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Enzymatic activity and chromatographic characteristics of the cell membrane immobilized on silica surface 被引量:59
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作者 Langchong He Guangde Yang Xindu Geng 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1999年第9期826-831,共6页
A new cell membrane preparation, silica carrier cell membrane (CCM), has been presented, in which cell membrane was immobilized on silica which acted as carrier by the adsorption. The surface characteristics of the si... A new cell membrane preparation, silica carrier cell membrane (CCM), has been presented, in which cell membrane was immobilized on silica which acted as carrier by the adsorption. The surface characteristics of the silica CCM have been tested by a scanning electron microscope and surface energy spectrometer. Comparison has been made of the changeable rule of enzymatic activity of rabbit red cell membrane in three states: the silica CCM, the suspension and the precipitation cell membranes, with temperature and time. The result showed that the silica CCM still keeps the same enzymatic activity as the other two states of cell membranes. The interactions between calcium antagonists and rabbit red and cardiac muscle cell membranes, and the stereoscopic interactions between dihydropridines and rabbit cerebellar cell membrane have been investigated by the chromatographic system of the silica CCM as a stationary phase. From the foregoing results, the chromatographic parameters obtained from the system would 展开更多
关键词 cell membrane preparation silica CCM ENZYMATIC activity affinity chromatography enantiomers.
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高效几丁质降解菌CB101的分离、鉴定及其几丁质酶系的研究 被引量:29
2
作者 肖湘 周樱 王风平 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期138-142,共5页
1 引言 几丁质是海洋中居首位的多糖物质,它是虾、蟹壳的主要成分,同时广泛存在于昆虫外骨骼及真菌的细胞壁中.许多生物包括植物、细菌、真菌和一些无脊椎动物与脊椎动物都能够产生几丁质酶降解几丁质,其中细菌利用几丁质酶降解几丁质... 1 引言 几丁质是海洋中居首位的多糖物质,它是虾、蟹壳的主要成分,同时广泛存在于昆虫外骨骼及真菌的细胞壁中.许多生物包括植物、细菌、真菌和一些无脊椎动物与脊椎动物都能够产生几丁质酶降解几丁质,其中细菌利用几丁质酶降解几丁质作为生活所需碳源和氮源.从生态角度来看,几丁质酶在自然界几丁质循环过程中扮演了重要角色,作为对环境的适应。 展开更多
