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柑橘感染褐斑病过程中BAG1的作用
1
作者 周慧珍 张嘉 +6 位作者 胡军华 李白雪 曹立 余歆 王福生 邹修平 周彦 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期956-970,共15页
本研究旨在探究柑橘BAG1参与褐斑病菌(Alternaria alternata)侵染的调控机制。从‘秤砣红橘’(Citrus tangerina Hort.ex Tanaka)、‘宫本温州蜜柑’(C.unshiu Macf)、‘爱媛38’杂柑(C.reticulata Blanco)和‘金秋砂糖橘’(C.reticulat... 本研究旨在探究柑橘BAG1参与褐斑病菌(Alternaria alternata)侵染的调控机制。从‘秤砣红橘’(Citrus tangerina Hort.ex Tanaka)、‘宫本温州蜜柑’(C.unshiu Macf)、‘爱媛38’杂柑(C.reticulata Blanco)和‘金秋砂糖橘’(C.reticulata Blanco)叶片中扩增BAG1基因。BAG1蛋白相对保守,均具有Ubiquitin泛素结构域和BAG结构域,‘爱媛38’的BAG结构域存在3个新的氨基酸变动,导致侧链基团变动。上游启动子序列显示4个柑橘品种均包含相同的激素和胁迫相关顺式作用元件。系统分析显示4个柑橘品种与宽皮柑橘类BAG1蛋白聚为一支,相似度最高,与甜橙类、柚类亲缘关系较远。qRT-PCR显示在褐斑病菌THJ菌株侵染的抗、感品种上BAG1的表达差异显著。BAG1受外源Me JA、ABA和SA诱导上调表达。烟草亚细胞定位显示BAG1存在于细胞核和细胞膜中。BAG1沉默能够增强对A.alternata的抗性,过表达对A.alternata的抗性降低。表明BAG1通过参与活性氧激发和ABA、JA或SA信号途径,参与柑橘对褐斑病菌的调控。 展开更多
关键词 柑橘 BAG1 褐斑病菌 感病基因 活性氧
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细胞凋亡调控蛋白FAP-1、bag1与子宫内膜异位症的相关性 被引量：2
2
作者 姜桦 曹斌融 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期142-145,F005,共5页
目的　研究正常子宫内膜、子宫内膜异位症 (endometriosis,EMS)患者在位及异位内膜中细胞凋亡调控蛋白FAP 1、bag1表达的改变。方法　采用放射免疫及酶标法测定雌二醇 (E2 )及孕激素 (P)水平 ,免疫组化法检测 6 0份内膜标本中FAP 1、bag... 目的　研究正常子宫内膜、子宫内膜异位症 (endometriosis,EMS)患者在位及异位内膜中细胞凋亡调控蛋白FAP 1、bag1表达的改变。方法　采用放射免疫及酶标法测定雌二醇 (E2 )及孕激素 (P)水平 ,免疫组化法检测 6 0份内膜标本中FAP 1、bag1的表达。 结果　 (1)各组雌、孕激素水平无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;(2 )正常子宫内膜、FAP 1、bag1的表达增生期高于分泌期 (P <0 .0 5 ) ;(3)增生期FAP 1的表达在正常子宫内膜、EMS在位、异位内膜三者间无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,而分泌期FAP 1在正常子宫内膜的表达显著低于EMS在位及异位内膜(P <0 .0 5 ) ,而后两者之间无差异 (P >0 .0 5 ) ;(4 )增生期bag1在EMS在位、异位内膜的表达低于正常子宫内膜(P <0 .0 5 ) ,而在分泌期的表达与正常子宫内膜无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论　细胞凋亡及相关调控蛋白FAP 1、bag1与EMS的发生。 展开更多
关键词 细胞凋亡 调控蛋白 FAP-1 bagl 子宫内膜异位症 相关性
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抑制Bag1表达对胃癌细胞生长和化学治疗敏感性的影响 被引量：1
