激性红细胞发生 被引量：1
6
作者 王碧瑶 肖含先之 +4 位作者 牛依琳 孙念慈 汪子铃 王亚平 王璐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1949-1956,共8页
目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharide,ASP)拮抗5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对小鼠脾脏应激性红细胞发生的影响及其相关机制。方法选取6~8周龄的C57BL/6J小鼠,雌雄各半,分为对照组、ASP组、5-FU组、ASP+5-FU组。记... 目的探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharide,ASP)拮抗5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对小鼠脾脏应激性红细胞发生的影响及其相关机制。方法选取6~8周龄的C57BL/6J小鼠,雌雄各半,分为对照组、ASP组、5-FU组、ASP+5-FU组。记录建模时期小鼠体质量,血细胞计数仪分析外周血常规;观察脾脏组织切片病理学改变;计算脾指数;台盼蓝染色法计数小鼠股骨骨髓单个核细胞及脾细胞数;分离培养及计数脾脏单个核细胞爆氏红系集落形成单位;流式细胞术检测F4/80+脾巨噬细胞数量;qRT-PCR检测脾脏黏附分子基因Emp,铁转运基因Hmox-1、Trf、Fpn、TrfR以及核内吞基因Tim4、MerTK表达水平。结果ASP部分逆转5-FU致伤小鼠体质量、红细胞数量、血红蛋白含量和红细胞压积、骨髓单个核细胞数量下降;ASP增大脾脏体积、提升脾指数、红髓面积、脾细胞数量,促进脾脏BFU-E形成;ASP拮抗5-FU,维持F4/80+脾巨噬细胞数量,促进Emp、Hmox-1、Trf、Fpn、TrfR、Tim4及MerTK基因表达。结论ASP通过保护脾脏幼红细胞岛中央巨噬细胞数量及功能,促进小鼠脾脏应激性红细胞发生。 展开更多
关键词 当归多糖 5-氟尿嘧啶 应激性红细胞发生 爆氏红系集落形成单位 幼红细胞岛 巨噬细胞
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牛膝精对辐照小鼠造血干细胞和红系造血祖细胞的影响
7
作者 全宏勋 张宇明 +3 位作者 马素好 冯向功 邓爱民 张海林 《中国辐射卫生》 2011年第2期144-145,共2页
目的探讨牛膝精(ABE)对辐照小鼠造血干细胞(以CFU-S表示)和早期红系造血祖细胞[以红系爆式集落形成单位(BFU-E)表示]和晚期红系造血祖细胞[以晚期红系集落形成单位(CFU-E)表示]的影响。方法采用脾集落形成和造血祖细胞培养技术,观察了... 目的探讨牛膝精(ABE)对辐照小鼠造血干细胞(以CFU-S表示)和早期红系造血祖细胞[以红系爆式集落形成单位(BFU-E)表示]和晚期红系造血祖细胞[以晚期红系集落形成单位(CFU-E)表示]的影响。方法采用脾集落形成和造血祖细胞培养技术,观察了牛膝精对辐照小鼠脾重、造血干细胞、早期红系造血祖细胞和晚期红系造血祖细胞的影响。结果该药能使受照鼠脾重及脾集落数明显提高,但不能刺激早、晚期红系造血祖细胞的活性。结论牛膝精能刺激造血干细胞的增殖,但对其向红系分化无明显影响。 展开更多
关键词 牛膝精 造血干细胞 早期红系造血祖细胞 晚期红系造血祖细胞 辐照小鼠
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高原红细胞增多症骨髓前红系祖细胞体外培养动态观察 被引量：1
8
作者 邹春华 胡小利 +3 位作者 薜增军 何国强 李素芝 牟信兵 《西南国防医药》 CAS 1999年第2期71-72,共2页
目的:对高原红细胞增多症（HAPC）骨髓前红系祖细胞（BFU—E）进行动态观察,以探讨其发病机理。方法:应用造血干细胞体外培养技术,取其体系内含单个核细胞2×10<sup>5</sup>/ml置于培养液中,在5％CO<sub>2</su... 目的:对高原红细胞增多症（HAPC）骨髓前红系祖细胞（BFU—E）进行动态观察,以探讨其发病机理。方法:应用造血干细胞体外培养技术,取其体系内含单个核细胞2×10<sup>5</sup>/ml置于培养液中,在5％CO<sub>2</sub>、37℃及饱和湿度条件下培养,以观察其细胞生长情况。结果:红系祖细胞接种及增殖延滞时间为24h后,可见双细胞及少数4～6个细胞组成的细胞团。第4天可见10个左右细胞的细胞团,第6～7天可见较多CFU—E集落,第9天CFU—E集落数量明显减少,第10天可见较大或多中心的集落。呈桔黄色或颜色逐渐加深,以50～100个细胞的爆式集落为多见,联苯胺染色阳性,呈棕褐色,第14天可见较多较大的爆式集落含100～1000个左右细胞,培养至21d,BFU—E集落多数退化或消失。结论:观察中发现HAPC骨髓BFU—E集落产率与正常对照比较有显著差异（P【0.01）,集落类型以多中心型,分散型为主。提示,HAPC骨髓BFU—E具有很强的增殖、分化能力,其机理需要进一步探讨。 展开更多
关键词 高原 前红系祖细胞 红细胞增多症
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