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中国部分地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶基因型研究 被引量：172
1
作者 季淑娟 顾怡明 +6 位作者 谭文涛 王丹丹 冯羡菊 周志慧 俞云松 陈亚岗 李兰娟 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期590-593,共4页
目的　了解中国产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型分布。方法　收集北京、浙江、新疆及郑州等共 4 0 0株临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,采用接合试验 ,聚合酶链反应 ,克隆测序等方法明确... 目的　了解中国产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型分布。方法　收集北京、浙江、新疆及郑州等共 4 0 0株临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,采用接合试验 ,聚合酶链反应 ,克隆测序等方法明确ESBLs基因型。结果　 4 0 0株细菌中 35 6株细菌ESBLs的基因型明确。其中 32 8株细菌产 1种ESBLs,主要为CTX M型 ,包括CTX M 14型ESBLs占 5 2 2 5 % ,CTX M 3型占 14 2 5 % ,CTX M 2 4型占 7 2 5 % ,CTX M 2 2型占 2 % ,CTX M 2 8和CTX M 9型分别占 0 75 % ,CTX M 13、CTX M 2 7和CTX M 2 9型各占 0 2 5 % ;其次为SHV型 ,其中SHV 12占2 5 % (10 / 4 0 0 ) ,SHV 5占 1 0 0 % ,SHV 2占 0 5 %。 2 8株细菌同时携带 2种或 3种ESBLs ,占 7 0 0 %(2 8/ 4 0 0 ) ,其中以同时产CTX M 14和CTX M 3最常见。结论　中国产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型以CTX M 14型为主 ;其次为CTX M 3型 ,部分菌株同时产两种及两种以上ESBLs。 展开更多
关键词 CTX ESBL 肺炎克雷伯菌 大肠埃希菌 s基因 超广谱Β内酰胺酶 细菌 SHV型 克隆测序 酶基因
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鲍氏不动杆菌耐药性和氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶基因研究 被引量：136
2
作者 糜祖煌 黄支密 秦玲 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 2004年第9期968-971,共4页
目的　了解我国浙江湖州地区鲍氏不动杆菌 (ABA)耐药性和氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶基因存在状况。方法　收集 2 0 0 0年 7月～ 2 0 0 2年 12月分离自浙江湖州地区住院患者 6 0株鲍氏不动杆菌进行耐药性和 9种氨基糖苷类修饰酶基因... 目的　了解我国浙江湖州地区鲍氏不动杆菌 (ABA)耐药性和氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶基因存在状况。方法　收集 2 0 0 0年 7月～ 2 0 0 2年 12月分离自浙江湖州地区住院患者 6 0株鲍氏不动杆菌进行耐药性和 9种氨基糖苷类修饰酶基因、2种β-内酰胺酶基因检测。结果　该 6 0株菌已呈多重耐药 ;4 9株检出氨基糖苷类修饰酶基因 (81.7% ) ;9种基因由高到低的检出率分别为 :ant(3″) - (6 0 .0 % )、aac(6′) - (5 5 .0 % )、aac(3) - (5 1.7% )、ant(2″) - (2 0 .0 % )、aac(3) - (15 .0 % )、aac(3) - (11.7% )、 aac(6′) - (10 .0 % )、aph (3′) - (3.3% )、 aac(3) - (0 ) ;本研究 ant(3″) - (AY5 5 14 38)、aac(6′) - (AY5 36 0 6 3)、aac(3) - (AY5 2 910 3)序列已登录 Gen Bank;β内酰胺酶基因检出率分别为 :TEM 10 0 %、SHV 30 .0 % ;本研究 TEM- 1(AY2 6 3331)、TEM- 12 8(AY35 92 87)、SHV- 12 (AY2 5 916 3)、SHV - 4 8(AY 2 5 916 4 )、SHV- 5 6 (AY35 2 5 99)序列已登录 Gen Bank。结论　我国浙江湖州地区 ABA菌已呈多重耐药 ;氨基糖苷类修饰酶基因。 展开更多
关键词 不动杆菌属 Β-内酰胺酶类 基因
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产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及耐药性观察 被引量：114
3
作者 彭少华 李从荣 +2 位作者 施菁玲 蔡璇 李红霞 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期350-352,共3页
