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surfactin高产菌株的等离子体诱变及其高通量筛选 被引量:8
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作者 李光 唐小玲 +4 位作者 韦璇 朱学亮 张勇 张乐乐 陈双喜 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期67-72,共6页
利用常压室温等离子体(atmospheric pressure and room temperature plasma,ARTP)方法对枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis E7进行快速诱变,筛选表面活性素(surfactin)高产菌株。采用表观初筛,溶血圈初筛,孔板复筛,多功能酶标仪检测,摇瓶... 利用常压室温等离子体(atmospheric pressure and room temperature plasma,ARTP)方法对枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis E7进行快速诱变,筛选表面活性素(surfactin)高产菌株。采用表观初筛,溶血圈初筛,孔板复筛,多功能酶标仪检测,摇瓶验证相结合的方法提高了筛选通量,加快了筛选进程,构建了高通量诱变筛选surfactin高产菌株的体系,并使用高效液相(high performance liquid chromatography,HPLC)检测方法对产物进行检测。优化处理时间为220 s,获得了遗传稳定的突变菌株Bacillus subtillus SF90-5,其产surfactin能力提高到约0.8 g/L,是原始菌株的5倍。ARTP诱变技术结合高通量筛选体系极大程度减少了工作量,提高了筛选通量,加快了筛选进度,并快速获得了目的菌株,为脂肽类表面活性剂进一步的工艺研究提供了基础。 展开更多
关键词 SURFACTIN 常压室温等离子体 枯草芽孢杆菌 高通量
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常压室温等离子体诱变选育淀粉酶菌株及其酶学特性研究 被引量:3
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作者 童凡 黄家琪 +7 位作者 范坚强 黄仕新 龙腾 吴鹏 何伟 邓小华 陈善义 唐旭 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第20期137-143,共7页
目的:以云南马龙C3F-2016烟叶表面筛选的产淀粉酶菌株为出发菌株,诱变选育高产淀粉酶菌株并研究诱变前后酶学特性。方法:ARTP技术选育菌株后采用3,5-二硝基水杨酸法测定诱变前后菌株产生的淀粉酶酶活力,并探讨不同温度、不同pH、金属离... 目的:以云南马龙C3F-2016烟叶表面筛选的产淀粉酶菌株为出发菌株,诱变选育高产淀粉酶菌株并研究诱变前后酶学特性。方法:ARTP技术选育菌株后采用3,5-二硝基水杨酸法测定诱变前后菌株产生的淀粉酶酶活力,并探讨不同温度、不同pH、金属离子、紫外光对淀粉酶活力的影响。结果:诱变选育出一株酶活力有较大提高且传代稳定的突变株Bacillus koreensis FS-103,其淀粉酶活力达9050 U/mL,较出发菌株提高了90%。高产突变株FS-103所产淀粉酶的最适作用温度为60℃,最适作用pH5.5,在40~50℃和pH5~6之间具有良好的稳定性,Ca^(2+)、Mg^(2+)对淀粉酶活性具有促进作用,紫外照射对淀粉酶活力影响减弱。结论:此诱变选育产淀粉酶菌株的方法可行,为该类菌株进行酶制剂的研究与开发奠定理论基础。 展开更多
关键词 淀粉酶 韩国芽孢杆菌 常压室温等离子体(artp) 诱变选育 酶学特性
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叶绿素合成缺陷型小球藻突变株的选育及其蛋白产能和品质评价
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作者 陈霄 王百龙 魏东 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1247-1259,共13页
本研究旨在利用常压室温等离子体(atmospheric pressure room temperature plasma, ARTP)诱变技术构建叶绿素合成缺陷型凯式小球藻突变株,筛选出极低叶绿素、适用于发酵生产蛋白质的新藻种。首先经优化诱变处理时间后建立了野生型兼养... 本研究旨在利用常压室温等离子体(atmospheric pressure room temperature plasma, ARTP)诱变技术构建叶绿素合成缺陷型凯式小球藻突变株,筛选出极低叶绿素、适用于发酵生产蛋白质的新藻种。首先经优化诱变处理时间后建立了野生型兼养细胞的致死率曲线,在高于95%致死率条件下处理对数早期兼养细胞,基于可视化藻落颜色变化初筛获得4株突变株。随后在摇瓶中异养培养突变株,系统评价了蛋白生产性能,发现在含有30 g/L葡萄糖和5 g/L NaNO3的Basal培养基中,突变株P. ks4表现最优,蛋白含量及产率分别为39.25%干重及1.15g/(L·d),氨基酸评分达101.34,叶绿素a含量下降98.78%且不含叶绿素b,含有叶黄素0.62 mg/g而使藻体呈金黄色。本研究为微藻替代蛋白的发酵生产提供了高性能、高品质的新种质P. ks 4。 展开更多
关键词 凯氏小球藻 常压室温等离子体 叶绿素 蛋白质 氨基酸
