人感染H7N9禽流感的流行和生物学研究进展 被引量：11

1

作者 石伟 孙英伟 +2 位作者 王璐璐 孙海波 姚文清 《上海预防医学》 CAS 2019年第12期999-1005,共7页

2013年中国首次报道H7N9禽流感病毒由禽类感染人体,之后人感染H7N9禽流感持续在人群中季节性流行。H7N9流感病毒在HA蛋白上发生了与跨种属屏障有关的氨基酸突变(Q226L,G186V),并拥有哺乳动物适应性突变,而且在聚合酶PB2上E627K、D701N... 2013年中国首次报道H7N9禽流感病毒由禽类感染人体,之后人感染H7N9禽流感持续在人群中季节性流行。H7N9流感病毒在HA蛋白上发生了与跨种属屏障有关的氨基酸突变(Q226L,G186V),并拥有哺乳动物适应性突变,而且在聚合酶PB2上E627K、D701N突变增强病毒聚合酶活性和在哺乳动物中的毒力。截至2018年9月全国共报告人感染H7N9禽流感患者1 567例,死亡615例。2017年2月,在广东省患者中检出的H7N9禽流感病毒表现为高致病性和致死性,且在人群中可能有限地人传人,对人类造成巨大潜在威胁。序列分析发现在HA蛋白的氨基酸序列的裂解点多了几个连续的碱基片段(KRTA)。该文对H7N9禽流感病毒的流行特征、基因特征、防治现状等方面的目前研究进行综述,以期对H7N9禽流感防控提供依据。 展开更多

关键词 h7n9禽流感病毒 基因重组 流行特征 防控策略

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九江市首例人感染H7N9禽流感的实验室检测分析 被引量：3

2

作者 熊火梅 张红波 +1 位作者 梁剑锋 余福平 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第24期4235-4237,共3页

目的对九江市首例人感染H7N9禽流感患者进行实验室检测分析,为禽流感疫情的判定及制定防控措施提供依据。方法提取患者标本、活禽交易市场环境标本的病毒核酸,用荧光定量PCR方法检测甲型、乙型流感病毒核酸片段、季节性流感(包括H1N1、H... 目的对九江市首例人感染H7N9禽流感患者进行实验室检测分析,为禽流感疫情的判定及制定防控措施提供依据。方法提取患者标本、活禽交易市场环境标本的病毒核酸,用荧光定量PCR方法检测甲型、乙型流感病毒核酸片段、季节性流感(包括H1N1、H3N2)、甲型H1N1、禽流感病毒H9、H7和H5核酸片段。结果乙型流感、季节性流感(包括H1N1、H3N2)、甲型H1N1流感、H9和H5高致病性禽流感扩增结果均为阴性;甲型流感通用引物和H7N9亚型流感病毒扩增结果均为阳性。活禽交易市场外环境标本中检出1份H7N9禽流感病毒核酸阳性。结论在日常流感样病例监测中要关注非常见流感病毒型别的监测,为研判我国流感的流行趋势提供依据。 展开更多

关键词 禽流感h7n9病毒 核酸检测 荧光定量PCR 实验室检测分析

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禽流感病毒H7N9型实时荧光定量RT-PCR检测方法的研究 被引量：1

3

作者 陈勉乔 于浩洋 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第3期48-50,54,共4页

目的建立一种快速准确诊断禽流感病毒 H7N9型的实时荧光定量 RT-PCR检测方法。方法参照国家生物技术信息中心（NCBI）公布的 H7N9基因 HA序列，设计特异性引物及TaqMan探针；构建阳性重组质粒，验证其最低检测拷贝数、重复性及特异度。... 目的建立一种快速准确诊断禽流感病毒 H7N9型的实时荧光定量 RT-PCR检测方法。方法参照国家生物技术信息中心（NCBI）公布的 H7N9基因 HA序列，设计特异性引物及TaqMan探针；构建阳性重组质粒，验证其最低检测拷贝数、重复性及特异度。结果试验构建的阳性重组质粒，线性关系在6＆#215;102 copies／μl～6＆#215;108 copies／μl范围内检测结果良好；用该方法测得最低拷贝数为600 copies／μl，特异度和重复性（CV＜1％）良好，无交叉反应；用该荧光定量 RT-PCR检测方法检测8份阳性样品和8份阴性样品，准确率为100％（16／16）。结论实验建立的实时荧光定量 RT-PCR检测方法可用于禽流感病毒 H7N9型的快速检测。 展开更多