目的　探讨超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)的 3种检测技术及调查产ESBLs 细菌的耐药现状。方法　对 5 38株肠杆菌科细菌用VITEK32测定ESBLs,同时用复合纸片法做表型确证试验及双纸片协同法进行对照监测。结果　仪器法、确证法、双纸片法检... 目的　探讨超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)的 3种检测技术及调查产ESBLs 细菌的耐药现状。方法　对 5 38株肠杆菌科细菌用VITEK32测定ESBLs,同时用复合纸片法做表型确证试验及双纸片协同法进行对照监测。结果　仪器法、确证法、双纸片法检测ESBLs 菌株阳性率分别为 2 0 .1% ,19 .5 % ,双纸片法阳性率为 13.0 %。产ESBLs 菌对 12种常用抗菌药物耐药率明显高于非产酶菌株。结论　选择准确快速的检测方法 ,提高ESBLs 菌株的阳性检出率 。 展开更多
关键词 Β-内酰胺酶类 克雷伯氏菌 肺炎 肠杆菌属 抗药性
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AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶在阴沟肠杆菌中的表达及对其耐药性的影响 被引量：86
4
作者 佘丹阳 刘又宁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第19期1355-1358,共4页
目的　研究AmpC酶和超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)在阴沟肠杆菌中的流行情况及对其耐药性的影响。方法　琼脂稀释法测定最低抑菌浓度 (MIC) ,三维试验、等电聚焦电泳、接合试验及聚合酶链反应分析耐药菌的产酶情况。结果　 10 6株阴沟肠杆... 目的　研究AmpC酶和超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)在阴沟肠杆菌中的流行情况及对其耐药性的影响。方法　琼脂稀释法测定最低抑菌浓度 (MIC) ,三维试验、等电聚焦电泳、接合试验及聚合酶链反应分析耐药菌的产酶情况。结果　 10 6株阴沟肠杆菌中 ,单纯高产AmpC酶者、单纯产ESBL者、高产AmpC酶并产ESBL者分别占 16 0 %、10 4 %、13 2 %。CTX M型和SHV型ESBL的检出率分别为 17 0 % (18/ 10 6 )和 6 6 % (7/ 10 6 )。碳青霉烯类抗生素对阴沟肠杆菌均有很好的抗菌活性(MIC90≤ 2 μg/ml)。单纯高产AmpC酶菌对头孢吡肟、阿米卡星、庆大霉素和环丙沙星的敏感率均超过 70 % ;单纯产ESBL菌对哌拉西林 /他唑巴坦、头孢哌酮 /舒巴坦、环丙沙星和阿米卡星的敏感率均超过 6 0 % ;高产AmpC酶并产ESBL菌对除碳青霉烯类外的其他抗生素的敏感率均低于 2 5 %。结论　CTX M型ESBL已经在阴沟肠杆菌中流行。产ESBL和高产AmpC酶同样是导致阴沟肠杆菌对第 3代头孢菌素耐药的重要原因。ESBL在高产AmpC酶菌株中的流行增强了此类菌株的耐药性。 展开更多
关键词 AMPC酶 阴沟肠杆菌 耐药性 Β内酰胺酶类 院内感染 抗生素
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鲍曼不动杆菌耐药性及β内酰胺酶基因型研究 被引量：86
5
作者 黄支密 陈榆 +2 位作者 毛培华 吴晶 仵蕾 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期683-685,共3页
目的　明确浙江湖州地区临床分离的鲍曼不动杆菌耐药性及 β内酰胺酶基因型。方法　采用ATB药敏试验条板微量肉汤法测定临床分离的 6 0株鲍曼不动杆菌对 18种抗菌药物的敏感性 ,采用聚合酶链反应 (PCR)及序列分析的方法分析 β内酰胺酶... 目的　明确浙江湖州地区临床分离的鲍曼不动杆菌耐药性及 β内酰胺酶基因型。方法　采用ATB药敏试验条板微量肉汤法测定临床分离的 6 0株鲍曼不动杆菌对 18种抗菌药物的敏感性 ,采用聚合酶链反应 (PCR)及序列分析的方法分析 β内酰胺酶基因型。 结果　鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美洛培南的耐药率为 1 7% ,哌拉西林 /他唑巴坦的耐药率为 4 8 3% ,对其他抗菌药物的耐药率均在 5 0 %以上。有 18株菌株扩增到SHV型 β内酰胺酶 ,17株为ESBLsSHV 12 ,另 1株(HZ0 1株 )扩增序列全长含 82 6个核苷酸 ,与SHV 1相比 ,第 35、191、2 38、2 4 0位氨基酸有不同 ,被命名为SHV 4 8(GenBank登录号 :AY2 5 916 4 )。结论　浙江湖州地区临床分离的鲍曼不动杆菌耐药严重 ,至少存在 3种不同类型的 β内酰胺酶 ,基因型分别为SHV 12、SHV 4 8、TEM 1。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 耐药性 Β内酰胺酶 基因型 抗菌药物
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鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药分子机制的研究 被引量：71
6
作者 张永 唐英春 +1 位作者 陆坚 张扣兴 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期217-221,240,共6页