关键词 几丁质酶 亲和层折 脉鼠气单胞菌 分离 鉴定 PH值
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二化螟体内乙酰胆碱酯酶的分布及纯化方法 被引量:26
3
作者 彭宇 王荫长 +2 位作者 韩召军 陈长琨 李国清 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期209-214,共6页
研究了二化螟Chilosuppressalis乙酰胆碱酯酶 (AChE)的体躯和亚细胞分布 ,并用凝胶过滤层析和 2种亲和层析方法从二化螟幼虫体内分离、纯化乙酰胆碱酯酶。结果表明 :二化螟幼虫乙酰胆碱酯酶的活性主要集中于头部和胸部 ,而成虫胸部乙酰... 研究了二化螟Chilosuppressalis乙酰胆碱酯酶 (AChE)的体躯和亚细胞分布 ,并用凝胶过滤层析和 2种亲和层析方法从二化螟幼虫体内分离、纯化乙酰胆碱酯酶。结果表明 :二化螟幼虫乙酰胆碱酯酶的活性主要集中于头部和胸部 ,而成虫胸部乙酰胆碱酯酶的活性最低 ,显著低于头部和腹部。成虫体内AChE的活性明显高于幼虫。在亚细胞的分布上 ,乙酰胆碱酯酶主要位于膜上 (86 % ) ,近 46 %的活性存在微粒体中。在 3种纯化乙酰胆碱酯酶的方法中 ,以 3 羧基苯基 乙基二甲基铵作配体的亲和层析法纯化效果最佳 ,乙酰胆碱酯酶的最高纯化倍数为 5 36 0 5倍 ,产率 30 46 %。 展开更多
关键词 二化螟 乙酰胆碱酯酶 分布 纯化方法 亲和层析
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茶叶β-葡萄糖苷酶亲和层析纯化与性质研究 被引量:24
4
作者 张正竹 宛晓春 坂田完三 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期16-22,共7页
以化学合成的β-葡萄糖苷酶的抑制剂β-葡萄糖脒为配体,通过N-糖苷键交联到支持物上,使糖脒N-糖苷键一侧的氨基保持带正电荷的活化状态,合成了一种β-葡萄糖苷酶的亲和层析树脂。这种合成的亲和层析树脂在弱酸条件下非常稳定,能选择性... 以化学合成的β-葡萄糖苷酶的抑制剂β-葡萄糖脒为配体,通过N-糖苷键交联到支持物上,使糖脒N-糖苷键一侧的氨基保持带正电荷的活化状态,合成了一种β-葡萄糖苷酶的亲和层析树脂。这种合成的亲和层析树脂在弱酸条件下非常稳定,能选择性地吸附β-葡萄糖苷酶,并能多次重复使用。利用这种亲和层析树脂,在pH6和pH5条件下,从薮北种茶树叶片中纯化出两种分子量分别为63和75kDa的β-葡萄糖苷酶单体酶。以对硝基苯酚β-葡萄糖苷为底物,研究了两种酶的性质。TLC分析结果表明,这两种β-葡萄糖苷酶都能水解(Z)-3-己烯醇、苯甲醇和苯乙腈的β-D-葡萄糖苷。 展开更多
关键词 茶学 Β-葡萄糖苷酶 茶叶香气 亲和层析 薮北种 β-葡萄糖脒
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蚯蚓纤溶酶的分离纯化及抗栓活性研究 被引量:22
5
作者 何执中 郭怀芳 +1 位作者 唐宁 方成 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2001年第6期284-286,共3页
目的摸索蚯蚓纤溶酶的分离纯化工艺和研究蚯蚓纤溶酶的抗血栓活性。方法采用分步盐析、透析、凝胶色谱和亲和色谱法分离纯化蚯蚓纤溶酶 ;此酶的体内抗栓活性检测采用动静脉旁路血栓形成抑制实验法。结果分离纯化得到的蚯蚓纤溶酶比活高 ... 目的摸索蚯蚓纤溶酶的分离纯化工艺和研究蚯蚓纤溶酶的抗血栓活性。方法采用分步盐析、透析、凝胶色谱和亲和色谱法分离纯化蚯蚓纤溶酶 ;此酶的体内抗栓活性检测采用动静脉旁路血栓形成抑制实验法。结果分离纯化得到的蚯蚓纤溶酶比活高 ,为 16 0 5IU/mg ;蚯蚓纤溶酶的体内血栓形成抑制效果比尿激酶作用显著。 结论该法分离纯化工艺简单 ,特异性好 ,纯化的纤溶酶比活高 ; 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 分离纯化 亲和色谱 A-V旁路血栓形成抑制实验
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酶联免疫吸附法直接测定血清雌二醇 被引量:22
6
作者 金声 周浣芳 +2 位作者 常文保 慈云祥 郭振泉 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1994年第2期115-120,共6页