关键词 禽流感病毒 h7n9 型 实时荧光定量 检测

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有限认识儿童H7N9禽流感的危害

4

作者 祝益民 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期409-411,共3页

流感病毒H7N9亚型自2013年3月在中国上海等地首次报告感染类以来,已经出现2例儿童患者和1例健康携带者。本文简要描述3例儿童的基本情况,结合文献讨论了禽流感病毒的变异,小聚集尚不能确定有人传人传播,H7N9人禽流感感染的防治链与预防... 流感病毒H7N9亚型自2013年3月在中国上海等地首次报告感染类以来,已经出现2例儿童患者和1例健康携带者。本文简要描述3例儿童的基本情况,结合文献讨论了禽流感病毒的变异,小聚集尚不能确定有人传人传播,H7N9人禽流感感染的防治链与预防措施,还介绍了早期使用达菲及重度阶段应用帕拉米韦等药物的应用方法。 展开更多

关键词 禽流感病毒 儿童患者 禽流感感染 危害 健康携带者 早期使用 应用

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中国内地人感染H7N9禽流感疫情流行病学特征分析 被引量：76

5

作者 任瑞琦 周蕾 +25 位作者 向妮娟 刘波 赵坚 耿兴义 王亚丽 李超 吕勇 杨富强 杨明 随海田 黄旭 孟玲 洪志恒 涂文校 曹洋 李雷雷 丁凡 王哲 王锐 姚建义 高永军 金连梅 张彦平 倪大新 李群 冯子健 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1362-1365,共4页

目的 分析中国内地人感染H7N9禽流感疫情.方法 以2013年以来我国内地报告的确诊H7N9禽流感病例为研究对象,采用描述性流行病学方法分析病例的时间、空间和人群分布特点.结果 截至2014年6月4日中国内地共确诊人感染H7N9禽流感病例433例,... 目的 分析中国内地人感染H7N9禽流感疫情.方法 以2013年以来我国内地报告的确诊H7N9禽流感病例为研究对象,采用描述性流行病学方法分析病例的时间、空间和人群分布特点.结果 截至2014年6月4日中国内地共确诊人感染H7N9禽流感病例433例,死亡163人.2013年3-4月及2014年1-2月分别为2个发病高峰.病例分布在14个省（市）,报告病例数前五位的省份为浙江、广东、江苏、上海、湖南,占总报告病例数的85％;病例年龄1～91岁（M=58岁）;男性占70％.82％的病例在发病前有活禽相关的暴露史.共发生14起聚集性病例,其中9起发生人传人的可能性大.结论 中国内地人感染H7N9禽流感疫情有较明显的季节分布特点,同时呈现一定的区域聚集性;感染人群以老年人为主,男性多于女性;感染来源主要为禽类. 展开更多

关键词 人感染h7n9禽流感 流行病学特征

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不同职业暴露人群感染H5N1禽流感病毒风险性分析 被引量：11