目的了解鲍曼不动杆菌对亚胺培南产生耐药的分子机制.方法收集对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌(imipenem resistant Acinetobacter baumannii,IRAB)无重复株共9株,采用琼脂稀释法进行药敏检测,协同抑制试验、质粒接合试验、Southern杂交... 目的了解鲍曼不动杆菌对亚胺培南产生耐药的分子机制.方法收集对亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌(imipenem resistant Acinetobacter baumannii,IRAB)无重复株共9株,采用琼脂稀释法进行药敏检测,协同抑制试验、质粒接合试验、Southern杂交、等电聚焦电泳、PCR扩增blaVIM、blaIMP、blaOXA-23、blaOXA-24相关基因及整合子编码序列及其分子克隆和测序,以阐述其分子耐药机制.结果本组IRAB具有多重耐药性;耐药基因分子克隆、测序并结合等电聚焦分析证实均产OXA-23型碳青霉烯酶,质粒接合试验、Southern杂交显示其编码基因定位在染色体上.9株细菌均检测出Ⅰ型整合子基因结构(大小约1.2～4kb);3株菌检测出Ⅱ型整合子基因结构(1.8～2kb),均携带了多种耐药基因.结论产OXA-23型β-内酰胺酶是本组鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素产生耐药性的重要原因;IRAB整合子基因携带的多种耐药基因与其多重耐药性相关. 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 耐药 亚胺培南 p内酰胺酶类 DNA序列分析 整合子
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鲍曼不动杆菌TEM基因及氨基糖苷类修饰酶基因初步研究 被引量：64
7
作者 周月清 陆开来 糜祖煌 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期200-202,共3页
目的了解鲍曼不动杆菌TEM基因及氨基糖苷类修饰酶基因存在情况,为耐药性监测提供初步依据。方法在2002年8月—2004年2月间自临床分离20株鲍曼不动杆菌,采用微量稀释法测定其对13种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应及序列分析的方法分... 目的了解鲍曼不动杆菌TEM基因及氨基糖苷类修饰酶基因存在情况,为耐药性监测提供初步依据。方法在2002年8月—2004年2月间自临床分离20株鲍曼不动杆菌,采用微量稀释法测定其对13种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析TEM基因及氨基糖苷类修饰酶基因类型。结果20株鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美洛培南全部敏感,哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟及头孢他啶的耐药率分别为450%、650%和700%,氨基糖苷类抗生素的耐药率为750%,对其他抗菌药物的耐药率均在650%以上。TEM、aac(3)Ⅰ、aac(3)Ⅱ、aac(6”)Ⅰ和ant(3”)Ⅰ基因的阳性率分别为450%、550%、150%、350%和600%,而SHV、AmpCDHA、AmpCMIR基因均阴性。结论本院临床分离的鲍曼不动杆菌多重耐药严重,TEM型基因及氨基糖苷类修饰酶基因携带率较高。由于引物设计不完全,常见的OXA、VEB、PER基因未进入试验,因此第三、四代头孢菌素耐药原因需进一步研究。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 氨基糖苷类 修饰酶 耐药率 酶基因 临床分离 抗菌药物 引物设计 初步研究 序列分析
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革兰阴性杆菌碳青霉烯酶产生与细菌耐药性关系的研究 被引量：66
8
作者 沈继录 朱德妹 +2 位作者 吴卫红 徐晓刚 王明贵 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期408-414,共7页
目的 研究耐亚胺培南革兰阴性杆菌碳青霉烯酶产生及流行情况。方法采用琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对199株革兰阴性杆菌的MIC，采用乙二胺四乙酸（EDTA）协同实验筛选金属β内酰胺酶表型。PCR扩增耐药菌株碳青霉烯酶基因，并测序... 目的 研究耐亚胺培南革兰阴性杆菌碳青霉烯酶产生及流行情况。方法采用琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对199株革兰阴性杆菌的MIC，采用乙二胺四乙酸（EDTA）协同实验筛选金属β内酰胺酶表型。PCR扩增耐药菌株碳青霉烯酶基因，并测序分析。脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析产酶菌株同源性。结果 141株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南药敏试验结果显示具有3种模式，以亚胺培南和美罗培南同时耐药为主94株（66．7％）、亚胺培南耐药和美罗培南敏感46株（32．6％）、亚胺培南敏感和美罗培南耐药仅1株（0．7％）。但其他耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌、洛菲不动杆菌、弗劳地柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯菌和黏质沙雷菌均对亚胺培南和美罗培南同时耐药。EDTA协同试验结果显示，仅4株耐亚胺培南铜绿假单胞菌为EDTA协同试验阳性（2．8％），其余菌株均为EDTA协同试验阴性。PCR扩增碳青霉烯酶基因结果显示，4株EDTA协同试验阳性的铜绿假单胞菌产VIM-2型金属酶；34株鲍曼不动杆菌菌株中30株（88．2％）产OXA型碳青霉烯酶，其中OXA23型27株（79．4％），OXA24型13株（38．2％），OXA66型23株（67．6％）。并且22株（64．7％）细菌同时产生一种以上的OXA型碳青霉烯酶。7株洛菲不动杆菌全部产OXA-23型碳青霉烯酶；11株弗劳地柠檬酸杆菌、5株肺炎克雷伯菌和1株黏质沙雷菌均产KPC-2型碳青霉烯酶，其中6株弗劳地柠檬酸杆菌同时具有IMP-8新亚型金属酶。PFGE结果显示，34株鲍曼不动杆菌中PFGE谱型共有15种，其中有14株属于A型，7株属于B型；7株洛菲不动杆菌不属于同一克隆；4株产VIM-2型金属酶铜绿假单胞菌不属于同一PFGE谱型；11株柠檬酸杆菌属于同一PFGE谱型；5株肺炎克雷伯菌属于同一PFGE谱型。结论耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌对12种抗生素的耐药� 展开更多
