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免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光法测定动物药中黄曲霉毒素 被引量:42
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作者 刘丽娜 李耀磊 +1 位作者 金红宇 马双成 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1220-1224,共5页
目的采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法测定动物药中黄曲霉毒素,考察该方法在动物药黄曲霉毒素测定中的可行性。并对动物药中黄曲霉毒素污染情况进行筛查,为动物药的监管提供依据。方法样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化... 目的采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法测定动物药中黄曲霉毒素,考察该方法在动物药黄曲霉毒素测定中的可行性。并对动物药中黄曲霉毒素污染情况进行筛查,为动物药的监管提供依据。方法样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化后,利用高效液相色谱-光化学衍生-荧光检测器进行分析测定。对部分动物药,尤其是可能污染黄曲霉毒素的动物药进行加样回收率考察,测定动物药中黄曲霉毒素残留量,并对测定结果进行分析。结果动物药中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的回收率均在70%~120%。16种64批动物药中有6种24批动物药检出了黄曲霉毒素,检出率为37.5%,其中4种13批动物药均出现了超过《中国药典》2015年版限度的现象,不合格率为20.3%。结论免疫亲和净化HPLC柱后光衍生荧光检测法适用于动物药中黄曲霉毒素的测定。动物药的个别品种黄曲霉毒素污染情况较为严重,应尽快完善动物药的质量标准,保障用药安全。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 免疫亲和柱 黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素B2 黄曲霉毒素g1 黄曲霉毒素g2 动物药 风险评估
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素G_1对体外培养人外周血淋巴细胞凋亡影响的研究 被引量:19
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作者 王会艳 孙旭明 +4 位作者 张祥宏 左连富 严霞 王俊灵 王凤荣 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期102-104,共3页
以细胞培养、流式细胞仪DNA含量分析及DNA琼脂糖凝胶电泳方法研究了我国食管癌高发区磁县居民粮食中优势污染霉菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和黄曲霉毒素G1(AFG1)对人淋巴细胞凋亡的影响。流式细胞术(FCM)检... 以细胞培养、流式细胞仪DNA含量分析及DNA琼脂糖凝胶电泳方法研究了我国食管癌高发区磁县居民粮食中优势污染霉菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和黄曲霉毒素G1(AFG1)对人淋巴细胞凋亡的影响。流式细胞术(FCM)检测结果显示,DON、AFG1处理组淋巴细胞出现了典型的亚二倍体凋亡细胞峰,凋亡百分率与毒素作用时间(DON:2~72小时;AFG1:2~24小时)及剂量(DON:50~2000μg/L;AFG1:3.12~2000μg/L)呈正相关关系。DNA琼脂糖凝胶电泳结果表明,DON(1000μg/L)、AFG1(1000μg/L)处理24小时淋巴细胞出现特征性的DNA"Ladder"条带。因此表明,DON、AFG1可诱导和促进体外培养的人外周血淋巴细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 DON 食管癌 黄曲霉毒素g1 淋巴细胞凋亡 镰刀菌
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高效液相色谱-荧光检测法测定沉香中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 被引量:6
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作者 张金星 龚旭东 +2 位作者 周谧 徐丹洋 高慧 《现代药物与临床》 CAS 2021年第1期35-38,共4页
