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牛泡沫病毒BFV3026细胞感染性的确立及包装细胞系的建立 被引量：1
1
作者 余荭 孔晓红 +3 位作者 李汀 马永钢 陈启民 耿运琪 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期330-335,共6页
分别将牛泡沫病毒BFV3026接种于胎牛肺细胞(FBL)、牛肺细胞系(BL12)、新生牛肾细胞(NBK)、兔肺细胞(RL)、人乳腺癌上皮细胞(MCF)、293T、HeLa、CV-1、CHO等9种细胞,通过对它们及其传代细胞的病变观察与RT-PCR检测,确立BFV3026对这9种细... 分别将牛泡沫病毒BFV3026接种于胎牛肺细胞(FBL)、牛肺细胞系(BL12)、新生牛肾细胞(NBK)、兔肺细胞(RL)、人乳腺癌上皮细胞(MCF)、293T、HeLa、CV-1、CHO等9种细胞,通过对它们及其传代细胞的病变观察与RT-PCR检测,确立BFV3026对这9种细胞的感染。并以BFV3026原病毒DNA为模板,通过PCR构建以pcD NA3 1(-)为载体的gag-pol、env真核表达质粒共转染BL12细胞,经G418持续筛选,获得8个NeoR细胞克隆。RT-PCR及包装实验证实:其中7个细胞克隆能有效行使包装辅助功能。 展开更多
关键词 牛泡沫病毒 BFV3026细胞 感染性 包装细胞系
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牛泡沫病毒BFV3026 gag基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)
2
作者 余荭 孔晓红 +4 位作者 马永刚 李汀 王金忠 陈启民 耿运琪 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期84-90,共7页
从牛泡沫病毒 BFV3 0 2 6感染的胎牛肺细胞中提取 Hirt DNA,PCR扩增 BFV3 0 2 6gag基因 .序列分析确证后 ,将其克隆于原核表达载体 p ET3 2 A,重组质粒转化大肠杆菌 BL2 1 (DE3 ) ,经 IPTG诱导 ,使 Gag蛋白得以高效表达 .SDS-PAGE及 Wes... 从牛泡沫病毒 BFV3 0 2 6感染的胎牛肺细胞中提取 Hirt DNA,PCR扩增 BFV3 0 2 6gag基因 .序列分析确证后 ,将其克隆于原核表达载体 p ET3 2 A,重组质粒转化大肠杆菌 BL2 1 (DE3 ) ,经 IPTG诱导 ,使 Gag蛋白得以高效表达 .SDS-PAGE及 Western blot证实 :表达蛋白占菌体总蛋白的 40 % .本工作的完成为 Gag蛋白功能的研究奠定基础 . 展开更多
关键词 牛泡沫病毒 BFV3026 GAG基因 基因克隆 基因表达 序列分析 大肠杆菌
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牛泡沫病毒中国株感染兔的研究
3
作者 余荭 孔晓红 +3 位作者 宣成昊 王金忠 陈启民 耿运琪 《中国病毒学》 CAS CSCD 2003年第6期566-570,共5页
将牛泡沫病毒(BFV3026)感染的细胞经耳缘静脉注射兔子,并以正常细胞注射的兔为对照。1年后处死,病毒挽救实验及PCR检测显示:兔经一次注射即可被BFV3026感染,病毒广泛分布于感染兔的多种脏器中,通过共培养可从感染兔血、肝、脾、肺、肾... 将牛泡沫病毒(BFV3026)感染的细胞经耳缘静脉注射兔子,并以正常细胞注射的兔为对照。1年后处死,病毒挽救实验及PCR检测显示:兔经一次注射即可被BFV3026感染,病毒广泛分布于感染兔的多种脏器中,通过共培养可从感染兔血、肝、脾、肺、肾中拯救出相应感染性病毒颗粒,并在脑、骨髓、心、胰、肠系膜中检到高拷贝BFV原病毒DNA存在。同时,血清学检测表明:感染兔在接受注射一个月后即产生高滴度抗病毒蛋白抗体,并维持该滴度水平直至实验终止,兔未表现任何可观病变。 展开更多
关键词 牛泡沫病毒3026 兔 感染 中国株
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