关键词 革兰阴性菌 细胞蛋白质类 Β内酰胺酶类 抗药性 细菌
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重症监护病房产VIM-2型金属酶绿脓假单胞菌的研究 被引量：36
9
作者 杨青 魏泽庆 +3 位作者 俞云松 钟步云 陈亚岗 李兰娟 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期678-682,共5页
目的　分析重症监护病房产金属 β内酰胺酶绿脓假单胞菌的同源性、金属酶基因型及转移机制。方法　用 2 巯基丙酸协同试验筛选重症监护病房分离的对亚胺培南耐药的绿脓假单胞菌中的产金属酶株 ,聚合酶链反应 (PCR)、克隆测序确定耐药基... 目的　分析重症监护病房产金属 β内酰胺酶绿脓假单胞菌的同源性、金属酶基因型及转移机制。方法　用 2 巯基丙酸协同试验筛选重症监护病房分离的对亚胺培南耐药的绿脓假单胞菌中的产金属酶株 ,聚合酶链反应 (PCR)、克隆测序确定耐药基因 ,整合子PCR扩增 ,脉冲场凝胶电脉分析同源性。结果　 2 6株绿脓假单胞菌 2 巯基丙酸协同试验阳性 ,酶粗提液能水解亚胺培南 ,活性能被EDTA抑制。VIM型金属酶引物PCR扩增阳性 ,经克隆测序证实为VIM 2型金属酶。整合子可变区序列分析表明 ,blaVIM 2位于Ⅰ类整合子上 ,该基因上游含有 1个aacA4基因 ,下游为aadB基因。脉冲场凝胶电脉结果证实产酶株均来自同一克隆。结论　医院重症监护病房有产VIM 2型金属酶绿脓假单胞菌的流行 。 展开更多
关键词 重症监护病房 绿脓假单胞菌 整合子 2-巯基丙酸 亚胺培南 阳性 耐药基因 金属酶 克隆测序 PCR扩增
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广州地区产CTX—M型超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的研究 被引量：41
10
作者 卓超 苏丹虹 +9 位作者 李红玉 王露霞 廖康 王媚 植志全 郭仲辉 魏衍超 耿穗娜 金光耀 钟南山 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1114-1119,共6页
目的研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征。方法收集2007-2008年广州地区9家医院临床分离产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌，通过PCR检测ESBLs... 目的研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征。方法收集2007-2008年广州地区9家医院临床分离产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌，通过PCR检测ESBLs分子表型；通过接合试验、质粒图谱、PCR分析CTX-M-15型ESBLs的基因环境，肠杆菌科基因间重复序列引物PCR（ERIC—PCR）分析产CTX-M-15型ESBLs菌株的分子同源性。结果67．3％（243／361）的ESBLs产生株为CTX-M表型，其中CTX-M-1群和CTX．M-9群各占46．9％（114／243）和53．1％（129／243），未发现其他CTX-M亚群。CTX-M-14和CTXM-15是最常见的ESBLs基因型，其中CTX-M-14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别35．4％（64／181）和28．3％（51／180），CTX-M-15在这两种菌的检出率分别为21．5％（39／181）和26．1％（47／180），此外还检出对头孢他啶有水解活性的CTX-M-55、CTX-M-19和CTX．M-27。采用ERIC—PCR分析CTX-M-15产生株的同源性，39株大肠埃希菌被分为28个基因型，47株肺炎克雷伯菌被分为30个基因型。67．6％（25／37）和32．4％（12／37）blaCTX-M-15分别位于65000bp和90000bp的可接合质粒上，65000bp质粒除blaCTX-M-15阳性外，未检到6laTEM-1、qnrB、blaDHA-1、blaOXA-1，aac（6′）-Ib-cr等耐药基因。1株接合菌90000bp质粒还存在b／aoxA-1和blaTEM-1耐药基因，其余7个90000bp质粒所携耐药基因同65000bp质粒。所有blaCTX-M-15都位于ISEep1-like插入序列下游，ISEepl-like末端与blaCTX-M-15间距均为48bp。结论广州地区ESBLs主要分子表型为CTX-M型主要流行为CTX-M-14型。以CTX-M-15为代表能水解头孢他啶的CTX-M型ESBLs在本地区检出增多值得关注。 展开更多
关键词 大肠杆菌 克雷伯菌 肺炎 Β内酰胺酶类 大肠杆菌蛋白质类 表型 微生物敏感性试验 聚合酶链反应
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肠杆菌科细菌中质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶的检测 被引量：39
11
作者 张嵘 蔡加昌 +1 位作者 周宏伟 陈功祥 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1134-1141,共8页
