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题名农杆菌介导法将反义蜡质基因转入杂交稻亲本
被引量：4
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作者
刘清
萧浪涛
吴顺
朱允华
刘素纯
史齐
康朵兰
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机构
湖南省植物激素与生长发育重点实验室
南华大学生命科学与技术学院
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出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
2006年第4期500-505,共6页
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基金
教育部青年骨干教师基金2000(科教司65号)
长沙市科技局攻关项目资助.
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文摘
通过农杆菌介导法将反义蜡质基因导入特青(OryzasativaL.subsp.indica)和广粳1号(OryzasativaL.subsp.japonica)这两个杂交稻亲本的愈伤组织中,获得了经PCR检测证明外源基因已整合进植物基因组中的再生植株,其中含潮霉素抗性基因的植株有6株,但仅有2株能够扩增出反义蜡质基因的特异条带,其原因可能是在转基因植株中出现了基因丢失或沉默现象。试验表明,粳型稻广粳1号的不同外植体(成熟胚、幼胚、幼穗、花药)的愈伤诱导率比特青的高,且随着继代时间的延长,不同基因型水稻诱导的愈伤之间的转化率存在着极显著性差异(P<0.01);经过转染的水稻愈伤在一定的筛选压力下会出现“逃逸”现象,抗性筛选后成活愈伤PCR检测发现广粳1号和特青的愈伤转化率只有44.4%和29.4%;不同凝固剂对愈伤诱导的质量有着明显的影响,植物凝胶作凝固剂比琼脂作凝固剂时的愈伤褐化率低。
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关键词
反义蜡质基因
杂交稻
外源基因
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Keywords
anti-sense waxy. gene, Hybrid flee, Exogenous gene
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分类号
S511
[农业科学—作物学]
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题名转反义蜡质基因水稻亲本后代性状分析
被引量：1
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作者
刘清
吴顺
沈革志
彭琼
刘桃李
程鹏
萧浪涛
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机构
湖南农业大学湖南省植物激素与生长发育重点实验室
上海市农业科学院作物研究所
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出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第9期1195-1200,共6页
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基金
国家自然科学基金项目(编号:30600049)
湖南省科技应用基础研究计划重点项目(编号:2007FJ3003)
湖南省科技计划项目(编号:06FJ3079)资助~~
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文摘
以单质粒转化的粳稻广粳一号和双质粒共转化的籼稻01早5202所获得的转反义蜡质基因水稻后代为供试材料,通过潮霉素抗性、PCR检测等手段分析了外源基因的遗传分离特性,同时,还分析了转基因材料的直链淀粉含量、waxy蛋白含量的变化特性。结果表明,无论是采用标记基因(hpt)与目的基因(Anti-sense waxy)连锁的单质粒转化,还是采用双质粒共转化,其供试的后代植株材料都发生了外源基因分离现象,且转基因植株材料的直链淀粉含量都有所下降,有些单株的直链淀粉含量已降至10%(质量百分比)以下,远低于对照(其直链淀粉含量为22.04%);SDS-PAGE检测结果显示,供试的转基因材料的waxy蛋白的含量与对应的直链淀粉含量呈正相关性。
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关键词
反义蜡质基因
水稻
直链淀粉
分离
waxy蛋白
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Keywords
anti-sense waxy gene
rice
amylose content
segregation
waxy protein
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分类号
S511
[农业科学—作物学]
S831.2
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题名反义Waxy基因共转化籼型杂交稻亲本的初步研究
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作者
程鹏
刘清
彭琼
赵严伟
龚晓
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机构
湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室
湖南省作物种质创新与资源利用重点实验室
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出处
《湖南农业科学》
2010年第8期1-3,共3页
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基金
湖南省科技计划项目(06FJ3079)
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文摘
以籼型杂交稻亲本II32B为供试材料,对根癌农杆菌共转化过程中影响转化效率的因素进行了研究。结果表明:在诱导培养基和分化培养基中附加NAA、KT和6-BA的激素配比可以改进愈伤组织质量,对愈伤组织的形成和苗的分化起决定作用;农杆菌OD600为0.8,侵染时间为10 min是II32B合适的转化参数;潮霉素浓度为30 mg/L是理想的筛选浓度;部分植株经PCR检测为阳性,证明外源目的基因已经整合到转基因水稻的基因组中,从而建立适合于供试水稻材料的遗传转化体系。
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关键词
籼稻
共转化
反义蜡质基因
激素配比
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Keywords
indica rice
co-transformation
anti-sense waxy gene
hormone ratio
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分类号
S511
[农业科学—作物学]
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