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Current focus of stem cell application in retinal repair 被引量:8
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作者 Maria L Alonso-Alonso Girish Kumar Srivastava 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2015年第3期641-648,共8页
The relevance of retinal diseases, both in society's economy and in the quality of people's life who suffer with them, has made stem cell therapy an interesting topic forresearch. Embryonic stem cells(ESCs), i... The relevance of retinal diseases, both in society's economy and in the quality of people's life who suffer with them, has made stem cell therapy an interesting topic forresearch. Embryonic stem cells(ESCs), induced pluripotent stem cells(i PSCs) and adipose derived mesenchymal stem cells(ADMSCs) are the focus in current endeavors as a source of different retinal cells, such as photoreceptors and retinal pigment epithelial cells. The aim is to apply them for cell replacement as an option for treating retinal diseases which so far are untreatable in their advanced stage. ESCs, despite the great potential for differentiation, have the dangerous risk of teratoma formation as well as ethical issues, which must be resolved before starting a clinical trial. i PSCs, like ESCs, are able to differentiate in to several types of retinal cells. However, the process to get them for personalized cell therapy has a high cost in terms of time and money. Researchers are working to resolve this since i PSCs seem to be a realistic option for treating retinal diseases. ADMSCs have the advantage that the procedures to obtain them are easier. Despite advancements in stem cell application, there are still several challenges that need to be overcome before transferring the research results to clinical application. This paper reviews recent research achievements of the applications of these three types of stem cells as well as clinical trials currently based on them. 展开更多
关键词 Retina adipose derived mesenchymal stemcells EMBRYONIC stem cells Induced PLURIPOTENT stemcells cell therapy
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脑源性神经营养因子基因修饰脂肪间充质干细胞治疗大鼠急性脊髓损伤 被引量:9
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作者 熊敏 何宁 +3 位作者 曾云 陈森 刘志刚 何宏生 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2271-2273,共3页
目的观察脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰脂肪间充质干细胞(ADSCs)治疗大鼠急性脊髓损伤效果。方法获取大鼠ADSCs细胞,观察其生物学特征,行溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记及腺病毒BDNF基因转染。将36只SD大鼠随机分为3组:脊髓... 目的观察脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰脂肪间充质干细胞(ADSCs)治疗大鼠急性脊髓损伤效果。方法获取大鼠ADSCs细胞,观察其生物学特征,行溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记及腺病毒BDNF基因转染。将36只SD大鼠随机分为3组:脊髓损伤对照组(A)、ADSCs治疗组(B)及BDNF转染的ADSCs治疗组(C)。在脊髓损伤部位行相应处理:A组植入明胶海绵;B组植入含3.0肛l(3×10^10/L)ADSCs的明胶海绵;C组植入含3.0μl(3×10^10/L)转染ADSCs的明胶海绵。行为学评分及观察免疫荧光染色。结果成功分离并培养ADSCs,可于体外稳定增殖。术后7、14、28d,C组运动功能评分为(10.55±0.80、14.39±0.25、19.71±2.14)分,明显高于A组(5.35±0.68、7.93±0.45、10.78±1.18)分、B组(7.01±0.39、10.33±0.27、14.87±0.37)分。免疫荧光染色显示移植ADSCs脊髓组织内,均可见不同程度的分布有BrdU阳性标记细胞;荧光染色结果提示部分Brdu阳性的移植细胞同时呈胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性。结论ADSCs在移植后能在宿主体内存活、迁移并分化。移植ADSCs之后,运动功能可见改善,证实ADSCs移植能改善中枢神经系统功能。 展开更多
