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白英水提物对胃癌SGC-7901细胞凋亡与基因bcl-xl/bid表达的影响 被引量:13
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作者 余乐涵 许宝华 +3 位作者 吴剑 李华 涂硕 万福生 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1744-1748,共5页
目的:观察白英水提物对胃癌SGC-7901细胞凋亡及基因bcl-xl、bid表达的影响。方法:常规法制备白英水提物,实验分正常对照组、白英处理组。白英处理组加入白英水提物终浓度分别为12.5mg/mL、25mg/mL和50mg/mL。流式细胞仪检测细胞凋亡,半... 目的:观察白英水提物对胃癌SGC-7901细胞凋亡及基因bcl-xl、bid表达的影响。方法:常规法制备白英水提物,实验分正常对照组、白英处理组。白英处理组加入白英水提物终浓度分别为12.5mg/mL、25mg/mL和50mg/mL。流式细胞仪检测细胞凋亡,半定量RT-PCR和免疫化学分析细胞中bcl-xl、bid基因表达。结果:与正常对照组比较,白英处理组SGC-7901细胞增殖有显著性下降,细胞凋亡显著性增多(P<0.05);基因bcl-xl mRNA和Bcl-xl蛋白表达降低、bidmR-NA和Bid蛋白表达升高(P<0.05),并随白英浓度增加而加强。结论:白英水提物能诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡和抑制增殖,且有一定的量效关系,其作用机制可能与调控bcl-xl、bid基因表达有关。 展开更多
关键词 白英 SGC-7901细胞 凋亡 bclxl/bid 基因表达
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Bcl-xl反义寡核苷酸对裸鼠人鼻咽癌移植瘤抑制作用的研究 被引量:9
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作者 闵玲 周克元 +1 位作者 梁统 张月飞 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期14-17,共4页
目的 探讨bcl xl反义寡核苷酸 (ASODN)对裸鼠人鼻咽癌移植瘤生长和基因表达的抑制作用。方法 建立裸鼠人鼻咽癌模型 ,接种肿瘤细胞后 2 4h之内将bcl xlASODN、序列对照寡核苷酸 (ODN)皮下注射进行治疗 ,观察肿瘤大小变化和组织形态学... 目的 探讨bcl xl反义寡核苷酸 (ASODN)对裸鼠人鼻咽癌移植瘤生长和基因表达的抑制作用。方法 建立裸鼠人鼻咽癌模型 ,接种肿瘤细胞后 2 4h之内将bcl xlASODN、序列对照寡核苷酸 (ODN)皮下注射进行治疗 ,观察肿瘤大小变化和组织形态学改变 ,并检测药物治疗后肿瘤细胞中bcl xlmRNA和蛋白表达情况。结果 Bcl xlASODN治疗组裸鼠鼻咽癌的生长受到明显抑制 ,抑瘤率为 41.7% ,其对应的bcl xlmRNA和蛋白水平明显降低 ,与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,而序列对照ODN治疗组抑瘤率仅为 19.0 % ,差异无显著性 ,对基因的表达亦无明显影响。结论 Bcl xlASODN对裸鼠鼻咽癌移植瘤的生长具有一定的抑制作用 ,为鼻咽癌的治疗提供新的方法。 展开更多
关键词 bclxl 反义寡核苷酸 鼻咽癌 移植瘤 抑制作用 基因治疗
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肝动脉栓塞化疗术对肝细胞癌bcl-2、fas和bcl-xl表达的影响 被引量:7
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作者 宁厚法 王滨 +1 位作者 曹贵文 孙业全 《临床放射学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期324-327,共4页
目的 探讨经导管肝动脉栓塞化疗术 (TACE)对肝细胞癌 (HCC)细胞凋亡相关蛋白bcl 2、fas和bcl xl表达的影响 ,评价TACE对HCC的疗效。资料与方法 经病理证实的HCC 6 3例 ,包括单纯手术组 4 2例 ,TACE组 2 1例(为TACE治疗 2次后有手术机... 目的 探讨经导管肝动脉栓塞化疗术 (TACE)对肝细胞癌 (HCC)细胞凋亡相关蛋白bcl 2、fas和bcl xl表达的影响 ,评价TACE对HCC的疗效。资料与方法 经病理证实的HCC 6 3例 ,包括单纯手术组 4 2例 ,TACE组 2 1例(为TACE治疗 2次后有手术机会而行切除者 ) ;采用免疫组织化学SP法检测标本bcl 2、fas和bcl xl的表达情况 ,将两组结果进行对照分析。