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题名番茄根际土尚未培养细菌的分离培养方法探究
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作者
吴晨晨
李怡君
徐双
马荣
韦善君
张晓霞
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机构
中央民族大学生命与环境科学学院
中国农业科学院农业资源与农业区划研究所/农业农村部农业微生物资源收集与保藏重点实验室
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出处
《中国土壤与肥料》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第8期233-242,共10页
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基金
国家重点研发计划(2019YFD1002000)
中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ZDRW202201)
+1 种基金
北京市乡村振兴科技项目(BJXCZX2022)
中央民族大学大学生创新训练计划项目(URTP2021110091)。
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文摘
为探究获得土壤中尚未培养细菌资源的方法,以MS无机盐为基础养分,设置1/100×TSB、1/50×R2A和土壤浸提液(SE)3种低有机营养类型,凝固剂用琼脂(A)或结冷胶(G),得到一组培养基MS+TSG、MS+TSA、MS+R2A和MS+SE,以及在此基础上添加1.5 g/L丙酮酸钠作为抗氧化剂的第二组培养基。用上述8种培养基分离培养健康番茄根际土壤中的细菌,并对各种培养基平板上代表性菌落进行16S rRNA基因分析。结果表明,在MS无机盐和低有机营养组合的培养基平板上,在28℃下培养28 d后可检测到菌落数达1×10^(7)CFU/g土,4种培养基平板上检测到的菌落数量由多到少顺序为MS+SE>MS+TSG>MS+R2A>MS+TSA;在相同的低有机营养条件下,用结冷胶作为凝固剂可获得更多菌落,添加丙酮酸钠为抗氧化剂会显著降低菌落的多样性。鉴定的84个代表性菌落属于34个属的52个种,其中7个(占检测菌株数的8.33%)为可能新种,不同培养基上种丰富度表现为MS+TSA>MS+R2A>MS+TSG>MS+SE。结果说明,采用低有机营养的MS无机盐培养基有利于分离获得土壤中的一些尚未培养细菌。
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关键词
尚未培养微生物
分离培养
番茄
根际土壤
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Keywords
as-yet-uncultured microorganism
isolation and cultivation
tomato
rhizosphere soil
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分类号
S154.3
[农业科学—土壤学]
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题名土壤环境基因组技术及其在新药发现中的应用
被引量:2
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作者
闫珠君
崔晓龙
李铭刚
李一青
彭谦
文孟良
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机构
云南大学教育部微生物资源开放研究重点实验室云南省生物资源保护与利用重点实验室
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出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期1-5,共5页
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基金
国家自然科学基金项目(20362009
30460004
+2 种基金
30460022
20462008)
云南省自然科学基金重点项目(2004C0002Z)资助
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文摘
土壤是微生物最重要的生境,土壤微生物具有极大的多样性。然而传统培养技术只能得到约1%的微生物纯培养,其余都是未被纯培养微生物。利用土壤环境基因组技术,可以把未被纯培养微生物的基因克隆到载体中并在宿主中进行表达,获得比已培养微生物丰富的代谢产物多样性,这为我们发现新颖结构先导化合物以及新药开辟了新的道路。本文介绍应用环境基因组技术构建土壤DNA文库的思路和方法。
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关键词
药物发现
环境基因组
未被纯培养微生物
土壤DNA文库
生物活性物质
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Keywords
Drug discovery
Metagenomics
as-yet uncultured microorganisms
Soil DNA library
Bioactive substance
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分类号
R979.1
[医药卫生—药品]
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