关键词 腺病毒 脂肪间充质干细胞 脑源性神经营养因子 急性脊髓损伤
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异体脂肪间充质干细胞对卵巢早衰患者外周血调节性T细胞的影响 被引量:9
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作者 宋开静 何援利 +3 位作者 蔡慧华 张冬梅 黄睿淳 孙冬华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期294-298,共5页
目的探讨异体脂肪间充质干细胞(h ADSCs)对卵巢早衰(POF)患者外周血调节性T细胞(Treg)的影响。方法采用0.1%Ⅰ型胶原酶消化法从脂肪组织中分离培养h ADSCs,并进行成脂成骨分化诱导以及表面分子鉴定。采用密度梯度离心法分离POF患者外周... 目的探讨异体脂肪间充质干细胞(h ADSCs)对卵巢早衰(POF)患者外周血调节性T细胞(Treg)的影响。方法采用0.1%Ⅰ型胶原酶消化法从脂肪组织中分离培养h ADSCs,并进行成脂成骨分化诱导以及表面分子鉴定。采用密度梯度离心法分离POF患者外周血单个核细胞(PBMCs)。在植物凝集素(PHA)的刺激下,将PBMCs分别与1×10~4、2×10~4、1×10~5个hADSCs共培养72h,CCK-8法检测淋巴细胞的增殖率,流式细胞技术测定CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg的比例,实时荧光定量PCR检测Foxp3^+mRNA的表达水平。结果 h ADSCs高表达CD90、CD105,低表达CD34、CD45,具有成脂成骨分化能力。CCK-8检测结果显示,与对照组相比,各数量级的h ADSCs均能明显抑制淋巴细胞的增殖(P<0.001)。流式检测结果显示,各数量级的hADSCs均能促进CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg的增殖(P<0.05)。qPCR检测结果显示,与对照组相比,各实验组均能显著上调Foxp3^+mRNA的表达(P<0.001)。结论 hADSCs能发挥免疫调节作用,促进卵巢早衰患者外周血Treg的增殖。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 卵巢早衰 调节性T细胞 FOXP3
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复方黄柏液涂剂对脂肪间充质干细胞免疫抑制的影响 被引量:9
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作者 李栋 胡勤峰 蔡大幸 《中国皮肤性病学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期819-824,共6页
目的探讨复方黄柏液涂剂对人脂肪间充质干细胞(A-MSC)免疫调控能力的影响情况。方法从人皮下脂肪样本分离间充质干细胞,观察形态学改变和细胞表型,用A-MSC完全培养基按梯度稀释后进行流式细胞术凋亡检测,按1∶100稀释后,用CCK-8法检测... 目的探讨复方黄柏液涂剂对人脂肪间充质干细胞(A-MSC)免疫调控能力的影响情况。方法从人皮下脂肪样本分离间充质干细胞,观察形态学改变和细胞表型,用A-MSC完全培养基按梯度稀释后进行流式细胞术凋亡检测,按1∶100稀释后,用CCK-8法检测复方黄柏液涂剂处理24h后的A-MSC对淋巴细胞增殖能力的影响,实时定量PCR法检测复方黄柏液涂剂处理后免疫调控相关基因在A-MSC中的表达情况。结果所得A-MSC具有典型成纤维细胞形态和显著增殖能力,阳性表达CD29,CD44,CD73,CD90和CD105,不表达CD31,CD45和CD133等血细胞标记,复合MSC国际标准。予低浓度复方黄柏液涂剂处理后,A-MSC对淋巴细胞增殖的抑制作用明显增强,且A-MSC中细胞免疫抑制相关基因表达增加,促炎相关基因表达减弱。结论复方黄柏液涂剂可通过加强脂肪间充质干细胞免疫抑制能力影响创伤局部炎性微环境。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 复方黄柏液涂剂 免疫 淋巴细胞
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干细胞来源外泌体对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:8
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作者 何其宽 戴宁高 +5 位作者 叶瑞凡 洪重 余华军 郭鹏毅 张杰 张启瑜 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2018年第2期134-141,共8页