结果 TACE组fas表达阳性率为 4 7.6 2 % (10 /2 1) ,单纯手术组fas表达阳性率为 2 1.4 3%(9/4 2 ) ,二者之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TACE组明显高于单纯手术组 ;TACE组bcl xl表达阳性率为 2 3.81%(5 /2 1) ,单纯手术组阳性率为 5 4 .76 % (2 3/4 2 ) ,二者之间亦有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TACE组明显低于单纯手术组 ;bcl 2的表达阳性率在单纯手术组和TACE组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 TACE治疗可以促进肝癌细胞fas表达增高 ,使bcl xl表达降低 ,从而在总体上增加肝癌细胞凋亡率 ,促使肿瘤缩小。关于TACE治疗对bcl 展开更多
关键词 肝动脉栓塞化疗术 肝细胞癌 bcl-2 FAS bcl-xl 表达
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60%氧暴露对新生大鼠肺组织细胞凋亡相关基因表达的影响 被引量:9
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作者 王安茹 王伟 +2 位作者 刘欣 宁琴 罗小平 《中华围产医学杂志》 CAS 2006年第5期332-336,共5页
目的探讨中浓度高氧(60%O2)暴露新生大鼠肺损伤模型中细胞凋亡相关基因Bax和Bcl-XL的效应。方法新生足月大鼠随机分为实验组和对照组,每组8只,制备中浓度氧致新生鼠BPD模型,应用HE染色、免疫组织化学和RT-PCR技术,观察生后1、4、7、11和... 目的探讨中浓度高氧(60%O2)暴露新生大鼠肺损伤模型中细胞凋亡相关基因Bax和Bcl-XL的效应。方法新生足月大鼠随机分为实验组和对照组,每组8只,制备中浓度氧致新生鼠BPD模型,应用HE染色、免疫组织化学和RT-PCR技术,观察生后1、4、7、11和14d肺组织病理改变、Bax及Bcl-XL基因的蛋白和mRNA表达水平。结果高氧组自4d开始出现肺泡发育障碍,至14d单位面积肺泡数明显减少,平均肺泡面积显著增大。高氧组与空气组比较,Bax基因表达1d开始增加,其mRNA水平于11d开始降低至1·0216±0·2597,蛋白表达于14d降低至0·3950±0·0138;Bcl-XL基因mRNA水平1d至14d表达增加,其蛋白表达1d降低至0·3690±0·0399,随后增加,差异有统计学意义。随氧暴露时间延长,高氧组Bax的mRNA及蛋白和Bcl-XL的mRNA表达水平均呈降低趋势,Bcl-XL蛋白表达呈上升趋势。空气组的Bax mRNA水平从11d开始增加,蛋白水平从14d开始增加。空气组Bcl-XLmRNA和蛋白水平1d表达最丰。结论中浓度高氧暴露诱导新生鼠肺细胞凋亡的调节可能和Bax/Bcl-XL基因表达异常有关。在高氧暴露早期,Bax表达增加,促进肺细胞凋亡。肺上皮细胞和血管内皮细胞的凋亡损伤了正常的肺发育。随着氧暴露时间延长,Bax的表达降低,Bcl-XL表达增加。这种变化促进肺修复,新生鼠对高氧形成耐受。本文亦初步揭示了凋亡和氧暴露的时相关系,即高氧暴露早期时肺细胞凋亡效应显著,后期减弱。 展开更多
关键词 高氧 支气管肺发育不良 细胞凋亡 基因 Bax 基因 bcl-xl
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大鼠脑创伤后bcl-x_L和bax mRNA的表达改变 被引量:8
5
作者 骆纯 朱诚 +4 位作者 江基尧 卢亦成 张光霁 袁国梁 蔡如珏 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期209-211,共3页
目的 探讨脑创伤后bcl-xL 和bax在mRNA水平的变化规律。 方法 应用RT -PCR法分别检测大鼠液压脑损伤后不同时程bcl-xL 和baxmRNA表达情况 ;采用凋亡原位末端标记、电镜超微结构、DNA凝胶电脉 ,观察脑创伤后细胞凋亡的形态和生化特征... 目的 探讨脑创伤后bcl-xL 和bax在mRNA水平的变化规律。 方法 应用RT -PCR法分别检测大鼠液压脑损伤后不同时程bcl-xL 和baxmRNA表达情况 ;采用凋亡原位末端标记、电镜超微结构、DNA凝胶电脉 ,观察脑创伤后细胞凋亡的形态和生化特征。 结果 在打击组所有标本中均可测得bcl-xL mRNA和baxmRNA的表达。bcl-xL mRNA的改变出现在伤后 6h ,早于细胞凋亡的发生 ,此时致伤侧半球bcl -xL mRNA扩增产物明显少于对侧 ,为对侧的 (6 7.42±7.5 4) % (P <0 .0 1) ;伤后 3d到达低谷 ,为对侧的 (39.97± 3.6 1) % ,以后逐渐恢复。伤后 6h、1dbaxmRNA无显著变化 ,致伤侧半球baxmRNA在伤后 3d升高为对侧半球的 (2 0 3.95± 17.5 3) %(P <0 .0 1) ,伤后 3~ 7d逐渐下降。 结论 细胞凋亡及其调节基因的表达间具有一致性 :脑创伤后早期 ,bcl-xL mRNA下调危及细胞生存 ; 展开更多
