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对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达的影响 被引量：26
1
作者 林思 朱华 +3 位作者 秦慧真 王孝勋 许立拔 邓玲玉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期73-79,共7页
目的:研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法:选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总... 目的:研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达的影响。方法:选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总生物碱设置添加干预的质量浓度为50,75,112,167,250 mg·L^(-1),另设置仅添加10%胎牛血清作为空白组。采用噻唑蓝(MTT)比色法和细胞克隆实验观察细胞增殖的作用,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测3种凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3的表达。结果:对叶百部总生物碱可抑制SMMC-7721细胞增殖,与空白组比较,细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),作用24,48,72 h的50%细胞抑制浓度(IC_(50))分别为(173.36±8.75),(112.14±16.50),(96.41±2.60)mg·L^(-1),细胞集落形成抑制率显著升高(P<0.01),存在浓度依赖性。与空白组比较,对叶百部总生物碱可促进细胞凋亡,SMMC-7721细胞凋亡数目和凋亡率显著增加(P<0.01),在荧光正置显微镜下可观察到典型细胞凋亡形态,如亮蓝色细胞核染色,细胞质浓缩和细胞核固缩等。与空白组比较,抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著下调(P<0.01);与空白组比较,对叶百部总生物碱75,112,167,250 mg·L^(-1)促凋亡蛋白Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:对叶百部总生物碱有很好的抑制SMMC-7721细胞增殖和促进凋亡的作用,其机制可能与抑制Bcl-2蛋白表达和促进Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 对叶百部总生物碱 人肝癌 SMMC-7721细胞 凋亡 b细胞淋巴瘤-2(bcl-2) bcl-2相关X蛋白(bax) 切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)
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HSP70调控Bcl-2表达抑制脓毒症大鼠肺血管内皮细胞损伤的机制研究 被引量：4
2
作者 陈雅静 许磊 +6 位作者 郭东风 陈果 袁晓燕 刘国荣 杭敏 王佩 罗娅娟 《解剖学研究》 CAS 2020年第3期258-261,267,共5页
目的探讨热休克蛋白70(HSP70)调控B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达抑制脓毒症大鼠肺血管内皮细胞损伤的机制。方法 SD大鼠30只随机分为对照组、脓毒症组、干预组,每组10只,脓毒症组腹腔注射20 mg/kg内毒素,干预组尾静脉注射溶于15 mL林格液的... 目的探讨热休克蛋白70(HSP70)调控B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达抑制脓毒症大鼠肺血管内皮细胞损伤的机制。方法 SD大鼠30只随机分为对照组、脓毒症组、干预组,每组10只,脓毒症组腹腔注射20 mg/kg内毒素,干预组尾静脉注射溶于15 mL林格液的800μg重组质粒pcDNA3.1-HSP70,48 h后腹腔注射20 mg/kg内毒素;对照组腹腔注射等量生理盐水。24 h后采血检测各组大鼠血清IL-6、TNF-α水平,采血后将各组大鼠处死取其肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,检测各组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率,检测各组大鼠肺血管内皮细胞中HSP70、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示干预组大鼠肺组织病理改变较模型组明显改善。脓毒症组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率及血清IL-6、TNF-α水平显著高于对照组(P<0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率及血清IL-6、TNF-α水平显著低于脓毒症组(P<0.05);脓毒症组大鼠肺血管内皮细胞中HSP70、Bax、Bcl-2蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞中HSP70、Bcl-2蛋白表达水平显著高于脓毒症组(P<0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞中Bax表达水平显著低于脓毒症组(P<0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率及IL-6、TNF-α、HSP70、Bax、Bcl-2水平较对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP70可能通过下调Bax及上调Bcl-2表达,减轻脓毒症大鼠炎症反应,减少肺血管内皮细胞凋亡,抑制肺血管内皮细胞损伤,从而起到保护肺血管内皮细胞的作用,这可能成为脓毒症肺损伤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 脓毒症 热休克蛋白70 b淋巴细胞瘤-2 bcl-2相关X蛋白 血管内皮细胞 肺损伤
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通痹方热奄包外敷对家兔退变颈椎间盘细胞凋亡相关基因Caspase-3和Bcl-2 mRNA的影响 被引量：4
3
作者 徐银琴 王光义 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第4期438-443,共6页