目的研究重症监护病房（ICU）出现的碳青霉烯耐药的黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌等肠杆菌科细菌的分子流行病学及耐药机制。方法2006年4月-2007年2月，从我院2个ICU病房分离到对碳青霉烯耐药或敏感性降低的21株黏质沙雷菌、10... 目的研究重症监护病房（ICU）出现的碳青霉烯耐药的黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌等肠杆菌科细菌的分子流行病学及耐药机制。方法2006年4月-2007年2月，从我院2个ICU病房分离到对碳青霉烯耐药或敏感性降低的21株黏质沙雷菌、10株肺炎克雷伯菌和1株大肠埃希菌。用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和肠杆菌基因间重复性一致序列-PCR（ERIC-PCR）分析这些菌株的分子流行病学。用接合试验、质粒消除试验、质粒图谱分析、等电聚焦电泳（IEF）、特异性PCR扩增和序列分析以及外膜蛋白分析等技术研究细菌对碳青霉烯耐药的分子机制。结果21株黏质沙雷菌为同一克隆株；10株肺炎克雷伯菌亲缘关系相近。亚胺培南和美罗培南对黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的MIC为2-8μg／ml，肺炎克雷伯菌K10为128和256μg／ml。所有菌株接合试验均获得成功，亚胺培南和美罗培南对接合子的MIC由原来的≤0．125μg／ml上升到1-2μg／ml。IEF、PCR扩增和序列分析证实黏质沙雷菌产KPC-2型碳青霉烯酶[等电点（pI）为6．7]和pI为6．5的β内酰胺酶；肺炎克雷伯菌产TEM-1（p15．4）、KPC-2、CTX-M-14（p17．9）和p1为7．3的β内酰胺酶；大肠埃希菌产KPC-2、CTX-M-15（pI9．0）和pI为7．3的β内酰胺酶；所有接合子均只产KPC-2一种β内酰胺酶。所有接合子质粒DNA的EcoRⅠ、HindⅢ和BcuⅠ限制性酶切图谱完全相同。外膜蛋白的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电泳和基因序列分析发现肺炎克雷伯菌K10由于OmpK36基因中存在插入序列ISEcp1而导致OmpK36膜孔蛋白的缺失。结论我院ICU病房出现大量碳青霉烯耐药的黏质沙雷菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌；KPC-2是引起这些细菌对碳青霉烯耐药或敏感性降低的主要原因；KPC-2合并膜孔蛋白缺失可导致肺炎克雷伯菌对碳青霉烯高水平耐药；同一种编码blaKPC-2的质 展开更多
关键词 肠杆菌科 质粒 细菌蛋白质类 Β内酰胺酶类 卡巴配能类 抗药性 细菌
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绿脓假单胞菌β内酰胺类耐药基因研究 被引量：36
12
作者 李智山 邓三季 +1 位作者 杨燕 赵建忠 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1030-1033,共4页
目的调查湖北襄樊地区绿脓假单胞菌多重耐药菌株中β内酰胺酶编码基因及oprD2基因存在状况。方法采用PCR方法检测分离自本地区的35株绿脓假单胞菌耐药菌株各种β内酰胺酶编码基因TEM、SHV、OXA、PER、GES、IMP、VIM、质粒型AmpC酶DHA、... 目的调查湖北襄樊地区绿脓假单胞菌多重耐药菌株中β内酰胺酶编码基因及oprD2基因存在状况。方法采用PCR方法检测分离自本地区的35株绿脓假单胞菌耐药菌株各种β内酰胺酶编码基因TEM、SHV、OXA、PER、GES、IMP、VIM、质粒型AmpC酶DHA、MIR及OprD2。结果35株β内酰胺类耐药基因TEM、OXA、质粒型AmpC酶DHA的阳性率分别为51·4%、17·1%、2·9%,OprD2基因缺失率100%,而SHV、PER、GES、IMP、VIM、MIR基因检测均阴性。结论研究表明,携带TEM、OXA、质粒型AmpC酶DHA以及OprD2基因缺失是导致本组绿脓假单胞菌多重耐药菌株对β内酰胺酶类抗生素耐药的重要机制。 展开更多
关键词 假单胞菌 铜绿 Β内酰胺酶类 抗生素类 基因
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碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌基因型检测和同源性分析 被引量：35
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作者 杨丽君 陈坚 +5 位作者 杨燕 林迪 成军 陈东科 曾贤铭 孙长贵 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期318-323,共6页
目的探讨临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌基因分型和菌株同源性。方法收集2011年1月至2012年6月临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌175株，采用MIC法检测菌株对药物的敏感性，纸片法表型确证试验检测超广谱β内酰胺酶（ESBL）... 目的探讨临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌基因分型和菌株同源性。方法收集2011年1月至2012年6月临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌175株，采用MIC法检测菌株对药物的敏感性，纸片法表型确证试验检测超广谱β内酰胺酶（ESBL），改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型，PCR、DNA测序以及BLAST比对等方法确定菌株耐药酶基因型，重复序列聚合酶链反应（REP—PCR）分析菌株同源性。