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Adult neural stem cell dysfunction in the subventricular zone of the lateral ventricle leads to diabetic olfactory defects 被引量:2
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作者 Yu-hong Jing Chu-chu Qi +3 位作者 Li Yuan Xiang-wen Liu Li-ping Gao Jie Yin 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2017年第7期1111-1118,共8页
Sensitive smell discrimination is based on structural plasticity of the olfactory bulb,which depends on migration and integration of newborn neurons from the subventricular zone.In this study,we examined the relations... Sensitive smell discrimination is based on structural plasticity of the olfactory bulb,which depends on migration and integration of newborn neurons from the subventricular zone.In this study,we examined the relationship between neural stem cell status in the subventricular zone and olfactory function in rats with diabetes mellitus.Streptozotocin was injected through the femoral vein to induce type 1 diabetes mellitus in Sprague-Dawley rats.Two months after injection,olfactory sensitivity was decreased in diabetic rats.Meanwhile,the number of Brd U-positive and Brd U+/DCX+double-labeled cells was lower in the subventricular zone of diabetic rats compared with agematched normal rats.Western blot results revealed downregulated expression of insulin receptorβ,phosphorylated glycogen synthase kinase 3β,and β-catenin in the subventricular zone of diabetic rats.Altogether,these results indicate that diabetes mellitus causes insulin deficiency,which negatively regulates glycogen synthase kinase 3β and enhances β-catenin degradation,with these changes inhibiting neural stem cell proliferation.Further,these signaling pathways affect proliferation and differentiation of neural stem cells in the subventricular zone.Dysfunction of subventricular zone neural stem cells causes a decline in olfactory bulb structural plasticity and impairs olfactory sensitivity in diabetic rats. 展开更多
关键词 nerve regeneration diabetic encephalopathy adult neural stem cells olfactory function subventricular zone proliferation glycogen synthase kinase 3 beta β-catenin differentiation rats INSULIN type i diabetes mellitus neural regeneration
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成体神经干细胞与微环境 被引量:2