目的建立高效液相色谱–光化学衍生–荧光检测法测定沉香药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。方法采用高效液相色谱法,通过免疫亲和柱提取和净化,荧光检测器检测。Agilent Zorbax Ecilpse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相... 目的建立高效液相色谱–光化学衍生–荧光检测法测定沉香药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。方法采用高效液相色谱法,通过免疫亲和柱提取和净化,荧光检测器检测。Agilent Zorbax Ecilpse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–水(45∶55);体积流量:0.8 m L/min;柱温:30℃;进样盘温度:4℃;荧光激发波长为360 nm,发射波长为450 nm。结果黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2分别在9.3~74.4、3.0~24.0、9.3~74.4、3.5~28.0 pg线性关系良好,r均大于0.998 0;检测限分别为1.86、0.60、1.86、0.70 pg,定量限分别为7.44、2.40、7.44、2.80 pg。平均回收率分别为78%、92%、82%、99%,RSD值分别为4.4%、3.0%、4.3%、2.8%。结论所建立的方法结果准确、重复性、稳定性均良好,可用于沉香药材中黄曲霉毒素的质量控制。 展开更多
关键词 沉香 黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素B2 黄曲霉毒素g1 黄曲霉毒素g2 高效液相色谱 荧光检测器
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Effects of Sterigmatocystin, Deoxynivalenol and Aflatoxin G_1 on Apoptosis of Human Peripheral Blood Lymphocytes in vitro 被引量:7
4
作者 SunXM等 ZhangXH 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2002年第2期145-152,共8页
Objective To explore the effects of Sterigmatocystin (ST), Deoxynivalenol (DON) and Aflatoxin G1 (AFG1) on apoptosis of human peripheral blood lymphocytes (HPBLs) in vitro and thus to further elucidate the putative r... Objective To explore the effects of Sterigmatocystin (ST), Deoxynivalenol (DON) and Aflatoxin G1 (AFG1) on apoptosis of human peripheral blood lymphocytes (HPBLs) in vitro and thus to further elucidate the putative roles of these three mycotoxins on human immunosystem. Methods The effects of ST, DON and AFG1 on apoptosis of HPBLs were studied with cell culture, flow cytometric (FCM) DNA analysis and DNA agarose gel electrophoresis. Results DNA agarose gel electrophoresis results showed the characteristic 'ladder' pattern of apoptosis in HPBLs treated with ST, DON and AFG1. Flow cytometric DNA analysis revealed that typical subdiploid peaks of apoptosis in DNA histogram could be seen in all groups treated with the three mycotoxins. Significant time-effect and dose-effect relationships were found between the apoptosis rates and treatment time as well as concentrations of the three mycotoxins. Conclusion ST, DON and AFG1 can induce apoptosis of HPBLs in vitro and may have some negative effects on human immunosystem. 展开更多
关键词 STERIgMATOCYSTIN DEOXYNIVALENOL aflatoxin g1 APOPTOSIS Human LYMPHOCYTES
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薏苡仁中黄曲霉毒素G1的动态表面增强拉曼光谱检测 被引量:8
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作者 任菲 于治国 陆峰 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期612-616,共5页