目的:探讨通痹方热奄包外敷对家兔退变椎间盘细胞凋亡相关基因天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA表达的影响。方法:普通级新西兰大白兔18只随机均分为空白组(正常兔,不做任何干预)、模型组(颈椎病模型兔,不... 目的:探讨通痹方热奄包外敷对家兔退变椎间盘细胞凋亡相关基因天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA表达的影响。方法:普通级新西兰大白兔18只随机均分为空白组(正常兔,不做任何干预)、模型组(颈椎病模型兔,不予任何治疗)及热敷组(颈椎病模型兔,通痹方热奄包外敷治疗),各组家兔于造模前、造模第30天及治疗结束后拍摄颈椎X线并评分;治疗15次后留取各组家兔C3-4和C4-5椎间盘,采用苏木精-伊红(HE)染色观察C3-4椎间盘组织形态学变化并评分,实时荧光定量法检测C4-5椎间盘Caspase-3和Bcl-2 mRNA相对表达量。结果:模型组和热敷组家兔造模后颈椎X线评分分别较空白组升高,热敷组家兔治疗后颈椎X线积分改善程度较模型组大,差异均有统计学意义(P<0.05);HE染色结果显示,模型组家兔C3-4椎间盘评分比空白组升高,热敷组评分比模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与空白组相比,模型组家兔C4-5椎间盘内Casepase-3 mRNA表达升高、Bcl-2 mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,热敷组家兔椎间盘内Casepase-3 mRNA表达降低,Bcl-2 mRNA表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:通痹方热敷可通过上调Bcl-2 mRNA表达、抑制Casepase-3 mRNA表达减少椎间盘细胞凋亡,延缓椎间盘退变。 展开更多
关键词 椎间盘 细胞凋亡 通痹方 热敷 天冬氨酸特异性蛋白酶-3 b淋巴细胞瘤-2
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EGCG诱导人视网膜色素上皮细胞凋亡作用的研究 被引量：1
4
作者 邱梅园 丁芝祥 +1 位作者 靳荷 蒋姣姣 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2022年第8期1257-1261,共5页
目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)凋亡的影响及其机制。方法:体外培养ARPE-19,分别采用0、40、80、160μg/mL EGCG处理。处理预定时间后分别用hoechst 33258染色法检测细胞凋亡形态学变化;流式... 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)凋亡的影响及其机制。方法:体外培养ARPE-19,分别采用0、40、80、160μg/mL EGCG处理。处理预定时间后分别用hoechst 33258染色法检测细胞凋亡形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量RT-PCR和Western blotting检测细胞凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)和p53的表达。结果:hoechst 33258染色结果发现ARPE-19随着EGCG药物浓度的增加,凋亡细胞数量逐渐增多,可见明显的凋亡小体;流式细胞仪结果显示随着EGCG药物浓度的升高,凋亡率逐渐增高,40、80、160μg/mL凋亡率分别为4.95%±0.071%、11.75%±0.075%和21.25%±0.919%与对照组(2.8%±1.556%)相比有差异(P<0.01),呈现出药物浓度依赖性;实时荧光定量PCR和Western blot结果表明EGCG能明显上调凋亡促进因子Bax、caspase-3和p53的mRNA和蛋白表达,同时下调凋亡抑制因子bcl-2的表达,均呈现浓度依赖性。结论:EGCG能明显诱导ARPE-19发生凋亡,其机制与抑制bcl-2的表达,增强Bax、caspase-3和p53的表达有关。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) 人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19) 凋亡 b淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2) bcl2-Associated X的蛋白质(bax) 胱天蛋白酶-3(caspase-3) p53
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口腔疣状癌中survivin与BCL-2、Skp2与P27两组蛋白表达特点及相关性研究 被引量：1
5
作者 万长青 徐若竹 +2 位作者 谭媛元 陈学群 吴淑仪 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2017年第6期385-390,共6页
目的:研究口腔疣状癌(OVC)组织中survivin(生存蛋白)与BCL-2(B淋巴瘤/白血病-2基因)、Skp2(S期激酶蛋白-2)与P27(激酶抑制蛋白)两组蛋白的表达特点及其相关性。方法:以本院2012-01-2015-01期间收治的34例口腔疣状癌患者作为本次研究资料... 目的:研究口腔疣状癌(OVC)组织中survivin(生存蛋白)与BCL-2(B淋巴瘤/白血病-2基因)、Skp2(S期激酶蛋白-2)与P27(激酶抑制蛋白)两组蛋白的表达特点及其相关性。方法:以本院2012-01-2015-01期间收治的34例口腔疣状癌患者作为本次研究资料,全部患者均在本院接受手术治疗。将术中取得的口腔疣状癌组织、癌旁组织,以及2015年1月间在本院因良性病变行病理检查患者的正常口腔黏膜组织作为研究标本,测定3种口腔黏膜组织中survivin、BCL-2、Skp2、P27的蛋白表达水平并进行对比分析,分析不同类型、不同分期的口腔疣状癌组织中4项蛋白表达的差异性,研究survivin与BCL-2、Skp2与P27之间的相关性,并据此研究4项蛋白表达水平对于口腔疣状癌诊断治疗的意义。结果:口腔疣状癌组织中Survivin、BCL-2、Skp2、P27表达阳性率均显著高于癌旁组织与正常组织,P<0.01;经进一步两两对比分析,癌旁组织中4项蛋白表达的阳性率与正常组织无明显差异,P>0.05。Survivin在口腔疣状癌组织中的阳性表达与BCL-2的阳性表达呈显著正相关性,P<0.01,0<r<1;Skp2在口腔疣状癌组织中的阳性表达与P27的阳性表达呈显著负相关性,P<0.01,-1<r<0。不同肿瘤类型、不同分期口腔疣状癌组织中,Survivin、BCL-2、Skp2、P27阳性表达率差异具有统计学差异性,P<0.05。结论:survivin、BCL-2、Skp2、P27在口腔疣状癌中均可见特异性表达,Survivin与BCL-2在口腔疣状癌组织中的阳性表达以及Skp2与P27在OVC癌组织中的阳性表达均具有明确相关性。 展开更多
关键词 口腔疣状癌 S期激酶蛋白-2 激酶抑制蛋白 b淋巴细胞瘤/白血病-2基因 凋亡抑制蛋白因子
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