目的研究黄芪多糖(APS)对H_2O_2所致乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法分离并培养乳鼠心肌细胞72 h后分为:空白对照组、H_2O_2组、APS(20μmol/L、40μmol/L和80μmol/L)+H_2O_2组,每组设10个复孔;给药干预24 h后,MT...目的研究黄芪多糖(APS)对H_2O_2所致乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法分离并培养乳鼠心肌细胞72 h后分为:空白对照组、H_2O_2组、APS(20μmol/L、40μmol/L和80μmol/L)+H_2O_2组,每组设10个复孔;给药干预24 h后,MTT法检测细胞存活率,通过流式细胞术(Flow Cytometry)检测细胞凋亡状况并计算凋亡率;测定细胞中抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]活性和丙二醛(MDA)含量,培养液中心肌酶[谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)]含量,Western blot法检测细胞中NF-κB、caspase-3蛋白表达并进行半定量分析,RT-PCR法检测AKT m RNA、bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果与H_2O_2组比较,APS(40μmol/L、80μmol/L)+H_2O_2组细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低;细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,培养液中AST、CPK、LDH含量显著降低,细胞中caspase-3、NF-κB蛋白表达量显著降低,AKT m RNA和bcl-2 m RNA表达显著上调,Bax m RNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 APS可能通过改善抗氧化酶活性、降低氧化应激损伤、降低NF-κB、caspase-3蛋白表达、上调抗凋亡基因表达并下调促凋亡基因表达、提高bcl-2/Bax表达比值,从而对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞凋亡起抑制作用。展开更多
文摘目的研究黄芪多糖(APS)对H_2O_2所致乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法分离并培养乳鼠心肌细胞72 h后分为:空白对照组、H_2O_2组、APS(20μmol/L、40μmol/L和80μmol/L)+H_2O_2组,每组设10个复孔;给药干预24 h后,MTT法检测细胞存活率,通过流式细胞术(Flow Cytometry)检测细胞凋亡状况并计算凋亡率;测定细胞中抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]活性和丙二醛(MDA)含量,培养液中心肌酶[谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)]含量,Western blot法检测细胞中NF-κB、caspase-3蛋白表达并进行半定量分析,RT-PCR法检测AKT m RNA、bcl-2 m RNA、Bax m RNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果与H_2O_2组比较,APS(40μmol/L、80μmol/L)+H_2O_2组细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低;细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,培养液中AST、CPK、LDH含量显著降低,细胞中caspase-3、NF-κB蛋白表达量显著降低,AKT m RNA和bcl-2 m RNA表达显著上调,Bax m RNA表达显著下调,bcl-2/Bax表达比值显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 APS可能通过改善抗氧化酶活性、降低氧化应激损伤、降低NF-κB、caspase-3蛋白表达、上调抗凋亡基因表达并下调促凋亡基因表达、提高bcl-2/Bax表达比值,从而对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞凋亡起抑制作用。