目的研究大鼠脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes,Exo)对肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia-reperfusion injury,HIRI)的保护作用。方法胶原酶法提取SD大鼠原代脂肪间充质干细胞,超速离心法提取干细胞来源的外泌体。SD大鼠随机... 目的研究大鼠脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes,Exo)对肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia-reperfusion injury,HIRI)的保护作用。方法胶原酶法提取SD大鼠原代脂肪间充质干细胞,超速离心法提取干细胞来源的外泌体。SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注损伤组(IR)、缺血再灌注损伤外泌体治疗组(IR+Exo)。Sham组腹部正中切口,离断肝脏周围韧带,不做其他处理;IR组用动脉夹阻断70%肝脏血流60 min;IR+Exo组70%肝脏血流阻断60 min后,尾静脉注射外泌体观察其对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)含量。检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)与丙二醛(MDA)含量。Western blotting法检测氧化应激指标醌氧化还原酶(NQO-1)、血红素氧合酶1(HO-1),凋亡相关指标Bcl-2、Bax,HE染色观察肝组织病理变化。结果相比IR组,IR+Exo组血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1β水平显著下降(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05),MDA含量明显下降(P<0.05)。NQO1、HO-1、Bcl-2表达量显著升高,Bax显著下降(P<0.05),肝组织病理损伤明显改善。结论外泌体能够减轻肝脏缺血再灌注损伤,其可能通过缓解氧化应激、抑制炎症反应、抗凋亡而发挥作用。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 外泌体 肝脏缺血再灌注损伤 炎症反应 氧化应激 凋亡 大鼠
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人脂肪间充质干细胞体外培养鉴定与诱导分化的初步研究 被引量:7
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作者 郭常敏 王达利 +1 位作者 魏在荣 龙艳 《遵义医学院学报》 2013年第1期32-36,共5页
目的分离培养人脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs),观测表型及表达特异性蛋白与多向诱导分化的能力。方法取人脂肪组织,机械法与酶消化法分离、培养,观察细胞形态及增殖活力,免疫细胞化学和FCM检测其标... 目的分离培养人脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs),观测表型及表达特异性蛋白与多向诱导分化的能力。方法取人脂肪组织,机械法与酶消化法分离、培养,观察细胞形态及增殖活力,免疫细胞化学和FCM检测其标志蛋白。第9代ADSCs向成脂、成软骨和成骨细胞诱导分化。结果原代细胞贴壁后多呈多角形,传代后呈均一梭形。免疫细胞化学结果显示:ADSCs不表达CK19,而波形蛋白(Vimentin)阳性表达,间充质干细胞表面标志CD105、CD90、CD44、CD73均高表达,CD45+34+11b+19+DR为0.48%。第9代ADSCs诱导培养后分别出现脂肪、软骨、骨细胞特征性染色阳性。结论酶消化法可有效分离ADSCs,第9代生长状态好,仍保持良好干性,经诱导可多向分化,表明ADSCs可作为良好的细胞治疗或组织工程种子细胞的来源,且有潜在广泛应用前景。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 体外培养 鉴定
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miR-146a调控脂肪间充质干细胞成骨分化的机制 被引量:5
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作者 黄涛 程志坚 +4 位作者 贾志强 赵晓光 王磊 翟文静 周永新 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第1期70-75,共6页
背景:既往研究表明,miR-146a能影响骨髓间充质干细胞成骨分化,但其在脂肪间充质干细胞成骨分化中的调节功能尚未阐明。目的:探究miR-146a对小鼠脂肪间充质干细胞成骨分化的调控作用。方法:获取雄性C57BL/6小鼠脂肪间充质干细胞,采用倒... 背景:既往研究表明,miR-146a能影响骨髓间充质干细胞成骨分化,但其在脂肪间充质干细胞成骨分化中的调节功能尚未阐明。目的:探究miR-146a对小鼠脂肪间充质干细胞成骨分化的调控作用。方法:获取雄性C57BL/6小鼠脂肪间充质干细胞,采用倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞学方法检测第3代细胞CD29、CD44、CD45的表达,然后用mi R-NC、mi R-146a mimics和mi R-146a inhibitor转染脂肪间充质干细胞并进行成骨诱导分化,成骨诱导第6天,采用碱性磷酸酶染色观察钙化程度,RT-PCR和Western blot检测成骨表型标志物的表达;成骨诱导第12天,采用茜素红染色鉴定细胞表面矿化基质的产生。结果与结论:①培养的细胞为长梭形,呈成纤维样生长,第3代细胞CD29、CD44高表达,CD45低表达;②随着成骨诱导时间的延长,小鼠脂肪间充质干细胞miR-146a的表达逐渐降低(P<0.05);③与miR-NC组相比,碱性磷酸酶显色及其活性在miR-146a mimic组显著减弱,而在miR-146a inhibitor组显著增强(P<0.05);④与miR-NC组相比,ALP、Runx2、Akt、PI3K的m RNA和蛋白表达及p-Akt与p-PI3K的蛋白表达在miR-146a mimic组显著降低,而在miR-146a inhibitor组显著升高(P<0.05);⑤与miR-NC组相比,茜素红染色发现miR-146a mimic组细胞的钙化程度显著降低(P<0.05),而miR-146a inhibitor组的钙化程度显著升高(P<0.05);⑥上述结果表明,miR-146a能够通过PI3K/AKT信号通路负向调控脂肪间充质干细胞向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 干细胞 脂肪间充质干细胞 成骨细胞 MIR-146A 成骨分化 信号通路
