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miR-140-3p靶向AGT5调控鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移及自噬研究
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作者 王忠巧 高妍 司峰志 《生物医学工程与临床》 CAS 2023年第6期776-784,共9页
目的探讨miR-140-3p对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和自噬的影响及其与自噬相关基因5(AGT5)的靶向关系。方法选择人鼻咽癌细胞CNE2细胞、人鼻黏膜上皮细胞HNEpC,根据转染不同质粒分为miR-140-3p组(转染miR-140-3p mimic质粒)、si-miR-140... 目的探讨miR-140-3p对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和自噬的影响及其与自噬相关基因5(AGT5)的靶向关系。方法选择人鼻咽癌细胞CNE2细胞、人鼻黏膜上皮细胞HNEpC,根据转染不同质粒分为miR-140-3p组(转染miR-140-3p mimic质粒)、si-miR-140-3p组(转染miR-140-3p inhibitor质粒)、miR-空白对照(NC)组(转染miR-140-3p mimic空载体)、NC组(转染miR-140-3p inhibitor空载体)、si-miR-140-3p+OE组(转染miR-140-3p inhibitor质粒、过表达AGT5空载体)及si-miR-140-3p+AGT5组(转染miR-140-3p inhibitor质粒、过表达-AGT5质粒)。CCK-8实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力,荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞AGT5 mRNA及miR-106b-5p表达水平,Western blot检测细胞微管关联蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、微管关联蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、AGT5、自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)及p62蛋白表达水平,TargetScan在线网站预测miR-140-3p与AGT5结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与AGT5的靶向关系。结果CNE2细胞miR-140-3p、AGT5蛋白及AGT5 mRNA表达水平明显低于HNEpC细胞(0.21±0.03 vs 0.87±0.11、0.21±0.06 vs 0.87±0.12、0.32±0.05 vs0.74±0.08)(P<0.01)。上调miR-140-3p的CNE2细胞增殖、侵袭及迁移能力降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、AGT5蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平降低(P<0.01);下调miR-140-3p的CNE2细胞增殖、侵袭及迁移能力升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、AGT5蛋白表达水平降低,p62蛋白表达水平升高(P<0.01)。上调AGT5可逆转敲低miR-140-3p对CNE2细胞增殖、侵袭、迁移的促进作用及自噬的抑制作用。miR-140-3p与AGT5具有靶向调控关系。结论miR-140-3p对CNE2细胞增殖、侵袭、迁移具有抑制作用,对自噬具有促进作用,机制可能与正性调控AGT5有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 miR-140-3p 细胞自噬 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 自噬相关基因5
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