中药具有不良反应少,疗效独特等优点,越来越受到国内外的关注。但中药在生产、采集、加工、运输、贮藏等方面极易发生霉变而污染黄曲霉毒素。黄曲霉毒素具有很强的毒性,不仅影响中药质量和疗效还会对人体肝脏等器官造成极大损害。该文... 中药具有不良反应少,疗效独特等优点,越来越受到国内外的关注。但中药在生产、采集、加工、运输、贮藏等方面极易发生霉变而污染黄曲霉毒素。黄曲霉毒素具有很强的毒性,不仅影响中药质量和疗效还会对人体肝脏等器官造成极大损害。该文建立了中药材薏苡仁中黄曲霉毒素G1(Aflatoxin G1,AFG1)的动态表面增强拉曼光谱(Dynamic Surface-enhanced Raman Spectroscopy,D-SERS)的快速分析方法。采用简单擦拭法提取薏苡仁表面的黄曲霉毒素G1,因此SERS图谱中干扰峰较少。并且以金纳米颗粒为增强基底,优化了检测条件,进行了黄曲霉毒素G1的D-SERS的检测与分析。结果表明,方法的线性范围为8~320μg/kg,线性方程为y=0.0293x+1.7307,相关系数(r2)为0.9884。检出限(LOD)为5.5μg/kg,相对标准偏差(RSD)为11%。该方法的线性良好,灵敏度和重现性均能满足薏苡仁中黄曲霉毒素G1的快速检测要求,且操作简单、快速、节约成本,对中药材中黄曲霉毒素G1的现场实时快速分析具有良好的应用潜力。 展开更多
关键词 擦拭法 黄曲霉毒素g1 薏苡仁 动态表面增强拉曼光谱
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高效液相色谱-光化学衍生法测定湖南产莲子中黄曲霉毒素G1、G2、B1、B2 被引量:4
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作者 吴梅青 罗栩强 曾春姣 《现代药物与临床》 CAS 2021年第4期671-675,共5页
目的对不同来源的湖南产莲子中黄曲霉毒素G1、G2、B2、B1进行高效液相色谱-光化学衍生法测定。方法采用高效液相色谱–光化学衍生法,采用岛津GL Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇–乙腈–水(35∶13∶52),柱... 目的对不同来源的湖南产莲子中黄曲霉毒素G1、G2、B2、B1进行高效液相色谱-光化学衍生法测定。方法采用高效液相色谱–光化学衍生法,采用岛津GL Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇–乙腈–水(35∶13∶52),柱温35℃;光化学衍生器(254 nm)激发波长λex=360 nm,发射波长λex=450 nm。结果黄曲霉毒素G1、G2、B2、B1分别在6.7~33.3、11.4~56.8、10.3~51.5、4.1~20.3 pg线性关系良好;平均回收率分别为98.07%、97.72%、96.11%、99.52%,RSD值分别为1.69%、1.40%、2.72%、1.34%(n=6)。9批莲子样品中,有6批未检出黄曲霉毒素,来自于农贸市场农户自存的2批次检出黄曲霉毒素B1,实验室塑料袋包装储存1年的1批检出黄曲霉毒素B1、B2,但质量分数均低于法定标准限量。结论不同来源湖南产莲子中黄曲霉毒素质量分数均低于《中国药典》2020年版规定限量。该法测定结果准确、重复性良好,可为完善莲子安全性控制和质量标准提升提供实验依据。 展开更多
关键词 莲子 黄曲霉毒素g1 黄曲霉毒素g2 黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素B2 高效液相色谱-光化学衍生法
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碘衍生HPLC-FLD法测定三七粉中的黄曲霉毒素 被引量:2
7
作者 熊有明 张华 +2 位作者 王文婷 阳文武 周浓 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2021年第5期562-565,共4页
目的采用免疫亲和柱净化高效液相色谱-荧光法测定三七粉中黄曲霉毒素的含量,并对三七粉中黄曲霉毒素的污染情况进行风险监测。方法样品与高湿试验后的样品经超声提取、免疫亲和柱净化、柱后碘衍生,通过HPLC分离,外标法定量。结果黄曲霉... 目的采用免疫亲和柱净化高效液相色谱-荧光法测定三七粉中黄曲霉毒素的含量,并对三七粉中黄曲霉毒素的污染情况进行风险监测。方法样品与高湿试验后的样品经超声提取、免疫亲和柱净化、柱后碘衍生,通过HPLC分离,外标法定量。结果黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2在各自线性范围内线性关系良好,r均为0.9999,回收率为91.0%~94.2%,RSD为1.40%~2.10%,检测限分别为2、1、2、1 ng·kg^(-1)。50批样品中有3批检出黄曲霉毒素,检出率为6.0%,均符合2015年版《中国药典》中限量的标准。高湿试验后,部分样品中黄曲霉毒素的含量有所提高。结论所用方法准确、快速、灵敏度高,适用于三七粉中黄曲霉毒素的测定。室温高湿条件下能增加三七粉中黄曲霉毒素的含量,因此,三七粉储存过程中应注意防潮。 展开更多
关键词 三七粉 黄曲霉毒素B1 黄曲霉毒素B2 黄曲霉毒素g1 黄曲霉毒素g2 高效液相色谱-荧光 免疫亲和柱 碘衍生 高湿试验
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黄曲霉毒素G_1与β-环糊精及其衍生物超分子体系的荧光光谱研究 被引量:5
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作者 马良 张敏 +2 位作者 张宇昊 胡媛媛 周瑶 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期143-148,共6页
研究β-环糊精及其衍生物对AFG1的超分子包合作用及反应体系荧光响应值的影响。经研究:AFG1-HE-β-CD二元包合物反应体系荧光响应值大幅提高,在溶剂为2%的甲醇溶液,HE-β-CD浓度0.05mol/L、反应时间3min时体系可以达到最大的荧光值。根... 研究β-环糊精及其衍生物对AFG1的超分子包合作用及反应体系荧光响应值的影响。经研究:AFG1-HE-β-CD二元包合物反应体系荧光响应值大幅提高,在溶剂为2%的甲醇溶液,HE-β-CD浓度0.05mol/L、反应时间3min时体系可以达到最大的荧光值。根据Benesi-Hildebrand法确定HE-β-CD与AFG1形成1:1包络物。紫外吸收光谱、荧光光谱、KI淬灭实验以及热力学参数表明,AFG1进入HE-β-CD空腔从而荧光得到保护。AFG1在2~40μg/kg范围内与体系荧光呈良好线性关系,相关系数为0.9998,检出限为0.079μg/kg。将HE-β-CD应用于花生样品AFG1分析,准确度和精密度良好。 展开更多