本文合成了3种不同载体蛋白的雌二醇抗原,研究了载体蛋白免疫原性对雌二醇抗体产生的影响。应用酶联免疫吸附分析法测定了血清中雌二醇,浓度范围为5~160ng/ml(1.8×10^(-8)~5.9×10^(-7)mol/L).RSD%小于10.0%,检测限为1.97 ... 本文合成了3种不同载体蛋白的雌二醇抗原,研究了载体蛋白免疫原性对雌二醇抗体产生的影响。应用酶联免疫吸附分析法测定了血清中雌二醇,浓度范围为5~160ng/ml(1.8×10^(-8)~5.9×10^(-7)mol/L).RSD%小于10.0%,检测限为1.97 ng/ml,相当于98.5pg/孔(按空白平均值的二倍标准偏差计算)。另外,本文还建立了一种用考马斯亮蓝G-250测定半抗原与蛋白结合比的方法,提出了一种新的亲和层析法纯化雌二醇抗血清的方法。 展开更多
关键词 雌二醇 酶联免疫吸附 层析法 血清
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Combined serum hepatoma-specific alpha-fetoprotein and circulating alpha-fetoprotein-mRNA in diagnosis of hepatocellular carcinoma 被引量:26
7
作者 Wei Wu, Deng-Fu Yao, Yong-Mei Yuan, Ji-Wei Fan, Xiu-Feng Lu, Xiao-Hua Li, Li-Wei Qiu, Lei Zong and Xin-Hua Wu Research Center of Clinical Molecular Biology, Affiliated Hospital of Nantong University, Nantong 226001, China 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2006年第4期538-544,共7页
BACKGROUND: Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most common malignant tumors worldwide, its prognosis is poor, and early detection is of utmost importance. Although alpha-fetoprotein (AFP) is a useful marker ... BACKGROUND: Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most common malignant tumors worldwide, its prognosis is poor, and early detection is of utmost importance. Although alpha-fetoprotein (AFP) is a useful marker for detecting and monitoring HCC development, the false-negative or false-positive rates with AFP alone may be as high as 30%-40% for patients with small HCCs. To enhance the specificity and accuracy of AFP measurements for HCC, we analyzed AFP expression states in livers, detected the hepatoma-specific AFP (HS-AFP) fraction and AFP-mRNA from peripheral blood mononuclear cells, and explored their clinical implications for HCC diagnosis. METHODS: AFP expression and hepatocyte distributions in liver specimens were investigated by an immunohistoche- mical assay. Total RNAs were extracted from circulating blood, synthesized to cDNA through random primers and reverse transcriptase, and fragments of the AFP gene were amplified by a nested-PCR assay. The HS-AFP fraction was separated by lectin-affinity chromatography and its level was detected by radioimmunoassay. RESULTS: The incidence of AFP was 73.3% in HCC tissues