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抗菌肽Temprine-La(FS)抑制2型猪链球菌生物被膜形成的研究 被引量：5
1
作者 张欣 潘晨浩 +9 位作者 赵瑞利 姜轩 金天明 赵洋 马吉飞 于恩远 李留安 张振洲 李桂霞 李瑞忠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第1期324-337,共14页
试验旨在研究抗菌肽Temprine-La(S)(T-La(S))、Temprine-La(FS)(T-La(FS))、RGD-T-La(S)和RGD-T-La(FS)对2型猪链球菌(SS2)生物被膜形成的抑制作用。通过结晶紫染色法(CV)检测SS2生物被膜形成能力;微量稀释法测定抗菌肽对SS2生物被膜的... 试验旨在研究抗菌肽Temprine-La(S)(T-La(S))、Temprine-La(FS)(T-La(FS))、RGD-T-La(S)和RGD-T-La(FS)对2型猪链球菌(SS2)生物被膜形成的抑制作用。通过结晶紫染色法(CV)检测SS2生物被膜形成能力;微量稀释法测定抗菌肽对SS2生物被膜的最小生物被膜抑菌浓度(MBIC)和最小生物被膜杀菌浓度(MBEC);结晶紫染色法和扫描电镜(SEM)检测抗菌肽对SS2生物被膜形成的影响;XTT法检测抗菌肽对SS2生物被膜代谢活性的影响;苯酚硫酸法检测抗菌肽对SS2生物被膜胞外多糖含量的影响;建立猪链球菌-斑马鱼感染模型,HE染色法观察T-La(FS)对斑马鱼脑组织病理变化的影响;实时荧光定量PCR法分析抗菌肽对SS2生物被膜相关基因及对斑马鱼炎性细胞因子基因转录水平的影响。结果显示,SS2具有良好的生物被膜形成能力;T-La(S)、RGD-T-La(S)、T-La(FS)和RGD-T-La(FS)对SS2生物被膜的MBIC分别为31.3、15.6、7.8和15.6μg/mL;MBEC分别为62.6、31.2、15.6和31.2μg/mL;结晶紫染色结果表明,抗菌肽对SS2生物被膜的形成有抑制作用;扫描电镜结果显示,抗菌肽使SS2生物被膜中的细菌数量和生物被膜的形态发生明显变化,细胞外基质大量减少;XTT法结果显示,抗菌肽可显著降低SS2生物被膜的代谢活性;苯酚硫酸法结果显示,抗菌肽能有效抑制SS2生物被膜合成胞外多糖;实时荧光定量PCR结果表明,抗菌肽作用后降低了SS2生物被膜基因的转录水平;T-La(FS)作用后TLR2、MyD88及促炎性细胞因子基因的转录水平显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01),抗炎性细胞因子基因的转录水平显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01)。抗菌肽主要通过影响生物被膜相关基因转录水平和阻断胞外多糖的合成与分泌来抑制SS2生物被膜的形成,其中T-La(FS)可能通过抑制TLR2信号通路中TLR2和MyD88分子表达,抑制炎性细胞因子的释放,减轻脑膜炎的炎性反应。 展开更多
关键词 抗菌肽temprine-la(fs) 2型猪链球菌 生物被膜 斑马鱼 TLR2 MYD88
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抗菌肽Temprine-La(FS)抑制耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌生物被膜形成的研究 被引量：1
2
作者 张欣 潘晨浩 +6 位作者 赵瑞利 姜轩 赵洋 马吉飞 于恩远 李留安 张振洲 《天津农学院学报》 CAS 2021年第1期24-33,共10页
为了探究抗菌肽Temprine-La(FS)对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP)生物被膜形成的影响,本试验以Temprine-La为基序进行氨基酸改造合成新的抗菌肽T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(S)、RGD-T-La(FS)以提高抗菌活性。通过微量稀释法测定多肽... 为了探究抗菌肽Temprine-La(FS)对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP)生物被膜形成的影响,本试验以Temprine-La为基序进行氨基酸改造合成新的抗菌肽T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(S)、RGD-T-La(FS)以提高抗菌活性。通过微量稀释法测定多肽对MRSP生物被膜的最小抑菌浓度(MBIC);结晶紫染色法(CV)检测多肽对MRSP生物被膜形成能力的影响;XTT法检测多肽对MRSP生物被膜代谢活性的影响、多肽对MRSP生物被膜胞外多糖含量的影响;扫描电镜(SEM)检测多肽对MRSP生物被膜形成的影响;荧光定量PCR法(q-PCR)分析多肽对MRSP生物被膜相关基因转录水平的影响。结果显示,T-La(S)、RGD-T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(FS)对MRSP的MBIC分别为:31.3、15.6、7.8、15.6μg/mL;结晶紫染色法(CV)表明T-La(S)、RGD-T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(FS)对MRSP生物被膜形成有抑制作用;扫描电镜(SEM)结果显示多肽使MRSP生物被膜中细胞外基质大量减少,菌体裸露在物体表面;多肽可以显著降低MRSP生物被膜的代谢活性,抑制被膜菌的粘附作用;多肽能有效抑制MRSP生物被膜合成胞外多糖;荧光定量PCR结果表明,多肽作用后能够降低MRSP生物被膜相关基因的转录水平。因此,多肽主要通过影响生物被膜相关基因转录水平和阻断胞外多糖的合成与分泌来抑制MRSP生物被膜的形成。 展开更多
关键词 抗菌肽temprine-la(fs) 耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP) 生物被膜 相关基因
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