关键词 Β-环糊精 黄曲霉毒素g1 荧光增敏 超分子包络物
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黄曲霉毒素G1人工抗原的合成 被引量:5
9
作者 张金阳 李培武 +5 位作者 张文 丁小霞 马良 吴文华 张献忠 李涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期194-197,共4页
以间氯过氧苯甲酸(m-chloroperbenzoic acid,MCPBA)为氧化剂,使黄曲霉毒素G1(Aflatoxin G1,AFG1)转化为其8,9-环氧化物,与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)在两相反应体系中实现偶联,得到复合物AFG1-BSA。复合物紫外扫描结果显... 以间氯过氧苯甲酸(m-chloroperbenzoic acid,MCPBA)为氧化剂,使黄曲霉毒素G1(Aflatoxin G1,AFG1)转化为其8,9-环氧化物,与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)在两相反应体系中实现偶联,得到复合物AFG1-BSA。复合物紫外扫描结果显示其扫描图谱与BSA和黄曲霉毒素G1的图谱有明显差异,同时复合物与BSA荧光强度的差异,这表明BSA与黄曲霉毒素G1偶联。AFG1-BSA中AFG1与BSA的摩尔比为4.29:1。以合成人工抗原免疫小鼠,制备了特异性的鼠抗AFG1多克隆抗血清。用间接ELISA法测得抗体血清的最高效价可达1:16000,并测定了抗体的敏感度以及特异性。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 人工抗原 ELISA
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黄曲霉毒素G族人工抗原的合成与免疫效果研究 被引量:3
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作者 周茜 张文 +2 位作者 张奇 丁小霞 李培武 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期869-872,876,共5页
以黄曲霉毒素(Aflatoxin G1,AFG1)的半缩醛(Aflatoxin G2a,AFG2a)为中间物,通过还原烷基法,使黄曲霉毒素G1在8、9羟基上与牛血清白蛋白(BSA)实现偶联,得到偶联物。对偶联物进行紫外全波长扫描显示,其特征吸收峰与BSA和AFG1的特征吸收峰... 以黄曲霉毒素(Aflatoxin G1,AFG1)的半缩醛(Aflatoxin G2a,AFG2a)为中间物,通过还原烷基法,使黄曲霉毒素G1在8、9羟基上与牛血清白蛋白(BSA)实现偶联,得到偶联物。对偶联物进行紫外全波长扫描显示,其特征吸收峰与BSA和AFG1的特征吸收峰有明显差异。经完全透析后检测偶联物与BSA荧光强度差异,均表明BSA与黄曲霉毒素G1偶联,AFG1-BSA物质的量结合比为3.2∶1。以合成人工抗原免疫小鼠,用间接非竞争ELISA测得抗血清中抗体的效价可达1∶128 000,间接竞争ELISA测定抗体IC50为14.7 ng/mL。为下一步研制黄曲霉毒素G族单克隆抗体提供了关键试剂,为研究建立黄曲霉毒素G族免疫速测技术奠定了基础。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 人工抗原 ELISA
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黄曲霉毒素G1诱导的炎症反应介导的SOD-2高表达对肺腺癌增殖影响 被引量:1
11
作者 易力 刘宏雷 +1 位作者 贾欣 郝增方 《热带医学杂志》 CAS 2022年第1期22-27,146,共7页
目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)诱导的炎症反应对肺腺癌细胞增殖的影响和超氧化物歧化酶(SOD-2)高表达在其中发挥的作用。方法免疫组织化学及蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测AFG1诱导小鼠肺腺癌组织中增殖相关指标的表达。体外模拟AFG... 目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)诱导的炎症反应对肺腺癌细胞增殖的影响和超氧化物歧化酶(SOD-2)高表达在其中发挥的作用。方法免疫组织化学及蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测AFG1诱导小鼠肺腺癌组织中增殖相关指标的表达。体外模拟AFG1诱导的炎症反应,给予AFG1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)刺激A549细胞,Western Blot方法检测增殖相关蛋白的表达,CCK8方法及克隆形成实验检测细胞增殖能力;使用siRNA沉默SOD-2,给予上述刺激,再次检测增殖相关指标的表达情况及细胞增殖能力。