6

作者 袁洁 贺锋 +1 位作者 苏良 叶文 《中国热带医学》 CAS 2011年第5期573-574,共2页

目的了解长沙地区不同类型禽类职业暴露人群高致病性禽流感H5N1亚型病毒的抗体分布状况,分析不同职业暴露人群H5N1感染的风险性。方法采集菜市场家禽屠宰零售人员、大型家禽饲养企业工人和农村个体家禽散养人员的血清标本,用单放射免疫... 目的了解长沙地区不同类型禽类职业暴露人群高致病性禽流感H5N1亚型病毒的抗体分布状况,分析不同职业暴露人群H5N1感染的风险性。方法采集菜市场家禽屠宰零售人员、大型家禽饲养企业工人和农村个体家禽散养人员的血清标本,用单放射免疫扩散溶血技术(SRH)检测H5N1抗体。结果市场零售人员、农村个体家禽散养人员、企业饲养人员H5N1感染率分别为25%、1%和1.92%,男性从业人员H5N1抗体阳性率为10%,女性为23.88%。结论市场零售人员感染H5N1风险性远高于农村散养人员和企业饲养人员,不同职业人员中女性H5N1抗体阳性率高于男性从业人员。 展开更多

关键词 禽流感 职业暴露人群 h5n1抗体

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2013—2014年我国人感染H7N9禽流感时空分布及相关环境因素 被引量：7

7

作者 董雯 杨昆 许泉立 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期903-906,共4页

目的了解2013—2014年我国人感染H7N9禽流感疫情的时空分布特征,探索与疫情发生有关的环境因素。方法基于地理信息系统(GIS)对2013—2014年中国人感染H7N9禽流感疫情进行空间可视化和时空分析;对GIS提取出的可能与疫情发生有关的环境因... 目的了解2013—2014年我国人感染H7N9禽流感疫情的时空分布特征,探索与疫情发生有关的环境因素。方法基于地理信息系统(GIS)对2013—2014年中国人感染H7N9禽流感疫情进行空间可视化和时空分析;对GIS提取出的可能与疫情发生有关的环境因素进行相关性分析。结果 2014年的病例高发期(1—5月)比2013年的高发期(3—4月)提前,且持续时间、病例及发病地区数量都超过2013年;病例主要发生在我国东部及东南部地区,2014年出现了多个新发病例地区,发病地区分布比2013年有明显扩散和蔓延;单因素相关性分析显示,病例数与当地距离河流、湖泊、公路、湿地的最小距离呈负相关(P<0.05),与月平均降水量、月平均湿度呈正相关(P<0.05)。结论我国人感染H7N9禽流感病例冬春高发,与自然地理因素和气候因素可能有一定关联。 展开更多

关键词 人感染h7n9禽流感 地理信息系统(GIS) 时空分布 环境因素 相关性分析

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高致病性禽流感病毒H5N1亚型核蛋白NP真核表达载体的构建、表达与鉴定 被引量：5

8

作者 彭海燕 迟莹 +1 位作者 李燕 卞倩 《江苏预防医学》 CAS 2014年第5期6-9,共4页

目的构建高致病性禽流感病毒H5N1亚型核蛋白(NP)的真核表达载体,并在哺乳动物细胞中表达、鉴定其编码重组蛋白NP。方法采用RT-PCR法扩增NP基因,T-A克隆到pMD18-T载体中构建pMD18-T-NP质粒。经PCR、双酶切鉴定后,双酶切阳性质粒与pXJ40-H... 目的构建高致病性禽流感病毒H5N1亚型核蛋白(NP)的真核表达载体,并在哺乳动物细胞中表达、鉴定其编码重组蛋白NP。方法采用RT-PCR法扩增NP基因,T-A克隆到pMD18-T载体中构建pMD18-T-NP质粒。经PCR、双酶切鉴定后,双酶切阳性质粒与pXJ40-HA载体,电泳后胶回收,连接目的片段,构建pXJ40-HA-NP质粒,经PCR、双酶切、测序分析鉴定为阳性的质粒即为NP蛋白的真核表达载体。转染293T细胞后,采用免疫印迹法(Western blot)鉴定重组NP蛋白的表达。结果成功构建了高致病性禽流感病毒H5N1亚型NP基因的真核表达载体,并在293T细胞中成功表达出分子量为56kD的重组蛋白。结论成功构建的NP蛋白真核表达载体为进一步研究其功能,研发高致病性禽流感病毒H5N1亚型的诊断、治疗方法和疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 高致病性禽流感h5n1亚型 核蛋白 克隆 真核表达

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H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及原核表达 被引量：4