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干细胞外泌体对内皮细胞增殖迁移和血管生成的影响 被引量:2
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作者 陶苏皖 钟晓 +3 位作者 黎钗 杨江涛 赵晨辰 许娜 《生物技术》 CAS 2023年第1期81-87,94,共8页
[目的]探究脂肪间充质干细胞来源的外泌体对人脐静脉内皮细胞的迁移和血管生成的影响。[方法]利用超速离心法提取脂肪间充质干细胞来源的外泌体;通过透射电子显微镜观察外泌体的形貌;通过免疫印迹法检测外泌体的标志蛋白;通过动态光散... [目的]探究脂肪间充质干细胞来源的外泌体对人脐静脉内皮细胞的迁移和血管生成的影响。[方法]利用超速离心法提取脂肪间充质干细胞来源的外泌体;通过透射电子显微镜观察外泌体的形貌;通过免疫印迹法检测外泌体的标志蛋白;通过动态光散射法检测外泌体水合粒径;通过CCK-8法检测外泌体对HUVECs增殖的作用;通过划痕实验和Transwell实验检测外泌体对HUVECs迁移的影响;通过血管生成实验评估外泌体诱导HUVECs生成血管的能力。[结果]脂肪间充质干细胞外泌体的平均水合粒径约为151.9±12.3 nm,含有外泌体的标志蛋白CD63、TSG101。外泌体浓度为30μg/mL时,共孵育48 h后,EXO组HUVECs的增殖率高于NC组14%;划痕实验中NC组的平均迁移率约为0.45±0.05,EXO组约为0.63±0.05,EXO组的迁移率显著高于NC组约为0.18±0.07,而Transwel中48 h时NC组的单位面积平均转移细胞数约为167±24,EXO组约为728±49。4 h的成血管实验显示外泌体组管的NC组平均结点数约为495±52,EXO组约为658±76;NC组单位图像平均分支长度约为163±9μm, EXO组约为190±7μm。[结论]脂肪间充质干细胞来源的外泌体可以促进HUVECs的增殖、迁移和成血管。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 外泌体 人脐静脉内皮细胞 迁移 血管生成
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软骨组织工程种子细胞的研究进展 被引量:3
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作者 何爱娟 张天宇 《中国眼耳鼻喉科杂志》 2020年第1期3-6,共4页
肿瘤、外伤、先天畸形等导致的软骨缺损临床十分常见。目前,组织工程软骨修复技术在整形外科各领域均获得了较多进展,但种子细胞来源问题仍是限制这一技术临床应用转化的重要瓶颈。本文重点综述目前软骨组织工程技术常用的种子细胞来源... 肿瘤、外伤、先天畸形等导致的软骨缺损临床十分常见。目前,组织工程软骨修复技术在整形外科各领域均获得了较多进展,但种子细胞来源问题仍是限制这一技术临床应用转化的重要瓶颈。本文重点综述目前软骨组织工程技术常用的种子细胞来源,阐述各类种子细胞的生物学行为特性、研究进展及面临的挑战,为组织工程软骨的临床应用转化提供参考。 展开更多
关键词 组织工程 种子细胞 软骨细胞 骨髓间充质干细胞 脂肪干细胞 胚胎干细胞 诱导多能干细胞 经血源子宫内膜干细胞
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脂肪间充质干细胞对小型猪肝缺血再灌注合并肝切除组织细胞焦亡的影响
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作者 马亚军 焦智慧 +5 位作者 刘笑凝 陆翔羽 刘涛 王月 朴晨曦 王洪斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期355-364,共10页
本研究旨在探究脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs)对小型猪肝缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)合并肝切除组织细胞焦亡的影响。将18头巴马小型猪随机平分成3组,每组6头,分别为假手术组(s... 本研究旨在探究脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs)对小型猪肝缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)合并肝切除组织细胞焦亡的影响。将18头巴马小型猪随机平分成3组,每组6头,分别为假手术组(sham组)、模型组(IRI组)、异体移植ADSCs干预组(ADSCs组,剂量为1×10^(6)cells·kg^(-1)),通过腹腔镜微创技术建立肝IRI合并肝切除损伤模型,于术后即刻分别向IRI组和ADSCs组小型猪肝实质注射生理盐水和ADSCs。于术后1、3和7 d采集血液和肝组织样本。应用ELISA法对血清中促炎因子白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的含量进行测定,应用RT-qPCR技术和Western blot技术对细胞焦亡相关基因与蛋白进行检测。结果显示,术后1、3 d时,相比于sham组,IRI组血清中促炎因子IL-18、IL-1β含量显著增加(P<0.01),肝组织中IL-18、IL-1β基因与蛋白表达量同样显著升高(P<0.01);肝组织中细胞焦亡相关因子NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、Caspase-1、GSDMD和核因子κBp65(nuclear factor kappa-Bp65,NF-κBp65)基因与蛋白水平均显著升高(P<0.05)。经ADSCs干预后,血清和肝组织中IL-18、IL-1β表达量显著降低(P<0.05),肝组织中细胞焦亡相关因子NLRP3、ASC、GSDMD和NF-κBp65基因与蛋白水平均显著降低(P<0.05)。综上,本研究证明,小型猪腹腔镜肝IRI合并肝切除损伤会诱导细胞焦亡的发生,而ADSCs能够降低及改善这种肝损伤引起的组织细胞焦亡损伤。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 肝缺血再灌注损伤 细胞焦亡 腹腔镜 小型猪
