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高产乙醇肺炎克雷伯adhE缺失菌株构建及对其产乙醇能力的影响
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作者 范政 付彤彤 +3 位作者 陈雨晨 李周霏 刘洪伯 袁静 《遵义医科大学学报》 2024年第5期442-446,453,共6页
目的探究基因adhE缺失对高产乙醇肺炎克雷伯菌株生长能力,乙醇脱氢酶活性及产乙醇能力的影响。方法以高产乙醇肺炎克雷伯菌株TH1为背景,利用温敏型质粒介导的同源重组技术构建基因adhE的缺失菌株。通过PCR扩增获取基因adhE片段并构建于p... 目的探究基因adhE缺失对高产乙醇肺炎克雷伯菌株生长能力,乙醇脱氢酶活性及产乙醇能力的影响。方法以高产乙醇肺炎克雷伯菌株TH1为背景,利用温敏型质粒介导的同源重组技术构建基因adhE的缺失菌株。通过PCR扩增获取基因adhE片段并构建于pGEM-Teasy表达载体获得回补质粒,导入ΔadhE缺失菌株得到回补菌株,并将pGEM-Teasy空质粒导入高产乙醇肺炎克雷伯野生菌株及ΔadhE缺失菌株作为空载对照。在液体LB培养基中测定各菌株的生长曲线,使用试剂盒检测各菌株的乙醇脱氢酶活性并通过顶空法检测各菌株的乙醇产量。结果使用PCR技术明确ΔadhE缺失菌株与相关回补菌株构建成功。基因adhE缺失后,厌氧条件下高产乙醇肺炎克雷伯菌株的生长速度显著降低,而回补菌株的生长速度显著升高(P<0.05)。同时,相比于野生型菌株,ΔadhE缺失菌株的乙醇脱氢酶活性与乙醇产量显著降低,而回补菌株的乙醇脱氢酶活性与乙醇产量恢复到了野生型菌株的水平(P<0.05)。结论基因adhE的缺失减缓了高产乙醇肺炎克雷伯菌株厌氧条件下的生长速度,同时显著降低了高产乙醇肺炎克雷伯菌株的产乙醇能力。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 基因敲除 乙醇脱氢酶e 乙醇
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嗜热乙醇杆菌中醇脱氢酶E的功能与调控 被引量：1
2
作者 彭惠 毛忠贵 +1 位作者 武国干 邵蔚蓝 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期84-87,共4页
对嗜热乙醇杆菌中的醇脱氢酶E(alcohol dehydrogenase E,AdhE)进行了克隆、表达和鉴定,证明先前报道的醛脱氢酶其实是AdhE。对AdhE在乙醇代谢中的功能与调控进行了研究。通过分析测定AdhE的酶学性质、AdhE在嗜热乙醇杆菌的不同生长时期... 对嗜热乙醇杆菌中的醇脱氢酶E(alcohol dehydrogenase E,AdhE)进行了克隆、表达和鉴定,证明先前报道的醛脱氢酶其实是AdhE。对AdhE在乙醇代谢中的功能与调控进行了研究。通过分析测定AdhE的酶学性质、AdhE在嗜热乙醇杆菌的不同生长时期的表达情况以及AdhE高表达时嗜热乙醇杆菌产乙醇/乙酸的比率变化,证明了AdhE的主要生理功能是促使乙醇产生。分析了嗜热乙醇杆菌在山梨糖(强还原性碳源)、葡萄糖(氧化还原性居中的碳源)和葡糖醛酸(强氧化性碳源)诱导培养下的AdhE表达量,证明氧化还原力是AdhE的表达调控信号之一。 展开更多
关键词 嗜热乙醇杆菌 醇脱氢酶e 功能 调控
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