结果175株肺炎克雷伯菌中Hodge试验阳性140株，阳性率80．0％（140／175）。102株携带blaKPc-2基因，占58．3％（102／175），6株携带blalMP-4基因，占3．4％（6／175）。11．4％（20／175）菌株携带blaDHA-1基因。28．6％（50／175）菌株ESBL表型试验阳性。有89．1％（156／175）菌株携带bla…基因，63．4％（111／175）菌株携带blaTEM基因，50．3％（88／175）菌株携带blaCEx-M基因。66．9％（117／175）菌株同时具有3种以上耐药基因。REP—PCR指纹图谱扩增条带数3—8条，产物最长1600bp，最短200bp，分为12个谱型，其中以G型为主，有71株（40．6％），其次为F型有35株（20．0％）。结论碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌以blaKPC-2基因型为主，其次为blaIMP-4基因型；ESBL以blaCRX-14基因型为主。在某些医院存在克隆株流行，北京A医院与杭州地区流行株不同，北京A医院以G型为主，杭州地区以F型为主。f中华检验医学杂志，2013，36：318—323） 展开更多
关键词 克雷伯菌 肺炎 卡巴配能类 抗药性 细菌 基因型 B内酰胺酶类
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2000～2002年北京、上海及广州三地儿童携带流感嗜血杆菌抗生素敏感性监测 被引量：26
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作者 沈叙庄 陆权 +6 位作者 邓力 俞桑洁 张泓 邓秋莲 姜敏 胡翼云 杨永弘 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第16期1335-1339,共5页
目的了解当前我国儿童携带流感嗜血杆菌对常用抗生素的敏感性情况,以便有效指导临床合理用药和预防。方法采用E-test最小抑菌浓度(MIC)方法及KB纸片扩散法对2000-2002年北京、上海、广州3所儿童医院上呼吸道感染儿童携带流感嗜血杆菌进... 目的了解当前我国儿童携带流感嗜血杆菌对常用抗生素的敏感性情况,以便有效指导临床合理用药和预防。方法采用E-test最小抑菌浓度(MIC)方法及KB纸片扩散法对2000-2002年北京、上海、广州3所儿童医院上呼吸道感染儿童携带流感嗜血杆菌进行10种常用抗生素敏感性检测。结果 氨苄青霉素对898株流感嗜血杆菌的MIC50和MIC90分别为0.25μg/ml和4μg/ml,敏感性88.0％,10.6％菌株对氨苄青霉素耐药,所有氨苄青霉素中度敏感株和耐药株均产β-内酰胺酶,分离株产β-内酰胺酶率为12％;分离株对阿莫西林/克拉维酸、头孢曲松、头孢呋辛敏感性均为100％;头孢克罗对分离株MIC50和MIC90分别为1.5μg/ml和3μg/ml,敏感性略低(96.1％),耐药率1.8％。流感嗜血杆菌对阿奇霉素、环丙沙星敏感率分别为100％和99％,对氯霉素、四环素、磺胺甲(?)唑/甲氧苄氨嘧啶(SMZ/TMP)耐药率分别为11％、18％、54.4％。北京和上海分离株对四环素敏感性分别为57％和61％,明显低于广州分离株(81％);广州和上海分离株对SMZ/TMP敏感性分别为47％和54％,明显高于北京株(35％);2000-2002年的3年中,分离株对氨苄青霉素敏感性呈逐年下降趋势,对氨苄青霉素总体耐药率由2000年的7.7％增加至2002年的14.5％。本研究中,34.5％分离株对8种抗生素均敏感,多重耐? 展开更多
关键词 2000-2002年 北京 上海 广州市 儿童 流感嗜血杆菌 抗生素 敏感性 Β内酰胺酶类
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产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测 被引量：28
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作者 孔庆莲 于秀娟 姚苹 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 2000年第6期360-363,共4页
目的　选择适用于检测产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)临床大肠埃希菌、肺炎克雷伯耐药菌株的最佳方案。方法　临床分离的 110株大肠埃希菌和 84株肺炎克雷伯菌经初筛试验 ,用浓度梯度法 (Etest法 )、单纸片加抑制剂克拉维酸和单纸片加抑... 目的　选择适用于检测产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)临床大肠埃希菌、肺炎克雷伯耐药菌株的最佳方案。方法　临床分离的 110株大肠埃希菌和 84株肺炎克雷伯菌经初筛试验 ,用浓度梯度法 (Etest法 )、单纸片加抑制剂克拉维酸和单纸片加抑制剂舒巴坦扩散法、阿莫西林及氨苄西林双纸片协同试验 ,比较 5种方法的检出率及其差异。结果　Etest法对产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出存在明显的差异 (P <0 .0 1) ,肺炎克雷伯菌的检出率 (4 / 2 0 )明显低于大肠埃希菌 (16 / 2 6 ) ;单纸片扩散法加克拉维酸对两种菌的检出均较高 (16 / 2 6、12 / 2 0 )。检测产ESBLs大肠埃希菌时 ,除氨苄西林双纸片协同法 (8/ 2 6 )检出率低以外 ,其他 4种方法的检出率无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,5种方法有较好的一致性。检测产ESBLs肺炎克雷伯菌时 ,单纸片扩散法加克拉维酸或舒巴坦 (12 / 2 0 )与Etest法、氨苄西林双纸片协同法的检出 (4 / 2 0 )存在差异 (P <0 .0 5 ) ,前两种方法检出率较高。 展开更多