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LncRNA H19靶向调控miR-19b-3p/SOX9通路对脂肪间充质干细胞向成骨细胞分化的影响
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作者 冯璐 王瑶 张建军 《河北医学》 CAS 2024年第7期1075-1081,共7页
目的:分析长链非编码核糖核酸(LncRNA)H19靶向调控miR-19b-3p/性别决定区Y框转录因子9(SOX9)通路对脂肪间充质干细胞(ADMSC)向成骨细胞分化的影响。方法:体外培养人ADMSC细胞并鉴定,将ADMSC细胞分为对照组(常规培养)、H19组(转染LncRNA ... 目的:分析长链非编码核糖核酸(LncRNA)H19靶向调控miR-19b-3p/性别决定区Y框转录因子9(SOX9)通路对脂肪间充质干细胞(ADMSC)向成骨细胞分化的影响。方法:体外培养人ADMSC细胞并鉴定,将ADMSC细胞分为对照组(常规培养)、H19组(转染LncRNA H19慢病毒过表达载体)、LncRNA-NC组(转染慢病毒空载体)、miR-19b-3p组(共转染LncRNA H19慢病毒过表达载体和miR-19b-3p模拟物慢病毒载体)、miR-NC组(共转染LncRNA H19慢病毒过表达载体和miR-NC慢病毒载体),检测各组LncRNA H19、miR-19b-3p、SOX9及含锌指的成骨细胞特异性转录因子(Osx)、骨钙素(OCN)和RUN相关转录因子2(RUNX2)表达。观察各组ALP染色和茜素红染色情况,比较细胞增殖活力、ALP活性,分析各组SOX9、BMP-2、OPN蛋白表达,验证LncRNA H19和miR-19b-3p的靶向关系。结果:与对照组、LncRNA-NC组比,H19组LncRNA H19和SOX9、Osx、OCN、RUNX2的mRNA表达及SOX9、BMP-2、OPN蛋白表达、ALP活性、矿化结节形成量增加,miR-19b-3p表达降低(P<0.05),与H19组、miR-NC组比,miR-19b-3p组LncRNA H19和SOX9、Osx、OCN、RUNX2的mRNA表达及SOX9、BMP-2、OPN蛋白表达、ALP活性、矿化结节形成量降低,miR-19b-3p表达增加(P<0.05)。各组细胞24h、48h、72h的吸光度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LncRNA H19和miR-19b-3p间存在靶向关系。结论:LncRNA H19能负向调控miR-19b-3p,上调SOX9,有助于人ADMSC细胞向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 长链非编码核糖核酸H19 miR-19b-3p/性别决定区Y框转录因子9通路 脂肪间充质干细胞 成骨细胞分化
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胶质细胞源性神经营养因子修饰的三种细胞在脊髓损伤中的研究
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作者 刘书画 李艺 +1 位作者 彭观发 叶军明 《赣南医学院学报》 2023年第5期520-524,544,共6页
近年来脊髓损伤的发病人数逐年增加,该损伤预后较差,给患者家庭及社会带来沉重负担。目前脊髓损伤修复的最大难题是轴突的再生和髓鞘形成。相关研究证实,胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)... 近年来脊髓损伤的发病人数逐年增加,该损伤预后较差,给患者家庭及社会带来沉重负担。目前脊髓损伤修复的最大难题是轴突的再生和髓鞘形成。相关研究证实,胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)基因修饰的骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞和雪旺细胞移植到损伤脊髓中,能够显著改善神经元再生困难、局部生长因子匮乏、损伤轴突脱髓鞘化和胶质疤痕形成等,促进脊髓损伤修复。本文就骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞和雪旺细胞进行胶质细胞源性神经营养因子修饰后在脊髓损伤中的有关作用进行综述。 展开更多
关键词 脊髓损伤 胶质细胞源性神经营养因子 骨髓间充质干细胞 脂肪间充质干细胞 雪旺细胞
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姜黄素对猪脂肪间充质干细胞脂肪合成和分解相关基因mRNA表达的影响 被引量:5
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作者 潘士锋 崔忆馨 +3 位作者 张杭 管飘萍 袁嘉晟 邢华 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第11期42-46,共5页
为了探讨姜黄素对猪脂肪间充质干细胞脂肪合成和分解相关基因mRNA表达的影响,从断奶仔猪皮下脂肪分离得到间充质干细胞,增殖培养,诱导分化,并在分化的同时进行姜黄素处理。试验分对照组(诱导分化液+姜黄素溶解试剂DMSO)和处理组(诱导分... 为了探讨姜黄素对猪脂肪间充质干细胞脂肪合成和分解相关基因mRNA表达的影响,从断奶仔猪皮下脂肪分离得到间充质干细胞,增殖培养,诱导分化,并在分化的同时进行姜黄素处理。试验分对照组(诱导分化液+姜黄素溶解试剂DMSO)和处理组(诱导分化液+10μmol/L姜黄素),分化48 h后收集细胞,进行后续检测。结果表明:10μmol/L姜黄素处理能显著降低猪脂肪细胞甘油三酯的含量,而对细胞增殖能力没有明显影响。荧光定量PCR结果显示,脂肪分化过程中的两个重要转录因子过氧化物酶增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和CCAAT增强子结合蛋白-β(C/EBP-β),脂肪合成过程中两个关键酶脂肪酸合成酶(FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA表达在10μmol/L姜黄素处理组均显著下降,而脂肪分解基因激素敏感脂肪酶(HSL)和脂肪组织三酰甘油水解酶(ATGL)mRNA表达以及酶活在10μmol/L姜黄素处理组均显著升高。结果提示姜黄素降低猪脂肪间充质干细胞脂肪沉积,有可能是通过抑制脂肪合成和增强脂肪分解两个过程来实现的,为姜黄素作为减少猪脂肪沉积的饲料添加剂的应用提供了理论支持。 展开更多