关键词 脑损伤 基因表达 细胞凋亡 bcl-xl BAX mRNA
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核因子κB p65及靶基因在CagAHp胃癌及癌前病变中的表达研究 被引量:7
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作者 杨桂芳 邓长生 +4 位作者 熊永炎 罗峻 汪必成 田素芳 徐柯 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期551-553,共3页
目的 检测核因子κappaBp6 5 (NFκBp6 5 )及靶基因在幽门螺杆菌 (Hp)感染的肠上皮化生 (IM)、不典型增生 (Dys)、胃癌 (GC)组织中的表达 ,探讨表达细胞毒素相关抗原A的幽门螺杆菌(CagA+ Hp)致胃癌的分子生物学机制。方法 采用ELISA... 目的 检测核因子κappaBp6 5 (NFκBp6 5 )及靶基因在幽门螺杆菌 (Hp)感染的肠上皮化生 (IM)、不典型增生 (Dys)、胃癌 (GC)组织中的表达 ,探讨表达细胞毒素相关抗原A的幽门螺杆菌(CagA+ Hp)致胃癌的分子生物学机制。方法 采用ELISA方法检测患者血液中的CagA抗体 ;以快速尿素酶试验和Warthinstarry法检测组织中的Hp ;以免疫组织化学方法检测 12 2例肠上皮化生、10 4例不典型增生及 6 3例胃癌组织中的NFκBp6 5及其靶基因c myc、CyclinD1和bcl xl的表达。结果 IMⅠ和IMⅡ、IMⅢ、DysⅠ、DysⅡ和DysⅢ以及GC组织中 ,NFκBp6 5阳性表达率在CagA阳性组较CagA阴性组高 ,差异有显著性。IMⅢ、DysⅡ和DysⅢ组织中 ,c myc、CyclinD1和bcl xl在CagA阳性组表达率较CagA阴性组高 ,差异有显著性。NFκBp6 5在IMⅢ、DysⅡ和DysⅢ组织中 ,阳性表达率与靶基因阳性表达相一致。CagA+ Hp感染的胃癌组织中 ,NFκBp6 5、c myc、CyclinD1和bcl xl阳性表达率在肠型胃癌中高于弥漫型胃癌 ,差异有显著性。结论 弥漫型胃癌与肠型胃癌的发生机制不同。CagA+ Hp感染与肠型胃癌发生有关 ;CagA+ Hp感染后 ,NFκBp6 5上调c myc、CyclinD1和bcl xl在肠上皮化生及不典型增生组织中的表达 ,促进肠型胃癌发生。通过抑制NFκBp6 5的活? 展开更多
关键词 NFΚB 肠型胃癌 表达 bcl-xl CyclinD1 靶基因 c-myc 显著性 结论 差异
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利用RNA干扰效应阻抑鼻咽癌细胞bcl-xL基因表达和诱导癌细胞凋亡的研究 被引量:6
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作者 李继霞 周克元 +3 位作者 蔡康荣 梁统 唐旭东 张月飞 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期347-351,共5页
目的研究RNA干扰(RNA interference)效应对人鼻咽癌低分化上皮细胞株CNE-2Z bcl-xL基因表达的抑制作用及其对CNE-2Z细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用.方法使用美国Ambion公司提供的网上设计软件设计针对人bcl-xL基因的小干扰RNA(siRNA)序列... 目的研究RNA干扰(RNA interference)效应对人鼻咽癌低分化上皮细胞株CNE-2Z bcl-xL基因表达的抑制作用及其对CNE-2Z细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用.方法使用美国Ambion公司提供的网上设计软件设计针对人bcl-xL基因的小干扰RNA(siRNA)序列,体外转录试剂盒合成siRNA;荧光素标记试剂盒标记siRNA;脂质体法将siRNA转入CNE-2Z细胞株.荧光显微镜下观察siRNA的转染效率;RT-PCR法半定量检测siRNA对bcl-xL基因表达的抑制作用;噻唑蓝法检测siRNA对细胞生长增殖抑制作用;流式细胞术检测siRNA诱导细胞凋亡作用.结果荧光显微镜下荧光素标记的siRNA转染组可见到细胞内清晰的绿色荧光,而在未转染siRNA对照组未见;各siRNA转染组bcl-xL mRNA表达水平有不同程度的下调,下调范围在10%~70%之间,而在未转染对照组内bcl-xL mRNA表达水平无明显改变;细胞生长增殖抑制率在一定范围内具有剂量依赖性(剂量增加,抑制率增高)和时间依赖性;各浓度siRNA4转染组可不同程度诱导CNE-2Z细胞凋亡.结论体外转录合成的siRNA能特异有效地下调bcl-xL基因的表达,不同序列特异性的siRNA下调bcl-xL基因表达的能力不同;瞬时转染bcl-xL siRNA4能有效抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导其凋亡;siRNA不仅为基因组功能分析提供了强有力的工具,而且为抗鼻咽癌基因治疗提供了新的思路. 展开更多