结果免疫组化结果显示,AFG1诱导小鼠肺腺癌组织中增殖相关指标Survivin、B细胞淋巴瘤/白血病-xl(Bcl-xl)、增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)均阳性表达,Western Blot结果显示以上蛋白表达均升高。体外分别给予AFG1和TNF-α+IL-6处理A549细胞,Survivin、Bcl-xl、PCNA和CyclinD1蛋白表达均无变化,CCK8和克隆形成实验结果显示细胞增殖能力没有提高。而使用siRNA转染抑制SOD-2表达后,再给予TNF-α+IL-6刺激,A549细胞增殖相关各项指标均高表达,细胞增殖能力提高。结论AFG1诱导的小鼠肺腺癌组织中增殖相关指标高表达。体外实验中AFG1和TNF-α+IL-6作用均不影响A549细胞增殖,敲低SOD-2后TNF-α+IL-6作用使A549细胞增殖能力增加,说明SOD-2是炎症反应中影响A549细胞增殖的关键指标。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 炎症 超氧化物歧化酶 肺腺癌
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黄曲霉毒素G_1对原代培养人食管鳞状上皮细胞HLA-Ⅰ分子表达影响的研究 被引量:2
12
作者 李增宁 崔晋峰 +1 位作者 张祥宏 王俊灵 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期50-52,56,共4页
目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)对体外培养的人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的影响。方法采用原代培养、免疫印迹(Western blot)和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析方法研究不同浓度AFG1(50、100、1000和2000μg/L)处理后人食管鳞状... 目的探讨黄曲霉毒素G1(AFG1)对体外培养的人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的影响。方法采用原代培养、免疫印迹(Western blot)和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析方法研究不同浓度AFG1(50、100、1000和2000μg/L)处理后人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子表达的变化。结果免疫印迹结果表明,经不同浓度AFG1(50、100、1000、2000μg/L)处理细胞24h后,100、1000、2000μg/L AFG1处理组HLA-ABC的蛋白表达均明显低于溶剂对照组(P<0.05),而且在100~2000μg/L浓度范围内,人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达逐渐降低,两者呈明显的负相关关系(r=-0.921,n=3,P<0.01)。RT-PCR检测在mRNA水平进一步证实了AFG1对HLA-ABC表达的影响。其中100、1000、2000μg/L AFG1处理细胞后,HLA-A mRNA的表达明显低于溶剂对照组(P<0.05);2000μg/L处理组HLA-B mRNA的表达较溶剂对照组降低(P<0.05);而各AFG1处理组HLA-C mRNA的表达没有明显影响。结论 AFG1处理可以抑制人食管鳞状上皮细胞表面HLA-Ⅰ分子的表达。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 人白细胞表面抗原-Ⅰ 人食管鳞状上皮细胞
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支气管给予黄曲霉毒素G_1对大鼠肺组织CC-10表达的影响 被引量:1
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作者 申海涛 吕平 +4 位作者 张祥宏 邢欣 邢凌霄 严霞 王俊灵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期631-635,共5页
目的:探讨1次性支气管给予黄曲霉毒素G1(AFG1)对大鼠肺组织CC-10表达的影响。方法:按30μg/kg剂量经支气管1次性给予雄性SD大鼠AFG1处理。处理1、3、7和14d后分别处死动物。收集肺泡灌洗液(BALF),采用生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力。... 目的:探讨1次性支气管给予黄曲霉毒素G1(AFG1)对大鼠肺组织CC-10表达的影响。方法:按30μg/kg剂量经支气管1次性给予雄性SD大鼠AFG1处理。处理1、3、7和14d后分别处死动物。收集肺泡灌洗液(BALF),采用生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力。采用流式细胞术(FCM)和蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测肺组织中CC-10蛋白的表达;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测CC-10mRNA水平的表达。结果:给予AFG1作用后肺泡灌洗液中LDH活力升高(P<0.01),至14d时恢复到正常水平。FCM和蛋白免疫印迹方法检测CC-10蛋白结果发现AFG1作用3、7和14d,CC-10蛋白表达明显低于对照组(P<0.01,P<0.01),蛋白免疫印迹结果同FCM一致。AFG1作用3、7和14d大鼠肺组织CC-10 mRNA表达明显低于对照组(P<0.01)。结论:支气管1次性给予AFG1作用对大鼠肺组织具有明显的致损伤作用,降低CC-10蛋白和mRNA的表达水平。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 支气管肺泡灌洗液 CLARA细胞分泌蛋白