关键词 姜黄素 脂肪间充质干细胞 脂肪合成 脂肪分解
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过表达膜联蛋白A1的人脂肪间充质干细胞治疗急性呼吸窘迫综合征小鼠的效果及其机制 被引量:1
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作者 朱邦晖 赖宏豪 +4 位作者 魏晨如 沈纵 孙瑜 朱峰 伍国胜 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期456-464,共9页
目的探索过表达膜联蛋白A1(ANXA1)的人脂肪间充质干细胞(AMSC)治疗急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠的效果及其机制。方法采用实验研究方法。采用流式细胞术鉴定成人AMSC后,取第3代细胞进行后续实验。采用随机数字表法(分组方法下同),将细... 目的探索过表达膜联蛋白A1(ANXA1)的人脂肪间充质干细胞(AMSC)治疗急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠的效果及其机制。方法采用实验研究方法。采用流式细胞术鉴定成人AMSC后,取第3代细胞进行后续实验。采用随机数字表法(分组方法下同),将细胞分为转染含ANXA1基因RNA序列的质粒的过表达ANXA1组、转染对应空载质粒的空载对照组,另取细胞分为转染含ANXA1基因小干扰RNA序列的质粒的敲减ANXA1组、转染对应空载质粒的空载对照组,转染后72 h,于荧光显微镜成像系统下观察荧光表达情况,分别采用蛋白质印迹法和实时荧光定量反转录PCR法检测ANXA1的蛋白和mRNA表达(样本数均为3)。取50只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠,分为假伤组、单纯ARDS组、正常细胞组、过表达ANXA1组、敲减ANXA1组,每组10只。将后4组小鼠均用内毒素/脂多糖制成ARDS肺损伤模型,假伤组小鼠模拟致假伤。伤后即刻,假伤组、单纯ARDS组小鼠均经尾静脉注射生理盐水,正常细胞组、过表达ANXA1组、敲减ANXA1组小鼠对应注射正常AMSC、过表达ANXA1的AMSC、敲减ANXA1的AMSC。注射后24 h,取每组5只小鼠,行伊文思蓝染色观察右肺组织大体染色情况,采用酶标仪检测左肺支气管肺泡灌洗液(BALF)上清液的吸光度值,了解肺血管通透性。注射后3 d,取各组剩余5只小鼠,取右肺组织,行苏木精-伊红染色观察病理学变化,行免疫组织化学染色观察CD11b和F4/80阳性巨噬细胞情况;采用酶联免疫吸附测定法检测左肺BALF上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β水平。对数据行配对样本t检验、单因素方差分析与LSD检验。结果转染后72 h,过表达ANXA1组与敲减ANXA1组AMSC均分别较对应空载对照组AMSC表达更高强度的荧光。转染后72 h,与对应空载对照组比较,过表达ANXA1组AMSC中ANXA1蛋白与mRNA表达均明显增多(t值分别为249.80、6.56,P<0.05),敲减ANXA1组AM 展开更多
关键词 呼吸窘迫综合征 肺损伤 炎症 膜联蛋白A1 基因 修饰 脂肪间充质干细胞
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二甲双胍对Ⅰ型成骨不全小鼠间充质干细胞成骨分化的影响及疗效探讨
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作者 王娟 赵玉霞 +3 位作者 茹雅维 汪子涵 付婷 李光 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第8期830-834,共5页
目的研究二甲双胍对Ⅰ型成骨不全小鼠(oim)脂肪间充质干细胞(oimADSCs)向成骨细胞分化的影响并初步探讨二甲双胍在oim中的治疗效果。方法从oim中分离培养oimADSCs,通过观察细胞形态,碱性磷酸酶(ALP)染色和油红O染色对其分化能力进行鉴定... 目的研究二甲双胍对Ⅰ型成骨不全小鼠(oim)脂肪间充质干细胞(oimADSCs)向成骨细胞分化的影响并初步探讨二甲双胍在oim中的治疗效果。方法从oim中分离培养oimADSCs,通过观察细胞形态,碱性磷酸酶(ALP)染色和油红O染色对其分化能力进行鉴定;将oimADSCs分组进行诱导培养,通过观察ALP染色、检测ALP活性和实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测几种成骨分化相关分子的表达情况,分析二甲双胍对oimADSCs向成骨细胞分化的影响;利用微计算机断层扫描技术(Micro-CT)分析股骨的骨骼微观结构,观察二甲双胍在oim模型小鼠中的治疗效果。结果在二甲双胍处理oimADSCs后,ALP染色显著加深、ALP活性显著提高,骨钙素(Bglap)、Ⅰ型胶原(Col1a1)、Runt相关转录因子2(Runx2)以及骨形成蛋白2(BMP2)的mRNA表达水平升高;Micro-CT分析发现oim模型小鼠经过二甲双胍治疗后,股骨骨小梁的骨体积/总体积增加,股骨骨小梁数目增多、厚度增加。结论二甲双胍能够促进oimADSCs向成骨细胞分化,改善oim的骨骼生长情况。 展开更多
关键词 成骨不全 间质干细胞 二甲双胍 Ⅰ型成骨不全 脂肪间充质干细胞 成骨分化
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LncRNA-HOTAIR可调节脂肪间充质干细胞向成骨细胞的分化 被引量:3
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作者 黄涛 贾志强 +5 位作者 赵晓光 王磊 方丽萍 翟文静 翟莎菲 周永新 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第25期3951-3955,共5页