关键词 RNA干扰效应 鼻咽癌 肿瘤细胞 bcl-xl 基因表达 细胞凋亡
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鼠bcl-X_L基因在CHO细胞中的表达 被引量:6
8
作者 王贤辉 梁米芳 +3 位作者 李德新 徐静 米力 陈志南 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第24期2217-2219,共3页
目的 :构建携带鼠bcl XL 基因的真核表达载体 ,并将其在CHO细胞中表达 .方法 :用反转录PCR获取鼠bcl XL全长cDNA序列 ,将其克隆进pEGFP重组融合表达质粒 .脂质体法转染CHO细胞 ,荧光检测目的蛋白表达 .结果 :成功获得了鼠bcl XLcDNA ,... 目的 :构建携带鼠bcl XL 基因的真核表达载体 ,并将其在CHO细胞中表达 .方法 :用反转录PCR获取鼠bcl XL全长cDNA序列 ,将其克隆进pEGFP重组融合表达质粒 .脂质体法转染CHO细胞 ,荧光检测目的蛋白表达 .结果 :成功获得了鼠bcl XLcDNA ,构建了编码鼠bcl XL 的真核融合表达载体pEGFP bcl XL,转染CHO细胞后观察到融合蛋白表达 .结论 :鼠bcl XL 基因的克隆及融合表达 ,为进一步在高密度、大规模细胞培养中利用bcl 展开更多
关键词 基因 bcl-xl CHO细胞 基因表达
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细菌内同源重组高效制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl-X_L的重组腺病毒载体 被引量:6
9
作者 罗燕 唐仕波 +1 位作者 李湘竑 刘双信 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1462-1467,T001,共7页
目的 :制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl-XL 的重组腺病毒载体。方法 :采用PCR方法从质粒pEGFP -C3 -bcl-XL 中扩增出bcl-XL 基因 ,再亚克隆至腺病毒穿梭质粒中 ,形成转移质粒pAdTrack -CMV -bcl-XL;然后与pAdEasy - 1共转化BJ51 83... 目的 :制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl-XL 的重组腺病毒载体。方法 :采用PCR方法从质粒pEGFP -C3 -bcl-XL 中扩增出bcl-XL 基因 ,再亚克隆至腺病毒穿梭质粒中 ,形成转移质粒pAdTrack -CMV -bcl-XL;然后与pAdEasy - 1共转化BJ51 83菌 ,采用细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒pAdEasy - 1 -gfp -bcl-XL,筛选同源重组的阳性克隆 ;抽提的pAdEasy - 1 -gfp -bcl-XL 经PacI线性化后 ,再用LIPOFECTAMINETM2 0 0 0介导转染至人胚肾 2 93细胞内包装扩增出重组腺病毒颗粒 ;采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定 ;用氯化铯超高速梯度离心纯化获取高滴度的重组腺病毒rAd -gfp -bcl-XL。结果 :由pAdTrack -CMV -bcl-XL 和pAdEasy - 1共转化BJ51 83菌1 6 - 2 0h后 ,可获得 35 %的阳性重组体细菌克隆。由重组质粒DNA经 2 93细胞包装后产生的重组腺病毒 ,经PCR检测表明含有目的基因bcl-XL。氯化铯纯化所得重组腺病毒滴度约为 6 5× 1 0 1 2 PFU/L。结论 :用细菌内同源重组法可以高效、简便、快捷地制备出重组腺病毒质粒载体 ,重组体病毒质粒经 2 93细胞包装、扩增和氯化铯纯化后可制备出高滴度的重组腺病毒颗粒rAd -gfp -bcl-XL,为人类相关疾病的基因治疗提供良好的基因转染载体。 展开更多
关键词 同源重组 腺病毒 细胞凋亡 bcl-xl基因 基因疗法
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高功率微波对人T淋巴细胞的影响机制和干预措施 被引量:8
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作者 郭瑛 崔玉芳 +6 位作者 徐菡 王子兵 柳晓兰 董波 苏振涛 周红梅 孙启鸿 《感染.炎症.修复》 2005年第4期195-198,共4页