and its expression in HCCs with moderate or low differentiation was significantly stronger than that of HCCs with high differentiation (P<0.05). The incidence of AFP gene fragments was 100% in HCCs, and 60% in paracancerous tissues (P<0.01). In the HCC and liver cirrhosis groups, the incidence of HS-AFP was 91.7% and 18% (P<0.01), and of AFP-mRNA was 56.7% and 16% (P<0.01), respectively, and neither was found in controls.HS-AFP or AFP-mRNA was not significantly related to size or number of HCC, but to its differentiation, metastasis, and relapse (P<0.05). CONCLUSIONS: Different AFP expression is present in different parts of HCC tissues. HS-AFP and AFP-mRNA fragments improve sensitivity and specificity, and both are useful markers to diagnose HCC or monitor metastasis and relapse. 展开更多
关键词 carcinoma hepatocellular hepatoma-specific AFP AFP-MRNA affinity chromatography IMMUNOHISTOCHEMISTRY RT-PCR
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亲和色谱纯化蛋白质新进展 被引量:12
8
作者 韩金玉 那平 元英进 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期447-450,共4页
通过对35篇文献的综述。
关键词 亲和色谱法 蛋白质 纯化
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人血浆MBL的分离纯化及其特性鉴定 被引量:17
9
作者 陈政良 韩强涛 +3 位作者 易正山 张丽芸 卢晓 彭良平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期12-14,共3页
应用甘露聚糖-Sepharose4B柱亲和层析,从人血浆中分离纯化了甘露聚糖结合凝集素(MBL)。在还原条件下进行SDS-PAGE,该结合蛋白显示29KD的单一条带。125I-甘露聚糖与MBL的结合是浓度依赖、可饱和... 应用甘露聚糖-Sepharose4B柱亲和层析,从人血浆中分离纯化了甘露聚糖结合凝集素(MBL)。在还原条件下进行SDS-PAGE,该结合蛋白显示29KD的单一条带。125I-甘露聚糖与MBL的结合是浓度依赖、可饱和的,且受N-乙酰甘露糖胺、N-乙酰葡糖胺、甘露糖及L-岩藻糖的抑制,但葡萄糖、半乳糖及其它单糖则否。这种结合依赖Ca2+,达50%最大结合量的Ca2+浓度大约为1mmol/L。 展开更多
关键词 甘露聚糖 结合蛋白 亲和层析 糖识别 钙依赖性
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以硅胶为载体的交联壳聚糖作为亲和层析填料基质的研究 被引量:15
10
作者 邬建敏 陈正贤 阮东梁 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第9期1063-1066,共4页
采用硅胶为载体的交联壳聚糖 (CTS SiO2 )作为亲和层析填料基质 ,对其卵清蛋白的偶联能力 ,以及亲和纯化小鼠抗卵清蛋白抗体效果等进行了研究。结果显示卵清蛋白能方便地用戊二醛偶联于CTS SiO2 基质 ,该新型亲和层析填料稳定性高 ,选... 采用硅胶为载体的交联壳聚糖 (CTS SiO2 )作为亲和层析填料基质 ,对其卵清蛋白的偶联能力 ,以及亲和纯化小鼠抗卵清蛋白抗体效果等进行了研究。结果显示卵清蛋白能方便地用戊二醛偶联于CTS SiO2 基质 ,该新型亲和层析填料稳定性高 ,选择性好 ,非特异性吸附小 ,每克交联壳聚糖上可偶联卵清蛋白 5 4.2 5mg ,用该填料可有效地亲和吸附小鼠抗卵清蛋白抗体 ,并可用碱性缓冲液将该抗体洗脱 ,初步显示出较好的分离纯化效果。 展开更多