9

作者 朱春玉 孙婷婷 +5 位作者 郑方亮 艾海新 朱俊峰 王宁 商玲玲 刘宏生 《辽宁大学学报（自然科学版）》 CAS 2011年第2期143-148,共6页

克隆、表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础.根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切... 克隆、表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础.根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a载体上,经酶切分析及序列测定正确后,鉴定出NS1基因的阳性重组子.阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,通过Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对NS1蛋白进行纯化.结果成功克隆H5N1亚型AIV的NSl基因,其核苷酸序列长度为678 bp,重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,表达产物在上清及包涵体中均有表达.经纯化,目的蛋白纯度高达90%,成功表达纯化出28KD的NS1融合蛋白并鉴定其免疫学活性.成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为进一步研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础. 展开更多

关键词 禽流感病毒h5n1 nS1蛋白 克隆 原核表达 纯化

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AIV H5N1亚型高免卵黄抗体的制备及理化特性研究 被引量：2

10

作者 伍海芽 喻正军 +6 位作者 陈剑锋 宋云峰 周明光 杨俊兴 周红波 金梅林 陈焕春 《动物医学进展》 CSCD 2007年第4期5-8,共4页

应用禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)免疫20周龄的高产来航蛋鸡,制备抗AIV H5N1高免卵黄抗体(IgY)。在比较了3种缓冲液对IgY活性的影响后,确定采用水稀释法提取IgY。同时在模拟的胃肠内环境下对IgY的各种理化性质进行了试验。结果表明,纯化... 应用禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)免疫20周龄的高产来航蛋鸡,制备抗AIV H5N1高免卵黄抗体(IgY)。在比较了3种缓冲液对IgY活性的影响后,确定采用水稀释法提取IgY。同时在模拟的胃肠内环境下对IgY的各种理化性质进行了试验。结果表明,纯化的IgY在pH 2.0和胃蛋白酶终浓度为1.5 mg/mL的环境下,以及在pH 8.0和胰蛋白酶终浓度为2.5 mg/mL的环境下,37℃作用1 h后其ELISA抗体效价均无明显下降;同时,热稳定性试验表明,IgY在60℃以下作用30 min,其ELISA抗体效价也无明显下降;中和试验测得IgY的中和效价为1∶640,具有较好的中和H5N1亚型AIV的能力。以上结果表明,本试验所制备的抗禽流感H5N1亚型高免IgY具有较高的抗体效价和中和效价,同时还具有一定的耐蛋白酶消化的作用,可用于H5N1亚型禽流感的预防和治疗。 展开更多

关键词 AIV h5n1 高免卵黄抗体 理化特性

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表达双拷贝H7N9亚型禽流感病毒HA基因的重组新城疫病毒免疫原性的评价 被引量：3

11

作者 胡增垒 黄雅 +3 位作者 石磊 胡顺林 甘军纪 刘秀梵 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1512-1518,共7页

为评价新城疫病毒(NDV)载体携带的外源基因大小对其免疫原性的影响,将2个拷贝的H7N9亚型禽流感病毒HA基因插入NDV的P与M基因之间非编码区最佳插入位点,构建重组NDV并评价其生物学特性及对鸡的免疫原性。结果显示,表达单、双拷贝HA基因... 为评价新城疫病毒(NDV)载体携带的外源基因大小对其免疫原性的影响,将2个拷贝的H7N9亚型禽流感病毒HA基因插入NDV的P与M基因之间非编码区最佳插入位点,构建重组NDV并评价其生物学特性及对鸡的免疫原性。结果显示,表达单、双拷贝HA基因的重组NDV与亲本株在鸡胚中的复制水平均相似,而携带双拷贝HA基因使重组NDV诱导鸡产生的NDV抗体显著下降;表达双拷贝HA基因的重组NDV的HA蛋白表达量明显提高,但其诱导鸡产生的H7N9血凝抑制、IgG抗体水平均与表达单拷贝HA基因的重组NDV相当。结果表明,在NDV的P和M基因之间插入双拷贝HA基因能够显著提高HA蛋白表达量,但却使重组NDV在鸡体内的复制能力下降,而不能提高NDV载体疫苗诱导机体产生的H7N9特异性抗体应答的水平。本研究对NDV疫苗载体的构建和优化具有重要参考意义。 展开更多