关键词 Β内酰胺酶 大肠杆菌 肺炎克雷伯氏菌 检测
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上海出现PER-1型超广谱β内酰胺酶 被引量：21
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作者 蒋晓飞 乐军 +5 位作者 朱月秋 孙景勇 陈轶兰 洪秀华 王洪海 倪语星 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期229-232,共4页
目的　分析多重耐药鲍曼不动杆菌 14 8号试验菌株耐 β内酰胺抗生素的原因及耐药性的转移能力。方法　用等电聚焦电泳试验和三相水解试验分析 14 8号试验菌株所产 β内酰胺酶 ,并进行初步分类 ,再用聚合酶链反应 (PCR)扩增和PCR产物测... 目的　分析多重耐药鲍曼不动杆菌 14 8号试验菌株耐 β内酰胺抗生素的原因及耐药性的转移能力。方法　用等电聚焦电泳试验和三相水解试验分析 14 8号试验菌株所产 β内酰胺酶 ,并进行初步分类 ,再用聚合酶链反应 (PCR)扩增和PCR产物测序方法确认 β内酰胺酶基因。 结果14 8号试验菌株产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ,经分子生物学方法证实有blaPER 1基因 ,同时还有aacA4基因。结论　 14 8号试验菌株耐 β内酰胺抗生素的原因 ,可能是产生了可转移的PER 1型ESBLs,blaPER 1基因位于质粒上。 展开更多
关键词 不动杆菌 鲍曼不动杆菌 148号试验菌株 β内酰胺抗生素 多重耐药 耐药性
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广州地区3500株革兰阴性细菌的分布特征及耐药性特点 被引量：23
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作者 肖庆忠 苏丹虹 +1 位作者 江洁华 钟南山 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期132-138,共7页
目的了解广州地区医院感染常见革兰阴性细菌分布特征和耐药特点.方法2001年7月～2003年8月,用Kirby-Bauer法检测了从广州地区13家医院分离获得的3 500株革兰阴性细菌对临床常用15～21种抗生素的药敏结果,并按美国临床实验标准委员会200... 目的了解广州地区医院感染常见革兰阴性细菌分布特征和耐药特点.方法2001年7月～2003年8月,用Kirby-Bauer法检测了从广州地区13家医院分离获得的3 500株革兰阴性细菌对临床常用15～21种抗生素的药敏结果,并按美国临床实验标准委员会2000年判断标准进行判断,用WHONET-5软件分析数据.结果分离出的3 500株革兰阴性菌中前3位细菌依次是大肠埃希菌(Escherichia coli,ECO)1 244株(占35.5%)、肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae,Kpn)900株(占25.7%)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pae)547株(占15.6%).广州地区临床分离革兰阴性菌中产超广谱β内酰胺酶(extended-spectrumbeta-lactamases,ESBLs)菌株的总检出率为31.0%(1 084/3 500),在各种常见菌属中的检出率分别为:大肠埃希菌为38.7%(482/1 244)、肺炎克雷伯菌为37.9%(341/900)、铜绿假单胞菌为5.3%(29/547)、阴沟肠杆菌为55.2%(117/212)、不动杆菌属为8.2%(17/208)、其他肠杆菌属为27.7%(53/191)、嗜麦芽窄食单胞菌为33.3%(37/117)、变形杆菌属为9 2%(8/87).从呼吸道标本中分离获得革兰阴性细菌最多,为1 463株(占41.8%);其次为泌尿道标本,为943株(占26.9%).耐药性分析显示:革兰阴性杆菌对临床常用抗生素的总体耐药率最低为亚胺培南(8.7%),其次为头孢哌酮/舒巴坦(13.3%),而最高为氨苄西林(90.5%),其次为奈啶酸(69 3%).亚胺培南对广州地区临床分离的大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌属、其他肠杆菌属和变形杆菌属的耐药率最低,分别为1.1%、0.5%、0.6%、3.2%、0.8%和0%,而头孢哌酮/舒巴坦对广州地区临床分离的铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌的耐药率最低,分别为10.8%和15.9%,大部分细菌呈多重耐药.产ESBLs菌株对15～21种临床常用抗菌药物的耐药率均显著高于不产ESBLs菌株(P＜0.05).结论细菌耐药性仍是目前广州地区临床用药最为严重的问题,尤其是产ESBLs菌株有上升� 展开更多
关键词 革兰氏阴性菌 抗药性 微生物 交叉感染 细菌分布 Β内酰胺酶类
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产DHA-1型AmpC酶和TEM-1型β-内酰胺酶及携带Ⅰ类整合子的鲍氏不动杆菌 被引量：23
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作者 侯天文 尹晓琳 +5 位作者 马翠卿 徐树彬 陈晶 陈兴 李玮 白云 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期853-857,共5页