目的:观察高功率微波辐照后人T淋巴细胞活性氧和线粒体跨膜电位的变化,并探索某些干预措施对其损伤后的影响。方法:采用DCFH-DA分子探针和荧光染料罗丹明-123结合流式细胞仪分别检测人T细胞经0、10、30、50mW/cm^2微波辐照及给予某些... 目的:观察高功率微波辐照后人T淋巴细胞活性氧和线粒体跨膜电位的变化,并探索某些干预措施对其损伤后的影响。方法:采用DCFH-DA分子探针和荧光染料罗丹明-123结合流式细胞仪分别检测人T细胞经0、10、30、50mW/cm^2微波辐照及给予某些干预措施后细胞内活性氧和线粒体跨膜电位的变化。结果:(1)经10mW辐照后即可见T细胞内活性氧水平的升高,于30mW辐照后达到峰值;而10mW辐照后T细胞线粒体跨膜电位出现明显降低,于30mW辐照后降至最低。(2)于照前给予活性氧抑制剂能有效抑制T细胞内活性氧水平的升高;T细胞转入bcl-X_L基因后也能明显抑制细胞内活性氧水平的升高和线粒体跨膜电位的下降,高剂量组更为明显。结论:一定强度的高功率微波能引起T细胞活性氧和线粒体跨膜电位变化等早期凋亡事件的发生,活性氧抑制剂和bcl-X_L基因过表达能有效抑制这些早期事件的发生。 展开更多
关键词 高功率微波 T淋巴细胞 活性氧 线粒体跨膜电位 bcl-X_L 基因
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氯化钴诱导PC12细胞凋亡的分子机制 被引量:6
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作者 曾季平 王立祥 +5 位作者 胡晓燕 杨玲玲 孔峰 吴伟芳 陈蔚文 崔行 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期193-195,共3页
目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT... 目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT对CoCl2诱导PC12细胞DNA片段化的影响;利用RTPCR法检测凋亡相关基因bclxl和bax在PC12细胞调亡过程中的表达及NAC、DTT对基因表达的影响;化学发光法检测NAC、DTT对Caspase3表达的作用。结果在CoCl2诱导PC12细胞凋亡中,ROS生成量明显上升,为正常时的2.92倍;NAC、DTT可提高细胞存活率,由53.1%上升为94.8%和92.3%(P<0.01),并有效抑制ROS的生成,为正常时的24.2%和82.1%(P<0.01);同时抑制DNA片段化的发生。bclxl在细胞凋亡过程中表达明显下降,bax表达无明显变化;NAC和DTT可使bclxl的表达明显上升。Caspase3在细胞凋亡中被激活,NAC、DTT可抑制Caspase3的表达(P<0.01)。结论ROS介导了CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,这一过程与抑制bclxl表达,激活Caspase3有关。 展开更多
关键词 氯化钴 PCI2细胞 细胞凋亡 活性氧 基因bcl-xl
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Bcl-xl/Lipofectamine^(TM)2000比值对人角膜基质细胞转染效率的影响 被引量:5
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作者 李新宇 李贵刚 朱雪菲 《眼科新进展》 CAS 2006年第7期524-526,共3页
目的检测Bclxl/LipofectamineTM2000复合物中两者比值对转染人角膜基质细胞转染效率的影响,探讨其用于人角膜基质细胞基因转染的最佳比值。方法选择Bclxl/LipofectamineTM2000比值1∶2、1∶4、1∶8、1∶10四个实验组制备载体复合物转染... 目的检测Bclxl/LipofectamineTM2000复合物中两者比值对转染人角膜基质细胞转染效率的影响,探讨其用于人角膜基质细胞基因转染的最佳比值。方法选择Bclxl/LipofectamineTM2000比值1∶2、1∶4、1∶8、1∶10四个实验组制备载体复合物转染人角膜基质细胞,转染时间24h。在转染后3d,采用半定量RTPCR检测目的基因Bclx1mRNA表达的变化;采用免疫组织化学染色法及流式细胞计数法检测目的基因Bclx1表达阳性细胞率。数据采用SPSS软件分析。结果Bclxl/LipofectamineTM2000载体复合物中两者比值能显著影响其对人角膜基质细胞的转染效率,存在最佳的比值。当Bclxl/LipofectamineTM2000比值为1∶8时,培养的人角膜基质细胞获得了最佳的转染效率。转染后3d,定量PCR显示1∶8组mRNA表达水平高于其他组(P<0.05),Bclx1免疫组化染色及流式细胞计数法均显示1∶8组转染效率最高,阳性细胞率为(45.6±2.0)%(免疫组织化学染色法),(48.3±3.0)%(流式细胞计数法)(P<0.05)。结论LipofectamineTM2000能有效介导外源基因Bclxl转染人角膜基质细胞。Bclxl/LipofectamineTM2000载体复合物比值为1∶8时转染效率最高。 展开更多