关键词 新城疫病毒 疫苗载体 载体容量 免疫原性 h7n9亚型禽流感病毒 hA基因

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H5N1亚型禽流感病毒NS1基因截短体的克隆与原核表达 被引量：3

12

作者 郑方亮 朱春玉 +7 位作者 商玲玲 马杰良 孙婷婷 艾海新 朱俊峰 段艳婷 朱应 刘宏生 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期1-6,共6页

禽流感病毒H5N1 NS1蛋白是一种非结构蛋白,在病毒感染过程中发挥着重要的作用。构建基因截短的重组蛋白,可为进一步研究NS1不同结构域与宿主蛋白间的相互作用奠定基础。在成功克隆禽流感病毒H5N1全长NS1基因并测序的基础上,将部分截短... 禽流感病毒H5N1 NS1蛋白是一种非结构蛋白,在病毒感染过程中发挥着重要的作用。构建基因截短的重组蛋白,可为进一步研究NS1不同结构域与宿主蛋白间的相互作用奠定基础。在成功克隆禽流感病毒H5N1全长NS1基因并测序的基础上,将部分截短基因序列克隆到表达载体pET28a(+)上,构建基因截短的重组表达质粒pET28a-NS1-RBD和pET28a-NS1-ED,转化大肠埃希菌BL21(DE3),阳性重组质粒经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,然后利用Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对重组蛋白进行纯化,并通过Western Blotting进一步确认NS1及截短体蛋白的表达。结果表明,实验成功构建禽流感病毒H5N1亚型的NS1蛋白截短体,并在大肠埃希菌中高效表达,这为进一步研究NS1蛋白不同结构域与宿主蛋白的相互作用提供了实验材料,为深入研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础。 展开更多

关键词 禽流感病毒h5n1 nS1 截短体 原核表达 纯化

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抗禽流感病毒H5N1分泌型IgA在中国仓鼠卵巢细胞中的表达 被引量：1

13

作者 李存 张宝中 +10 位作者 安小平 米志强 刘大斌 姜焕焕 潘博 王盛 陈斌 黄芬 王娟 王晓娜 童贻刚 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期219-225,共7页

分泌型IgA(SIgA)在机体的粘膜免疫中具有重要作用,在外分泌道中比单体IgA和IgG抗体具有更好的抗感染活性。为了表达抗禽流感病毒H5N1人-鼠嵌合分泌型IgA抗体,首先以本室先前构建的稳定表达IgA的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系为基础,共转... 分泌型IgA(SIgA)在机体的粘膜免疫中具有重要作用,在外分泌道中比单体IgA和IgG抗体具有更好的抗感染活性。为了表达抗禽流感病毒H5N1人-鼠嵌合分泌型IgA抗体,首先以本室先前构建的稳定表达IgA的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞系为基础,共转染分泌片和J链表达质粒,然后用抗生素Zeocin选择阳性克隆细胞,利用倍比稀释的方法筛选分泌SIgA的单克隆细胞,通过Western blotting分析培养上清中SIgA的表达情况。结果表明,在CHO细胞中成功表达了SIgA抗体,上述研究为研制分泌型IgA抗体制剂奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 禽流感病毒h5n1 WESTERn BLOTTInG SIgA抗体

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H5N1亚型禽流感病毒RNA聚合酶PB1_P亚基片段的表达、纯化和结晶 被引量：1

