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来源于豆豉的枯草芽孢杆菌MX-6所产纳豆激酶的稳定性研究
被引量：
4
1
作者
满丽莉
向殿军
《中国调味品》
CAS
北大核心
2019年第7期25-28,33,共5页
以中国豆豉中筛选到的1株纤溶酶高产菌株——枯草芽孢杆菌MX-6为研究对象,应用聚合酶链式反应(PCR)成功扩增到1473bp的纤溶酶编码基因aprN,系统进化树结果显示该纤溶酶为纳豆激酶。研究了纳豆激酶对热、pH、金属离子、化学物质、抑制剂...
以中国豆豉中筛选到的1株纤溶酶高产菌株——枯草芽孢杆菌MX-6为研究对象,应用聚合酶链式反应(PCR)成功扩增到1473bp的纤溶酶编码基因aprN,系统进化树结果显示该纤溶酶为纳豆激酶。研究了纳豆激酶对热、pH、金属离子、化学物质、抑制剂和变性剂的稳定性及传代稳定性。结果表明:纳豆激酶在-20,4,30~50℃的热稳定性较好,pH在3~11之间酶活性相对稳定,Mg2+、Ca2+对纳豆激酶具有显著的激活作用,K+、Fe2+对纳豆激酶的稳定性基本无影响,而Mn2+、Zn2+、Cu2+、Al3+、Ba2+有显著的抑制作用,Hg2+导致纳豆激酶完全失活,牛血清蛋白、明胶、蛋白胨能够显著提高纳豆激酶的稳定性,丙二醇、海藻酸钠对纳豆激酶的稳定性基本无影响,而乙醇显著降低纳豆激酶的稳定性。PMSF导致纳豆激酶的活性完全丧失,EDAT和DTT对纳豆激酶的活性基本无影响,10mmol/L的SDS显著降低纳豆激酶的稳定性,说明此纳豆激酶是一种丝氨酸蛋白酶,不是金属酶,不含二硫键,且具有良好的传代稳定性。结果显示该酶的稳定性较好,具有开发为溶栓药物的应用价值,有利于纳豆激酶的工业化应用。
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关键词
纳豆激酶
aprn
基因
克隆
枯草芽孢杆菌
稳定性
下载PDF
职称材料
纳豆激酶基因工程菌的构建及酶活力分析
被引量：
3
2
作者
崔青
钱炳俊
+4 位作者
姚晓敏
季顺利
鲁飞凤
吴静
张建华
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第14期1-8,共8页
纳豆激酶由纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)的aprN基因编码,在体内外具有很强的溶解纤维蛋白活性。利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增B.subtilis natto的aprN基因,并依据B.subtilis的密码子偏好性优化...
纳豆激酶由纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)的aprN基因编码,在体内外具有很强的溶解纤维蛋白活性。利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增B.subtilis natto的aprN基因,并依据B.subtilis的密码子偏好性优化了起始30个氨基酸的密码子,构建了重组表达质粒pHT01-aprN。经限制性酶酶切、PCR扩增和测序验证了其编码的正确性。通过电击法将含有强启动子的pHT01-aprN导入B.subtilis,利用氯霉素抗性筛选获得B.s 168/pHT01-aprN工程菌。经IPTG诱导表达,摇瓶发酵培养最高酶活力为(289.00±3.42)U/mL,是野生菌的3.9倍,酶活力表达稳定性良好。
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关键词
纳豆激酶
aprn
基因
枯草芽孢杆菌
基因
工程菌
酶活力
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职称材料
题名
来源于豆豉的枯草芽孢杆菌MX-6所产纳豆激酶的稳定性研究
被引量：
4
1
作者
满丽莉
向殿军
机构
内蒙古民族大学生命科学学院
内蒙古民族大学农学院
出处
《中国调味品》
CAS
北大核心
2019年第7期25-28,33,共5页
基金
内蒙古自治区自然科学基金资助(2018MS03060)
内蒙古民族大学博士科研启动基金资助(BS403)
内蒙古民族大学实验室开放项目
文摘
以中国豆豉中筛选到的1株纤溶酶高产菌株——枯草芽孢杆菌MX-6为研究对象,应用聚合酶链式反应(PCR)成功扩增到1473bp的纤溶酶编码基因aprN,系统进化树结果显示该纤溶酶为纳豆激酶。研究了纳豆激酶对热、pH、金属离子、化学物质、抑制剂和变性剂的稳定性及传代稳定性。结果表明:纳豆激酶在-20,4,30~50℃的热稳定性较好,pH在3~11之间酶活性相对稳定,Mg2+、Ca2+对纳豆激酶具有显著的激活作用,K+、Fe2+对纳豆激酶的稳定性基本无影响,而Mn2+、Zn2+、Cu2+、Al3+、Ba2+有显著的抑制作用,Hg2+导致纳豆激酶完全失活,牛血清蛋白、明胶、蛋白胨能够显著提高纳豆激酶的稳定性,丙二醇、海藻酸钠对纳豆激酶的稳定性基本无影响,而乙醇显著降低纳豆激酶的稳定性。PMSF导致纳豆激酶的活性完全丧失,EDAT和DTT对纳豆激酶的活性基本无影响,10mmol/L的SDS显著降低纳豆激酶的稳定性,说明此纳豆激酶是一种丝氨酸蛋白酶,不是金属酶,不含二硫键,且具有良好的传代稳定性。结果显示该酶的稳定性较好,具有开发为溶栓药物的应用价值,有利于纳豆激酶的工业化应用。
关键词
纳豆激酶
aprn
基因
克隆
枯草芽孢杆菌
稳定性
Keywords
nattokinase
aprn
gene
clone
Bacillus subtilis
stability
分类号
TS201.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
纳豆激酶基因工程菌的构建及酶活力分析
被引量：
3
2
作者
崔青
钱炳俊
姚晓敏
季顺利
鲁飞凤
吴静
张建华
机构
上海交通大学农业与生物学院陆伯勋食品安全研究中心
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第14期1-8,共8页
基金
国家自然科学基金面上项目(31171737)
文摘
纳豆激酶由纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)的aprN基因编码,在体内外具有很强的溶解纤维蛋白活性。利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增B.subtilis natto的aprN基因,并依据B.subtilis的密码子偏好性优化了起始30个氨基酸的密码子,构建了重组表达质粒pHT01-aprN。经限制性酶酶切、PCR扩增和测序验证了其编码的正确性。通过电击法将含有强启动子的pHT01-aprN导入B.subtilis,利用氯霉素抗性筛选获得B.s 168/pHT01-aprN工程菌。经IPTG诱导表达,摇瓶发酵培养最高酶活力为(289.00±3.42)U/mL,是野生菌的3.9倍,酶活力表达稳定性良好。
关键词
纳豆激酶
aprn
基因
枯草芽孢杆菌
基因
工程菌
酶活力
Keywords
nattokinase
aprn
gene
Bacillus subtilis
enzyme activity
engineered bacteria
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
来源于豆豉的枯草芽孢杆菌MX-6所产纳豆激酶的稳定性研究
满丽莉
向殿军
《中国调味品》
CAS
北大核心
2019
4
下载PDF
职称材料
2
纳豆激酶基因工程菌的构建及酶活力分析
崔青
钱炳俊
姚晓敏
季顺利
鲁飞凤
吴静
张建华
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
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职称材料
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