背景:已有证据表明,LncRNA-HOTAIR能调节骨髓间充质干细胞中成骨相关基因的表达,但其对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响尚未见报道。目的:探讨LncRNA-HOTAIR对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响。方法:体外培养Lewis大鼠脂肪间充质干细胞... 背景:已有证据表明,LncRNA-HOTAIR能调节骨髓间充质干细胞中成骨相关基因的表达,但其对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响尚未见报道。目的:探讨LncRNA-HOTAIR对脂肪间充质干细胞成骨分化的影响。方法:体外培养Lewis大鼠脂肪间充质干细胞,转染lncRNA-NC、lncRNA-HOTAIR mimics、lncRNA-HOTAIR inhibitor并进行成骨诱导,成骨诱导第7天检测碱性磷酸酶活性,成骨诱导第14天进行茜素红染色。成骨诱导第6天,通过RT-PCR及Western blot检测成骨相关基因碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙素、骨桥蛋白mRNA和蛋白的表达。结果与结论:①转染LncRNA-HOTAIR mimic后,脂肪间充质干细胞中碱性磷酸酶活性及钙化程度显著降低,而转染LncRNA-HOTAIR inhibitor后则显著增加(P<0.05);②转染LncRNA-HOTAIR mimic后,脂肪间充质干细胞中碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙素和骨桥蛋白的表达显著降低(P<0.05),而转染LncRNA-HOTAIR inhibitor后则显著增加(P<0.05);③上述结果表明,LncRNA-HOTAIR能负向调控脂肪间充质干细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 干细胞 脂肪间充质干细胞 LncRNA-HOTAIR MIMIC INHIBITOR 成骨分化
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人脂肪间充质干细胞向表皮细胞表型转化的研究 被引量:4
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作者 赵周婷 胡大海 +3 位作者 陶克 刘佳琦 张战凤 白晓智 《中国美容医学》 CAS 2014年第22期1899-1903,共5页
目的:探索人脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs)向表皮细胞表型转化的方法。方法:以手术中剩余的人皮下脂肪组织为材料来源,利用胶原酶消化法分离ADSCs,流式细胞仪检测细胞表面标记CD29、CD90、CD105的表... 目的:探索人脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs)向表皮细胞表型转化的方法。方法:以手术中剩余的人皮下脂肪组织为材料来源,利用胶原酶消化法分离ADSCs,流式细胞仪检测细胞表面标记CD29、CD90、CD105的表达,成脂诱导后油红O染色鉴定。实验组利用第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科实验室已成功构建的pc DNA3.1(+)/SP+EGF质粒经脂质体介导转染的Ha Cat细胞,与ADSCs在Transwell小室中共培养,对照组为ADSCs加入10%FBS培养基,14天后Realtime-PCR检测两组ADSCs中CK19、integrin-β的m RNA表达量。结果:实验组ADSCs中CK19、integrin-β的m RNA表达量较对照组明显升高,且差别有统计学意义。结论:转染EGF的Ha Cat细胞可诱导ADSCs向表皮细胞表型分化,从而为其成为组织工程理想的种子细胞提供了进一步的支持。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 HACAT细胞 表皮细胞 组织工程
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姜黄素联合脂肪间充质干细胞促进大鼠皮肤创面愈合的作用及机制研究 被引量:3
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作者 张璐 李悦 +7 位作者 李晓鲁 吴诗惠 龚晓丽 全云云 田媛 岳倩华 赵军宁 蓝海 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期41-47,共7页
目的:探讨姜黄素联合脂肪间充质干细胞(ADSCs)促进大鼠皮肤创面愈合的效应及相关信号通路的研究。方法:用酶消化法分离和培养大鼠ADSCs,流式细胞仪鉴定干细胞表面抗原。取活性良好的第3代细胞,不同浓度(0、2.5、5、10、20、40μmol/L)... 目的:探讨姜黄素联合脂肪间充质干细胞(ADSCs)促进大鼠皮肤创面愈合的效应及相关信号通路的研究。方法:用酶消化法分离和培养大鼠ADSCs,流式细胞仪鉴定干细胞表面抗原。取活性良好的第3代细胞,不同浓度(0、2.5、5、10、20、40μmol/L)的姜黄素作用于ADSCs,通过CCK8法测定干细胞的存活率,筛选姜黄素最适宜浓度。40只雄性SD大鼠切除背部直径1 cm全层皮肤,建立皮肤创面模型,按照不同治疗方法分为模型对照组、干细胞组、姜黄素20μmol/L组、姜黄素20μmol/L联合干细胞组,测量记录各组0、3、7、14 d的皮肤创面愈合率。治疗后7 d ELISA法检测大鼠血清成纤维细胞生长因子(FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。治疗后14 d HE染色观察各组大鼠皮肤创面情况,Masson染色观察胶原纤维含量,免疫荧光观察干细胞数量及分布情况。荧光定量PCR检测各组大鼠皮肤创面组织内Wnt4、β-catenin mRNA表达。结果:流式细胞仪鉴定ADSCs表面抗原CD44、CD90阳性,CD34阴性。CCK8法检测姜黄素在20μmol/L时对干细胞增殖无明显毒性作用。与模型对照组比较,干细胞组、姜黄素20μmol/L组、姜黄素20μmol/L联合干细胞组的皮肤创面愈合率、胶原纤维面积百分比、血清生长因子FGF、VEGF、TGF-β明显升高(P<0.05),血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α明显降低(P<0.05),Wnt4、β-catenin mRNA表达明显上调(P<0.05),与姜黄素20μmol/L联合干细胞组比较,姜黄素组FGF、VEGF、TGF-β含量、胶原纤维面积明显降低,IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高,Wnt4、β-catenin mRNA明显下调(P<0.05或P<0.01)。姜黄素20μmol/L联合干细胞组皮肤创面中的ADSCs荧光表达明显高于干细胞组(P<0.05),ADSCs主要分布在真皮层和表皮基底层。结论:姜黄素联合ADSCs可促进大鼠皮肤创面愈合,提高移植后干细胞的 展开更多