关键词 bcl-xl 角膜基质细胞 基因转染 阳离子脂质体
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上皮性卵巢肿瘤中bcl-2、bcl-xl基因的表达及临床意义 被引量:1
13
作者 陈爱平 刘晖 +2 位作者 周素花 戴淑真 徐冰 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期406-408,共3页
目的 探讨凋亡抑制基因bcl 2、bcl xl在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其相互关系。方法 应用免疫组织化学S P方法检测 10例正常卵巢、2l例良性上皮性卵巢肿瘤、12例交界性肿瘤、72例恶性肿瘤组织中bcl 2、bcl xl基因表达情况 ,并分析其表... 目的 探讨凋亡抑制基因bcl 2、bcl xl在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其相互关系。方法 应用免疫组织化学S P方法检测 10例正常卵巢、2l例良性上皮性卵巢肿瘤、12例交界性肿瘤、72例恶性肿瘤组织中bcl 2、bcl xl基因表达情况 ,并分析其表达与不同临床病理特征之间的关系。结果 bcl 2在正常卵巢、良性上皮性卵巢肿瘤、交界性肿瘤、恶性肿瘤中阳性表达率分别为 10 % (1/ 10 )、19.1% (4 / 2 1)、5 0 % (6 / 12 )、和 5 5 .6 % (4 1/ 72 ) ,bcl xl在正常卵巢、良性上皮性卵巢肿瘤中均为阴性表达 ,在交界性肿瘤和恶性肿瘤中阳性表达率分别为 16 .6 7%和 4 8.6 1%。bcl 2与肿瘤的分化程度有关 ,分化差者bcl 2表达低。bcl xl与肿瘤的临床分期有关 ,在Ⅲ、Ⅳ期恶性肿瘤中的阳性率分别为 5 4 .0 5 %、71.4 3% ,Ⅰ、Ⅱ期为 12 .5 0 %、4 5 .0 0 % ;两者均与肿瘤的病理学类型无关。未发现两者有相关关系。结论 本实验结果表明bcl 2和bcl x1基因参与了卵巢肿瘤的发生发展过程 ,可作为卵巢恶性肿瘤的分子生物学指标之一。 展开更多
关键词 上皮性卵巢肿瘤 bcl-2 bcl-xl 基因 表达 免疫组化分析
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银杏叶提取物金纳多心停跳液对人心肌细胞bcl-2和bcl-xL基因表达的影响 被引量:3
14
作者 邓云坤 韦方 +2 位作者 李永念 陈静 刚绍鹏 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期256-258,共3页
目的探讨银杏叶提取物金纳多(简称金纳多)对体外循环人心肌细胞抗凋亡基因bcl-2和bcl- xL表达的影响。方法择期先天性心脏病患儿30例,随机均分为两组,治疗组在灌注St Thomas'停搏液(4℃)中加入金纳多(0.5 mg/kg),心脏完全停跳后开... 目的探讨银杏叶提取物金纳多(简称金纳多)对体外循环人心肌细胞抗凋亡基因bcl-2和bcl- xL表达的影响。方法择期先天性心脏病患儿30例,随机均分为两组,治疗组在灌注St Thomas'停搏液(4℃)中加入金纳多(0.5 mg/kg),心脏完全停跳后开始心内手术;对照组单纯灌注St Thomas'停搏液(4℃)。在手术结束开放升主动脉前取心肌组织,采用RT-PCR技术在凝胶电泳成像基础上半定量检测bcl- 2和bcl-xL基因的表达水平。结果治疗组bcl-2和bcl-xL基因的表达显著高于对照组(P<0.05)。结论银杏叶提取物金纳多可促进人心肌细胞抗凋亡基因bcl-2和bcl-xL的表达。 展开更多
关键词 银杏叶提取物(金纳多) bcl-2 bclxl 基因表达
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最新进展的转基因技术在骨与软骨缺损修复中的应用 被引量:4
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作者 茹嘉 李强 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第2期353-357,共5页
背景:组织工程技术在骨与软骨的修复方面已经取得巨大进步,其中转基因技术的引入在最近几年也引起人们广泛的关注。目的:总结近5年来转基因技术在骨与软骨缺损修复中的最新研究进展。方法:应用计算机检索CNKI数据库和PubMed数据库2007年... 背景:组织工程技术在骨与软骨的修复方面已经取得巨大进步,其中转基因技术的引入在最近几年也引起人们广泛的关注。目的:总结近5年来转基因技术在骨与软骨缺损修复中的最新研究进展。方法:应用计算机检索CNKI数据库和PubMed数据库2007年1月至2012年3月关于转基因技术治疗骨与软骨缺损方面的文献,中文检索词"基因,治疗,骨,软骨,缺损"。英文检索词"gene,therapy,bone,cartilage,defect",最终纳入22篇符合要求的文献。结果与结论:基因治疗为骨和软骨再生带来了一种新的治疗理念,它可以把具有特异性的目的基因精确转移入靶细胞内,并特异性的表达。目前应用于骨与软骨缺损的基因主要包括骨形态发生蛋白,转化生长因子,碱性成纤维细胞生长因子,胰岛素样生长因子,血管内皮细胞生长因子,Bcl-xl基因等。应用基因治疗可以诱导骨与软骨的形成,为骨与软骨的修复提供了崭新的途径。 展开更多