14

作者 范克伟 庞海 +2 位作者 陈吉龙 黄志勇 吴德峰 《家畜生态学报》 北大核心 2012年第2期31-36,共6页

根据GenBank中H5N1亚型禽流感病毒RNA聚合酶PB1基因序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒的PB1_P基因,克隆到原核表达载体pET-28a载体中,经PCR、酶切和测序分析后,鉴定出阳性重组子。将阳性质粒pET-28a/PB1_P... 根据GenBank中H5N1亚型禽流感病毒RNA聚合酶PB1基因序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒的PB1_P基因,克隆到原核表达载体pET-28a载体中,经PCR、酶切和测序分析后,鉴定出阳性重组子。将阳性质粒pET-28a/PB1_P转化大肠杆菌BL21(DE3),用0.5mol/L IPTG,在37℃诱导表达4h,经SDS-PAGE和Western-blot检测,获得重组蛋白PB1_P表达。并经Ni-NTA柱亲和层析与柱层析纯化表达蛋白,采用悬滴气相扩散法对纯化蛋白进行结晶。结果成功构建pET-28a/PB1_P重组质粒,SDS-PAGE结果显示重组蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,Western-blot证明表达的融合蛋白具有良好的免疫原性,经蛋白纯化、初筛结晶,得到PB1_P重组蛋白初筛晶体,为深入研究流感病毒聚合酶的生物学功能、开发新型H5N1亚型禽流感病毒检测试剂盒奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 流感病毒h5n1 PB1_P 克隆 表达纯化 蛋白结晶

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湖南省2006-2009年人感染高致病性禽流感病毒（H5N1）分子特征研究 被引量：1

15

作者 黄一伟 董丽波 +7 位作者 李俊华 刘运芝 高立冬 张红 陈长 胡世雄 李芳彩 舒跃龙 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期709-715,共7页

目的分析湖南省2006--2009年4例人感染高致病性禽流感病例感染病毒的可能来源、基因重配情况以及分子特征。方法鸡胚分离核酸检测H5N1病毒阳性标本，获得高致病性H5N1病毒，对病毒进行全基因组序列测定，采用BLAST和MEGA4．0进行同源性... 目的分析湖南省2006--2009年4例人感染高致病性禽流感病例感染病毒的可能来源、基因重配情况以及分子特征。方法鸡胚分离核酸检测H5N1病毒阳性标本，获得高致病性H5N1病毒，对病毒进行全基因组序列测定，采用BLAST和MEGA4．0进行同源性比对、基因进化分析和各基因分子特征分析。结果4株病毒的基因片段均为禽源，并未发现与人季节性流感病毒之间发生重配，且与当地禽类中分离的病毒高度同源。全基因组进化树分析显示，4株病毒在分支2．3．4中，2株为基因型V、2株为新的基因型。分子特征分析显示，4株病毒的血凝素（HA）分子裂解位点均为PLRERRKR／G，均出现A160T位点突变，神经氨酸酶（NA）分子49～68位均出现20个氨基酸（aa）缺失，非结构蛋白1（NS1）分子80～84位均出现5个aa的缺失。在HA分子大部分位点，4株病毒仍然表现出与禽类受体的亲和性，HN／I／09和HN／2／09出现可能使病毒对α-2，6连接的唾液酸人类受体的亲和性增强的T1921突变。HN／1／08的PB2基因出现增加小鼠致病力的D701N改变。耐药性基因片段分析显示，4株病毒对金刚烷胺和奥司他韦均敏感。结论2006—2009年湖南省4株人感染高致病性禽流感病毒（H5N1）为禽源，但存在多种基因型，而且发生了部分位点的突变： 展开更多

关键词 禽流感病毒h5n1 基因特性

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中国南方地区3株H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因特性 被引量：1