关键词 载体 填料基质 交联壳聚糖 硅胶 亲和层析 酶联免疫分析 卵清蛋白 色谱法 分离 纯化
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棉铃虫普通气味结合蛋白Ⅱ基因的表达及鉴定 被引量:14
11
作者 王桂荣 郭予元 吴孔明 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期285-289,共5页
通过PCR扩增的方法获得了棉铃虫普通气味结合蛋白Ⅱ (GOBP2 Harm)基因成熟蛋白阅读框序列 ,构建了GOBP2 Harm原核表达载体pGEX GOBP2 Harm ,并成功地在大肠杆菌中进行了表达。SDS PAGE分析表明 :大部分GOBP2 Harm重组蛋白形成不溶... 通过PCR扩增的方法获得了棉铃虫普通气味结合蛋白Ⅱ (GOBP2 Harm)基因成熟蛋白阅读框序列 ,构建了GOBP2 Harm原核表达载体pGEX GOBP2 Harm ,并成功地在大肠杆菌中进行了表达。SDS PAGE分析表明 :大部分GOBP2 Harm重组蛋白形成不溶性的包涵体 ,超声波破碎大肠杆菌细胞后 ,在上清液中能检测到少量的可溶性GOBP2 Harm蛋白。为了获得大量纯化的可溶性目的蛋白 ,我们对包涵体进行了溶解和重折叠 ,并通过亲合层析法进行了纯化。纯化产物能与多音天蚕(Antheraeapolyphemus)GOBP抗血清发生交叉反应 ,证实表达产物属于昆虫普通气味结合蛋白。 展开更多
关键词 棉铃虫 普通气味结合蛋白Ⅱ PCR扩增 原核表达 重组蛋白 亲合层析
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应用Protein G纯化细胞培养上清中的大鼠单抗 被引量:17
12
作者 白丽 Dent,L 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期207-209,共3页
用miniPerm系统旋转连续培养大鼠杂交瘤细胞株,获得大量含抗鼠IL-4(IgG1)和IL-5(IgG1和IgG2a)抗体的培养上清;经PM10膜超滤、50%饱和硫酸铵沉淀及链球菌G蛋白-琼脂糖亲和层析纯化IgG单... 用miniPerm系统旋转连续培养大鼠杂交瘤细胞株,获得大量含抗鼠IL-4(IgG1)和IL-5(IgG1和IgG2a)抗体的培养上清;经PM10膜超滤、50%饱和硫酸铵沉淀及链球菌G蛋白-琼脂糖亲和层析纯化IgG单抗。结果每升杂交瘤细胞培养上清得到大鼠IgG22~36mg;1次可纯化抗体达20mg;经SDS-PAGE及ELISA鉴定,所得到的抗体纯度高、活性保持良好。 展开更多
关键词 杂交瘤 大鼠 单克隆抗体 细胞培养
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昆虫谷胱甘肽S-转移酶分离纯化的新方法 被引量:11
13
作者 周先碗 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期269-273,共5页
谷胱甘肽S-转移酶(glutathioneS-transferases,GST)是一类具有多种生理功能的同功酶.从蜡螟幼虫(Galeriamelonela)的提取液中分离纯化谷胱甘肽S-转移酶的基本方法如下:首先将冷... 谷胱甘肽S-转移酶(glutathioneS-transferases,GST)是一类具有多种生理功能的同功酶.从蜡螟幼虫(Galeriamelonela)的提取液中分离纯化谷胱甘肽S-转移酶的基本方法如下:首先将冷冻的蜡螟幼虫在磷酸缓冲液中匀桨,经10000g和100000g分级离心;取上清液通过QAE-SephadexA-25离子交换柱层析除去部分色素和杂蛋白;然后采用谷胱甘肽-琼脂糖凝胶亲和层析(GSH-QT4),四溴酚酞二磺酸盐-琼脂糖凝胶亲和层析(BSP-QT4),铜离子-琼脂糖凝胶螯合层析(Cu2+-QT4)及PBE94-Sepharose(PBE94)聚焦层析等层析技术进一步分离纯化.将上述方法获得的色谱峰以CDNB和DCNB为底物检测生物活性.具有生物活性部分的蛋白质,通过SDS-PAGE测定其分子量.实验结果表明,采用GSH-QT4亲和层析法获得的活性峰,在SDS-PAGE图谱上呈现出两条带,分子量为24kD,24.5kD左右;Cu2+-QT6螯合层析法分离的活性峰,呈现出一条带,分子量为24kD左右;PBE94-聚焦层析法分离获得三个活性峰:第一色谱峰,呈现出一条带,分子量为23kD左右? 展开更多
关键词 谷胱甘肽S 转移酶 层析聚焦 亲和层析 螯合层析
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糖化血红蛋白不同测定法的评价 被引量:18
14
作者 苏作军 《检验医学》 CAS 北大核心 2004年第6期514-517,共4页