关键词 组织构建 组织构建学术探讨 基因 治疗 软骨 缺损 骨形态发生蛋白 转化生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 胰岛素样生长因子 血管内皮生长因子 SOX bcl-xl 国家自然科学基金
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白英水提物对肺癌SPC-A-1细胞的凋亡及bcl-xl、bid表达的影响 被引量:4
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作者 王美凤 余乐涵 +1 位作者 万慧芳 涂硕 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2011年第6期8-12,共5页
目的观察白英水提物(extracts of solanun lyratum thumb,ESL)对肺癌SPC-A-1细胞凋亡及基因bcl-xl、bid表达的影响。方法常规法制备ESL,实验分为正常对照组、白英处理组。白英处理组加入ESL,终质量浓度分别为12.5、25.0和50.0 mg.mL-1;... 目的观察白英水提物(extracts of solanun lyratum thumb,ESL)对肺癌SPC-A-1细胞凋亡及基因bcl-xl、bid表达的影响。方法常规法制备ESL,实验分为正常对照组、白英处理组。白英处理组加入ESL,终质量浓度分别为12.5、25.0和50.0 mg.mL-1;正常对照组的培养细胞不加药物处理。采用流式细胞仪检测细胞凋亡、半定量RT-PCR和免疫组织化学法分析细胞中bcl-xl、bid基因表达。结果与正常对照组比较,白英处理组SPC-A-1细胞增殖有显著性下降,细胞凋亡显著性增多(P<0.05);bcl-xl mRNA和Bcl-xl蛋白表达降低、bid mR-NA和Bid蛋白表达升高(P<0.05),并随ESL质量浓度的增加而加强。结论 ESL能诱导人肺癌SPC-A-1细胞上调bcl-xl基因表达,下调bid基因表达,且作用有一定的量效关系,这可能是白英诱导细胞凋亡的重要作用机制。 展开更多
关键词 白英 肺癌SPC-A-1细胞 凋亡 bcl-xl BID 基因表达
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转基因小鼠中bcl-xl基因的过表达在小鼠大脑中动脉栓塞中的保护作用 被引量:4
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作者 王芙蓉 姜永生 +3 位作者 刘艳 肖文伍 张苏明 朱遂强 《国际神经病学神经外科学杂志》 2006年第2期106-110,共5页
目的观察bcl-xl基因的过表达对小鼠大脑中动脉栓塞的保护作用,探讨其作用机制。方法通过建立bclxl转基因小鼠,经传代及检测后证实,该转基因小鼠中存在着bclxl基因的过表达,然后将该模型小鼠与同种系野生型小鼠同时行线栓永久性阻塞大脑... 目的观察bcl-xl基因的过表达对小鼠大脑中动脉栓塞的保护作用,探讨其作用机制。方法通过建立bclxl转基因小鼠,经传代及检测后证实,该转基因小鼠中存在着bclxl基因的过表达,然后将该模型小鼠与同种系野生型小鼠同时行线栓永久性阻塞大脑中动脉,在缺血24h时测其神经功能评分,观察转基因小鼠与野生型小鼠的差别。在缺血后不同时间点测其梗死体积,观察梗死体积的动态变化。用TUNEL法观察小鼠的脑组织缺血后不同时间点再灌注时凋亡细胞的数量和分布情况。用免疫组化方法观察梗死前后两种小鼠脑组织中bcl-xl的表达量的差异。结果缺血24h后转基因小鼠的神经功能评分低于野生型小鼠(P<0.05)。缺血后3、24、72h,转基因小鼠的梗死体积均明显低于野生型小鼠,差异有显著性意义。TUNEL显示在缺血再灌注后的不同时间点,转基因小鼠皮质缺血区内的凋亡细胞数明显少于野生型小鼠,差异有显著性意义。免疫组化结果显示,梗死前后转基因小鼠的皮质细胞bclxl的表达量均明显高于野生型小鼠(P<0.05),且梗死后两种小鼠体内的bclxl的表达量均较梗死前增加(P<0.05)。结论在规范化的标准条件下,转基因小鼠中bclxl基因的过表达能够降低脑梗死的体积并改善小鼠的神经功能;过表达bclxl基因的这种效应可能是通过抑制细胞凋亡而实现的。 展开更多
关键词 转基因小鼠 脑梗死 bcl-xl 基因治疗
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bcl-xL基因转染对脊髓损伤半胱氨酸蛋白酶-3表达的影响 被引量:5