16

作者 房师松 何建凡 +3 位作者 程小雯 吕星 逯建华 张顺祥 《中国热带医学》 CAS 2007年第10期1747-1748,1752,共3页

目的研究中国南方地区H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因分子特征。方法从Genebank中下载中国南方地区3株H5N1亚型人禽流感病毒和其他国家或地区的16株代表性H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因序列,利用生物信息学软件DNASTAR 5.0进行核酸... 目的研究中国南方地区H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因分子特征。方法从Genebank中下载中国南方地区3株H5N1亚型人禽流感病毒和其他国家或地区的16株代表性H5N1亚型人禽流感病毒血凝素基因序列,利用生物信息学软件DNASTAR 5.0进行核酸同源性分析,用MEGA 3.1进行核酸和氨基酸序列比对和进化树分析。结果中国南方3株H5N1亚型人禽流感病毒HA蛋白的重链区和轻链区连接肽的序列为LRERRR-KR,与动物分离的高致病性H5N1亚型禽流感病毒和东南亚地区人禽流感病毒的连接肽相比,减少1个碱性氨基酸;共有8个潜在的糖基化位点,抗原决定簇位点有其独特的特征。基因进化树表明中国南方3株H5N1亚型人禽流感病毒HA基因位于单一的进化簇,与动物来源的高致病性禽流感病毒HA基因同源性高。结论中国南方3株H5N1亚型人禽流感病毒HA基因分子特征一致,有其显著的独有特点。提示候鸟或其他扩散因素在高致病性H5N1亚型流感病毒HA基因的重配方面扮演了重要的作用。 展开更多

关键词 人禽流感病毒h5n1 基因序列 中国南方

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全球首例人感染高致病性H5N8禽流感病毒基因特征和进化分析 被引量：1

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作者 冯兆民 潘阳 +8 位作者 崔淑娟 石伟先 刘医萌 赵佳琛 卢桂兰 彭晓旻 张代涛 杨鹏 王全意 《国际病毒学杂志》 2021年第6期480-484,共5页

目的分析全球首例人感染高致病性H5N8禽流感病毒基因进化及变异位点,为高致病性H5N8禽流感病毒的风险评估提供科学依据。方法在GISAID数据库下载H5N8禽流感病毒全基因组序列,利用MEGA软件最大似然法构建基因进化树,分析基因组的关键性... 目的分析全球首例人感染高致病性H5N8禽流感病毒基因进化及变异位点,为高致病性H5N8禽流感病毒的风险评估提供科学依据。方法在GISAID数据库下载H5N8禽流感病毒全基因组序列,利用MEGA软件最大似然法构建基因进化树,分析基因组的关键性变异位点。结果通过基因进化分析,全球首例人感染H5N8禽流感病毒属于H52.3.4.4 b分支;该病毒基因组和A/chicken/Astrakhan/2171-1/2020、A/chicken/Astrakhan/321-10/2020和A/chicken/Astrakhan/321-06/2020等病毒基因组相似度最高(99%~100%);HA基因的受体结合位点222-224位氨基酸为QRG(H5编码),病毒更加倾向结合禽α-2,3唾液酸受体;在PB2基因上未出现E627K、D701N等哺乳动物适应性氨基酸突变位点;NA和M2基因上没有出现对神经氨酸酶抑制剂和金刚烷胺类药物的耐药性突变,对抗病毒药物仍具有敏感性。结论目前的高致病性H5N8禽流感病毒尚未适应人,不具备人传人的能力,但仍要密切监测H5N8禽流感病毒的基因组变异。 展开更多

关键词 高致病性h5n8禽流感病毒 基因进化 变异

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人源H5N1禽流感病毒血凝素分子遗传变异特征分析 被引量：1

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作者 张继荣 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期145-149,共5页

从GenBank获取已公布的人及相应国家禽感染的H5N1禽流感病毒HA核酸和蛋白序列,用生物软件Clust-alX1.83和MEGA4.0对HA基因序列和蛋白分析,构建HA核苷酸遗传进化树。结果表明,HA蛋白上再次出现既能与人又能与禽受体特异性结合的QNG;东南... 从GenBank获取已公布的人及相应国家禽感染的H5N1禽流感病毒HA核酸和蛋白序列,用生物软件Clust-alX1.83和MEGA4.0对HA基因序列和蛋白分析,构建HA核苷酸遗传进化树。结果表明,HA蛋白上再次出现既能与人又能与禽受体特异性结合的QNG;东南亚和东亚人感染毒株亲缘关系密切,西亚、南亚和非洲人感染毒株遗传距离近;进化树组成和HA蛋白关键位点氨基酸的变异,揭示多数国家的人感染的毒株与当地禽感染毒株高度同源,具有地域性特征,部分国家之间存在着病毒扩散现象。 展开更多