目的 对 3种测定糖化血红蛋白的方法进行方法学评价。方法 用离子交换高效液相层析 (HPLC)法 (X)、微柱亲和层析手工法 (Y1)、胶乳凝集免疫法 (Y2 )测定糖化血红蛋白 ,进行线性范围、回收率、精密度、干扰因素及参考范围的分析。结果... 目的 对 3种测定糖化血红蛋白的方法进行方法学评价。方法 用离子交换高效液相层析 (HPLC)法 (X)、微柱亲和层析手工法 (Y1)、胶乳凝集免疫法 (Y2 )测定糖化血红蛋白 ,进行线性范围、回收率、精密度、干扰因素及参考范围的分析。结果 X、Y1、Y2 法的线性范围分别为 2 .8%~ 18%、3.6 %~ 15 .3%、2 .3%~15 .5 %。3种方法的平均回收率均在 95 %~ 10 4 %以内 ,批内、批间平均变异系数 (CV )均 <5 %。 10 .2mmol/L三酰甘油、8.0mmol/L胆固醇、6 84 μmol/L胆红素、10 .1%的HbF对 3种方法均无干扰。Y1法测定结果显著高于X法 (P <0 .0 1) ,回归方程 :Y1=1.15X - 0 .17(r =0 .86 ,P <0 .0 1) ;Y2 法与X法的测定结果差异有显著性(P <0 .0 5 ) ,Y2 法的测定结果偏低 ,回归方程 :Y2 =1.0 4X - 0 .6 9(r =0 .92 ,P <0 .0 1) ;X、Y1、Y2 法的参考范围分别是 4 .3%~ 6 .7%、3.5 %~ 8.3%、3.6 %~ 6 .7%。结论 与HPLC法相比 ,微柱亲和层析手工法测定结果偏高 ,而胶乳凝集免疫法的测定结果偏低。 展开更多
关键词 糖化血红蛋白 胶乳凝集 亲和层析 高效液相层析
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亲和层析技术在现代蛋白质研究中的应用及新发展 被引量:11
15
作者 李洪利 黄倢 周丽 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2005年第3期86-94,共9页
亲和层析技术是目前重要的蛋白质研究技术之一。本文介绍了免疫亲和层析、凝集素亲和层析、核酸亲和层析、金属螯合亲和层析以及染料配体亲和层析等几类常规亲和层析的原理及在蛋白质分离纯化以及分析鉴定方面的应用;简要叙述了当今蛋... 亲和层析技术是目前重要的蛋白质研究技术之一。本文介绍了免疫亲和层析、凝集素亲和层析、核酸亲和层析、金属螯合亲和层析以及染料配体亲和层析等几类常规亲和层析的原理及在蛋白质分离纯化以及分析鉴定方面的应用;简要叙述了当今蛋白质组研究中新出现的两种与亲和层析有关的技术,串联亲和层析技术和SELDI芯片技术。并且提出了存在的问题以及今后发展趋势。 展开更多
关键词 亲和层析 蛋白质 纯化 鉴定
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IDA型固定化镍离子金属螯合亲和膜色谱对人血清白蛋白的分离纯化 被引量:11
16
作者 杨利 贾凌云 +1 位作者 邹汉法 张玉奎 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期74-77,共4页
采用自制的固定化镍离子亚氨二乙酸(IDA)型复合纤维素金属螯合膜色谱对药用人血清白蛋白的进一步纯化进行了研究。考察了pH对HAS吸附效果的影响。经一步纯化,商品药用HSA中的许多杂蛋白可被除去,经毛细管电泳分析,纯度与Sigma公司的电泳... 采用自制的固定化镍离子亚氨二乙酸(IDA)型复合纤维素金属螯合膜色谱对药用人血清白蛋白的进一步纯化进行了研究。考察了pH对HAS吸附效果的影响。经一步纯化,商品药用HSA中的许多杂蛋白可被除去,经毛细管电泳分析,纯度与Sigma公司的电泳纯HSA相当,回收率可达85%以上。纯化蛋白液中的镍离子经过自制的N,N,N′三羧甲基乙二胺(TED)型螯合柱处理后可较好地除去。 展开更多
关键词 亲和色谱 人血清白蛋白 金属螯合 分离 纯化
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亲和层析在蛋白质研究中的应用进展 被引量:7
17
作者 王莉 刘道杰 李连之 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期515-517,共3页
文中介绍了生物、免疫、固定化金属离子拟生物几类常规亲和层析的原理及其在蛋白质分离纯化以及分析鉴定方面的应用(引用文献25篇)。
关键词 亲和层析 蛋白质 综述
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抗Ig融合蛋白Fc段单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究 被引量:16
18