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作者 吴凌峰 吴晓牧 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第19期3538-3545,共8页
背景:成体神经干细胞广泛分布于中枢神经系统,它存在于特殊的微环境中,有自我更新和分化能力,可作为内源性干细胞来源来修复受损的神经组织。目的:归纳总结神经干细胞与微环境的研究与进展。方法:由第一作者检索PubMed(1989至2012年)数... 背景:成体神经干细胞广泛分布于中枢神经系统,它存在于特殊的微环境中,有自我更新和分化能力,可作为内源性干细胞来源来修复受损的神经组织。目的:归纳总结神经干细胞与微环境的研究与进展。方法:由第一作者检索PubMed(1989至2012年)数据库与中国期刊全文数据库(CNKI:2001至2012年),检索词分别为"神经干细胞;微环境;调控"和"neural stem cells;microenviroment;regulation"。结果与结论:阅读文题和摘要进行筛选,选择具有原创性,论点论据可靠且分析全面、密切相关的文章,排除重复性研究与以及质量较差文章,共检索到379篇英文文章,131篇中文文章,按纳入及排除标准筛选后,共纳入64篇文章。微环境中的各种组成成分如血管及内皮细胞、星形胶质细胞、室管膜细胞、细胞外基质与神经干细胞关系密切,在成体神经干细胞的生存、增殖、分化调控中均发挥重要作用。同时,成体神经干细胞的分化受基因调控。成体神经干细胞与微环境两者之间的研究将为神经组织的修复带来新的方向。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞学术探讨 神经干细胞 成体神经干细胞 中枢神经系统 微环境 调控 神经修复 国家自然科学基金
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调控Smo活性对成年大鼠神经干细胞增殖和迁移的影响 被引量:3
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作者 仇欣霞 陈荷 +1 位作者 冯德龙 董为人 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1588-1592,共5页
目的探讨Shh信号通路中G蛋白偶联受体Smoothened(Smo)对成年大鼠神经干细胞(ANSCs)增殖、迁移的影响并阐明其作用机制。方法培养ANSCs,分别添加Smo的激动剂Purmorphamine及其抑制剂Cyclopamine,细胞增殖-毒性实验(CCK8)检测其对ANSCs增... 目的探讨Shh信号通路中G蛋白偶联受体Smoothened(Smo)对成年大鼠神经干细胞(ANSCs)增殖、迁移的影响并阐明其作用机制。方法培养ANSCs,分别添加Smo的激动剂Purmorphamine及其抑制剂Cyclopamine,细胞增殖-毒性实验(CCK8)检测其对ANSCs增殖的影响;细胞划痕实验检测其对ANSCs迁移能力的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测Sonic Hedgehog(Shh)信号通路的细胞表面Patched蛋白(Ptch1)、G蛋白偶联受体Smo、转录因子(Gli1)以及神经导向因子(Slit1)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达量的变化。结果Smo激动剂PM对ANSCs的增殖有明显促进作用,48 h后PM组ANSCs的吸光度明显升高(P<0.01);PM可以促进ANSCs的迁移,48 h后的PM组ANSCs划痕面积显著减小(P<0.01);Smo抑制剂CPM对ANSCs的增殖和迁移均有显著的抑制作用;RT-PCR实验显示PM组细胞中的Ptch1、Smo、Gli1及Slit1、BDNF表达水平均明显增加(P<0.05)。结论调控Smo的活性可以促进或抑制成年神经干细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与调节BDNF和Slit1的表达有关。 展开更多
关键词 Purmorphamine CYCLOPAMINE G蛋白偶联受体Smoothened 成年神经干细胞
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神经递质在调控成体神经干细胞分化中的作用 被引量:3
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作者 李玲 伍芳慧 刘媛 《中国临床神经科学》 2021年第4期461-464,共4页
成体神经干细胞的增殖与分化受到细胞内外多种因素的影响。神经递质是神经元之间进行化学信号传递的基础,对神经细胞的功能调控发挥重要作用。文中就不同种类神经递质对成体神经干细胞增殖与分化的作用进行综述。
关键词 神经递质 成体神经干细胞 分化 调控
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叶酸联合成体神经干细胞治疗创伤性脑损伤大鼠的实验 被引量:2