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Toll样受体4参与介导黄曲霉毒素G1对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤作用
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作者 杨红 陈成水 《实用医药杂志》 2012年第8期727-730,共4页
目的在基因水平上探讨Toll样受体4(TLR4)参与介导黄曲霉毒素G1(AFG1)对肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤生物学效应,及其作用机制和途径。方法分离、纯化、培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞并配置3个不同浓度的AFG1液体。实验随机分为正常组、实验组... 目的在基因水平上探讨Toll样受体4(TLR4)参与介导黄曲霉毒素G1(AFG1)对肺泡Ⅱ型上皮细胞的致损伤生物学效应,及其作用机制和途径。方法分离、纯化、培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞并配置3个不同浓度的AFG1液体。实验随机分为正常组、实验组、溶剂对照组,每组6个样本。正常组加入同等量的无菌生理盐水;实验组加入不同浓度的AFG1液(高、中、低浓度分组),溶剂对照组加入同等量的二甲基亚砜(DMSO),终浓度为0.4 ml/L;同时处理24 h后在上述5组提取细胞mRNA,采用RT-PCR法检测各组TLR4 mRNA、NF-κBmRNA、TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表达水平。结果正常组肺泡Ⅱ型上皮细胞上TLR4 mRNA、NF-κBmRNA、TNF-αmRNA和IL-6mRNA的表达量较低。实验组经AFG1液作用后,各项指标的表达量显著高于正常组(P<0.05)和溶剂对照组(P<0.05),且呈浓度依赖性增高。溶剂对照组各项指标的表达量与正常对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论 TLR4→NF-κB→炎症介质信号转导通路参与AFG1对AT-Ⅱcells的损伤作用。 展开更多
关键词 肺泡Ⅱ型上皮细胞 肺损伤 黄曲霉毒素g1 TOLL样受体4 核因子(NF)-κB
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黄曲霉毒素G_1与人血清白蛋白的结合机理及分子对接 被引量:1
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作者 钟红 王佳曼 +1 位作者 马良 江涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第5期86-91,共6页
在模拟人体血液p H 7.4的条件下,用分子对接及其荧光光谱、3D荧光、圆二色谱等方法研究黄曲霉毒素G1(aflatoxin G_1,AFG_1)与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的相互作用。结果发现,根据双对数方程得出AFG1与HSA结合反应猝灭机制... 在模拟人体血液p H 7.4的条件下,用分子对接及其荧光光谱、3D荧光、圆二色谱等方法研究黄曲霉毒素G1(aflatoxin G_1,AFG_1)与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的相互作用。结果发现,根据双对数方程得出AFG1与HSA结合反应猝灭机制为静态猝灭,4个温度条件下结合常数数量级均为104,结合位点数近似为1。通过分子对接和热力学参数计算,AFG1结合在HSA的ⅠB疏水腔中,二者结合力主要为疏水作用和氢键。通过研究体内金属离子对AFG1-HSA反应的影响,Fe^(3+)、Mg^(^(2+))能增大AFG1对HSA的亲和力,而Zn^(2+)、Cu^(2+)、Mn^(2+)离子则能大大降低AFG1与HSA的亲和力。基于F?rster’s能量转移,二者反应距离为3.26 nm。3D荧光结果显示,二者的结合反应使HSA生色团氨基酸残基疏水性增加,二级结构发生改变;圆二色谱结果表明,加入AFG1使得HSA的α-螺旋含量增加。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g1 人血清白蛋白 光谱 分子对接 结合反应
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HPLC柱后光化学衍生荧光检测法检测3种含土鳖虫中成药的黄曲霉毒素 被引量:7
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作者 刘晶晶 李耀磊 +2 位作者 王晶娟 戴忠 马双成 《中国药事》 CAS 2021年第3期307-314,共8页