关键词 姜黄素 脂肪间充质干细胞 创面愈合 生长因子 炎症因子 Wnt4/β-连环蛋白信号通路
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脂肪间充质干细胞诱导巨噬细胞向M2型极化的实验研究 被引量:4
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作者 王玲玲 唐丽丽 +7 位作者 孙萌 王天阳 尤和谊 张纯武 杨亦荣 陈吉彩 周蒙滔 陈必成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期332-335,344,共5页
目的:探究脂肪间充质干细胞体外对炎症启动细胞——巨噬细胞的极化作用。方法:脂多糖(LPS,1μg/ml)模拟局部炎症,诱导RAW264.7巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化。收集培养过脂肪间充质干细胞的培养基(ADMSCCM)诱导M1型RAW264.7细胞向M2转化... 目的:探究脂肪间充质干细胞体外对炎症启动细胞——巨噬细胞的极化作用。方法:脂多糖(LPS,1μg/ml)模拟局部炎症,诱导RAW264.7巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化。收集培养过脂肪间充质干细胞的培养基(ADMSCCM)诱导M1型RAW264.7细胞向M2转化。检测M1和M2极化方向的相关指标,通过对IL-10、IGF-1、Arg-1、TNF-α、FIZZ1、SPHK-1的mRNA定量,以及通过Western蛋白质印迹法和荧光标记技术观察IL-10、IL-12 p40、IL-27 Rα的表达。结果:LPS诱导后的RAW264.7细胞,在经过ADMSCCM培养后,其M1相关指标(TNF-αmRNA、IL-12 p40;P<0.05)显著下降,部分M2相关指标(IGF-1、IL-10 mRNA、IL-10;P<0.05)明显上升。结论:脂肪间充质干细胞分泌的可溶性细胞因子,可诱导已向M1型极化的RAW264.7细胞向M2型巨噬细胞极化。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 巨噬细胞 RAW264.7 极化
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乳腺癌细胞培养上清液促进人脂肪间充质干细胞迁移和增殖的机制探讨
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作者 刘丹阳 王璐璐 +5 位作者 何军 姜杨 李永涛 张晓东 李鹏辉 沈雷 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第11期1153-1157,共5页
目的探讨MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清液对人脂肪间充质干细胞(hAdMSC)迁移、增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将MDA-MB-231细胞上清液和不含胎牛血清的RPMI-1640培养基以1∶4的体积比混匀后培养的hAdMSC为MDA-MB-231上清液组。向MDA-... 目的探讨MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清液对人脂肪间充质干细胞(hAdMSC)迁移、增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将MDA-MB-231细胞上清液和不含胎牛血清的RPMI-1640培养基以1∶4的体积比混匀后培养的hAdMSC为MDA-MB-231上清液组。向MDA-MB-231上清液组添加10μmol/L Reparixin(CXCR1/2抑制剂)为CXCR1/2抑制剂组;向MDA-MB-231上清液组添加10 nmol/L GSK690693(Akt抑制剂)为Akt抑制剂组。无任何刺激进行培养的hAdMSC为对照组。细胞划痕实验检测各组hAdMSC的迁移能力,CCK-8实验检测各组hAdMSC增殖情况,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞凋亡实验检测各组hAdMSC凋亡率,Western blot检测各组hAdMSC的mTOR/磷酸化mTOR(p-mTOR)和Akt/磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达。结果与对照组相比,MDA-MB-231上清液组hAdMSC的24 h和48 h细胞划痕闭合面积、细胞增殖水平以及p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量均增加,细胞凋亡率降低(P<0.05);与MDA-MB-231上清液组相比,Akt抑制剂组和CXCR1/2抑制剂组hAdMSC的48 h细胞划痕闭合面积、细胞增殖水平以及p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量均降低,细胞凋亡率均增加(P<0.05)。结论MDA-MB-231乳腺癌细胞培养上清液通过激活Akt-mTOR信号通路促进hAdMSC迁移和增殖,抑制hAdMSC凋亡,其中IL-8-CXCR1/2轴发挥关键作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 细胞迁移 细胞增殖 肿瘤微环境 脂肪间充质干细胞
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