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作者 刁波 刘琴 +1 位作者 王丽萍 张宜 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第7期48-55,F0004,共9页
目的观察叶酸联合成体神经干细胞对创伤性脑损伤大鼠的治疗作用,探讨其可能作用机制。方法 120只Wistar大鼠随机分为6组,正常组,模型组,假手术组,叶酸注射组,成体神经干细胞移植组,成体神经干细胞移植+叶酸注射组。倒置显微镜下观察神... 目的观察叶酸联合成体神经干细胞对创伤性脑损伤大鼠的治疗作用,探讨其可能作用机制。方法 120只Wistar大鼠随机分为6组,正常组,模型组,假手术组,叶酸注射组,成体神经干细胞移植组,成体神经干细胞移植+叶酸注射组。倒置显微镜下观察神经干细胞形态学变化;流式细胞仪检测神经干细胞表面标记物CD105、CD45、CD44、CD29的表达;免疫荧光法检测神经元特异性烯醇酶(NSE成熟神经元的特异性标志)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP胶质细胞的标记物)的表达;平衡木实验检测大鼠运动协调与整和能力;Morris水迷宫实验测试各组大鼠的学习记忆能力;HE染色及Brdu免疫组化实验观察脑组织形态学变化;酶联免疫吸附试验检测大鼠脑组中脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达;蛋白质印迹法检测脑组织中凋亡相关蛋白BCL-2、Bax、Caspase-3的表达。结果分离所得细胞能在体外传代培养,流式细胞仪检测发现细胞阳性表达CD44、CD29,阴性表达CD105、CD45,细胞经胎牛血清诱导分化后能形成NSE或GFAP阳性细胞。实验表明,叶酸与成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠模型后能显著改善其行为学变化,减轻脑组织的炎症反应,恢复受损神经细胞,增加脑组织内BDNF、NGF的含量,上调BCL-2的表达,下调Bax、Caspase-3的表达。结论叶酸联合成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠能显著改善中枢神经功能,对维持神经元微环境稳态具有重要的作用。 展开更多
关键词 叶酸 成体神经干细胞 创伤性脑损伤
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转基因脑肿瘤小鼠模型中成体神经干细胞与脑肿瘤干细胞的克隆与鉴定 被引量:1
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作者 李英斌 陈骅 夏春林 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1185-1188,F0002,共5页
目的从Tet-on转基因脑肿瘤小鼠模型中分离鉴定成体神经干细胞和脑肿瘤干细胞。方法分别从转基因小鼠肿瘤和室管膜下区取材,将细胞培养于含生长因子的无或含血清培养基。光镜下观察病理,相差显微镜和电镜下分别观察细胞形态及超微结构,... 目的从Tet-on转基因脑肿瘤小鼠模型中分离鉴定成体神经干细胞和脑肿瘤干细胞。方法分别从转基因小鼠肿瘤和室管膜下区取材,将细胞培养于含生长因子的无或含血清培养基。光镜下观察病理,相差显微镜和电镜下分别观察细胞形态及超微结构,流式细胞术检测Hoechst33342阴性的SP细胞、染色体倍体和细胞周期,免疫荧光染色检测细胞球体及分化细胞表面标志物。结果无血清培养条件下,肿瘤细胞和室管膜下区细胞均呈悬浮球状生长,含血清培养条件下贴壁分化。成体神经干细胞球细胞较小,形态相对较规则。电镜下两者均表现核质比高、细胞器不发达、具干细胞特征,但在细胞器发育上有所差异。肿瘤细胞球中异倍体细胞为26.77%,而神经球中细胞均为二倍体。免疫荧光染色两种细胞球中大部分细胞表达干细胞标志物Nestin,少数细胞表达分化标志物GFAP和NSE。贴壁后两者的大部分细胞表达分化标志物,且部分细胞共表达前体细胞标志。结论Tet-on转基因脑肿瘤小鼠中存在具有自我更新和多向分化潜能的脑肿瘤干细胞和神经干细胞。 展开更多
关键词 转基因工程鼠 胶质瘤 肿瘤干细胞 成体神经干细胞
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成体神经干细胞脑内移植对脑外伤大鼠神经功能的影响 被引量:1
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作者 徐国政 刁波 +2 位作者 张宜 文雪 袁先厚 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1907-1909,共3页