作者 户义 刘雪松 +4 位作者 朱勇 刘莹 许晓光 薛江楠 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期170-171,175,共3页
目的 :制备并鉴定抗Ig融合蛋白Fc段的单克隆抗体 (mAb) ,建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法和纯化Fc融合蛋白的亲和层析法。方法 :以hBCMA Ig融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠 ,通过细胞融合制备抗Fc段mAb ,用ELISA等方法鉴定mAb的Ig亚... 目的 :制备并鉴定抗Ig融合蛋白Fc段的单克隆抗体 (mAb) ,建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法和纯化Fc融合蛋白的亲和层析法。方法 :以hBCMA Ig融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠 ,通过细胞融合制备抗Fc段mAb ,用ELISA等方法鉴定mAb的Ig亚类、表位以及种属特异性 ,建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法 ;Westernblot检测mAb对变性Ig融合蛋白的反应性。将mAb与Sepharose4B交联 ,制备亲和层析柱 ,对LAIR1 Ig融合蛋白进行纯化。 结果 :获得 7株稳定分泌抗Fc段mAb的杂交瘤 (FMUFc1~FMUFc7)。利用FMUFc4作为包被mAb ,FMUFc5作为酶标记mAb ,成功地建立了检测Ig融合蛋白的ELISA法 ,敏感度达到 2 μg/L ;在 7株mAb中 ,FMUFc6可用于Ig融合蛋白的Westernblot检测。用FMUFc6mAb制备的亲和层析柱 ,可有效地纯化LAIR1 Ig融合蛋白。结论 :成功地制备了抗Ig融合蛋白Fc段的mAb ,建立了可用于Ig融合蛋白检测和纯化的方法 。 展开更多
关键词 IG融合蛋白 FC段 单克隆抗体 夹心ELISA法 亲和层析法
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粉尘螨变应原的提纯及其物理化学特征鉴定 被引量:13
19
作者 钟建敏 温廷桓 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期204-206,共3页
本文制备了粉尘螨(Dermatophagoides farinae)代谢培养基浸液,采用抗 Der f Ⅰ单克隆抗体亲和层析法在国内首次分离纯化粉尘螨Ⅰ类变应原(Der f Ⅰ),并进一步分析 Der fⅠ变应原的物理化学特性。SDS-PAGE 测得 Der f Ⅰ分子量为 24 kDa... 本文制备了粉尘螨(Dermatophagoides farinae)代谢培养基浸液,采用抗 Der f Ⅰ单克隆抗体亲和层析法在国内首次分离纯化粉尘螨Ⅰ类变应原(Der f Ⅰ),并进一步分析 Der fⅠ变应原的物理化学特性。SDS-PAGE 测得 Der f Ⅰ分子量为 24 kDa,同时在 SDS-PAGE 上只显示 1条蛋白质条带。等电聚焦电泳结果表明该变应原pⅠ为4.8-7.5,在此范围内形成6条蛋白质染色条带,这表明 Der f Ⅰ变应原的不均一性,其组成非常复杂。 展开更多
关键词 粉尘螨 变应原 提纯 理化特性 鉴定
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蚯蚓纤溶酶的亲和层析纯化及部分性质 被引量:7
20
作者 林少琴 余萍 兰瑞芳 《药物生物技术》 CAS CSCD 2000年第4期229-232,共4页
用牛血纤溶酶原Separose4B亲和层析方法从蚯蚓粗提物丙酮粉中分离纯化一种纤维蛋白溶解酶。该酶为糖蛋白 ,含糖量约为 1.43 % ,Mr为 30 0 0 0。实验结果表明此酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的间接溶解纤维蛋白的双重作用 ,并对... 用牛血纤溶酶原Separose4B亲和层析方法从蚯蚓粗提物丙酮粉中分离纯化一种纤维蛋白溶解酶。该酶为糖蛋白 ,含糖量约为 1.43 % ,Mr为 30 0 0 0。实验结果表明此酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的间接溶解纤维蛋白的双重作用 ,并对人血凝块有明显的溶解作用。 1%PMSF对酶有显著的抑制作用 。 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 纤溶酶原 亲和层析 纯化 抗血栓药
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