3
作者 马飞 郑磊贞 +3 位作者 顾建春 李小平 张明迪 王雅杰 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期308-313,共6页
目的探讨Bag1表达水平对胃癌细胞生长和对5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的影响。方法采用RealTime PCR和Western blotting检测Bag1在5个不同的胃癌细胞系中的表达水平。选取高表达Bag1的细胞系,采用慢病毒载体下调Bag1基础表达水平,下调效率经... 目的探讨Bag1表达水平对胃癌细胞生长和对5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的影响。方法采用RealTime PCR和Western blotting检测Bag1在5个不同的胃癌细胞系中的表达水平。选取高表达Bag1的细胞系,采用慢病毒载体下调Bag1基础表达水平,下调效率经Real-Time PCR和Western blotting检测验证;采用CCK-8法检测Bag1表达水平下调对细胞生长及对5-FU敏感性的影响。结果 Bag1 mRNA和蛋白表达水平在SGC7901和KATO-Ⅲ细胞中均显著升高。有效下调Bag1的表达水平后,SGC7901和KATO-Ⅲ细胞增殖受到抑制,而对5-FU的敏感性显著提高。结论沉默Bag1基因可显著抑制胃癌细胞增殖,增强细胞对5-FU的敏感性。Bag1可能成为胃癌化学治疗的新靶点。 展开更多
关键词 胃癌 Bag1 细胞生长 化学治疗 敏感性
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弓形虫缓殖子期抗原1的原核表达及其多克隆抗体制备与初步应用
4
作者 幸忆恩 吴宏宇 蔡亦红 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第7期803-807,共5页
目的对弓形虫缓殖子期抗原1(BAG1)基因进行优化、克隆、原核表达,表达产物纯化后免疫小鼠,制备BAG1多克隆抗体,评价重组蛋白的免疫原性,并观察BAG1在虫体内的定位。方法对bag1基因序列进行筛选和优化,利用生物信息学方法分析其编码蛋白... 目的对弓形虫缓殖子期抗原1(BAG1)基因进行优化、克隆、原核表达,表达产物纯化后免疫小鼠,制备BAG1多克隆抗体,评价重组蛋白的免疫原性,并观察BAG1在虫体内的定位。方法对bag1基因序列进行筛选和优化,利用生物信息学方法分析其编码蛋白的氨基酸序列结构和功能,预测其免疫原性。将合成的pET28a(+)-bag1质粒转化至BL21感受态细胞中,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)至终浓度l mmol/L,37℃诱导4 h,用HIS标签蛋白纯化试剂盒纯化表达蛋白。取纯化蛋白做SDS-PAGE凝胶电泳分析,用BCA法测定蛋白浓度。取7只BALB/c小鼠,取纯化的BAG1蛋白与等体积的弗氏佐剂按双推法混匀,皮下多点注射免疫小鼠,每鼠每次注射蛋白25μg(第一次使用弗氏完全佐剂,后两次均使用弗氏不完全佐剂,每隔两周免疫一次),末次免疫4 d后摘眼球取血,分离血清,以此为一抗,采用Western blot检测碱性条件下我国流行优势基因型Chinese 1虫株(TgCtwh6)速殖子向缓殖子转化及含有TgCtwh6包囊小鼠脑组织中的BAG1蛋白,间接免疫荧光(IFA)试验检测TgCtwh6虫株碱性诱导成为缓殖子情况。结果预测BAG1含有7个潜在抗原表位,具有良好的免疫原性。Western blot显示,BAG1多克隆抗体能识别在体外碱性培养基诱导的TgCtwh6和小鼠脑组织内形成的TgCtwh6虫株缓殖子;IFA结果显示,BAG1多克隆抗体能识别体外诱导的TgCtwh6缓殖子,且BAG1蛋白主要定位在弓形虫的胞质中。结论成功制备弓形虫BAG1多克隆抗体,该抗体能识别我国优势流行虫株的BAG1蛋白及缓殖子,为我国流行虫株的监测和鉴定提供了良好的手段。 展开更多
关键词 弓形虫 Chinese 1基因型 BAG1 多克隆抗体
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