目的 观察脑内移植成体神经干细胞对脑外伤大鼠中枢神经功能的影响.方法 将60只Wistar大鼠随机分为5组,正常组(A)、模型组(B)、假手术组(C)、PBS移植组(D)、干细胞移植组(E).Morris水迷宫实验测试各组大鼠的学习记忆能力;免... 目的 观察脑内移植成体神经干细胞对脑外伤大鼠中枢神经功能的影响.方法 将60只Wistar大鼠随机分为5组,正常组(A)、模型组(B)、假手术组(C)、PBS移植组(D)、干细胞移植组(E).Morris水迷宫实验测试各组大鼠的学习记忆能力;免疫组织化学及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠脑组织中脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达.结果与A组比较,B组大鼠寻找隐形平台的时间明显延长(P〈0.01),脑组织中BDNF(27.70±1.65)ng/g蛋白、NGF(59.80±9.40)ng/g蛋白含量下降显著(P〈0.01),模型复制效果理想;与B组比较,E组大鼠学习及功能明显改善,脑内BDNF(49.30±2.87)ng/g蛋白、NGF(88.50±9.23)ng/g蛋白的表达量上升,差异有统计学意义(P〈0.01).结论 成体神经干细胞的脑内移植能明显恢复外伤大鼠中枢神经功能. 展开更多
关键词 成体神经干细胞 脑内移植 脑外伤
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18α-GA激活Nrf2对成体神经干细胞的影响 被引量:1
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作者 杨娜 赵云鹤 +2 位作者 黄菲菲 刘琦玮 陆利 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1738-1745,共8页
目的:明确18α-甘草次酸(18α-GA)对核因子E2相关因子2(Nrf2)的激活作用,观察上调Nrf2对成体神经干细胞(a NSCs)增殖和分化能力的影响,探讨维持a NSCs活力的有效途径。方法:体外培养新生、成年和老年小鼠的侧脑室室膜下区神经干细胞(NSC... 目的:明确18α-甘草次酸(18α-GA)对核因子E2相关因子2(Nrf2)的激活作用,观察上调Nrf2对成体神经干细胞(a NSCs)增殖和分化能力的影响,探讨维持a NSCs活力的有效途径。方法:体外培养新生、成年和老年小鼠的侧脑室室膜下区神经干细胞(NSCs),观察随年龄增长NSCs中Nrf2的表达变化。以18α-GA作用a NSCs,用real-time PCR和Western blot实验比较18α-GA组与DMSO对照组a NSCs的Nrf2表达变化。构建携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的Nrf2-shRNA慢病毒载体(LV)感染a NSCs,用real-time PCR和Western blot实验检测shRNA对Nrf2的沉默效率。将a NSCs按照干预条件不同分为DMSO组、18α-GA组、LV-GFP组和LV-Nrf2-shRNA组,运用Brd U掺入实验、Tuj1免疫荧光染色、CCK-8实验、Hoechst 33342/PI双染色和活性氧簇(ROS)水平测定等方法评价18α-GA是否通过激活Nrf2对a NSCs的增殖、分化、细胞活力、细胞凋亡以及氧化应激水平产生影响。结果:随年龄增长,成年和老年小鼠a NSCs的Nrf2 mRNA表达水平较新生小鼠NSCs显著降低(P<0.01),但a NSCs的ROS水平显著高于新生小鼠NSCs(P<0.05)。应用18α-GA后,a NSCs的Nrf2 mRNA与蛋白表达水平较DMSO组明显升高(P<0.01),并且a NSCs的Brd U阳性率也显著增加(P<0.01)。2 mg/L 18α-GA作用后,a NSCs的Tuj1阳性率和细胞活力较DMSO组显著升高(P<0.05),而凋亡率和ROS水平显著下降(P<0.05和P<0.01)。但是,敲减a NSCs的Nrf2并应用18α-GA干预后,LV-Nrf2-shRNA组Brd U阳性率、Tuj1阳性率以及细胞活力均较LV-GFP组显著下降(P<0.05),ROS水平却显著上升(P<0.05)。结论:18α-GA可能通过激活Nrf2提高a NSCs的抗氧化能力,促进a NSCs增殖和分化,维持a NSCs潜能。 展开更多
关键词 18α-甘草次酸 成体神经干细胞 核因子E2相关因子2 细胞增殖 细胞分化 小鼠
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异丙酚促进体外培养的成年大鼠海马神经干细胞增殖
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作者 陶涛 赵振龙 +1 位作者 张雅婷 古妙宁 《热带医学杂志》 CAS 2010年第5期534-537,577,F0004,共6页