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作者 易成腊 陈安民 +2 位作者 白祥军 宋先舟 徐卫国 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期984-986,共3页
目的探讨bclxL基因转染对大鼠脊髓损伤Caspase3表达的影响和对神经细胞的保护作用。方法制备大鼠胸段脊髓T8,9压迫损伤模型,随机分为2组对照组,bclxL组,将阳离子脂质体质粒混合后直接注入大鼠损伤脊髓,伤后1、3和7d利用半定量逆转录聚... 目的探讨bclxL基因转染对大鼠脊髓损伤Caspase3表达的影响和对神经细胞的保护作用。方法制备大鼠胸段脊髓T8,9压迫损伤模型,随机分为2组对照组,bclxL组,将阳离子脂质体质粒混合后直接注入大鼠损伤脊髓,伤后1、3和7d利用半定量逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)和免疫组织化学检测bclxL和Caspase3表达情况;TUNEL法检测细胞凋亡,观察对神经细胞的保护作用。结果与对照组相比,bclxL组各时间段Caspase3表达明显降低(P<0.05),TUNEL阳性凋亡的神经细胞明显减少(P<0.05)。结论外源性bclxL基因体内转染在损伤脊髓的过度表达可减少脊髓不完全性损伤后凋亡,可能与其下调Caspase3的有关。 展开更多
关键词 bcl-xl 基因转染 脊髓损伤 半胱氨酸蛋白酶-3 基因表达 神经细胞
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Bcl-x_L、Bcl-Xs/L以及Bcl-6在骨肉瘤组织中的表达及临床意义
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作者 李昕 汤继文 +2 位作者 李建民 杨志平 许复郁 《山东大学学报(医学版)》 CAS 2003年第5期511-513,516,共4页
目的:检测凋亡相关蛋白Bcl-xL、Bcl-Xs/L以及Bcl-6在骨肉瘤中的表达,并探讨其与骨肉瘤预后的关系。方法:应用免疫组化方法检测Bcl-xL、Bcl-Xs/L以及Bcl-6在41例骨肉瘤组织中的表达,并分析其与无瘤生存率及生存时间的关系。结果:Bcl-xL、... 目的:检测凋亡相关蛋白Bcl-xL、Bcl-Xs/L以及Bcl-6在骨肉瘤中的表达,并探讨其与骨肉瘤预后的关系。方法:应用免疫组化方法检测Bcl-xL、Bcl-Xs/L以及Bcl-6在41例骨肉瘤组织中的表达,并分析其与无瘤生存率及生存时间的关系。结果:Bcl-xL、Bcl-Xs/L在骨肉瘤组织中表达的阳性率分别为53.7%和75.6%,而Bcl-6为阴性表达,是否行术前化疗不影响Bcl-xL的表达(P>0.05),Bcl-xL表达阳性者无瘤生存率较阴性者低(P<0.01),而Bcl-Xs/L表达与复发转移及无瘤生存率无相关关系。结论:Bcl-xL、Bcl-Xs/L在骨肉瘤中有不同程度的表达,Bcl-xL的表达与预后相关,Bcl-xL阳性表达者复发、转移率高,无瘤生存率低,这与Bcl-xL抑制骨肉瘤细胞凋亡导致化疗耐药的特性相关。 展开更多
关键词 骨肉瘤 基因 bclxl 基因 bcl—Xs/L 基因 bcl-6 细胞凋亡 免疫组织化学
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信号传导与转录活化因子3在肝细胞癌组织中的表达及意义 被引量:3
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作者 刘维藩 李荣江 +2 位作者 彭向阳 黄振华 黄应桂 《广东医学院学报》 2008年第4期377-380,共4页
目的研究信号传导与转录活化因子3(STAT3)在肝细胞癌组织中的表达及其意义。方法分别应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测肝癌组织、癌旁组织和良性病变肝组织中STAT3 mRNA和蛋白的表达,应用免疫组织化学法检测Bcl-x... 目的研究信号传导与转录活化因子3(STAT3)在肝细胞癌组织中的表达及其意义。方法分别应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测肝癌组织、癌旁组织和良性病变肝组织中STAT3 mRNA和蛋白的表达,应用免疫组织化学法检测Bcl-xL的蛋白表达情况。结果肝癌组织、癌旁组织中STAT3 mRNA的相对表达量和蛋白阳性率均高于良性病变肝组织(P均<0.01或0.05)。肝癌组织及癌旁组织中Bcl-xL蛋白表达率明显高于良性病变肝组织(P<0.05)。肝癌组织中STAT3蛋白与Bcl-xL蛋白表达有密切关系(P<0.01)。结论STAT3高表达可能是肝癌发病机制中的早期事件;在癌旁肝组织中,那些STAT3蛋白阳性的肝细胞可能是潜在的癌前细胞。STAT3基因可能通过直接或间接促进Bcl-xL的表达,抑制细胞的凋亡,从而在肿瘤的发生发展过程中发生重要作用。 展开更多
关键词 肝细胞癌 STAT3基因 bcl-xl基因 细胞凋亡
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