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Alk-SMase基因敲除小鼠的饲养繁殖及鉴定 被引量：1
1
作者 陈橼 吴金东 +6 位作者 钱俊 朱顺星 邵冰峰 张素青 何向锋 杨俐萍 张一心 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期183-187,共5页
目的 :为了繁育和鉴定碱性鞘磷脂酶(Alkaline sphingomyelinase,alk-SMase)基因敲除小鼠,将引进的基因敲除小鼠进行饲养繁殖,杂合子、纯合子用于继续保种。方法:对其幼鼠剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定;取alkSMase表达组... 目的 :为了繁育和鉴定碱性鞘磷脂酶(Alkaline sphingomyelinase,alk-SMase)基因敲除小鼠,将引进的基因敲除小鼠进行饲养繁殖,杂合子、纯合子用于继续保种。方法:对其幼鼠剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定;取alkSMase表达组织做HE染色进行形态学比较。结果 :对引进小鼠已成功饲养和繁殖,并得到纯合alk-SMase基因缺失型小鼠。结论:正确的饲养、繁殖及基因鉴定方法对于基因敲除小鼠的获得和保种具有重要的意义。 展开更多
关键词 alk-smase 基因敲除小鼠 PCR
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碱性鞘磷脂酶对Caco-2细胞胆固醇吸收的影响及机制研究 被引量：2
2
作者 邹军 冯丹 +2 位作者 吕小飞 苏东房 凌文华 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期19-22,共4页
目的探讨碱性鞘磷脂酶(Alk-SMase)对Caco-2细胞胆固醇吸收的影响以及可能机制。方法建立Caco-2细胞单层模型,用100 units/L Alk-SMase孵育细胞24 h后,再用[14C]-胆固醇微胶溶液孵育细胞2 h。用液闪计数仪(LSC)检测细胞胆固醇吸收量,薄... 目的探讨碱性鞘磷脂酶(Alk-SMase)对Caco-2细胞胆固醇吸收的影响以及可能机制。方法建立Caco-2细胞单层模型,用100 units/L Alk-SMase孵育细胞24 h后,再用[14C]-胆固醇微胶溶液孵育细胞2 h。用液闪计数仪(LSC)检测细胞胆固醇吸收量,薄层层析法分离膜磷脂、LSC检测细胞膜[14C]-鞘磷脂含量。结果 [14C]-胆固醇在Caco-2细胞中的吸收呈时间依赖性增加。Alk-SMase能够明显降低Caco-2细胞胆固醇吸收,并减少Caco-2细胞膜鞘磷脂含量,100 mu/ml Alk-SMase能够引起80%[14C]-标记的膜鞘磷脂水解。结论 Alk-SMase能够抑制Caco-2细胞胆固醇吸收,这可能与其水解膜鞘磷脂有关。 展开更多
关键词 碱性鞘磷脂酶 鞘磷脂 胆固醇 CACO-2细胞
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碱性鞘磷脂酶基因剔除鼠的基因型和表型特征 被引量：1
3
作者 杨俐萍 朱顺星 +8 位作者 闵娅兰 刘焕良 钱红燕 陈橼 朱菁烨 邵晶晶 雒润华 李静 段瑞冬 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期495-499,共5页
目的为研究alk-SMase在结肠癌发生发展中的作用提供动物模型的实验数据。方法将野生型(WT,+/+)、杂合子(+/-)、纯合子(KO,-/-)alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鉴定;取其肝肠组织进行HE染色、激光共聚焦分析以及质谱仪检... 目的为研究alk-SMase在结肠癌发生发展中的作用提供动物模型的实验数据。方法将野生型(WT,+/+)、杂合子(+/-)、纯合子(KO,-/-)alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鉴定;取其肝肠组织进行HE染色、激光共聚焦分析以及质谱仪检测,观察和分析不同基因型鼠的表型特征。结果与WT和杂合子比较,KO鼠显示:外观和体重无明显区别;基因型鉴定出现一个条带,其分子量为247 bp;小肠黏膜明显增厚,但alk-SMase表达减弱;质谱分析显示在肠道和肝脏中的鞘磷脂含量增高,1-磷酸鞘氨醇含量增加,而神经酰胺含量降低。结论 alk-SMase KO鼠有明显特征,但其外观和体重与其他基因型比较没有明显区别,为研究alk-SMase的生物功能提供了一个理想的动物模型。 展开更多
关键词 碱性鞘磷脂酶 基因剔除小鼠 基因型 表型
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