目的异丙酚对于成年神经干细胞增殖能力的影响目前尚不明确,本研究对异丙酚对体外培养的大鼠成年神经干细胞的作用及其可能的分子机制进行了研究。方法体外培养的大鼠成年神经干细胞给予BrdU后,分别用10、50、100μg/ml的异丙酚进行处理... 目的异丙酚对于成年神经干细胞增殖能力的影响目前尚不明确,本研究对异丙酚对体外培养的大鼠成年神经干细胞的作用及其可能的分子机制进行了研究。方法体外培养的大鼠成年神经干细胞给予BrdU后,分别用10、50、100μg/ml的异丙酚进行处理,并同时设立溶媒对照和空白对照。24h后,采用免疫染色显示BrdU阳性细胞,DAPI复染细胞核。细胞存活率采用细胞计数法和MTT法测定。人工计数BrdU阳性细胞和固缩细胞核的比例。用Fura2-AM检测胞浆内Ca2+浓度。分别用免疫荧光和免疫印迹法检测细胞内CREB和磷酸化CREB的表达位置和水平。结果低浓度(10μg/ml)异丙酚不能促进大鼠成年神经干细胞的增殖,而中浓度(50μg/ml)和高浓度异丙酚(100μg/ml)则呈剂量依赖性的促进其增殖。异丙酚提高了BrdU阳性细胞的比例。细胞死亡率在处理前后维持在低水平上(<2%)。异丙酚显著提高了大鼠成年神经干细胞胞浆内的游离Ca2+浓度。异丙酚处理前后,大鼠成年神经干细胞均能表达CREB和磷酸化CREB,但是异丙酚干预后,大鼠成年神经干细胞内磷酸化CREB表达水平显著增高。结论异丙酚可促进体外培养的大鼠成年神经干细胞的增殖水平,这是细胞存活率升高的主要原因,可能与胞浆内Ca2+浓度以及CREB磷酸化水平的升高有关。 展开更多
关键词 异丙酚 成年神经干细胞 增殖
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叔丁基对苯二酚激活蛋白酶体活性促进成年小鼠神经干细胞增殖与分化
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作者 牛晓洁 赵雪纯 +3 位作者 崔佳彬 杨桂姣 成晓龙 陆利 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期641-646,共6页
目的:探讨叔丁基对苯二酚(tBHQ)对成年小鼠神经干细胞(aNSCs)增殖分化能力的影响,寻找维持aNSCs活力的有效手段。方法:成年BALB/c小鼠腹腔注射tBHQ(每日16.7 mg/kg)7 d,收集室管膜下区(SVZ)的脑组织,应用荧光酶标仪定量检测其蛋白酶体... 目的:探讨叔丁基对苯二酚(tBHQ)对成年小鼠神经干细胞(aNSCs)增殖分化能力的影响,寻找维持aNSCs活力的有效手段。方法:成年BALB/c小鼠腹腔注射tBHQ(每日16.7 mg/kg)7 d,收集室管膜下区(SVZ)的脑组织,应用荧光酶标仪定量检测其蛋白酶体的活性;同时小鼠腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),Brd U免疫荧光染色检测SVZ内a NSCs的增殖能力。分离培养SVZ aNSCs,tBHQ(20μmol/L)作用7 d,分析比较tBHQ组与DMSO组a NSCs的蛋白酶体活性、BrdU阳性率以及形成神经球的数量和直径。应用1%的胎牛血清诱导a NSCs分化,早期神经元标记物β-Ⅲ微管蛋白(Tuj1)免疫荧光染色并比较tBHQ组与DMSO组a NSCs向神经元分化的能力。结果:小鼠腹腔注射tBHQ,其SVZ蛋白酶体活性较DMSO对照组上调12.9%±4.6%(P<0.05),并且BrdU标记实验显示tBHQ组阳性细胞数为31.3±6.3,与DMSO对照组(15.4±1.3)比较,aNSCs增殖能力显著提高(P<0.05)。体外实验结果也显示tBHQ组aNSCs蛋白酶体活性较DMSO对照组上升10.1%±0.8%(P<0.01)。tBHQ组Brd U阳性率(31.3%±3.2%)是DMSO对照组(20%±1.5%)的1.6倍(P<0.05)。tBHQ组神经球的数量和直径分别是DMSO对照组的1.7倍(P<0.05)和1.4倍(P<0.05),提示tBHQ促进aNSCs的自我更新。此外,tBHQ组Tuj1阳性率为26.5%±1.6%,较DMSO对照组18.6%±2.1%显著提高(P<0.05),提示tBHQ能够促进a NSCs向神经元方向分化。结论:tBHQ能够上调蛋白酶体活性,促进aNSCs的增殖与分化。 展开更多
关键词 叔丁基对苯二酚 成年神经干细胞 增殖 分化 小鼠
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成年脑内黑质神经元再生的研究进展
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作者 齐正晗 蒋雯卿 +1 位作者 方春贤 孙凤艳 《中国临床神经科学》 2006年第1期97-100,共4页
成熟哺乳动物的某些脑区存在神经干细胞/前体细胞,可在适当的条件下被诱导分化为新生的神经元。本文主要综述黑质部位多巴胺能神经元的再生以及调节再生的因素。尽管对黑质神经元再生的了解还处于初步阶段,但是开展这方面的研究有助于... 成熟哺乳动物的某些脑区存在神经干细胞/前体细胞,可在适当的条件下被诱导分化为新生的神经元。本文主要综述黑质部位多巴胺能神经元的再生以及调节再生的因素。尽管对黑质神经元再生的了解还处于初步阶段,但是开展这方面的研究有助于促进和拓展人们对帕金森病的发病机制和诊治基础的认识。 展开更多
关键词 神经干细胞 神经元再生 黑质 多巴胺神经元 影响因素 帕金森病
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成体神经干细胞培养方法的建立