目的分析鲍氏不动杆菌临床株(编号0524)的β-内酰胺酶基因(BLA)、质粒介导耐氟喹诺酮基因(qnr)、氨基糖苷类修饰酶基因(AMEs)、消毒剂与磺胺类耐药基因(qacE△1-sul1)和Ⅰ类整合子酶基因(intⅠ1)存在情况。方法对0524株应用K-B法检测其... 目的分析鲍氏不动杆菌临床株(编号0524)的β-内酰胺酶基因(BLA)、质粒介导耐氟喹诺酮基因(qnr)、氨基糖苷类修饰酶基因(AMEs)、消毒剂与磺胺类耐药基因(qacE△1-sul1)和Ⅰ类整合子酶基因(intⅠ1)存在情况。方法对0524株应用K-B法检测其耐药表型,应用三维试验检测其产生的β-内酰胺酶表型,应用聚合酶链反应及序列分析方法分析其BLAs、AMEs、qnr、qacE△1-sul1和intⅠ1基因类型。结果0524株鲍氏不动杆菌对第三代头孢菌素、头孢西丁、环丙沙星、阿米卡星耐药,对头孢吡肟、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦敏感,产生AmpC酶,携有blaDHA-1基因,同时blaTEM-1型基因,acc(3)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅰ、ant(3″)-;ⅠqacE△1-sull和intⅠ1均阳性,其他受试基因均阴性。结论0524号菌株产生DHA-1型AmpC酶和TEM-1型的广谱β-内酰胺酶,且携带Ⅰ类整合子、消毒剂与磺胺类耐药基因和3种氨基糖苷修饰酶基因,其耐药机制复杂。 展开更多
关键词 鲍氏不动杆菌 Β内酰胺酶 氨基糖苷类 喹诺酮类 消毒剂 整合子 基因
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鲍曼不动杆菌耐药性和金属β内酰胺酶的检测 被引量：23
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作者 宗志勇 雷秉钧 +2 位作者 吕晓菊 高燕渝 俞汝佳 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期999-1001,共3页
目的了解本院鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性以及对碳青霉烯类抗生素和头孢他啶耐药菌株是否产金属β内酰胺酶。方法对2002年4月—2003年1月本院临床分离的101株鲍曼不动杆菌采用NCCLS推荐的琼脂双倍稀释法测定了对15种抗菌药物的最低... 目的了解本院鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性以及对碳青霉烯类抗生素和头孢他啶耐药菌株是否产金属β内酰胺酶。方法对2002年4月—2003年1月本院临床分离的101株鲍曼不动杆菌采用NCCLS推荐的琼脂双倍稀释法测定了对15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MICs),将对亚胺培南耐药或对头孢他啶高度耐药的菌株用金属螯合剂-抗生素稀释法检测是否产金属β内酰胺酶。结果101株鲍曼不动杆菌最常分离自痰,分布于全院16个临床科室,但有1/3以上来自于ICU病房。这101株对抗菌药物的耐药性突出,仅对亚胺培南、美罗培南和头孢吡肟保持较高的敏感率,分别为90·1%、88·1%和81·2%;而对包括头孢他啶的其他11种抗菌药物的敏感率均低于50%;而且多重耐药菌株常见。共有19株鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药和(或)对头孢他啶高度耐药。金属螯合剂-抗生素稀释法检测出9株产金属β内酰胺酶。结论本院鲍曼不动杆菌分离率高、分布广,对抗菌药物耐药严重;仅碳青霉烯和四代头孢菌素保持较高的敏感性;存在对亚胺培南耐药和(或)对头孢他啶高度耐药的鲍曼不动杆菌,其中部分耐药株产金属β内酰胺酶。 展开更多
关键词 不动杆菌属 抗药性 多药 Β内酰胺酶类 头孢他啶
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产超广谱β内酰胺酶49株细菌耐药基因调查 被引量：22
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作者 孙自镛 程黎明 +3 位作者 朱旭慧 李丽 张蓓 俞云松 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期793-796,共4页
目的了解49株产超广谱 B 内酰胺酶(ESBLs)细菌的耐药基因。方法采用纸片扩散法检测产 ESBLs 细菌,通过基因扩增、序列分析、脉冲场凝胶电泳技术研究 ESBLs 基因型以及产ESBLs 细菌同源性。结果产 ESBLs 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸... 目的了解49株产超广谱 B 内酰胺酶(ESBLs)细菌的耐药基因。方法采用纸片扩散法检测产 ESBLs 细菌,通过基因扩增、序列分析、脉冲场凝胶电泳技术研究 ESBLs 基因型以及产ESBLs 细菌同源性。结果产 ESBLs 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌流行率自2000年的20%,增长至2003年的40%。49株产 ESBLs 细菌中,以 CTX-M-14(n=33)亚型最常见,其他亚型包括 CTX-M-3、CTX-M-9、CTX-M-12、CTX-M-15、CTX-M-24、SHV-5a,1株细菌同时产 CTX-M-3、CTX-M-14两种 CTX-M 型 ESBLs;4株表型确证试验阳性细菌未能分型。除2株大肠埃希菌、2株肺炎克雷伯菌有亲缘性外,其他菌株间无同源性。结论产 ESBLs 细菌分离率逐年增高,以 CTX-M 型酶为主。PFGE 试验证明非流行所致。 展开更多
关键词 Β内酰胺酶类 基因型 流行病学 分子
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