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高温淀粉酶高产菌株的ARTP诱变选育及发酵条件优化 被引量:3
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作者 张晋 宇海萍 +1 位作者 马磊磊 冯志强 《食品科技》 CAS 北大核心 2021年第8期22-26,共5页
利用常压室温等离子体(ARTP)诱变仪对产高温淀粉酶重组毕赤酵母进行诱变处理,并通过台盼蓝平板显色法初筛出产酶优势菌株,再通过摇瓶复筛选育出一株高温淀粉酶高产菌株A28,其酶活力达到1165 U/mL,较初始菌株酶活力提高37%。并对该菌株... 利用常压室温等离子体(ARTP)诱变仪对产高温淀粉酶重组毕赤酵母进行诱变处理,并通过台盼蓝平板显色法初筛出产酶优势菌株,再通过摇瓶复筛选育出一株高温淀粉酶高产菌株A28,其酶活力达到1165 U/mL,较初始菌株酶活力提高37%。并对该菌株的发酵周期、接种量、诱导温度及甲醇添加量进行优化,得到最佳发酵时长为7 d、接种量为8%、诱导温度为26 ℃、甲醇添加量为1%/d,在该条件下,发酵酶活达到1835 U/mL。在连续10代的传代培养中,其酶活力保持在1830 U/mL左右,具有重要的工业应用价值。 展开更多
关键词 常压室温等离子体 高温淀粉酶 发酵优化 毕赤酵母
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常压室温等离子体诱变选育高固氮酶活褐球固氮菌 被引量:3
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作者 段赛菲 黄艳娜 +3 位作者 王金斌 束仕元 周茂超 唐雪明 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期194-201,共8页
为增强固氮酶活性以提高现有固氮菌的固氮能力,采用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变技术处理褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)CICC21686,用乙炔还原法筛选具有高固氮酶活性的突变株28s-20,并... 为增强固氮酶活性以提高现有固氮菌的固氮能力,采用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变技术处理褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)CICC21686,用乙炔还原法筛选具有高固氮酶活性的突变株28s-20,并观察该突变株酶活的遗传稳定性;通过梯度温度和pH培养,探究高酶活突变株的生物学活性;采用盆栽试验,探究突变株对玉米植株干重及全氮量的影响。结果表明,复筛获得突变株28s-20的固氮酶活较出发菌株提高了101.72%;经5次传代,证实该菌株具有良好的遗传稳定性;突变株最适生长温度为28℃,培养基初始pH为7.5;与野生株相比,突变株显著增加玉米干重及全氮量,分别提高21.16%和34.36%。诱变高酶活菌株为褐球固氮菌的菌种优化及农业生物固氮提供了技术支持。 展开更多
关键词 常压室温等离子体 褐球固氮菌 固氮酶 乙炔还原法
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1株解淀粉芽胞杆菌的常压室温等离子诱变及其发酵优化
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作者 束仕元 黄艳娜 +2 位作者 段赛菲 周茂超 唐雪明 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2021年第3期37-43,共7页
为提高解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)TXM-A2对镰刀菌的抑菌作用,利用常压室温等离子(Atmospheric Room Temperature Plasma,ARTP)诱变技术处理菌株TXM-A2,以禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)为筛选指示菌,获得1株诱变株A... 为提高解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)TXM-A2对镰刀菌的抑菌作用,利用常压室温等离子(Atmospheric Room Temperature Plasma,ARTP)诱变技术处理菌株TXM-A2,以禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)为筛选指示菌,获得1株诱变株AR7,其对禾谷镰孢菌的抑制率提升了33.15%。经过5次传代培养,该诱变株的遗传稳定性良好。以诱变株的OD 600及无菌滤液对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的抑制作用为检测指标,采用单因素试验优化发酵培养基,最优配方为葡萄糖10 g/L,酵母浸粉25 g/L,NaCl 5 g/L,优化后OD 600由3.250增加至5.543,对尖孢镰刀菌的抑菌直径由2.833 cm增加至3.027 cm。进一步对诱变株进行不同转速条件5 L罐分批发酵,最大活菌数可达1.65×10^(9)cfu/mL。利用ARTP技术筛选的诱变株对镰刀菌有较好拮抗作用,扩大培养后活菌数上升,可为生物防治剂开发提供参考。 展开更多
关键词 解淀粉芽胞杆菌 禾谷镰孢菌 尖孢镰刀菌 常压室温等离子体 抑菌作用 发酵过程优化
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