关键词 禽流感h5n1病毒 血凝素hA 遗传 变异

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H5N1高致病性人禽流感DNA疫苗表达质粒的构建及其免疫原性 被引量：1

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作者 王飞 朱庆三 +2 位作者 金宁一 胡宁宁 李霄 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期286-289,共4页

目的构建H5N1高致病性人禽流感DNA疫苗表达质粒,并观察其免疫原性。方法分析H5N1人禽流感病毒HA基因的进化关系,人工合成人禽流感病毒HA基因(包含多数H5N1人禽流感病毒共有序列),构建含细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA4)和HA融合基因的真... 目的构建H5N1高致病性人禽流感DNA疫苗表达质粒,并观察其免疫原性。方法分析H5N1人禽流感病毒HA基因的进化关系,人工合成人禽流感病毒HA基因(包含多数H5N1人禽流感病毒共有序列),构建含细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA4)和HA融合基因的真核表达质粒pVAX-CLHA及HA基因的真核表达质粒pVAX-HA,经酶切及测序鉴定正确后,转染293-T细胞,经RT-PCR法检测转染细胞中HA基因mRNA的转录水平,间接免疫荧光法(IFA)检测其表达;分别以质粒pVAX-CLHA及pVAX-HA免疫BALB/c小鼠,测定血清HI抗体效价。结果重组DNA疫苗表达质粒pVAX-CLHA和pVAX-HA经酶切及测序证明构建正确,转染的293-T细胞可检测到目的基因的转录及蛋白的表达;3次免疫后均能诱导BALB/c小鼠产生HI抗体,pVAX-CLHA诱导的HI抗体高于pVAX-HA。结论已成功构建了含H5N1HA及CTLA4融合基因的DNA疫苗表达质粒,其对小鼠具有良好的免疫效果,为H5N1高致病性人禽流感DNA疫苗的开发奠定了基础。 展开更多

关键词 高致病性人禽流感病毒 h5n1亚型 DnA疫苗 免疫原性

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禽流感病毒H5N1血凝素基因适应性进化过程中的关键位点突变规律研究

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作者 彭小川 靳远 +5 位作者 胡明达 周江林 周静 岳俊杰 任洪广 梁龙 《生物技术通讯》 CAS 2019年第1期1-9,共9页

目的:寻找导致禽流感病毒H5N1血凝素(HA)适应性进化的关键突变,建立氨基酸突变评价体系,对突变作用进行评估,印证它们与病毒适应性进化的关联性。方法:计算株频率和枝频率,寻找标记分枝,向根结点回溯寻找HA进化路径上的氨基酸突变。计... 目的:寻找导致禽流感病毒H5N1血凝素(HA)适应性进化的关键突变,建立氨基酸突变评价体系,对突变作用进行评估,印证它们与病毒适应性进化的关联性。方法:计算株频率和枝频率,寻找标记分枝,向根结点回溯寻找HA进化路径上的氨基酸突变。计算各突变位点氨基酸的频率变化、有效变换及高频次突变,基于以上几个因素建立突变评价体系。结果:建立了大规模自动化寻找突变的方法,计算得到HA进化过程中的氨基酸突变435个,通过氨基酸频率图表分析这些突变可以很好地反映病毒适应性进化过程,其中79个突变是有效变换,发生的位点为正选择位点,且多数位点落在HA抗原表位上;29个突变是高频次突变,其中多数也为有效变换,因而与病毒适应性进化密切相关。结论:大规模自动化寻找突变的方法可靠,建立的突变评价体系准确性高,找到的关键突变及位点对实验有很好的指导意义。 展开更多

关键词 禽流感病毒h5n1 血凝素 适应性进化 关键突变 氨基酸频率 有效变换 高频次突变

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