目的:考察免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法在中成药中黄曲霉毒素测定的可行性,并对其污染情况进行筛查,为中成药黄曲霉毒素污染监管提供依据。方法:采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法对含有土鳖虫的中成药中黄曲... 目的:考察免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法在中成药中黄曲霉毒素测定的可行性,并对其污染情况进行筛查,为中成药黄曲霉毒素污染监管提供依据。方法:采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法对含有土鳖虫的中成药中黄曲霉毒素的含量进行测定。样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化后,利用高效液相色谱-光化学衍生-荧光检测器进行分析测定。对3种含土鳖虫的中成药,考察加样回收率,测定黄曲霉毒素残留量,并对测定结果进行分析。采用高效液相色谱-串联质谱法对部分超出限度批次进行结果确认。结果:3种中成药中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的回收率均在80%~113%。3种24批中成药中,21批检出黄曲霉毒素,检出率为87.5%,部分批次黄曲霉毒素含量明显偏高。结论:免疫亲和净化HPLC柱后光衍生荧光检测法结果准确,重现性好,可用于中成药中黄曲霉毒素的测定。含土鳖虫药材的中成药,个别品种黄曲霉毒素污染情况较为严重,存在安全隐患,应引起生产企业的重视,保障用药安全。 展开更多
关键词 中成药 免疫亲和柱 黄曲霉毒素B_(1) 黄曲霉毒素B_(2) 黄曲霉毒素g_(1) 黄曲霉毒素g_(2) 风险评估
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启脾丸中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)含量测定及安全性评价 被引量:1
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作者 张慧 白桂昌 +2 位作者 罗轶 罗永强 张赞 《中南药学》 CAS 2022年第3期613-616,共4页
目的建立高效液相色谱法测定启脾丸中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的含量,并评价启脾丸中黄曲霉毒素安全性。方法样品提取后通过免疫亲和柱处理,采用HPLC-柱后衍生-FLD法对全国10个生产企业的64批启脾丸进行测定。结果启脾丸... 目的建立高效液相色谱法测定启脾丸中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的含量,并评价启脾丸中黄曲霉毒素安全性。方法样品提取后通过免疫亲和柱处理,采用HPLC-柱后衍生-FLD法对全国10个生产企业的64批启脾丸进行测定。结果启脾丸中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的平均回收率为84.09%、84.38%、83.11%、86.33%,RSD为2.5%、2.0%、2.8%、1.9%,64批启脾丸中52批检出黄曲霉毒素,检出率为81.2%,不合格率为9.4%,部分样品存在黄曲霉毒素污染的问题。结论该方法操作简便,结果稳定可靠,可为该制剂的质量安全控制提供依据。 展开更多
关键词 启脾丸 黄曲霉毒素B_(1) 黄曲霉毒素B_(2) 黄曲霉毒素g_(1) 黄曲霉毒素g_(2)
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DNA吸附消除黄曲霉毒素G_(1)
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作者 马琼 李军生 +2 位作者 黄国霞 阎柳娟 马纪 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2022年第10期272-282,共11页
鉴于黄曲霉毒素G1(AFG_(1))的毒性强,难降解和有效去除,利用AFG_(1)与DNA的嵌插结合,构建选择性吸附消除AFG_(1)的有效方法。AFG_(1)嵌入DNA的最佳反应条件为pH 7.4及30℃,其DNA结合饱和值和去除率为1.66、88.14%。添加NaCl、CaCl_(2)... 鉴于黄曲霉毒素G1(AFG_(1))的毒性强,难降解和有效去除,利用AFG_(1)与DNA的嵌插结合,构建选择性吸附消除AFG_(1)的有效方法。AFG_(1)嵌入DNA的最佳反应条件为pH 7.4及30℃,其DNA结合饱和值和去除率为1.66、88.14%。添加NaCl、CaCl_(2)、L-天冬氨酸、葡萄糖、尿素、亮氨酸、赖氨酸、维生素C等后,DNA结合饱和值分别为1.45、1.45、1.29、1.05、1.95、1.95、2.32和2.90。去除率分别为78.08%、76.44%、75.92%、75.16%、88.41%、88.67%、88.87%、90.27%。NaCl、CaCl_(2)、L-天冬氨酸、葡萄糖等负电基团或者离子强度较高不利于AFG_(1)-DNA嵌插结合,而尿素、亮氨酸、赖氨酸、维生素C等带正电基团和相似基团的物质利于AFG_(1)-DNA的嵌插结合。花生油中的AFG_(1)的去除率达到80%以上。动力学相关系数和吸附容量可知,该吸附过程符合准二级动力学模型,表明吸附过程的限速步骤为化学相互作用。吸附过程遵循Freundlich等温吸附模型,该吸附过程为多层吸附。热力学结果显示DNA对AFG_(1)的吸附是自发的放热过程。综上,DNA能选择性吸附AFG_(1),因此,可进一步开发DNA新型材料,在去除食品中黄曲霉毒素方面有重要意义。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素g_(1) DNA 嵌插结合 影响因素 吸附
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