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作者 徐国政 刁波 +3 位作者 张宜 袁先厚 文雪 宋健 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1294-1295,共2页
目的 探讨体外建立培养成体神经干细胞(MSC)的方法.方法 从6周龄大鼠脑组织中分离神经干细胞,用神经干细胞培养液[DMEM/F12培养液添加1%N2、2%B27、20 μg/L表皮生长因子(EGF)和20μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]使其稳定增殖... 目的 探讨体外建立培养成体神经干细胞(MSC)的方法.方法 从6周龄大鼠脑组织中分离神经干细胞,用神经干细胞培养液[DMEM/F12培养液添加1%N2、2%B27、20 μg/L表皮生长因子(EGF)和20μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]使其稳定增殖,10%胎牛血清诱导其贴壁分化.倒置显微镜下观察神经干细胞形态学变化;流式细胞仪检测神经干细胞表面标记物巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇酶(NSE,成熟神经元的特异性标志)、半乳糖脑苷脂(Galc-C,成熟少突胶质细胞的标记物)的表达.结果 分离所得细胞能在体外传代培养,流式细胞仪检测显示Nestin阳性细胞为97.6%,细胞经胎牛血清诱导分化后能形成NSE、Galc-C阳性细胞.结论 采用无血清的神经干细胞培养液能培养出具有分化潜能的成体神经干细胞. 展开更多
关键词 成体神经干细胞 体外培养
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异丙酚促进成年神经干细胞增殖并上调环磷腺苷反应元件结合蛋白的磷酸化水平
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作者 陶涛 丁红 +2 位作者 赵振龙 张雅婷 古妙宁 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2010年第2期131-134,共4页
目的观察异丙酚对体外培养的大鼠成年神经干细胞是否具有生长调控作用及可能的分子机制。方法大鼠海马成年神经干细胞接种贴壁后,模拟临床应用浓度加入异丙酚至终浓度10、25、50、100mg/L,溶剂(脂肪乳)为对照,培养24h。用DAPI染... 目的观察异丙酚对体外培养的大鼠成年神经干细胞是否具有生长调控作用及可能的分子机制。方法大鼠海马成年神经干细胞接种贴壁后,模拟临床应用浓度加入异丙酚至终浓度10、25、50、100mg/L,溶剂(脂肪乳)为对照,培养24h。用DAPI染核,检测细胞数目变化。用免疫印记法检测细胞环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)磷酸化水平变化。结果异丙酚(〉10mg/L)处理组比对照组细胞数显著升高,且呈剂量依赖性。异丙酚处理前后,细胞均表达CREB和磷酸化CREB,但处理组比对照组的CREB磷酸化水平显著升高。结论异丙酚可能是通过上调细胞中CREB的磷酸化水平从而促进大鼠海马成年神经干细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 异丙酚 成年神经干细胞 增殖 环磷腺苷反应元件结合蛋白 磷酸化
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成人神经干细胞脑内移植后突触形成和电生理功能的实验研究 被引量:1
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作者 杨林 周辉 +1 位作者 王宇倩 朱剑虹 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期177-180,共4页
目的研究成人神经干细胞(NSCs)脑内移植后新生神经元突触形成和电生理功能。方法从开放性脑损伤患者外露的脑组织中分离培养出成人NSCs,利用病毒基因转移的方法对成人NSCs进行标记。将rAAV-LacZ标记的成人NSCs进行裸鼠脑内移植后行免疫... 目的研究成人神经干细胞(NSCs)脑内移植后新生神经元突触形成和电生理功能。方法从开放性脑损伤患者外露的脑组织中分离培养出成人NSCs,利用病毒基因转移的方法对成人NSCs进行标记。将rAAV-LacZ标记的成人NSCs进行裸鼠脑内移植后行免疫电镜检查,观察新生神经元突触形成情况;重组GFP逆转录病毒标记成人NSCs裸鼠脑内移植后进行脑片的细胞电生理检测。结果免疫电镜检查表明成人NSCs移植后分化的神经元与宿主细胞之间形成突触联系,膜片钳检测显示由成人NSCs分化而来的GFP阳性神经元具有自发的动作电位,全细胞膜片钳模式下可记录到Na+、K+电流。结论成人NSCs移植后可以与宿主细胞形成突触联系,其分化的神经元细胞具有电生理功能。 展开更多
关键词 成人神经干细胞 移植 膜片钳 免疫电镜
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