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BRD7对过氧化氢处理的心肌细胞线粒体膜电位和胞浆中Cyt C蛋白水平影响研究 被引量：4
1
作者 李春晓 李艳 +2 位作者 张静静 张勇涛 杨杰书 《中国循证心血管医学杂志》 2018年第10期1212-1215,共4页
目的研究溴区包含蛋白7(BRD7)对过氧化氢处理的心肌细胞线粒体膜电位和胞浆中细胞色素C(Cyt C)蛋白表达影响。方法以real-time PCR和Western blot方法检测过氧化氢处理后的心肌细胞中BRD7转录和表达水平。用BRD7 shRNA慢病毒和shRNA con... 目的研究溴区包含蛋白7(BRD7)对过氧化氢处理的心肌细胞线粒体膜电位和胞浆中细胞色素C(Cyt C)蛋白表达影响。方法以real-time PCR和Western blot方法检测过氧化氢处理后的心肌细胞中BRD7转录和表达水平。用BRD7 shRNA慢病毒和shRNA control慢病毒感染心肌细胞,以real-time PCR和Western blot方法检测过氧化氢条件下干扰效果。MTT测定细胞增殖活性,流式细胞术测定细胞凋亡情况,JC-1法检测线粒体膜电位,Western blot方法检测胞浆中Cyt C蛋白水平。结果过氧化氢处理后的心肌细胞中BRD7转录和表达水平升高。BRD7 shRNA慢病毒能够下调过氧化氢条件下心肌细胞中BRD7的表达水平。过氧化氢降低心肌细胞增殖活性,诱导心肌细胞凋亡,降低线粒体膜电位,增加胞浆中Cyt C蛋白水平。下调心肌细胞中BRD7表达可以拮抗过氧化氢对心肌细胞增殖活性、凋亡、线粒体膜电位及胞浆中Cyt C蛋白水平影响。结论下调BRD7提高过氧化氢条件下心肌细胞线粒体膜电位,降低胞浆中Cyt C蛋白水平,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 线粒体膜电位 溴区包含蛋白7 心肌细胞 过氧化氢
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BRD7在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 被引量：2
2
作者 陈龙 喻风雷 《中国肺癌杂志》 CAS 2011年第10期830-834,共5页
背景与目的溴区包含蛋白7(bromodo main-containing protein7,BRD7)基因属于bromodomain家族成员,该家族的大多数成员与上皮类肿瘤的发生密切相关。本研究旨在探讨BRD7在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临... 背景与目的溴区包含蛋白7(bromodo main-containing protein7,BRD7)基因属于bromodomain家族成员,该家族的大多数成员与上皮类肿瘤的发生密切相关。本研究旨在探讨BRD7在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测101例NSCLC癌组织及其33例正常肺组织中BRD7的表达情况。结果 BRD7在NSCLC组织中的阳性表达率明显高于正常肺组织;BRD7在淋巴结转移组阳性表达率高于无淋巴结转移组;BRD7的阳性表达率随着TNM分期的升高而升高。BRD7的阳性表达与患者年龄、性别、吸烟情况、病理类型、分化程度无关(P>0.05)。结论 BRD7在NSCLC中有较高的表达率,除了与淋巴结转移有关外,还与TNM分期有关,提示BRD7可能与肺癌的发生、发展和转移有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 溴区包含蛋白7 免疫组化
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基于同源重组和反向PCR扩增技术构建BRD7溴区结构域缺失突变体
3
作者 牛伟红 王鑫晔 +3 位作者 周尧 李夏雨 李桂源 周鸣 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期885-890,共6页
目的:利用同源重组和反向PCR扩增技术构建溴区包含蛋白7(bromodomain-containing protein 7,BRD7)的溴区结构域(bromodomain)缺失的真核表达载体。方法:设计一对反向PCR引物,以预先构建好的p IRES2-EGFP-3Flag/BRD7质粒为模板,利用高保... 目的:利用同源重组和反向PCR扩增技术构建溴区包含蛋白7(bromodomain-containing protein 7,BRD7)的溴区结构域(bromodomain)缺失的真核表达载体。方法:设计一对反向PCR引物,以预先构建好的p IRES2-EGFP-3Flag/BRD7质粒为模板,利用高保真酶的高保真性和较长的延伸能力,反向扩增出BRD7溴区结构域缺失突变体(p IRES2-EGFP-3Flag/BRD7△brd)的线性DNA片段,然后转化大肠杆菌,利用大肠杆菌同源重组修复能力即可自身环化,而不需要经连接酶连接或其他处理即可得到p IRES2-EGFP-3Flag/BRD7△brd重组表达质粒,通过测序和Western印迹进一步对该缺失突变体的序列和蛋白质表达性能进行验证。结果:通过酶切鉴定、测序和Western印迹证实p IRES2-EGFP-3Flag/BRD7△brd构建成功。结论:利用PCR反向扩增和同源重组技术,可以简便快速地构建p IRES2-EGFP-3Flag/BRD7△brd突变体,实验成本较低,并且发现质粒模板浓度会影响载体的同源重组效率,这种改进的技术可广泛应用到基因突变体的构建。 展开更多
关键词 反向PCR扩增 同源重组 溴区包含蛋白7 溴区结构域
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